可诱导表达BMP4的正常来源及隐睾特异性iPSCs的建立及分化研究

目的建立可诱导表达骨形态发生蛋白质4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)的正常来源及隐睾特异性诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),比较两者体外定向分化的差异,为研究部分隐睾患儿成年后不育的原因提供具有人类遗传背景的体外研究模型。方法①建立可诱导表达BMP4的正常来源及隐睾特异性iPSCs,将正常来源iPSCs作为对照组,隐睾特异性iPSCs作为隐睾组;利用多西环素(doxycycline,Dox)进行诱导,筛选出BMP4表达量最高的细胞株;②将外源性添加BMP4的正常来源iPSCs作为外源性添加BMP4组(外源组),将Dox内源诱导BMP4表达的正常来源iPSCs作为Dox内源诱导BMP4表达组(内源组),此两组共同作为实验组;在细胞形态和基因表达水平比较实验组两组间BMP4因子诱导效果的差异;③通过Dox诱导BMP4的表达、双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)、全反式维甲酸(all trans retinoid acid,ATRA)组成的三步法诱导分化方案,逐步诱导人的正常来源及隐睾特异性iPSCs向生精细胞方向分化,在基因及蛋白水平进行检测,比较两株细胞在分化过程中的差异。结果①经Dox诱导后,在正常来源及隐睾特异性iPSCs两株细胞中均可检测到BMP4表达明显升高、同时多能性基因OCT4的表达均呈明显下降趋势,与d0相比差异具有统计学意义,其中对照组的3#细胞株与隐睾组的5#细胞株在Dox诱导后BMP4表达量最高;②与外源组相比,内源组的细胞株形态变化更为均一、同步,BMP4的基因表达量更高,两组间的差异具有统计学意义;③在向生精细胞诱导分化过程中,对照组及隐睾组细胞的DAZL和PRDM1的表达量在两组之间的差异均无统计学意义;隐睾组的VASA、SYCP3、ACROSIN和TEKT1的表达量于诱导d14和d21时均明显低于对照组,两组之间的差异具有统计学意义。免疫染色结果显示:DAZL的阳性率在对照组和隐睾组细胞间的差异无统计学意义;隐睾组的VASA和SYCP3的阳性率于诱导d14和d21时均明显低于对照组,ACROSIN的阳性率于诱导d21时明显低于对照组,差异均具有统计学意义。结论本研究为部分隐睾患儿成年后不育的原因提供了具有人类遗传背景的体外研究模型,为未来的进一步研究奠定了良好基础。     

千金子二萜类成分及其生物活性研究进展

千金子为常见中药,含有二萜类、甾醇类、香豆素类、黄酮类、挥发油、脂肪油等丰富的化学成分和广泛的药物活性。二萜类化合物为其主要成分和活性成分,其中续随子烷二萜型和巨大戟烷二萜型两种骨架构成了千金子中的主要二萜类成分,具有致泻、抗肿瘤、抗肿瘤多药耐药、调节肠道菌群、祛斑美白等多种生物活性。通过整理、分析相关文献,全面综述了从千金子中分离出的二萜醇酯类成分及其生物活性,并对部分生物活性作用机制以及构效关系加以介绍,为千金子二萜醇酯类成分及其生物活性方面的研究提供文献参考,以期为更好地开发利用千金子提供科学依据。     

孟鲁司特钠联合BiPAP呼吸机对COPD合并呼吸衰竭患者CRP、TNF-α、NT-proBNP的影响

目的探讨孟鲁司特钠联合双水平无创正压通气(BiPAP)呼吸机治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并呼吸衰竭的临床疗效及其对患者C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、N末端脑钠肽(NT-proBNP)的影响。方法将92例COPD合并呼吸衰竭患者随机分成对照组和观察组,每组各46例。两组患者均给予常规治疗,对照组在常规治疗的基础上加用BiPAP呼吸机治疗,观察组在对照组的基础上再加用孟鲁司特钠治疗,两组患者的疗程均为一周。观察两组患者治疗前后的动脉血氧分压(PaO_2)、二氧化碳分压(PaCO_2)、pH值,以及血浆CRP、TNF-α、NT-proBNP的变化情况,同时对比两组的临床疗效。结果治疗后两组患者的动脉血PaO_2、PaCO_2,以及血浆CRP、TNF-α、NT-proBNP较治疗前均明显改善,且观察组的改善程度优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组治疗总有效率为93.5%,显著高于对照组的73.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论孟鲁司特钠联合BiPAP呼吸机治疗COPD合并呼吸衰竭的临床疗效显著,且能够有效改善患者的CRP、TNF-α及NT-proBNP水平,值得推广使用。     

大肠癌并急性结肠梗阻的处理方法

目的探讨大肠癌并急性结肠梗阻的处理方法。方法回顾性分析1998年2月～2013年2月本院收治的80例大肠癌并急性结肠梗阻患者的临床资料,综合评价其处理方法。结果80例患者均经手术治疗,出现并发症5例（6．25％）,死亡3例（3．75％）,其余均痊愈出院。结论大肠癌并急性结肠梗阻的处理要根据患者的全身情况和肿瘤的局部情况进行综合判定,再采取合适的手术方式。     

半乳糖凝集素3表达抑制对人胃癌MGC-803细胞中Bcl-2和Bax表达的影响及其促凋亡作用

目的：探讨抑制半乳糖凝集素3（galectin-3）的表达对人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响,为基因靶向治疗提供潜在靶点。方法：人胃癌MGC-803细胞分为siRNA干扰组、空白对照组和阴性对照组,siRNA干扰组MGC-803细胞转染靶向galectin-3的siRNA,空白对照组MGC-803细胞只加转染试剂,阴性对照组MGC-803细胞转染阴性对照的siRNA。采用流式细胞术和碘化丙啶（PI）染色法检测各组细胞凋亡率和细胞凋亡情况,Western blotting法检测各组细胞中galectin-3、Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果：与阴性对照组和空白对照组比较,siRNA干扰组细胞中galectin-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。PI染色,siRNA干扰组凋亡细胞数量明显增加,凋亡细胞出现细胞核固缩、染色质浓集、新月形和凋亡小体等细胞凋亡特征,阴性对照组仅有少量散在的凋亡细胞。流式细胞术和Western blotting法检测,与阴性对照组和空白对照组比较,siRNA干扰组细胞凋亡率明显升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,Bax蛋白表达水平未发生明显变化（P>0.05）。结论：抑制galectin-3表达可促进MGC-803细胞的凋亡,提示galectin-3对胃癌细胞发挥癌基因作用,具有成为靶向治疗靶点的可能性。     

桃红四物汤加减预防老年髋部骨折术后LEDVT的疗效探究

目的:分析桃红四物汤加减预防老年髋部骨折术后下肢深静脉血栓形成的效果。方法:选取2016年1月~2017年3月我院收治的71例老年髋部骨折患者为研究对象,根据随机数字表法分为对照组(36例)和观察组(35例)。对照组予以常规低分子肝素钠皮下注射,观察组在对照组基础上联合桃红四物汤加减治疗。比较两组治疗后血小板与血红蛋白水平、下肢深静脉血栓发生率、用药不良反应以及大腿、小腿周径差。结果:治疗后,两组血小板水平比较无显著性差异(P0.05);观察组血红蛋白明显高于对照组,下肢深静脉血栓发生率及大腿、小腿周径差明显低于对照组(P0.05);两组用药期间均未出现明显的不良反应。结论:桃红四物汤加减治疗可有效改善老年髋部骨折术后血液高凝状态,缓解患肢术后肿胀,预防下肢深静脉血栓形成。     

跟骨骨折的可调式三角形外支架的研制和临床应用

目的：设计用于跟骨骨折的可调式三角形外支架,并研究其临床应用效果。方法：支架安装在3根横穿跟骨结节、胫骨下端、第1楔骨的克氏针的肢体两侧,通过调节支架的支撑杆长度使克氏针作用于跟骨结节,使跟骨的Bohler角和其前后径得到恢复,辅以手法复位,达到恢复跟骨形状的目的。自2003年4月至2008年4月临床治疗34例,男30例,女4例;年龄19～54岁,平均36.7岁;Bohler角-5°～15°,平均13.5°。其中SanderⅡ型2例,Ⅲ型20例,Ⅳ型12例。结果：34例均得到随访,时间3个月～4年,平均25个月。Bohler角恢复至30°～40°,平均32.5°。Maryland评分由术前平均（24.76±15.05）分提高至术后平均（83.26±16.81）分,按Maryland标准评定,优8例,良21例,可3例,差2例。结论：用于跟骨骨折的可调式三角形外支架具有方法简便、复位好、再损伤小、并发症少的优点,纠正Bohler角和恢复跟骨前后径效果确实,是治疗跟骨骨折早期较为理想的方法。     

经皮囊内入路电切去顶术治疗单纯性肾囊肿16例报告

目的:评估经皮囊内入路电切去顶术治疗单纯性肾囊肿的疗效,以探讨低侵袭性、彻底的肾囊肿治疗方式。方法:我院于2011年4月~2013年12月采用经皮肾穿刺囊肿去顶术治疗单纯性肾囊肿患者16例。患者平均年龄59(23~78)岁;囊肿位于左肾13例,右肾3例。囊肿直径平均8.2(5.2~12.8)cm。术中在超声定位下应用经皮肾穿刺技术配合双极电切镜切除游离于肾脏外侧的囊壁,术后留置引流管2d。结果:14例患者手术顺利完成,囊肿完全消失。意外发现1例肾细胞癌,二期行肾部分切除术;1例因出血中转开放手术。平均手术时间68(15~125)min。平均随访15(1~32)个月,未见复发。结论:单纯性肾囊肿可以用经皮肾穿刺去顶术安全解决。此技术优于腹腔镜肾囊肿去顶减压术,避免了多个trocar的安置及广泛的肾周剥离,降低了手术难度。     

乳腺癌术后皮瓣坏死的病因及防治

自1994年6月至2 0 0 3年10月在本院治疗的乳腺癌患者共4 6 0例,其中35例术后出现皮瓣不同范围坏死,对手术及手术后处理过程中存在的问题及经验进行了分析。1　临床资料1.1　一般资料　本组中女4 5 7例,男3例,年龄2 5～78岁,平均5 5 .3岁。1.2　手术方式、肿块部位　见表1、表2 ,同期手术植皮6 0例,有1例出现皮瓣肿块区小片状坏死,2例因继发感染导致植皮皮瓣坏死。皮瓣坏死以切口中部皮瓣多见,其次是外侧,对于距皮缘小于1cm的全层坏死和距皮缘小于2cm的表皮坏死不计其由,均经换药处理愈合,皮瓣坏死多发生于术后3～11天,与皮瓣张力过高有关者1…