半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性研究

目的:研究半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性,揭示半夏产生毒性的机制。方法:采用大鼠腹腔炎症模型,以腹腔渗出液中PGE2含量为指标,研究半夏凝集素致炎作用的量-毒、时-毒曲线;采用家兔眼结膜刺激模型,以眼结膜的病理切片观察半夏凝集素与半夏毒针晶刺激性的相关性。结果:半夏凝集素可引起大鼠腹腔渗出液中PGE2、蛋白含量显著提高,呈剂量依赖性;半夏凝集素可显著加重半夏毒针晶对家兔眼结膜的刺激性,且随着半夏凝集浓度的升高,刺激性显著增强,但单给药半夏凝集素对家兔眼结膜无刺激性。结论:半夏凝集素蛋白具强烈的致炎作用。半夏产生强烈炎症刺激的机制是半夏刺入机体,凝集素蛋白随针晶进入机体组织,诱导炎症反应发生而产生刺激性。     

半夏醇制减毒新方法研究(Ⅰ)——新方法及新工艺研究探讨

目的:探索半夏醇制减毒新方法和最佳工艺参数。方法:以乙醇润制半夏减毒,采用正交试验设计考察乙醇量、润制时间、乙醇浓度、润制温度4个影响因素,以总游离有机酸含量为化学指标,以大鼠腹腔渗出液中PGE2含量为毒理指标,综合评分,以家兔眼结膜刺激性试验得分作为减毒的直观验证,优选半夏醇制减毒的最佳工艺,并以药效验证考察醇制工艺的合理性。结果:半夏最佳醇制工艺为生半夏在60℃,用0.5倍量的75%乙醇润制4 d,干燥后即得。半夏醇制后保留了半夏的镇咳、祛痰、抗炎作用。结论:该方法简单、可行,可作为半夏减毒存效新方法的研究方向。     

商陆提取物醋制前后毒性作用的比较研究

目的:提取分离获得商陆的毒性成分,并比较其醋制前后毒性的变化.方法:采用黏膜刺激性反应、小鼠腹腔炎症模型及离体巨噬细胞释放NO模型,比较商陆毒性成分醋制前后的致炎毒性变化.结果:商陆毒性成分具有显著的致炎毒性,可导致家兔眼结膜水肿、小鼠腹腔渗出液中PGE2含量升高以及巨噬细胞释放NO含量升高;经醋制后,对家兔眼结膜刺激性减弱,使小鼠腹腔渗出液中PGE2含量降低、巨噬细胞释放NO含量降低.结论:醋制法能够降低商陆毒性成分的毒性作用.     

半夏、掌叶半夏及禹白附凝集素蛋白的刺激性研究

目的:研究半夏凝集素(Pinellia ternata agglutinin,PTA),掌叶半夏凝集素(Pinellia pedtaisecta agglutinin,PPA),禹白附凝集素(Typhonium giganteum agglutinin,TGA)的刺激性作用。方法:SD雄性大鼠随机分为空白组,PTA,PPA及TGA高中低剂量组(300,200,100 mg.L-1),ip给药,4 h后处死大鼠,ip生理盐水,取腹腔液测中性粒细胞迁移数目,测定腹腔液中总蛋白,一氧化氮(NO),前列腺素E2(PGE2)的含量;家兔随机分为空白组,半夏,掌叶半夏及禹白附的凝集素组及毒针晶组,半夏,掌叶半夏及禹白附的针晶加其凝集素组,观察家兔眼结膜充血,水肿及分泌物,考察PTA,PPA,TGA的刺激性作用。结果:大鼠ip PTA,PPA,TGA后,与空白组腹腔液中性粒细胞迁移数目(633.33±233.81)×106/L比较,100 mg.L-1组PTA(1 083.33±116.9)×106/L,PPA(1 033.3±150.55)×106/L及TGA(1 133.33±103.28)×106/L均具极显著性差异(P<0.01),均可引起严重的中性粒细胞向腹腔迁移,且浓度升高,作用增强;大鼠腹腔液的总蛋白,NO及PGE2的含量显著升高,均可加重针晶刺激家兔眼结膜强烈水肿。结论:天南星科中具有刺激性毒性作用的半夏,掌叶半夏及禹白附所含凝集素蛋白具有刺激性作用,是其毒性刺激性成分。     

半夏毒针晶的致炎作用研究

目的探讨半夏毒针晶引起的刺激性炎症的机体表现及对相关炎症介质的影响。方法采用小鼠毛细管通透性实验、小鼠腹腔炎症实验及大鼠足跖肿胀实验,考察不同剂量半夏毒针晶的致炎效应及其量-效关系,并测定相关炎症介质的量。结果半夏毒针晶混悬液可使小鼠腹腔毛细血管通透性增加,腹腔渗出液中炎症介质前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的量增加;亦可引起大鼠足跖肿胀,并在一定剂量范围内表现为典型的量-效关系,还可使大鼠致炎足跖中炎症介质PGE2、环氧合酶-2(COX-2)的量显著增加。结论半夏毒针晶刺激性毒性在机体内表现为炎症反应。     

半夏及掌叶半夏毒针晶中共性毒蛋白的研究

目的:寻找天南星科半夏属有毒中药半夏及掌叶半夏毒性物质基础毒针晶中的共有蛋白,研究刺激性相关蛋白的致炎效应。方法:采用溶液内双酶解方法将半夏与掌叶半夏毒针晶中的蛋白降解为混合肽段,采用液相色谱与串联质谱偶联分析降解后的肽段,将质谱分析数据与BIOWORKS软件搜索的NCBI绿色植物Viridiplantae蛋白库比对进行蛋白质检索分析。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对半夏、掌叶半夏毒针晶蛋白进行分析,同时采用胶内酶解后液相色谱与串联质谱偶联的方法,分析并鉴定约13kDa蛋白。提取分离半夏中的凝集素蛋白,并采用中性粒细胞迁移试验和测定腹腔渗出液中PGE2的含量,考察毒针晶及凝集素的炎症刺激性效应。结果:半夏及掌叶半夏毒针晶中均含约13kDa的蛋白条带,此条带经鉴定为凝集素类蛋白,且此13kDa蛋白条带为毒针晶中的主要蛋白之一,凝集素类蛋白可诱导中性粒细胞向大鼠腹腔迁移,可显著增加小鼠腹腔渗出液中PGE2的含量。结论:天南星科有毒中药半夏及掌叶半夏毒针晶蛋白中均含有凝集素类蛋白,且此类凝集素蛋白具有显著的致炎作用,是半夏与掌叶半夏毒针晶中的共性毒蛋白。     

半夏泻心汤及其苦降药组HPLC指纹图谱的比较研究

目的:采用高效液相色谱法比较半夏泻心汤及其苦降药组指纹图谱的差别。方法:采用PhenomenexGemini C18 110A(5μm,250mm×4.6mm)色谱柱,柱温40℃,乙腈-0.05%三乙胺水溶液(pH 3.0)梯度洗脱,检测波长275nm,对半夏泻心汤及其苦降药组水提醇沉液的HPLC指纹图谱进行比较分析。结果:该方法精密度、稳定性和重复性良好,相似度均大于0.99,在半夏泻心汤中17个和其苦降药组共有的色谱峰峰面积占总峰面积98.18%。结论:苦降药组水提醇沉液和半夏泻心汤水提醇沉液HPLC指纹图谱有一定的差别,但差别不大。     

姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制研究

为探索姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制,该研究采用掌叶半夏毒针晶诱导的小鼠腹腔炎症模型,观察姜辣素对小鼠腹腔炎症渗出液中炎症介质PGE2的影响;采用大鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以上清液中TNF-α和IL-1β为指标,研究姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶的致炎作用;采用扫描电镜法观察姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激后巨噬细胞表面形态的改变;采用巨噬细胞-中性粒细胞共培养模型,考察姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶对中性粒细胞迁移的影响。结果显示,姜辣素可以显著抑制掌叶半夏毒针晶所致的小鼠腹腔渗出液中PGE2的生成;姜辣素可以显著抑制掌叶半夏毒针晶诱导巨噬细胞释放炎症因子,并具有一定的量效关系;扫描电镜显示,姜辣素可以显著抑制巨噬细胞吞噬掌叶半夏毒针晶及细胞膜破损,并能显著抑制掌叶半夏毒针晶诱导的中性粒细胞迁移。姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制可能是抑制了包括巨噬细胞激活、炎症因子释放、中性粒细胞迁移聚集的致炎毒性。     

生姜解半夏毒的研究——生姜汁对半夏毒针晶所致炎性反应的影响

目的:研究生姜汁对半夏毒针晶所致炎性反应的影响。方法:采用腹腔注射半夏毒针晶所致小鼠腹腔炎症模型,观察生姜汁对小鼠毛细管通透性、腹腔渗出液的量、腹腔渗出液中蛋白质含量、白细胞数量和炎症介质PGE2含量的影响;采用半夏毒针晶诱导大鼠足跖肿胀模型,观察生姜汁对大鼠足跖肿胀的作用。结果:生姜汁能显著抑制半夏毒针晶腹腔注射所致的小鼠毛细管通透性增加,减少腹腔渗出液和白细胞数目,降低蛋白质和炎症介质PGE2的含量,也可减轻半夏毒针晶所致的大鼠足跖肿胀。结论:生姜汁可显著抑制半夏毒针晶所致的炎症反应。     

半夏对妊娠家兔和胚胎的毒性研究

本文对半夏的妊娠禁忌问题进行了实验探讨。制半夏和生半夏汤剂在对妊娠家兔母体无影响的情况下,能够引起死胎显著增加,胎儿体重显著下降,胎儿之间的大小差异突出。半夏汤剂的胚胎毒性不因炮制而有所降低,说明我国古代“半夏动胎”的说法有其道理。     

半夏古法“汤洗”炮制的科学性分析

目的:评价经典名方中半夏"汤洗"炮制的科学性和可行性,为相关经典名方的开发提供参考。方法:基于古代"汤洗"炮制建立水洗半夏炮制方法,通过单因素试验优选工艺条件,测定炮制前后水分、灰分、浸出物,对其炮制前后质量变化、总酸含量(以琥珀酸计)以及高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱进行比对,并进行家兔眼刺激试验,以评价水洗半夏上述指标及刺激性变化情况。结果:水洗半夏炮制方法为加4倍量80℃热水反复清洗10次,洗至水清澈,切开断面透心,口尝无麻感或者微麻。水洗半夏的水分平均值9.34%,灰分平均值1.71%,浸出物平均值4.22%,质量下降率平均值7.49%,总酸质量分数下降率平均值43.31%,水洗炮制前后HPLC指纹图谱发现各成分均有所减少,但并无新增色谱峰,其中9号峰(腺苷)减少较为明显。家兔眼刺激试验结果表明水洗半夏浸液未出现明显眼结膜刺激性,水洗后毒性明显降低。结论:建立的半夏"汤洗"炮制方法稳定可行,半夏水洗后的浸提液对家兔眼结膜无刺激性。     

药典法姜半夏与正交法姜半夏药理作用的比较

通过两种不同炮制工艺炮制的姜半夏对动物刺激性、镇咳、胃排空、肠蠕动、催眠诸项药理实验比较表明：药典法姜半夏和正交法姜半夏的各项药理作用基本一致，统计学处理无明显差异，但就炮制工艺而言正交法姜半夏有炮制时间短，辅料用量少，工艺易控制等优点。     

半夏姜制对动物刺激性及毒性的影响

姜汁煮半夏能明显降低对动物的刺激性和毒性,其降低作用与矾半夏相似;姜汁冷浸半夏的作用不如姜汁煮半夏;小鼠口服姜汁对生半夏的腹腔刺激有对抗作用;姜矾煮半夏可明显降低对动物的毒性。     

对两版《中华人民共和国药典》一部含半夏制剂质量控制的探讨

半夏为我国常用的中药材,药用历史悠久。药用半夏制品除包括生半夏之外,还有法半夏、清半夏、姜半夏等半夏炮制品。通过对半夏制剂质量控制情况的分析和探讨,为《中华人民共和国药典》的修订提供参考,促进含半夏及半夏炮制品的中药制剂质量控制水平的提升。     

不同产地半夏药材HPLC特征图谱的建立

目的:研究并建立半夏药材HPLC特征图谱,提高其质量控制水平。方法:采用SVEA C₁₈ Opal色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-水作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.9 mL/min,柱温为30℃,检测波长为270 nm,建立了半夏药材的指纹图谱,运用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》对测定的17批半夏药材数据进行处理分析。结果:建立了以9个特征峰为指标成分的半夏药材HPLC特征图谱,以鸟苷色谱峰为参照,其他8个特征峰的相对保留时间分别为(0.503±0.050)min、(0.563±0.056)min、(0.643±0.064)min、(0.928±0.093)min、(1.490±0.149)min、(1.536±0.154)min、(2.171±0.217)min、(2.210±0.221)min。结论:建立了同时测定不同来源半夏药材化学成分的HPLC特征图谱方法,该方法经过方法学验证,结果可靠,可用于半夏药材的质量控制。     

经典名方中半夏炮制品的使用刍议

《古代经典名方目录(第一批)》中含有半夏的方剂共17首,其中大多仅标记"汤洗"或未标记任何炮制方法,与现行使用要求不符,给相关经典名方的研发带来了一定困惑。通过梳理经典名方在原书、同时代著作以及后世作品中的记载,对比历代演变中半夏炮制品的使用情况,以及分析不同方剂的功效主治和配伍意义,根据"尊古而不泥古"的原则,笔者建议上述17首经典名方分别使用2015年版《中国药典》收载的半夏炮制品姜半夏、法半夏和清半夏,其中半夏泻心汤、甘草泻心汤、黄连汤、旋覆代赭汤、竹叶石膏汤、半夏厚朴汤、麦门冬汤、瓜蒌薤白半夏汤、温胆汤、竹茹汤、金水六君煎、养胃汤用姜半夏,升阳益胃汤、厚朴麻黄汤、半夏白术天麻汤、藿朴夏苓汤用法半夏,仅桑白皮汤用清半夏。     

半夏历代炮制方法考证

通过查阅古今本草、文献及相关法典,对半夏的历代炮制方法进行探讨。半夏炮制方法经历了多样化的历史时期,自《黄帝内经》出现治半夏后相继出现净制、切制、熬制、姜制、煮制、药汁制、火炮、焙制、麸制、浆制、半夏曲、灰制、醋制、矾制、米制、炙制、炒制、生用、泔制、油制、酒制、面制、煨制、制炭、胆汁制、盐制等一系列不同的炮制方法和要求。其中生半夏、清半夏、姜半夏和法半夏沿用至今并被广泛使用,但不同时期半夏炮制品的炮制方法、辅料种类及用量等有较大差异,其炮制工艺及质量标准有待于进一步规范化和标准化。     

中药半夏复制法炮制的研究进展

在中医临床中,半夏是一种常用的中药材,具有非常重要的药用价值,但其生品具有一定毒性。根据中医药基础理论,半夏经炮制后可以降低其毒副作用,从而保证临床安全用药。该文基于半夏复制法的炮制特点,探讨半夏多物料多流程炮制前后变化。该法没有统一工序,加入一种或多种物料,按不同流程,如浸、泡、漂,或蒸、煮,或数法共用,反复炮制达到规定的质量要求。通过不同炮制方法,其功效等也随之变化,用于不同疾病的治疗。文章从多物料,多流程2个方向出发,分别综述了多物料或多流程炮制对其化学成分、药效的影响,以及减毒增效的炮制机制,以期为半夏降低毒性增强疗效,扩大药用范围提供参考,为后人进一步研究炮制机制提供理论依据。对半夏的深入性研究,使得半夏更加安全有效地应用于临床,以确保临床疗效。为今后对半夏饮片炮制的质量控制、有效成分以及新药研发方面的研究提供参考。对其寻求最佳的炮制工艺奠定了科学基础,为解决半夏炮制品存在的生产问题提供理论依据,从而达到提高生产效率,提高药品质量的目的。     

半夏及其炮制品化学成分及功效的差异研究

目的研究半夏及其不同炮制品化学成分及功效的差异。方法采用HPLC法测定半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏水提取物中8种有效成分肌苷、鸟苷、腺苷、琥珀酸、盐酸麻黄碱、甘草苷、甘草酸铵、6-姜辣素含量;通过小鼠气管段酚红法和浓氨水刺激小鼠引咳法对半夏传统功效祛痰、止咳进行药效学研究。结果半夏炮制品中肌苷、鸟苷、腺苷、琥珀酸、盐酸麻黄碱含量较半夏生品明显下降,法半夏中未检出肌苷。3种炮制品相比,清半夏中肌苷、鸟苷、腺苷、琥珀酸含量最高,姜半夏最低,与祛痰作用强弱一致,该4种成分是祛痰作用的活性成分,清半夏炮制时加入白矾,也增强其化痰功效;法半夏止咳作用最强,其次为半夏、清半夏,姜半夏作用最弱,法半夏经甘草、石灰水制后,辅料甘草(引入甘草苷、甘草酸铵)的加入增强了法半夏止咳作用。姜半夏经生姜、白矾制后,生姜(引入6-姜辣素)增强姜半夏止呕作用,减弱化痰、止咳作用。结论半夏炮制后化学成分及功效均发生一定变化,不同炮制方法对其化学成分和功效的影响不同。     

半夏姜制对鸟苷含量的影响

目的:比较“正交法”和药典法两种炮制工艺的姜半夏中微量水溶性成分鸟苷的含量,对半夏的其他姜制炮制品中鸟苷含量进行比较。方法:采用反相高效液相色谱法。结果:“正交法”和药典法两种炮制工艺炮制的姜半夏中鸟苷含量接近,与生半夏相比,没有明显变化,其他炮制品的鸟苷含量则有较大幅度下降。结论:“正交法”和药典法炮制的姜半夏没有明显区别,浸制工艺对鸟苷含量影响较大。