益气活血方介导促炎因子促进破裂型腰椎间盘突出后重吸收的机制研究

目的:通过比较益气活血方介导对趋化因子5(CCL5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)在破裂及非破裂型髓核细胞中表达的影响,探索益气活血方促进破裂型腰椎间盘突出后重吸收的机制。方法:收集破裂型与非破裂型腰椎间盘突出症患者的髓核组织各6例,采用酶消法分离细胞,放入含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养,定期用倒置相差显微镜观察细胞贴壁及生长情况。用10只3个月龄SD大鼠制备含药(益气活血方)血清及无药(生理盐水)血清,用两种血清分别培养破裂型及非破裂髓核细胞。提取两种血清体外给药后的破裂及非破裂原代髓核细胞RNA。利用实时荧光定量PCR(实时qPCR)技术分别检测体外含药血清给药培养后及非含药血清培养后的破裂及非破裂型髓核细胞中CCL5,TNF-α,IL-1βmRNA的表达,记录统计分析数据。提取含药血清及非含药血清体外给药培养后的破裂及非破裂型原代髓核细胞蛋白,利用免疫蛋白印迹(Western Blotting)技术分别检测两种血清体外给药培养后的破裂及非破裂型原代髓核细胞中CCL5,TNF-α及IL-1β蛋白的表达,记录统计分析数据。结果:CCL5,TNF-α及IL-1β在破裂型髓核中的表达明显高于非破裂型(P0.05),在破裂型含药组髓核细胞中的表达显著高于无药组(P0.05)。结论:益气活血方可提高促炎因子在破裂型髓核细胞中高表达,有利于髓核细胞的炎性反应,加速细胞外基质(ECM)的降解,从而有利于重吸收现象的发生,且破裂型髓核比非破裂型髓核更容易发生重吸收现象。     

不同剂量五福饮对大鼠尾椎间盘退变髓核β—连环素、聚蛋白多糖及Ⅱ型胶原调控作用的实验研究

目的:探索不同剂量五福饮对大鼠尾椎间盘退变(IVDD)髓核β-连环素(β-catenin)、聚蛋白多糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(Col2)的调控作用。方法:取SD大鼠64只,随机分为空白组、模型组、五福饮低剂量组及五福饮高剂量组。除空白组外,其余各组大鼠构建IVDD模型。模型构建成功后,五福饮低、高剂量组灌服不同剂量的五福饮药液,空白组和模型组大鼠灌服生理盐水。五福饮干预8周后,检测椎间盘髓核β-catenin阳性表达细胞数及mRNA表达水平,Aggrecan及Col2 mRNA水平。结果:模型制备4周后,与空白组比较,模型组、五福饮低、高剂量组大鼠50%缩足阈值(PWT)明显降低(P<0.05);尾椎间盘髓核β-catenin阳性表达细胞数明显升高(P<0.05)。五福饮干预8周后,与空白组比较,模型组大鼠尾椎5~6椎间盘Aggrecan与Col2 mRNA表达明显降低(P<0.05),β-catenin mRNA及阳性表达细胞数明显升高(P<0.05)。与模型组比较,五福饮低、高剂量组大鼠50%PWT、尾椎5~6椎间盘Aggrecan与Col2 mRNA表达均明显升高(P<0.05),β-catenin mRNA及阳性表达细胞数明显降低(P<0.05)。与五福饮低剂量组比较,五福饮高剂量组大鼠50%PWT、尾椎5~6椎间盘Aggrecan与Col2mRNA表达均明显升高(P<0.05),β-catenin mRNA及阳性表达细胞数明显下降(P<0.05)。结论:五福饮可延缓或部分逆转大鼠尾IVDD,且五福饮对大鼠尾IVDD治疗作用存在剂量依赖性。椎间盘髓核β-catenin可能是五福饮的作用靶点。     

益气逐瘀利水方治疗青少年腰椎间盘突出症的临床效果

目的:探讨益气逐瘀利水方治疗青少年腰椎间盘突出症的临床效果。方法:选取2019年2—12月我院骨科收治的70例腰椎间盘突出症患者作为研究对象,根据年龄与治疗方式,分为对照组(成年患者)与观察组(青少年患者),对照组40例,观察组30例。所有患者进行益气逐瘀利水方治疗,观察并比较两组治疗情况。结果:①观察组治疗后JOA评分高于对照组,ODI指数低于对照组,差异比较明显(P0.05),具有统计学意义。②两组吸收率比较,无明显差异(P0.05),无统计学意义;但对于后纵韧带破裂型和后纵韧带非破裂型的吸收率比较,差异比较明显(P0.05),具有统计学意义。结论:对于腰椎间盘突出症,青少年患者采用益气逐瘀利水方治疗效果较好,虽然青少年患者与成年患者再吸收几率方面无明显差异,但后纵韧带破裂型重吸收较容易。     

益气化瘀补肾法对颈椎病动物椎间盘病理变化与Ⅱ型胶原mRNA表达的影响

目的 :观察益气化瘀补肾法对颈椎病动物退变椎间盘病理变化及髓核Ⅱ型胶原mRNA表达的影响。方法 :把健康成年新西兰大白兔随机分为益气化瘀补肾组、消炎痛组、模型对照组和正常对照组 ,运用静力平衡失调颈椎病动物模型 ,造成动物椎间盘的退变 ,然后分别喂以相应药物或医用淀粉胶囊 ,观察24周后 ,取颈6/7椎间盘 ,用HE染色法观测椎间盘组织病理变化 ,用生物素标记原位杂交法观测椎间盘髓核组织内细胞Ⅱ型胶原mRNA的表达 ,并运用图像分析仪对其进行数据转换 ,采用SPSS统计软件分析。结果 :益气化瘀补肾法对退变椎间盘病理变化的影响不显著 ,但对椎间盘髓核组织内Ⅱ型胶原mRNA表达的影响有显著作用。结论 :益气化瘀补肾法对颈椎病动物退变椎间盘髓核组织胶原的形成过程的环节有正面影响。     

淫羊藿苷对家兔退变腰椎间盘组织中Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的影响

目的：观察淫羊藿苷对家兔退变腰椎间盘组织中Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的影响，探讨淫羊藿苷防治腰椎间盘退变的作用机制。方法：用随机数字表法将 30 只家兔分为实验组、模型组和空白组，每组 10 只。实验组和模型组采用髓核穿刺抽吸法复制腰椎间盘退变模型。术后 4 周，实验组按 3 mg/（kg · d）的剂量灌胃淫羊藿苷，模型组和空白组用等量生理盐水灌胃，连 续 4 周。术后 4 周和术后 8 周，各组分别取 5 只用空气栓塞法处死后切取椎间盘组织。HE 染色观察其组织病理学变化，免疫组织化学法检测Ⅱ型胶原的表达水平，间苯三酚分光光度法检测蛋白多糖的含量。结果：术后 4 周，空白组髓核组织内基质成分高，密度均匀，染色深，其间有大量髓核细胞，核深染，胞浆淡染；实验组和模型组髓核内基质及髓核细胞部分消失，被深染的纤维组织和梭形的成纤维细胞取代。术后 8 周，空白组髓核成分同术后 4 周比无明显变化；而模型组髓核的基质及髓核细胞大部分消失，染色变浅，大量成纤维细胞和纤维组织形成；实验组髓核基质成分较高，髓核细胞减少。术后 4 周，与空白组比较，模型组Ⅱ型胶原、蛋白多糖表达水平降低 （P＜0.05）。术后 8 周，与空白组比较，模型组Ⅱ型胶原、蛋白多糖表达水平明显降低（P＜0.05）；与模型组比较，实验组Ⅱ型胶原、蛋白多糖表达水平升高 （P＜0.05）。结论：淫羊藿苷可通过上调Ⅱ型胶原的表达、增加蛋白多糖的含量来延缓腰椎间盘退变。     

益气化瘀补肾法对退变颈椎间盘Ⅱ型胶原mRNA表达的影响

目的益气化瘀补肾法对退变颈椎间盘Ⅱ型胶原mRNA表达的影响。方法健康成年新西兰大白兔42只,随机平均分为益气化瘀补肾组、益气化瘀组、补肾组、消炎组、模型对照组、正常对照组。建立颈椎病椎间盘退变模型,原位杂交后病理图像分析。结果正常对照组髓核组织中Ⅱ型胶原mRNA表达的量显著高于模型对照组和消炎痛治疗组（P<0.01）,与益气化瘀组、补肾组相比较也有显著差异(P<0.05);益气化瘀补肾法与益气化瘀法、单纯补肾法比较有较显著差异(P<0.05),与消炎痛组、模型组比较有非常显著差异(P<0.01);益气化瘀法、补肾法对髓核组织中Ⅱ型胶原mRNA的表达有一定的增强作用。结论颈椎病家兔椎间盘的Ⅱ型胶原mRNA表达比正常组显著降低,益气化瘀补肾法可以上调Ⅱ型胶原mRNA基因的表达,使之维持在正常范围,说明益气化瘀补肾法对延缓椎间盘的退变有积极作用。     

优化活血利水方对大鼠自体髓核移植后移植髓核MMP-3、TIMP-1表达的影响

目的:建立自体髓核移植致大鼠非压迫腰椎间盘髓核突出神经根性疼痛模型,探讨优化活血利水方对移植髓核MMP-3、TIMP-1表达的影响。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组、阿斯匹林组,建立大鼠自体髓核移植致腰5神经根性痛模型,造模后1周起各组分别予生理盐水1.82mL、生理盐水1.82mL、中药汤剂1.82mL、阿斯匹林1.82mL(0.1g.kg-1.d-1),每日1次,连续用药4周。第31天取移植髓核检测MMP-3、TIMP-1mRNA及蛋白的表达。结果:正常髓核中MMP-3、TIMP-1mRNA及蛋白表达量很少,各实验组移植髓核中MMP-3、TIMP-1mRNA及蛋白表达量与对照组比较均显著增多(P<0.0l)。与模型组比较,中药组、西药组MMP-3mRNA及蛋白表达量显著减少(P<0.01),TIMP-1mRNA及蛋白相对表达量显著增多(P<0.01)。中、西药组比较,两组间存在显著性差异,中药组MMP-3mRNA及蛋白显著减少,TIMP-1mRNA及蛋白显著增多。结论:优化活血利水方可以显著下调移植髓核MMP-3mRNA及其蛋白表达,上调TIMP-1mRNA及其蛋白表达,减轻椎间盘的退变,促进椎间盘的修复。     

Galectin-3在人类椎间盘软骨终板标本中的表达变化与意义

目的探讨Galectin-3(半乳糖凝集素3)在椎间盘软骨终板标本中的表达变化与意义。方法收集自新疆维吾尔自治区中医医院因椎间盘退变性疾病行腰椎后路手术的患者,按照椎间盘退变程度不同分为ModicⅠ组、ModicⅡ组及ModicⅢ组,共3组。通过苏木素—伊红检测椎间盘软骨终板的病理变化,免疫组化、实时荧光定量PCR与Western blot检测Galectin-3、Aggrecan、CCL3、ColⅡ的表达水平变化。所有数据利用SPSS 13.0软件进行数据处理,采用LDS法进行两两比较。结果 ModicⅠ组、ModicII组及Modic Ⅲ组的组织病理变化显示,随着退变的加重,椎间盘软骨终板软骨细胞数量减少,密度下降,胶原排列出现断裂及钙化。免疫组化检测表明Aggrecan、ColⅡ、Galectin-3的光密度值随着退变进程不断降低,各组之间有统计学意义(P0.05);实时荧光定量PCR和Western blot结果显示Galectin-3、Aggrecan、CCL3、ColⅡ的mRNA和蛋白表达水平随着退变进程不断减少,ModicⅠ型组与其余各组之间有统计学意义(P0.05),ModicⅡ与ModicⅢ组之间无统计学意义(P0.05)。结论在椎间盘软骨终板退变进程中,Galectin-3与CCL3在ModicⅠ型中发挥促炎症反应,随之而来的病理变化亦可以促进ModicⅡ型、Ⅲ型的病理发展。     

大鼠中药血清对骨关节炎患者膝关节软骨细胞胶原和金属蛋白酶mRNA表达的影响

目的:观察祛痰除湿剂对原代培养骨关节炎(OA)患者的膝关节软骨细胞中Ⅱ型胶原、X型胶原和相关代谢酶MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA表达的影响,探讨祛痰除湿剂治疗骨关节炎的作用及其机制.方法:原代培养骨关节炎患者的膝关节软骨细胞,用第三代细胞进行试验.关节软骨细胞经含药血清作用72h后,采用Real Time-PCR法检测细胞中Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)、Ⅹ型胶原(Col Ⅹ)、基质金属蛋白酶-1、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13的mRNA表达.结果:OA患者膝关节软骨细胞经祛痰除湿剂含药血清作用后Col Ⅱ mRNA表达明显高于仅使用胎牛血清培养的空白对照组,经10％祛痰除湿剂含药血清作用后Col Ⅹ及MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA表达均明显低于空白对照组.结论:祛痰除湿剂可调节OA患者关节软骨中胶原及相关金属蛋白酶(MMPs)的mRNA表达,从而对退变的软骨细胞有一定的修复作用并可延缓关节软骨细胞的进一步退变.     

腰椎间盘突出症及有关知识

腰椎间盘包括髓核，髓核的纤维环，以及上下软骨板，当椎间盘退变后，弹性减弱，脆性增加，髓核通过薄弱的纤维环，或破裂的纤维环向后脱出或膨出，压迫了马尾神经或神经根，引起一系列临床证候群，称之为腰椎间盘突出症。腰椎间盘突出症又称腰椎纤维环破裂症或腰椎髓核脱出症。     

右归丸对肝肾亏虚型退变髓核细胞活力及相关炎性因子表达的影响

目的:研究右归丸含药大鼠血清对肝肾亏虚型退变髓核细胞活性及IL-1、TNF-α表达的影响。方法:选取48只雌雄各半质量为180～220 g SD大鼠,按随机数字表法分为空白对照组、桃红四物汤组及右归丸组,各组药物干预后取血清冻存备用。选3例辨证肝肾亏虚型的腰椎间盘突出且需要手术的患者,获取髓核组织细胞并进行细胞培养。各组冻存的含药血清分别配置成5%、10%、20%浓度梯度干预髓核细胞,运用MTT法获取细胞OD值并制作细胞生长曲线,选取各组最佳含药血清浓度。将2代髓核细胞分为空白血清组、桃红血清组、右归血清组。选用各组最佳浓度血清分别连续干预3、7、14 d, Western Blot检测2代髓核细胞中IL-1、TNF-α的表达水平。结果:10%空白血清、20%桃红四物汤含药血清及20%右归丸含药血清有利于髓核细胞生长。分别在第3、7、14天与空白血清组比较,桃红血清组、右归血清组髓核细胞中IL-1、TNF-α的表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05),且右归血清组相比桃红血清组IL-1、TNF-α降低更加明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论:右归丸大鼠含药血清干预肝肾亏虚型退变髓核细胞可显著提高细胞增殖活力,下调炎性因子IL-1、TNF-α的表达,右归丸含药血清干预肝肾亏虚型退变髓核细胞效果优于桃红四物汤含药血清,从侧面进一步论证了辨证论治理论的科学性。     

补骨脂素对大鼠腰椎间盘软骨细胞炎性退变的影响

目的探讨补骨脂素延缓椎间盘退变的内在机制。方法体外分离1月龄雌性SD大鼠腰椎间盘软骨板,采用组织块法培养,通过HE染色、甲苯胺蓝染色和免疫荧光进行细胞辨别、鉴定。通过细胞增殖实验和RT-PCR法进行补骨脂素最佳浓度筛选。取第3代生长状况良好的椎间盘软骨细胞,以每孔1×105的浓度将细胞置于6孔板内,分为空白对照组、白细胞介素-1β(IL-1β)诱导组(10ng/ml)、补骨脂素组(IL-1β10ng/ml+补骨脂素最佳浓度),每组3孔,检测各组Ⅱ型胶原基因(Col2a1)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS-5)、IL-1β和环氧化酶-2(COX-2)mRNA的表达。结果补骨脂素浓度在100、150、200、400μM时,细胞活性较浓度为0时明显减弱(P0.01)。补骨脂素在12.5、25μM时较浓度为0时能上调Col2a1 mRNA表达(P0.05或P0.01)。补骨脂素组Aggrecan mRNA高于空白对照组(P0.01);与IL-1β诱导组比较,补骨脂素组Col2a1 mRNA升高,ADAMTS-5 mRNA降低(P0.01)。结论补骨脂素可以一定程度缓解IL-1β诱导的椎间盘软骨细胞的退变进程,并对IL-1β炎性信号通路的相关因子产生影响。     

益气逐瘀利水方基于信息熵的工艺优化研究

目的：优选益气逐瘀利水方的煎煮工艺参数。方法：以提取时间、提取次数和提取溶剂倍数为影响因素，以毛蕊异黄酮葡萄糖苷(CG)含量和干浸膏率的综合评分为评价指标，设计正交实验并结合熵权法优选益气逐瘀利水方的最佳煎煮工艺。结果：最佳煎煮工艺为加12倍量的水，煎煮3次，每次1 h。结论：本研究工艺稳定，可为益气逐瘀利水方质量标准的制定提供参考。     

益气化瘀补肾法对退变颈椎间盘II型胶原mRNA表达的影响

目的：益气化瘀补肾法对爱变颈椎间盘II型胶原mRNA表达的影响。方法：健康成年新西兰大白兔42只,随机分均分为益气化瘀补肾组,益气化瘀组,补肾组,消炎组,模型对照组,正常对照组。建立颈椎闰椎间盘退变模型,原位杂交后病理图像分析,结果：正常对照组髓核组中II型胶原m RNA表达的量显著高于模型对照组和湖炎痛治疗组（P＜0．01）,与益气化瘀化,补肾组相比较也有显著差异（P＜0．05）,益气化阏补肾法与举气化瘀法,单纯补肾法比较有显显著差异（P＜0．05）,与消炎痛组,模型组比较有非常显著差异（P＜0．01）,益气化瘀法,补肾法对髓核组织中II型胶原mRNAR的表达有一定的增强作用,结论：颈椎病家兔椎间盘的II型胶原mRNA表达比正常组显著降低,益气化瘀化法可以上调II型胶原mRNA基因的表达,使之维持在正常范围,说明益气化瘀补肾法对延缓椎间盘的退变有积极作用。     

益气逐瘀利水方治疗腰椎间盘突出症的效果

〔摘 要〕 目的：分析益气逐瘀利水方治疗腰椎间盘突出症的临床效果。方法：选取惠东县中医院 2017 年 1 月至 2019 年 8 月期间收治的 75 例腰椎间盘突出症患者为研究对象,应用随机数字表法分成对照组（n = 38）与观察组（n = 37）, 分别开展常规治疗、益气逐瘀利水方联合常规治疗。比较两组患者临床治疗效果、腰腿功能改善情况及视觉模拟评分法 （VAS）评分变化。结果：观察组患者治疗总有效率为 94.59 % 高于对照组的 76.32 %,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）; 治疗后两组患者的 Oswestry 腰腿功能评分量表评分均有不同程度降低,且观察组低于对照组,差异具有统计学意义 （P ＜ 0.05）;治疗前,两组患者 VSA 评分比较,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。治疗后,观察组患者 VAS 评分低于对照组, 差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：在常规治疗条件下,予以腰椎间盘突出症患者益气逐瘀利水方,可强化临床治疗 效果,促进其腰腿功能较快恢复。     

牛膝总皂苷对大鼠椎间盘髓核细胞外基质合成的影响

目的探讨牛膝总皂苷(ABS)对大鼠椎间盘髓核细胞外基质合成的影响。方法体外培养大鼠椎间盘髓核细胞,并建立氧糖剥夺(OGD)模型模拟退变微环境。采用不同浓度ABS单独或加入SIRT1抑制剂EX527、自噬抑制剂3-MA干预细胞。CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,实时定量PCR检测细胞外基质collagen II、Aggrecan mRNA表达, Western blot检测SIRT1、collagen II、Aggrecan及自噬相关蛋白ATG5、LC3II/LC3Ⅰ和p62的蛋白表达。结果 ABS(40μg/mL)可促进大鼠椎间盘髓核细胞存活(P<0.01);ABS干预可使OGD环境中的细胞存活率增加,细胞凋亡、caspase-3活性降低,collagen II、Aggrecan mRNA和蛋白表达均上调,SIRT1、ATG5和LC3II/LC3Ⅰ蛋白表达上调,p62蛋白表达下调(P<0.05);EX527、3-MA干预可抑制OGD环境中ABS介导的细胞增殖增加、凋亡减少,collagen II和Aggrecan的蛋白表达上调(P<0.05)。结论 ABS可通过SIRT1/自噬信号通路促进大鼠椎间盘髓核细胞存活和细胞外基质合成。     

益气活血法对兔退变髓核中Fas/FasL的表达及基质代谢的影响

目的:观察益气活血法中药对兔退变髓核中Fas/FasL的表达及基质代谢的影响。方法:建立兔腰椎间盘退变的动物模型,随机分为益气活血法中药治疗组和生理盐水治疗的对照组,治疗后用病理切片观察髓核的组织学变化;测量髓核中蛋白多糖含量;应用逆转录PCR法检测治疗后髓核中Fas/FasL基因mRNA表达。结果:①两组动物治疗后病理切片显示髓核退变均明显,但治疗组软骨终板退变较轻,血管芽较多;②治疗组1、2月和对照组1、2月蛋白多糖含量均减少,两组间对比无显著差异(P>0.05);各治疗组内1、2月蛋白多糖含量的组内对比(P>0.05),具有显著差异。③治疗组和对照组的随时间延长Fas/FasL基因mRNA表达均增强,治疗组和对照组对比无显著差异(P>0.05);各组组内对比Fas/FasL基因mRNA表达增强,具有显著差异(P<0.05)。结论:本实验提示益气活血法中药在一定程度上能延缓椎间盘软骨终板退变的发展,但不能根本抑制或逆转髓核形态学退变的发生;不能抑制髓核内Fas/FasL基因的表达;不能抑制基质中蛋白多糖含量的减少。     

AMPK在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及其意义

目的:检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)及其相关分子在正常与退变腰椎间盘髓核中的表达情况,并探讨AMPK在椎间盘退变中的作用.方法::取6例正常和10例腰椎间盘突出症患者的髓核组织,Western Blot检测线粒体能量代谢相关蛋白质AMPK的含量和磷酸化状态,免疫组化检测细胞衰老相关基因p16INK4a和细胞增殖相关基因mTOR的表达.结果:退变髓核组织中AMPK和磷酸化AMPK蛋白表达量较正常对照组均有所增加,二者比较差异均有统计学意义(P<0.01).免疫组化显示,正常对照组和退变髓核组织p161NK4a染色阳性细胞率分别为12.1%和53.1%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).正常对照组髓核组织和退变髓核组织中,mTOR染色阳性细胞率分别为55%和22.7%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:能量代谢障碍是椎间盘退变的重要机制,椎间盘细胞可能通过AMPK含量和磷酸化状态的改变而调控细胞的增殖和衰老.     

推拿配合电针治疗腰椎间盘突出症

腰椎间盘突出症是因腰椎间盘退变、纤维环破裂后髓核突出压迫神经根或硬膜囊所出现的腰腿疼痛综合征,属祖国医学腰痛范畴.笔者采用推拿配合电针治疗腰椎间盘突出症40例疗效满意,现介绍如下.     

益气化瘀补肾方及拆方影响椎间盘细胞外基质胶原和代谢酶mRNA表达的研究

目的探讨益气化瘀补肾方及拆方影响退变模型大鼠颈椎间盘细胞外基质中Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和相关代谢酶MMPs／TIMPmRNA的表达。方法采用RT—PCR法检测胶原和MMPs／TIMPmRNA表达,凝胶成像系统扫描仪对各条带进行扫描,计算机自动计算出光密度。结果与假手术组比较,模型组Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和MMP-13 mRNA表达明显升高（P〈0．01）;TIMP-1 mRNA表达无明显统计学差异（P〉0．05）。益气化瘀补肾方及其拆方可明显降低Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和MMP-13 mRNA的过度表达（P〈0．01或P〈0．05）。结论退变椎间盘的Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原mRNA表达增高,MMP-13 mRNA的高表达和TIMP-1 mRNA的低表达,MMPs／TIMP的比例失调,反映了退变椎间盘ECM合成和降解的失调。益气化瘀补肾方及拆方可能通过影响颈椎间盘组织胶原及相关代谢酶mRNA表达而延缓椎间盘的退变。