冬凌草甲素抗肿瘤活性研究进展

正冬凌草为唇形科香茶属植物碎米桠Rabdosia rubescens(Hemsl.)Hara的干燥地上部分,具有清热解毒,活血止痛等作用[1]。民间常用于抗炎、抗菌和治疗肿瘤,1977年,冬凌草被收载于中华人民共和国药典。冬凌草主要活性成分为二萜类,其中最主要的抗肿瘤有效成分为冬凌草甲素(Oridonin,Ori)。本文对Ori的抗肿瘤活性及其作用机制的研究进展作一综述。     

冬凌草甲素抗肿瘤分子药理机制研究进展

冬凌草为唇形科香茶菜属植物碎米亚Rabdosia rubescens(Hemsl.)Hara的干燥全草,具有清热解毒、消炎止痛、抗肿瘤之功效,用于治疗咽喉肿痛、扁桃体炎,对食管癌、肝癌、肺癌等多种癌症患者有缓解症状并延长生存时间的作用.冬凌草甲素(Oridonin,Ori)是从冬凌草中提取出来的一种二萜类化合物,占冬凌草有效成分的90%以上,是抗肿瘤的主要活性成分.体外药效学研究显示,冬凌草甲素对多种人癌细胞株的生长有明显的抑制作用[1,2].本文就冬凌草甲素的抗肿瘤分子药理机制研究进展作一综述.     

产冬凌草甲素菌株筛选鉴定及其抗肿瘤活性研究

目的对冬凌草内生真菌进行筛选鉴定,并研究其体外抗肿瘤活性,以期得到冬凌草甲素高产抗肿瘤活性菌株。方法采用TLC法和HPLC法对前期从冬凌草中分离出的256株内生真菌进行筛选,HPLC-MS测定菌株发酵液中的冬凌草甲素。结合形态学特征、ITS序列对筛选出的菌株进行鉴定。MTT法测定筛选菌株的体外抗肿瘤活性。结果从冬凌草中分离出的256株内生真菌经筛选,获得1株冬凌草甲素高产菌株M-J-5,鉴定为青霉属草酸青霉菌Penicillium oxalicum Currie et Thom,其对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞活性具有一定抑制作用。结论从冬凌草内生真菌中筛选得到产冬凌草甲素且具抗肿瘤活性的菌株M-J-5。     

冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用

目的研究冬凌草甲素自微乳对H22移植性肿瘤模型小鼠的肿瘤抑制作用。方法采用昆明小鼠接种肝癌H22瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型,以实体瘤模型小鼠的瘤重、抑瘤率观察冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用;以胸腺指数、脾脏指数为指标观察冬凌草甲素自微乳对免疫器官的影响;以小鼠平均生存时间观察冬凌草甲素自微乳对腹水瘤模型小鼠的生命延长作用。结果冬凌草甲素自微乳能有效地抑制实体瘤模型荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,低、中、高(67,100,150 mg.kg-1)3个剂量组的抑瘤率分别为:43.94%、54.65%、59.57%;冬凌草甲素自微乳给药组小鼠胸腺指数和脾脏指数与荷瘤对照组相比,无显著性差异;中剂量(100 mg.kg-1)冬凌草甲素自微乳对腹水瘤肿瘤模型小鼠的生存时间具有延长作用,与荷瘤对照组相比具显著性差异。结论冬凌草甲素自微乳对荷瘤小鼠肿瘤生长具有一定的抑制作用,抑制作用强于冬凌草甲素,并有剂量依赖性。     

冬凌草甲素纳米制剂的研究和应用

冬凌草甲素(oridonin),别名冬凌草素、延命草宁,是唇形科香茶菜属植物碎米亚桠Rabdosia rubescens的全草,由醇提、萃取、层析、结晶等工序完成。冬凌草甲素对白血病、乳腺癌、黑色素瘤等多种肿瘤,具有显著的抑制或杀伤作用,主要用于抗肿瘤,抗菌,清热解毒,消炎止痛和健胃活血等方面的治疗。但因其微溶于水,且味道极苦,很大程度上限制了其在临床上的应用。纳米制剂作为一种新型的药物传递系统,近年来已有学者开展了冬凌草甲素纳米制剂的研究探索,其中包括冬凌草甲素的β-环糊精包合物、纳米粒、脂质体、微乳聚合物胶束和纳米混悬剂等。研究发现,纳米制剂能够有效地改善冬凌草素水溶性,提高其生物利用度,具有开发价值和广阔的应用前景。该文对当前冬凌草甲素纳米制剂的研究和应用状况进行了综述,为冬凌草甲素新制剂的研究开发提供依据。     

鄂西香茶菜甲素作为抗肿瘤先导物的发现与抗肿瘤活性验证

采用反向预测和分子对接技术,评价鄂西香茶菜甲素成为抗肿瘤先导物的可行性。在反向预测的基础上,利用网络药理学技术构建"疾病-化合物-靶点-通路"网络。结果显示,鄂西香茶菜甲素预测靶点中有39个与肿瘤密切相关,参与调节细胞凋亡、细胞周期、肿瘤转移等多种细胞活动,并可调节雌激素信号转导途径和炎症应答。采用Discovery Studio 2020软件进行分子对接及TOPKAT毒性预测;鄂西香茶菜甲素与肿瘤相关靶点ABL1、ESR1、SRC、BCL-XL的结合亲和力均强于冬凌草甲素,且其致突变性、啮齿动物致癌性、大鼠口服LD_(50)毒性均小于冬凌草甲素;进而,采用体外实验证实了鄂西香茶菜甲素的抗肿瘤活性,并初步探讨了其作用机制。结果显示,鄂西香茶菜甲素在细胞毒、抑制细胞集落形成和诱导凋亡方面均优于冬凌草甲素。鄂西香茶菜甲素有望成为新的抗肿瘤先导物,具有较大的研究前景。且鄂西香茶菜素对雌激素信号转导通路调节作用的预测结果值得进行深入研究,为其抗肿瘤作用机制的研究提供新视角。     

14-O-取代冬凌草甲素衍生物的合成及抗肿瘤活性(英文)

目的:探索14-O-取代冬凌草甲素衍生物的合成及其抗肿瘤活性。方法:将二酸酐与冬凌草甲素14位羟基缩合,再与氨基酸酯进行酰胺化反应,合成14-O-取代冬凌草甲素衍生物;采用MTT法测试所有目标化合物体外对肿瘤细胞株(BGC-7901,SW-480,HL-60,BEL-7402,A549和B16)的细胞毒性以及化合物2c和2d对小鼠H22肝癌在体抗肿瘤活性。结果:合成了10个新的目标化合物,其结构均经IR,MS及1HNMR确证;生物活性初筛结果显示,化合物2c,2d和3e有较强的细胞毒活性;化合物2c和2d在体抗肿瘤活性大于环磷酰胺和冬凌草甲素。结论:14-O-取代冬凌草甲素衍生物2c,2d和3e作为潜在的抗肿瘤候选化合物值得进一步深入研究。     

冬凌草甲素诱导三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及对细胞内活性氧水平的影响

冬凌草甲素是从中药冬凌草Rabdosia rubescens中分离得到的一种贝壳杉烯二萜类的天然有机化合物,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性。该实验观察冬凌草甲素对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。采用MTT法检测冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用,PI单染、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞凋亡的影响,活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内ROS水平的变化,Western blot分析PARP,Bcl-2,caspase-3蛋白的表达情况。结果表明,冬凌草甲素对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有明显的凋亡诱导作用,显著升高细胞内的ROS水平,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并促进caspase-3及其底物PARP的切割。提示,冬凌草甲素诱导MDA-MB-231细胞凋亡的作用可能与升高细胞内ROS水平、下调Bcl-2的表达以及激活caspase-3相关。     

冬凌草甲素诱导膀胱癌MB49细胞凋亡及机制研究

目的研究冬凌草甲素对膀胱癌MB49细胞株的生长抑制及诱导凋亡作用及其机制。方法MTT法检测冬凌草甲素对MB49细胞的生长抑制作用;Hoechst 33258染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检查Annexin V-FITC-PI双染色法检测细胞凋亡率;分光光度法检测caspase-3、caspase-8和caspase-9活性变化;Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果冬凌草甲素对MB49细胞有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系。随着冬凌草甲素作用浓度增加,凋亡细胞数和坏死细胞数均增加,浓度越高,坏死细胞的比率增加越多。随着冬凌草甲素作用时间延长,MB49细胞的Caspase-3和Caspase-9活性均升高;Bcl-2蛋白的表达逐渐减弱,Bax蛋白的表达逐渐增强,但Caspase-8未见明显变化。结论冬凌草甲素对膀胱癌MB49有明显的抗肿瘤作用。冬凌草甲素可能主要通过Fas/FasL-线粒体途径上调Bax、下调Bcl-2,导致MB49细胞凋亡的发生。     

冬凌草甲素的药学研究进展

 目的综述了近30年来国内外有关冬凌草甲素的研究进展。方法分析和归纳了有关冬凌草甲素的结构性质、含量测定方法、剂型研究、药理作用及临床应用的文献报道。结果与讨论冬凌草甲素的研究主要集中在抗肿瘤活性及机制方面，提取分离和含量测定方法的研究也比较多，但对新剂型及药物动力学的研究较少。     

冬凌草甲素现代药理研究进展

冬凌草甲素为唇形科香茶菜属植物冬凌草的主要有效成分,为贝壳杉烯骨架的四环二萜类化合物。本文就这几年来对冬凌草甲素在肿瘤防治、免疫功能、β-受体阻断等方面的现代药理作用研究进展进行阐述。     

基于CNKI的冬凌草甲素研究文献计量学分析

目的分析冬凌草甲素研究现状,为冬凌草甲素开发应用提供参考。方法检索中国知识资源总库(CNKI)收录的建库至2017年12月冬凌草甲素研究文献。采用SATI3.2及Ucinet对发表时间、作者、期刊、研究机构、基金资助、被引情况和研究内容等进行统计分析,并采用Netdraw进行可视化展示。结果纳入文献379篇,近10年发文较多;涉及作者1145位,合作度3.02、合著率97.1%,尚未形成稳定的核心作者群;"核心区"期刊20种;发文量超过10篇的机构5所,其中郑州大学发文最多(18篇);受资助发文率52.1%,国家级基金资助较多;高被引文献、文献学科分布、高频关键词和研究主题中,抗肿瘤研究均为热点。结论冬凌草甲素研究日趋增长,其抗肿瘤活性为研究热点,研究水平较高,研究核心基本形成,但多偏基础研究,尚未很好应用于临床,适宜药物载体的发现对冬凌草甲素抗肿瘤药效的发挥至关重要。     

冬凌草甲素抗肿瘤活性及构效关系研究进展

对近年来国内外有关冬凌草甲素抗肿瘤活性及其构效关系作一综述，供新型抗癌药物开发借鉴。     

冬凌草甲素对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制。方法通过大剂量冲击法,诱导制备耐紫杉醇的人卵巢癌HO-8910PM细胞株(HO-8910PM/PIX),用不同浓度冬凌草甲素处理HO-8910PM/PIX细胞;或在冬凌草甲素作用HO-8910PM/PIX细胞前以NF-κB激活剂TPA进行预处理。给药后,细胞经DAPI染色,荧光显微镜下观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blotting检测卵巢癌细胞中NF-κB蛋白的表达。建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。接种后8周,观察冬凌草甲素对裸鼠皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中NF-κB的阳性表达。结果与对照组相比,冬凌草甲素呈浓度相关性抑制卵巢癌HO-8910PM/PIX细胞增殖,显著诱导细胞凋亡,而TPA可显著削弱冬凌草甲素诱导细胞凋亡的作用。与HO-8910PM细胞相比,NF-κB在HO-8910PM/PIX细胞中表达显著上调,冬凌草甲素可抑制HO-8910PM/PIX细胞中NF-κB的表达。冬凌草甲素可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长,明显减弱移植瘤组织中NF-κB的阳性表达。结论冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性具有拮抗作用,该作用可能通过抑制NF-κB的表达而实现。     

冬凌草甲素对肿瘤转移相关酶的影响

目的 探讨冬凌草甲素对肿瘤转移相关酶(乙酰肝素酶,MMP-2,MMP-9)的影响.方法 利用半定量RT-PCR检测乳腺癌MDA-MB-231细胞乙酰肝素酶基因的表达变化,用明胶酶谱检测冬凌草甲素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞MMP-2、MMP-9活性的影响.结果 冬凌草甲素可下调乙酰肝素酶在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达,并抑制基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9的活性.结论 冬凌草甲素可通过下调乙酰肝素酶基因表达、抑制MMP-2和MMP-9活性,从而抑制肿瘤的侵袭转移.     

冬凌草甲素/胆固醇甲酰-壳聚糖共聚物纳米胶束的制备及其体外抗肿瘤作用

 目的 制备冬凌草甲素/胆固醇甲酰-壳聚糖共聚物（ORI/CF-CS）纳米胶束并研究其体外抗肿瘤活性。方法 采用酰胺化反应合成胆固醇甲酰-壳聚糖共聚物（CF-CS）;以CF-CS为载体材料制备ORI/CF-CS纳米胶束,并测定其载药量、包封率、形态、粒径和ξ电位;MTT法测定其对宫颈癌Hela肿瘤细胞的细胞毒作用。结果 ORI/CF-CS纳米胶束载药量为9.16%,包封率为48.83%,粒径控制在68.10~113.8 nm内,ξ电位为-34.97~-29.19 mV,体外释药缓慢;ORI/CF-CS纳米胶束对Hela肿瘤细胞的细胞毒作用优于冬凌草甲素溶液,且IC₅₀ 值比冬凌草甲素溶液低约3倍。结论 CF-CS是冬凌草甲素的优良载体,且可提高其抗Hela肿瘤细胞的活性。     

冬凌草甲素衍生物的制备和评价

目的 为研究冬凌草甲素的构效关系,对冬凌草甲素进行结构修饰,合成其衍生物,并评价其细胞毒活性.方法 经常规提取分离得到冬凌草甲素(Ⅰ);通过氧化和酰基化,制备冬凌草甲素衍生物,所获产物采用NMR和MS确证结构;采用MTT法观察衍生物的细胞毒活性.结果 制备了6个冬凌草甲素的衍生物,分别为14-乙酰基冬凌草甲素(Ⅱ)、1,14-二乙酰基冬凌草甲素(Ⅲ)、14一对甲苯磺酰基冬凌草甲素(Ⅳ)、1-氧代冬凌草甲素(Ⅴ),14-乙酰基-1-氧代冬凌草甲素(Ⅵ)、14-对甲苯磺酰基-1-氧代冬凌草甲素(Ⅶ),其中化合物Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ为3个新化合物.初步药理实验表明部分衍生物细胞毒活性高于冬凌草甲素.结论 首次评价了1-氧代冬凌草甲素衍生物的细胞毒活性,其活性高于冬凌草甲素.     

冬凌草甲素对人肝癌细胞HepG_2缝隙连接功能的影响

目的:观察冬凌草甲素对人肝癌细胞Hep G2缝隙连接功能(GJIC)的影响。方法:采用划痕标记染料示踪技术(Scrape-loading Dye Transfer Assay,SL/DT),观察不同浓度的冬凌草甲素处理人肝癌细胞Hep G2之后细胞间隙连接通讯功能。结果:空白对照组细胞的荧光染料主要出现在划痕旁1~2列细胞中(±),且划痕两边被染色的细胞较少;细胞经冬凌草甲素处理48h后,荧光染料不仅出现在划痕的附近细胞内,而且在划痕以外的3~4列细胞内也出现了荧光(++++),划痕两边被染色的细胞明显增多,出现了明显的细胞间染料传输现象,呈浓度依赖性。结论:冬凌草甲素能增强Hep G2细胞间缝隙连接功能,可能是其抗肿瘤作用机制之一。     

冬凌草甲素抑制人胃癌SGC-7901细胞生长的G2/M期阻滞机制研究

目的 研究冬凌草甲素抑制人胃癌SGC-7901细胞生长作用及G2/M期阻滞机制.方法 MTT法检测冬凌草甲素对SGC-7901细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测冬凌草甲素对SGC-7901细胞周期的影响;Western blotting法检测冬凌草甲索对Cdkl、Cyclin B1两种蛋白表达的影响.结果 冬凌草甲素作用于SGC-7901细胞的IC50为15.64μmol/L;冬凌草甲素对G2/M期细胞的阻滞作用随着浓度的增加而增强;Cdk1和Cyclin B1蛋白的表达量随着冬凌草甲素浓度的增大显著降低.结论 冬凌草甲素通过下调SGC-7901细胞内Cdk1、CyclinB1两种蛋白的表达,阻滞细胞于G2/M期而抑制SGC-7901细胞生长.