苦参碱抑制结肠癌细胞生长和迁移侵袭的作用研究

目的:观察苦参碱对人结肠癌SW480和SW480/M5细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭及AKT/GSK3β/β-catenin信号通路的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测AKT、GSK3β和β-catenin及各自磷酸化蛋白水平。结果:苦参碱呈浓度及时间依赖性抑制SW480和SW480/M5细胞的增殖,在24、48、72 h对SW480细胞的半数抑制浓度依次为1 919、832.8、318.1μg/mL,对SW480/M5细胞的半数抑制浓度依次为2 417、947、581μg/mL。苦参碱呈浓度依赖性降低SW480和SW480/M5细胞的克隆形成率,苦参碱可抑制SW480和SW480/M5细胞的迁移和侵袭能力,800μg/mL苦参碱能抑制SW480和SW480/M5细胞内AKT和GSK3β蛋白磷酸化,诱导β-catenin的磷酸化降解。结论:苦参碱可抑制结肠癌SW480和SW480/M5细胞的增殖、克隆形成和迁移侵袭能力,其机制可能与抑制AKT/GSK3β/β-catenin信号通路有关。     

基于网络药理学的汉黄芩素抑制人结直肠癌细胞SW480增殖机制研究

汉黄芩素是中药黄芩的主要活性单体之一,具有较好的抗癌作用。近年来针对汉黄芩素的抗癌药理作用已开展了广泛的研究,但涉及其分子机制的研究仍较少,其抗癌活性的分子靶点尚不清楚。该研究基于网络药理学筛选汉黄芩素治疗结直肠癌的特征靶点和分子通路,结果表明Wnt/β-catenin是汉黄芩素治疗结直肠癌的关键通路。以此为基础,开展汉黄芩素对人结直肠癌细胞SW480增殖抑制的机制研究。药理研究显示,汉黄芩素能够显著抑制人结直肠癌细胞增殖(P0.001),且在12.5～50μmol·L~(-1)呈现良好的剂量依赖规律。流式细胞术结果揭示汉黄芩素能够将细胞有效阻滞于G_1期,从而抑制细胞增殖。此外,实验采用Western blot法考察汉黄芩素对Wnt/β-catenin通路4个特征蛋白的影响,与对照组相比,CTNNB1(β-catenin),BIRC5(survivin),GSK3B蛋白表达显著下调,而BAX呈现上调趋势(P0.05)。该研究通过网络药理学方法、流式细胞术与Western blot试验揭示汉黄芩素通过调节Wnt/β-catenin信号通路特征蛋白表达抑制人结直肠癌细胞增殖,CTNNB1(β-catenin),BIRC5(survivin),GSK3B,BAX是其潜在靶点。该研究阐释汉黄芩素的抗肿瘤分子机制及特征靶点,希望能够为抗结肠癌药物研发以及临床有效用药提供理论依据。     

马钱子碱对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的影响及机制研究

目的探讨马钱子碱对人结肠癌细胞株SW480的增殖和周期的影响及可能的分子机制。方法将试验分为空白对照组和马钱子碱高(8μmol/L)、中(4μmol/L)、低剂量组(2μmol/L),细胞生长曲线检测马钱子碱干预前后各组SW480细胞的增殖情况;流式细胞术检测马钱子碱对各组SW480细胞周期的影响;RT-PCR检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA表达的调节作用;Western Blot试验检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达的调节作用。结果细胞生长曲线表明,在一定范围内,马钱子碱给药浓度越高,对SW480细胞增殖的抑制作用越显著,以高剂量组为最优。流式细胞术试验表明,马钱子碱可显著升高G2/M期的SW480细胞数量,从而将SW480周期阻滞在G2/M期。RT-PCR和Western Blot试验结果显示,马钱子碱干预后Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA和蛋白表达相较于正常对照组其表达明显降低。结论马钱子碱可通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞SW480增殖并将SW480细胞周期阻滞在G2/M期。     

莪黄汤对结肠癌SW480细胞中β-catenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响

目的:了解莪黄汤含药血清对人结肠癌SW480细胞增殖的影响及对Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、cyclin D1蛋白表达的影响。方法:通过莪黄汤不同浓度含药血清处理SW480细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞周期,免疫组化及Western blot检测Wnt/β-catenin通路中β-catenin、Cyclin D1蛋白的表达。结果:MTT检测显示不同浓度莪黄汤含药血清在体外对结肠癌SW480细胞增殖有明显抑制作用,呈时间依赖及浓度依赖关系;流式细胞检测显示莪黄汤可抑制SW480细胞增殖,并提示莪黄汤可能在S期发挥作用,阻止细胞进入G2/M期,其中7.14g/kg组抑制作用最明显;免疫组化及Western检测提示莪黄汤可降低β-catenin及其下游cyclin D1蛋白的表达。结论:莪黄汤可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制SW480细胞增殖发挥抗肿瘤作用。     

Survivin靶向siRNA抑制结直肠癌细胞增殖作用的研究

目的分析Survivin靶向siRNA抑制结直肠癌细胞增殖的作用。方法将结直肠癌Lovo细胞株进行培养及转染,采用Western blot法、RT-PCR法对Survivin的表达进行检测,应用MTT法对siRNA抑制细胞增殖的作用进行检测。结果 Survivin靶向小干扰RNA抑制结直肠癌SW480细胞株mRNA的构成比为37.1%,抑制结直肠癌SW480细胞株蛋白表达的构成比为45.3%,12 h对结直肠癌SW480细胞的抑制率为23.8%,24 h对结直肠癌SW480细胞的抑制率为30.2%,36 h对结直肠癌SW480细胞的抑制率为35.2%,48 h对结直肠癌SW480细胞的抑制率为38.5%,72 h对结直肠癌SW480细胞的抑制率为39.6%,均显著高于阴性对照组(P均<0.05)。结论 Survivin靶向siRNA抑制结直肠癌细胞增殖的作用显著。     

加味小陷胸汤干预Wnt/β-catenin信号通路抑制人胃癌MGC803细胞上皮间质转化

目的:研究加味小陷胸汤对人胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)抑制作用及与分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路关系。方法:采用人胃癌MGC803细胞悬液种植法构建BALB/c裸鼠皮下异位移植性肿瘤动物模型。造模成功后随机分为模型组、加味小陷胸汤低、中、高剂量组(16.0,32.0,64.0 g·kg^-1),卡培他滨组(400 mg·kg^-1),每组8只,灌胃给药,每日1次,连续给药28 d,其中卡培他滨组给2周停1周。观察裸鼠一般状态、体质量,测量移植瘤大小,处死后称质量并计算抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色法观察移植瘤组织病理学变化;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt1,β-catenin的基因和蛋白表达水平及Western blot检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9),血管内皮生长因子(VEGF),N-钙黏蛋白(N-cadherin),E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin),锌指蛋白(Snail)蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测环氧合酶2(COX2),前列腺素E;(PGE;)的表达水平。结果:各组移植瘤体积随时间呈现不同的增长趋势,模型组增长趋势最为明显,与模型组比较,加味小陷胸汤低、中、高剂量组、卡培他滨组瘤体积呈现不同程度的生长抑制、增长趋势降低,且随时间延长作用明显,给药7,14,21,28 d加味小陷胸汤低、高剂量组、卡培他滨组移植瘤体积明显降低(P<0.05,P<0.01),给药14,21,28 d加味小陷胸汤中剂量组移植瘤体积显著降低(P<0.01)。与模型组比较,给药7,14,21,28 d,加味小陷胸汤高剂量组、卡培他滨组裸鼠移植瘤相对肿瘤体积显著降低(P<0.01),给药14,21,28 d,加味小陷胸汤低、中剂量组移植瘤相对肿瘤体积明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,加味小陷胸汤低、中、高剂量组、卡培他滨组移植瘤抑瘤率显著升高(P<0.01)。与模型组比较,加味小陷胸汤中低、中、高剂量组、卡培他滨组均能下调瘤组织Wnt1,β-catenin m RNA和蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)及MMP-9,VEGF,N-cadherin,Vimentin,Snail的蛋白表达(P<0.05,P<0.01),上调E-cadherin蛋白的表达(P<0.05,P<0.01);降低COX;,PGE;含量(P<0.05,P<0.01)。结论:加味小陷胸汤对人胃癌MGC803细胞移植瘤EMT具有抑制作用,其机制可能与Wnt/β-catenin通路有关。     

复方中药联合卡培他滨同步维持治疗晚期结直肠癌

目的评价复方中药联合卡培他滨在晚期结直肠癌维持期的疗效。方法将符合晚期结直肠癌维持治疗诊断标准的100例患者随机分为治疗组和对照组,各50例。治疗组:卡培他滨按照每日总剂量(常规用量每2 000mg/m2)分早、晚各1次,饭后30min口服,同步复方中药每日1剂,分2次,早、晚饭后1h服用。连续用药2周停药1周。对照组:单服卡培他滨。2组均持续用药至肿瘤进展或出现无法耐受的不良反应为止。结果治疗组和对照组的中位无疾病进展时间(PFS)分别为6.4个月和2.5个月,2组比较有显著性差异(P0.05);与对照组比较,治疗组可以明显提高晚期结直肠癌患者的NK细胞及CD4/CD8(P0.05),可以明显改善患者的卡氏评分(P0.01)。结论复方中药联合卡培他滨同步维持治疗晚期结直肠癌具有延长患者PFS、改善免疫功能、提高生活质量的作用。     

当归多糖通过Wnt/β-catenin信号通路抑制骨关节炎软骨细胞氧化应激损伤与炎症反应

目的:研究当归多糖通过Wnt/β-catenin信号通路对骨关节炎软骨细胞的氧化应激损伤及炎症反应的影响。方法:在大鼠膝关节中注射碘乙酸建立关节炎模型,3 mg/只,对照组注射等量的0.9%氯化钠溶液; 将关节炎模型大鼠分为模型组和当归多糖组。给药3周后,采用酶联免疫吸附法测定SD大鼠血清中炎症因子水平、氧化应激参数水平[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]、膝关节软骨中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA表达水平和c-Fos蛋白表达水平。采用酶标仪测定当归多糖处理48 h后的IL-1β,损伤SW1353细胞8 h后的细胞活性。通过PCR法检测MMP-13 mRNA、β-catenin mRNA、ADAMTS4 mRNA的表达水平。通过Western blot法测定β-catenin、MMP-13蛋白表达水平。结果:当归多糖治疗后,IL-1β、TNF-α、MDA、SOD、CAT水平及MMP-13 mRNA和c-Fos蛋白均低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。在IL-1β刺激的SW1353损伤模型中,经过10、50、100 μg/ml当归多糖处理后,SW1353细胞活性较模型组增加,组间比较差异有统计学意义(均P<0.05); Wnt 4a、GSK-3β、β-catenin、ADAMTS4 mRNA和MMP-13 mRNA蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:当归多糖通过Wnt/β-catenin信号通路抑制骨关节炎软骨细胞的氧化应激损伤与炎症反应。     

青蒿素联合吉西他滨对结肠癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的评价青蒿素联合吉西他滨对结肠癌细胞株(LOVO、HT29)增殖和凋亡的影响。方法 WST-1法检测联合用药对LOVO、HT29细胞增殖的影响,Annexin V/PI双染法检测联合用药对细胞凋亡的影响,JC-1法检测联合用药对细胞线粒体势能改变的影响,Western blot法检测联合用药对细胞内p-ERK1/2蛋白表达的影响。结果青蒿素、吉西他滨在体外显著抑制LOVO、HT29细胞增殖,具有浓度依赖性;两者联合能产生协同抑制作用,通过激活线粒体途径介导细胞凋亡;p-ERK1/2蛋白在2种细胞中的表达水平显著高于在结肠正常上皮细胞FHC中;青蒿素可下调p-ERK1/2、bcl-2、线粒体内细胞色素C蛋白表达,并上调bax、胞浆内细胞色素C及Caspase-3表达。结论青蒿素、吉西他滨可通过抑制ERK1/2信号通路激活来诱导结肠癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,两者联合应用有望成为结肠癌新型治疗方案。     

姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路抑制晶状体上皮细胞增殖的实验研究

[目的]探讨姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路对人晶状体上皮细胞(LECs)增殖的影响及其可能的作用机制,为晶状体后囊膜混浊(PCO)的临床治疗提供新的靶点。[方法]人LECs系SRA 01/04细胞为研究对象,实验分为3组:Wnt3a组,姜黄素组和对照组。Wnt3a组采用脂质体介导转染技术将Wnt3a c DNA表达载体瞬时转染入人SRA 01/04细胞中,构建PCO的细胞模型。姜黄素组在转染Wnt3a c DNA表达载体48 h后加入20μmol/L姜黄素,对照组转染pc DNA3-HA表达载体。采用Western blot技术验证载体在转染细胞中的表达,CKK-8实验检测姜黄素对SRA 01/04细胞增殖能力的影响,采用免疫细胞化学法检测Wnt3a过表达后增生细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化;Western blot法检测Wnt3a过表达对Wnt/β-catenin下游信号分子cyclin D1和c-Myc蛋白表达的影响;应用免疫荧光法检测Wnt3a过表达后β-catenin表达的定位变化。[结果]Western blot检测证实,转染pc DNA3-HA表达载体后,SRA 01/04细胞内Wnt3a蛋白表达明显升高。CKK-8检测表明,姜黄素组SRA 01/04细胞的增殖率明显低于Wnt3a组(t=2.782,P=0.049)。姜黄组SRA 01/04细胞PCNA蛋白表达阳性率为23.6%±4.0%,明显低于Wnt3a组的43.4%±5.4%,差异有统计学意义(t=2.951,P=0.018)。转染后48 h,β-catenin蛋白密集分布于Wnt3a组细胞核和细胞质中,而在对照组仅出现于细胞之中,姜黄素组β-catenin蛋白主要分布于细胞核中,少量分布于细胞质中。Western blot检测姜黄素组Wnt/β-catenin信号通路靶蛋白Cyclin D1和c-Myc蛋白表达明显低于Wnt3a组。[结论]在SRA01/04细胞中,姜黄素抑制Wnt3a过表达诱导的Wnt/β-catenin信号通路活化,下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc表达下调,抑制人LECs的增生。     

槲皮素通过抑制β-catenin入核抑制人宫颈癌细胞增殖、迁移的实验研究

[目的]探讨槲皮素通过Wnt/β-catenin信号通路对人宫颈癌上皮细胞增殖及迁移的影响及其可能的作用机制,为抑制宫颈癌进展的临床治疗提供新的靶点。[方法]人宫颈癌上皮细胞系HeLa细胞为研究对象,给予不同浓度槲皮素处理24 h后,通过CCK-8实验检测槲皮素对HeLa细胞增殖能力的影响。采用Transwell及细胞划痕实验检测槲皮素对HeLa细胞垂直及水平运动能力的影响。免疫荧光法检测β-catenin表达及TopFlash荧光素酶报告系统检测槲皮素对HeLa细胞Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用。[结果] CCK-8检测表明,槲皮素处理组HeLa细胞增殖率明显低于对照组(P0.01),且抑制作用具有浓度依赖性。槲皮素处理组HeLa细胞垂直及水平运动能力均较对照细胞降低,差异有统计学意义(P0.01)。对照组HeLa细胞中β-catenin蛋白密集分布于胞核和胞质中,而槲皮素处理组中β-catenin蛋白主要分布于细胞质中。TopFlash荧光素酶报告系统表明槲皮素处理组HeLa细胞Wnt/β-catenin信号通路受到抑制。[结论]槲皮素可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活化抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移。     

当归补血汤联合卡培他滨节拍化疗治疗高龄晚期结直肠癌

目的探讨当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)联合卡培他滨节拍化疗(Metronomic Chemotherapy)治疗高龄晚期结直肠癌的临床疗效及其对血清二胺氧化酶(DAO)水平的影响。方法选取2015年1月—2018年1月我科住院治疗的高龄晚期结直肠癌患者共41例,采用随机分组方法分为两组,当归补血汤联合卡培他滨节拍化疗组(DBD加MCG)21例,给予当归补血汤(当归6 g,黄芪30 g)和卡培他滨500 mg,日2次口服,28 d为1周期。卡培他滨组(MCG)20例,仅给予卡培他滨500 mg,日2次。比较两组患者的近期临床疗效、不良反应、生存时间及相关血液指标的变化情况。结果当归补血汤联合卡培他滨节拍化疗组有效率28.6%,疾病控制率71.4%;卡培他滨组有效为20.0%,疾病控制率为65.0%;结果提示当归补血汤联合卡培他滨节拍化疗组中位无疾病进展生存期为9.9个月;卡培他滨组7.8个月;两组患者发生不良反应的概率及反应级别都较低,其中当归补血汤联合卡培他滨节拍化疗组较卡培他滨组在乏力的发生率方面明显较低(P 0.05),具有统计学差异;两组患者治疗后血清二胺氧化酶水平均有所上升,但当归补血汤联合卡培他滨节拍化疗组平均血清二胺氧化酶仅为(2.11±0.52),而卡培他滨组为(3.31±0.66)(P 0.05),具有统计学差异。结论当归补血汤联合卡培他滨节拍化疗在高龄晚期结直肠癌患者的维持治疗中安全可行,能够减轻不良反应,并改善肠黏膜屏障功能,一定程度上延长患者生存时间。     

左旋紫草素靶向Wnt/β-catenin通路抑制宫颈癌HeLa细胞增殖侵袭迁移的机制研究

目的?观察左旋紫草素对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移及Wnt/β-catenin通路蛋白的影响。方法?设置左旋紫草素浓度梯度为0、0.5、1、2、4、8 μmol/L，干预HeLa细胞，MTS法检测细胞增殖活力，并筛选最佳干预浓度进行后续实验。后续实验中分为对照组、左旋紫草素 0.5、1、2 μmol/L组。划痕实验检测HeLa细胞24、48 h后细胞的迁移能力；Transwell实验检测左旋紫草素作用HeLa细胞24 h后细胞侵袭能力；Western Blot检测左旋紫草素作用HeLa细胞24 h后Wnt/β-catenin通路相关蛋白Wnt5a、β-catenin、p-LRP、LRP的表达。结果?左旋紫草素1、2、4、8 μmol/L在24 h可明显抑制HeLa细胞增殖（P<0.05，P<0.01），其抑制作用呈现浓度依赖性；与对照组比较，左旋紫草素0.5、1、2 μmol/L组细胞穿过率明显降低，细胞穿过基质胶的能力随着药物浓度的加大而降低（P<0.01），同时Wnt5a、β-catenin、p-LRP蛋白表达下降（P<0.05，P<0.01）。结论?左旋紫草素可通过下调Wnt/β-catenin信号通路，抑制HeLa细胞增殖、侵袭、迁移功能。     

口服蒿甲醚片剂抑制小鼠结直肠癌生长的实验研究

目的:探讨口服蒿甲醚片(Artemether Tablet)对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤作用。方法:BALB/c小鼠皮下接种CT-26结直肠癌细胞(2×106个/mL)48只,雌、雄各半;随机分为6组,每组8只,分别为Ⅰ组:蒿甲醚33.3mg/(kg.d)、Ⅱ组:蒿甲醚50mg/(kg.d)、Ⅲ组:蒿甲醚66.6mg/(kg.d)、Ⅳ组:蒿甲醚50mg/(kg.d) 硫酸亚铁1.5mg/(kg.d)组、Ⅴ组:阳性对照为卡培他滨片(83mg/kg.d)、Ⅵ组:空白对照组为等体积生理盐水;结果:口服蒿甲醚片33.3mg/(kg.d)、50mg/(kg.d)、66.6mg/(kg.d)以及蒿甲醚50mg/(kg.d) 硫酸亚铁1.5mg/(kg.d),对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤率分别为:42.3%、51.4%、52.0%、53.5%,各实验组与生理盐水组比较,差异有显著性(分别P=0.024,P=0.006,P=0.007,P=0.004),各实验组间比较,差异无显著性(P>0.05)。各实验组与阳性对照组卡培他滨比较,除Ⅰ组:蒿甲醚33.3mg/(kg.d),差异有显著性(P<0.05)外,其余各组,统计差异无显著性(P>0.05)。结论:口服蒿甲醚片剂对小鼠CT-26结直肠癌有明显的抑制作用;蒿甲醚与硫酸亚铁合用能使抑瘤率增加。     

从TGF-β/Smads信号通路探讨卡培他滨配伍桔梗抗乳腺癌增殖和侵袭作用及其机理研究

目的:探讨卡培他滨配伍不同归经引经药(引药上行之桔梗、引药下行之川牛膝)对乳腺癌4T1细胞株增殖和侵袭能力的影响,并从TGF-β/Smads信号通路探讨其可能作用机制。方法:分为桔梗组、川牛膝组、卡培他滨组、卡培他滨+桔梗组、卡培他滨+川牛膝组,空白对照组共6组。MTT法测不同组药物对乳腺癌4T1细胞增殖能力的影响,Transwell小室法测不同药物组作用4T1细胞后侵袭能力变化,实时定量PCR法测各组TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7mRNA的表达。结果:卡培他滨、桔梗、卡培他滨+桔梗组、卡培他滨+川牛膝组均具有一定的抑制4T1细胞增殖活性的作用(P均0.01)。与对照组比较,卡培他滨组、桔梗组、卡培他滨+桔梗组均能不同程度影响4T1细胞侵袭能力(P0.05、P0.05和P0.01),而卡培他滨配伍桔梗后抑制侵袭能力优于单药卡培他滨(P0.05)。与对照组比较,卡培他滨组可不同程度下调TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad3、Smad4的mRNA表达,同时上调Smad7的mRNA表达;而单药桔梗和川牛膝对TGF-β1信号通路各因子无明显调控作用。与单药卡培他滨比较,卡培他滨配伍桔梗后可进一步下调Smad4的mRNA表达(P0.05)。结论:卡培他滨可通过调控TGF-β/Smads信号通路关键基因的表达发挥抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭活性。卡培他滨配伍桔梗后具有更好的抑制增殖和抗侵袭作用,可能与进一步下调Smad4的mRNA表达相关。     

白藜芦醇诱导人胶质瘤细胞U251增殖抑制与凋亡的作用研究

目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链反应法检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax mRNA水平。采用Western blotting检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:白藜芦醇抑制U251细胞的增殖和Wnt、β-catenin、p53、p21和Bcl-2的表达,且呈浓度依赖性;促进U251细胞凋亡和Bax的表达。结论:白藜芦醇诱导U251细胞增殖抑制和凋亡与抑制Wnt/β-actin/p53信号通路激活相关。     

通络生骨胶囊对软骨氧化损伤的保护作用及其机制探讨

目的:通过H_2O_2诱导(SW1353)软骨细胞损伤Model,研究通络生骨胶囊对软骨细胞的保护作用,并探索其可能的作用机制。方法:不同浓度的通络生骨胶囊(1、5、10、50和100μg/mL)预处理SW1353细胞72 h,再经H_2O_2(300μmol/L)诱导损伤1 h,检测细胞活率、Nrf2、HO-1、Wnt4α和β-catenin的mRNA表达,并检测β-catenin、Nrf2、Keap-1和HO-1的蛋白表达水平。结果:通络生骨胶囊可有效促进软骨细胞增殖;在H_2O_2损伤Model中,通络生骨胶囊对软骨细胞具有明显的抗氧化保护作用,同时增强Nrf2、HO-1、Wnt4α和β-catenin的mRNA表达水平。通络生骨胶囊还可有效抑制Keap-1蛋白表达,上调Nrf2和HO-1的蛋白表达。结论:通络生骨胶囊可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路从而激活Nrf2/HO-1抗氧化途径,降低氧自由基对软骨细胞损伤作用,从而达到治疗骨性关节炎的目的。     

鸦胆子油注射剂胃癌术后辅助化疗

目的:研究胃癌术后应用鸦胆子油注射剂辅助化疗的疗效。方法:选择在本院接受手术治疗的108名进展期胃癌患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组,对照组给予XELOX辅助化疗(卡培他滨口服+奥沙利铂静脉滴注),观察组给予鸦胆子油注射剂辅助XELOX化疗(卡培他滨口服+奥沙利铂静脉滴注+鸦胆子油注射剂静脉滴注),观察远期预后情况、不良反应例数、总体生活质量以及免疫功能。结果:观察组完全缓解(CR)(8.62%)、有效率(58.62%)、获益率(79.31%)、卡氏行为状态(KPS)评分(84.37±8.21)分、生活质量核心量表(QLQ-C30)评分(81.84±8.34)分、T细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+)、自然杀伤(NK)细胞(9.31±1.34)%、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量(1.53±0.21)ng·L-1高于对照组,局部复发(10.34%)、远处转移(10.34%)、恶心呕吐(10.34%)、神经毒性(22.41%)、肝功能损害(10.34%)、肾功能损害(12.07%)低于对照组。结论:胃癌术后应用鸦胆子油注射剂辅助化疗能够改善远期预后、减少不良反应,具有积极的治疗价值。     

中医辨证维持治疗晚期结直肠癌的临床研究

目的评价中医辨证在晚期结直肠癌维持期的疗效。方法将符合晚期结直肠癌维持治疗诊断标准的120例患者随机分为中药组60例和卡培他滨组各60例。卡培他滨组按照每日总剂量（常规用量每日2000mg／m2）分早晚各1次饭后0．5h吞服,连用2周间隔1周。中药组以“证素”为基础,参考《大肠癌病证规律及中医证素诊疗规范化探讨》进行中医辨证汤剂治疗。2组均持续用药至肿瘤进展或出现无法耐受的不良反应为止。结果中药组的中位无疾病进展时间（PFS）为5．4个月,卡培他滨组中位PFS为2个月,2组比较差异有统计学意义（P=0．021〈0．05）;与卡培他滨组比较,中药组可以明显提高晚期结直肠癌患者的NK细胞及CD4／CD8（P〈0．05）,可以明显改善患者的卡氏评分（P〈0．01）。结论中医辨证维持治疗具有延长患者PFS、改善免疫功能、提高生活质量的作用。     

通腑解毒汤操控CCAT1介导结直肠癌细胞凋亡机制研究

目的:探讨通腑解毒汤调控结直肠癌细胞凋亡的潜在机制。方法:纳入2019年3月～2020年3月于我院收治确诊为结直肠癌患者30例,年龄66～78岁。通过实时荧光定量PCR检测30例结直肠癌组织和30例癌旁组织中CCAT1的表达情况。敲低CCAT1后,检测结直肠癌细胞的凋亡情况。通腑解毒汤处理结直肠癌细胞HCT116、RKO、HT-29、LS513、SW620、LoVo、SW480后,检测细胞中CCAT1的表达量和凋亡情况。通腑解毒汤处理并过表达CCAT1后,检测结直肠癌细胞的凋亡情况。结果:30例结直肠癌患者癌组织中CCAT1的表达高于癌旁组织(P0.05)。通腑解毒汤处理结直肠癌细胞HCT116、RKO、HT-29、LS513、SW620、LoVo、SW480后,结直肠癌细胞中CCAT1的表达均下降(P0.05)。通腑解毒汤处理结直肠癌细胞HCT116、RKO、HT-29、LS513、SW620、LoVo、SW480后,结直肠癌细胞中的凋亡水平上升(P0.05)。敲低CCAT1后,结直肠癌细胞HCT116、RKO、HT-29、LS513、SW620、LoVo、SW480的凋亡水平上升(P0.05)。过表达CCAT1并用通腑解毒汤处理后,结直肠癌细胞HCT116、RKO、HT-29、LS513、SW620、LoVo、SW480的凋亡水平无明显变化(P0.05)。结论:通腑解毒汤通过降低CCAT1的表达水平促进了结直肠癌细胞的凋亡。