从卷柏中提取雌激素类成分的实验研究

目的：对不同提取方法所得的卷柏各提取物进行雌激素活性筛选,探索卷柏中雌激素类活性物质的提取方法;明确卷柏发挥雌激素作用的活性成分的极性。方法：采用小鼠子宫增重实验,将卷柏分别以70%乙醇回流所得总部位经聚酰胺柱分离;95%乙醇回流药渣经水提取;药渣水提物去除多糖等所得的卷柏各组分进行雌激素活性筛选。运用HPLC指纹图谱技术对卷柏95%醇提物、药渣水提物进行分析。结果：70%乙醇回流所得的卷柏总部位、药渣水提物高剂量、药渣水提物去多糖组与空白组比,均能显著性增加小鼠子宫系数(p＜0.01),卷柏其余各组与空白组相比无明显作用(p＞0.05);HPLC指纹图谱显示卷柏95%醇提物中穗花杉双黄酮为其主要成分,而药渣水提物中基本不含穗花杉双黄酮。结论：95%乙醇回流药渣水提法与聚酰胺柱分离法相比,前者更适合于卷柏雌激素活性物质的提取分离;卷柏中发挥雌激素作用的活性成分主要为水溶性除多糖物质;HPLC指纹图谱结果提示,穗花杉双黄酮不是卷柏发挥雌激素作用的成分。     

卷柏及垫状卷柏的HPLC指纹图谱及穗花杉双黄酮的含量测定研究

目的 建立卷柏及垫状卷柏的HPLC指纹图谱分析方法并进行穗花杉双黄酮的含量测定.方法 采用HPLC方法测定24批不同产地的卷柏及垫状卷柏药材,分析两者的指纹图谱特征及穗花杉双黄酮的含量.结果 以穗花杉双黄酮为主的不同的7个特征峰分别共同构成卷柏及垫状卷柏的HPLC指纹图谱概貌,卷柏及垫状卷柏中穗花杉双黄酮的含量分别为1...     

江南卷柏及同属植物的HPLC指纹图谱鉴别及穗花杉双黄酮测定研究

目的建立江南卷柏及同属植物的HPLC指纹图谱并同步进行穗花杉双黄酮的含量测定。方法色谱柱:ZORBAXSB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.5%冰醋酸水溶液(B)梯度洗脱;检测波长:270nm;流速:1.0mL·min-1;穗花杉双黄酮含量测定与指纹图谱同步进行。结果以穗花杉双黄酮为主的18个特征峰共同构成江南卷柏的HPLC特征指纹图谱概貌;穗花杉双黄酮含量为0.8%～1%。结论13批江南卷柏具有高度的相似性,相似度大于0.98。5种卷柏属植物全草的色谱与江南卷柏的指纹图谱接近,结合主成分分析可与江南卷柏归为一类,推测有类似的生理活性。另3种(黑顶卷柏、薄叶卷柏、翠云草)指纹图谱有明显差异,不宜与江南卷柏混用。     

响应面法优选垫状卷柏中穗花杉双黄酮提取工艺

目的:建立垫状卷柏中穗花杉双黄酮乙醇提取的最佳工艺条件。方法:以穗花杉双黄酮提出量为考察指标,从乙醇浓度、提取时间、提取次数、加醇倍量4个方面进行单因素考察,选取最优条件设计垫状卷柏醇提工艺的响应面试验,确定最佳提取条件。结果:乙醇浓度70.6%、提取时间60 min、提取次数3次、加醇倍量12倍,穗花杉双黄酮提出量可以达到17.97 mg/g。结论:采用响应面法预测垫状卷柏醇提工艺的模型准确有效,可以较好的优选出垫状卷柏中穗花杉双黄酮的最佳提取工艺。     

不同产地五灵脂质量评价研究

目的：基于HPLC指纹图谱和穗花杉双黄酮的含量测定结果，对不同产地五灵脂药材质量进行评价。方法：采用HPLC建立五灵脂指纹图谱和穗花杉双黄酮含量测定方法，并运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统和统计软件进行结果分析。结果：不同产地的五灵脂指纹图谱和穗花杉双黄酮含量有其专属性，其中陕西、山西、安徽、河北四产地的指纹图谱相似度高，且穗花杉双黄酮含量>0.020%。结论：不同产地的五灵脂质量存在较大差异，可能与其复齿鼯鼠食物来源有关，需控制鼯鼠食物来源，保证市场上五灵脂质量稳定性。     

正交试验量效比对法优选卷柏抗SMMC-7721肝肿瘤组分总黄酮的提取工艺

目的： 优选卷柏抗SMMC-7721肝肿瘤组分总黄酮的提取工艺。 方法： 选取提取时间、提取次数、乙醇用量及体积分数为考察因素,以人肝癌细胞SMMC-7721抑制率为指标的正交试验结果优选总黄酮和穗花杉双黄酮提取量综合评分的权重系数比,并通过SPSS 17.0软件对有效组分与药效学指标进行Pearson相关系数分析。采用HPLC测定穗花杉双黄酮含量,流动相乙腈-0.5%乙酸水（33：67）,检测波长269 nm。 结果： 最佳提取工艺条件为加10倍量70%乙醇回流提取1次,每次3 h;穗花杉双黄酮含量与总黄酮含量的权重系数分别为0.7,0.3,反映含量指标与抑制率呈一定相关性。 结论： 以有效成分含量代表药效作为正交试验指标是科学合理的,优选的提取工艺稳定可行,为中药有效成分的提取提供新思路。     

黄芪及其提取物的红外光谱鉴别

目的：本文通过比较黄芪及其不同提取物的红外光谱图,为黄芪的化学成分分析和提取分离工艺提供质量参考。方法利用乙醇回流法提取皂苷与黄酮,再用蒸馏水提取药渣中的多糖。对黄芪药材粉末、黄芪水提取物、黄芪醇提物及其药渣水提物的红外光谱及二阶导数谱进行分析。结果黄芪粉末、70%醇提物和80%醇提物皆于1735 cm-1附近(羰基伸缩振动吸收峰)有较弱、较宽的吸收峰,黄芪水提物中此波长附近的吸收峰不明显。表明黄芪水提物中主要为多糖类成分,含有少量不溶于水的黄酮类成分。醇提物则主要为皂苷类与黄酮类成分,且在一定范围内,黄酮类提取量随乙醇浓度增加而增加。结论红外光谱分析法可快速、简便地鉴别黄芪及其提取物的化学成分类别,为其进一步的质量研究提供依据。     

旱生卷柏化学成分的研究(Ⅰ)

目的研究旱生卷柏的化学成分.方法旱生卷柏的乙醇提取物,经水混悬后的不溶物的醋酸乙酯提取部位,用硅胶柱色谱、薄层色谱制备以及Sephadex LH-20柱色谱分离纯化,得到4种化学成分.结果经理化测试和光谱分析确定了化学结构,分别是:大黄素、银杏双黄酮、扁柏双黄酮、穗花杉双黄酮.结论这些化合物均为首次从该植物中分得,大黄素系首次从卷柏科中分离得到.     

旱生卷柏化学成分的研究(Ⅰ)

目的 研究早生卷柏的化学成分。方法 早生卷柏的乙醇提取物，经水混悬后的不溶物的醋酸乙酯提取部位，用硅胶枝色谱、薄层色谱制备以及Sephadex LH—20枝色谱分离纯化，得到4种化学成分。结果 经理化测试和光谱分析确定了化学结构，分别是：大黄素、银杏双黄酮、扁柏双黄酮、穗花杉双黄酮。结论 这些化合物均为首次从该植物中分得，大黄素系首次从卷柏科中分离得到。     

天蓝苜蓿黄酮组分的制备及清除DPPH自由基活性研究

目的:以聚酰胺色谱柱分离天蓝苜蓿中黄酮组分,研究其清除DPPH自由基的能力。方法:采用多功能动态热回流提取浓缩机组提取天蓝苜蓿乙醇提取物,通过聚酰胺色谱柱吸附黄酮成分,不同浓度乙醇洗脱后,干燥得不同浓度乙醇洗脱物;采用DPPH自由基清除法,比较天蓝苜蓿不同洗脱液中黄酮组分的抗氧化能力。结果:天蓝苜蓿黄酮以三氯化铝显色后于紫外423nm有最大吸收;聚酰胺色谱柱上样洗脱,上样速度:12m L/min,洗脱速度:18m L/min;不同溶剂洗脱物清除DPPH自由基能力为:30%乙醇洗脱物60%乙醇洗脱物90%乙醇洗脱物水洗脱物。结论:聚酰胺色谱柱能够富集分离天蓝苜蓿黄酮组分,且30%乙醇洗脱物清除DPPH自由基能力最强。     

卷柏提取物对去势大鼠股骨中羟脯氨酸含量的影响

目的:采用柱前衍生化法对去势大鼠股骨中羟脯氨酸(HyP)的含量进行测定,观察卷柏提取物对去势大鼠股骨中HyP含量的影响。方法:Wistar雌性大鼠摘除卵巢后1周开始ip卷柏总提物665 mg·kg-1,卷柏正丁醇部位85 mg·kg-1,卷柏水部位490 mg·kg-1,持续11周后处死,取其股骨,采用2,4-二硝基氯苯柱前衍生化反相高效液相色谱法,观察卷柏提取物对去势大鼠股骨中HyP含量的影响。结果:HyP 0.125～2.00 g.L-1线性关系良好(r=0.999 4),精密度试验RSD<1%,24 h内稳定性试验RSD<5%,加样回收率均在90%～110%;卷柏水部位和正丁醇部位均能增加去势大鼠股骨中HyP含量。结论:卷柏提取物能增加去势大鼠股骨中HyP含量,其中卷柏水部位和正丁醇部位,对去势大鼠骨质疏松具有一定的干预作用。     

正交设计优选卷柏中总黄酮的提取工艺研究

目的 优选卷柏中总黄酮的提取工艺.方法 采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定总黄酮和阿曼托双黄酮.以提取量为考察指标,用正交设计方法 优选最佳提取工艺.结果 以总黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1B2C2D2;以阿曼托双黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1～3 B1～3 C2D2.综合考察采用A1B2C2D2为最佳提取工艺,即药材加10倍量的95%乙醇,回流提取2次,每次2h.结论 优选得到的工艺稳定可行,可作为卷柏的提取工艺.     

江南卷柏提取物脱脂工艺优选

目的: 优选江南卷柏提取物的石油醚脱脂工艺,为该植物的资源开发与利用提供参考. 方法: 以穗花杉双黄酮提取量和浸膏得率为评价指标,通过正交试验考察石油醚用量、提取时间和提取次数对脱脂工艺的影响.采用HPLC测定穗花杉双黄酮含量,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~5 min,25%A;5~12 min,25%~35%A;12~17 min,35%~45%A;17~25 min,45%~50%A;25~40 min,50%~55%A;40~45 min,55%~70%A;45~50 min,70%~100%A;50~55 min,100%A;55~60 min,100%~25%A),检测波长330 nm. 结果: 最佳脱脂工艺为加6倍量石油醚回流提取2次,每次1 h;穗花杉双黄酮提取量72.77 mg,浸膏得率11.04%. 结论: 该脱脂工艺稳定可行,适用于江南卷柏提取物的纯化.     

Antihyperglycemic activity of Selaginella tamariscina (Beauv.) Spring

Aim of the study

The present study was designed to investigate the effects of the EtOH and H₂O extracts of Selaginella tamariscina (Beauv.) Spring on hyperglycemia in diabetic rats and HepG2 cells, and to confirm the active fractions of EtOH extract in HepG2 cells.

Materials and methods

HepG2 cells and type II diabetic rats induced by low-dose streptozotocin (STZ) and high-fat diet (HFD) were used to evaluate the hypoglycemic effect of EtOH and H₂O extracts of Selaginella tamariscina. HepG2 cells were used to evaluate the promotive effect of different fractions of EtOH extract obtained from a polyamide column on glucose utilization.

Results

The results in HepG2 cells indicated that the EtOH extract had a better hypoglycemic effect than the H₂O extract. The results in diabetic rats indicated that both EtOH extract and H₂O extract were able to ameliorate the fasting blood glucose (FBG) level and improve oral glucose tolerance (OGTT). Total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipoprotein cholesterol (LDL-c), free fatty acids (FFA), tumor necrosis factor-α (TNF-α), alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), blood urea nitrogen (BUN) and malondialdehyde (MDA) levels in serum were lowered. High density lipoprotein (HDL-c), insulin and superoxide dismutase (SOD) levels in serum were elevated as well as the hepatic glycogen content in diabetic rats. Compared with H₂O extract, the effects of EtOH extract were more marked. The 80% ethanol fraction exhibited a stronger hypoglycemic effect than the aqueous and 50% ethanol fractions, but the 95% ethanol fraction did not show any appreciable effects in HepG2 cells.

Conclusions

The results suggested that the EtOH extract had a better hypoglycemic effect than the H₂O extract; the 80% ethanol fraction from polyamide column had a strong hypoglycemic activity in HepG2 cells.     

三白草中三白草酮提取工艺优选

目的:优选三白草中三白草酮的提取工艺参数.方法:采用HPLC测定三白草酮提出量,并以此为指标,正交试验法对粉碎度、乙醇体积分数、料液比、提取时间、浸泡时间5个因素进行考察,优选最佳提取工艺.结果:最佳提取条件为药材过10目筛,95％乙醇提取2次,第1次加14倍量乙醇浸泡2h,提取2h;第2次加10倍量乙醇提取1h.在此条件下,三白草酮平均提取得率0.21％,提取转移率为96％.结论:优选的提取工艺稳定、合理,可用于三白草中三白草酮的提取.     

河南连翘不同极性部位的HPLC指纹图谱

目的:建立河南连翘饮片不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价河南连翘饮片的质量提供参考。方法:将河南连翘饮片用75%乙醇制备总提取物后,分别用石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、正丁醇、水依次萃取,浓缩至浸膏,减压干燥制得粉末样品,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果:连翘饮片石油醚部位HPLC指纹图谱确定了18个共有峰,指认了3个指纹峰;三氯甲烷部位HPLC指纹图谱共确定了25个共有峰,指认了4个指纹峰;乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱共确定了20个共有峰,指认了3个指纹峰;正丁醇部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了3个指纹峰;水部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了2个指纹峰。连翘饮片同一极性部位指纹图谱相似度较高,不同极性部位之间化学成分有明显差异。结论:该实验方法准确、可靠、重复性高,所建指纹图谱可以全面反映连翘饮片的化学成分分布,为连翘饮片的整体质量评价提供参考。     

桐叶千金藤中莲花烷类生物碱的研究

目的:研究桐叶千金藤Stephania hernandifolia中的莲花烷类生物碱。方法:桐叶千金藤全草用95%乙醇溶液加热回流提取,减压回收乙醇,浓缩液加水稀释后经酸碱处理,石油醚、氯仿萃取,得生物总碱。生物总碱利用正相硅胶、反相Rp-18、微孔吸附树脂CHP20P、Sephadex LH-20等柱色谱方法分离和纯化,通过理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果:从桐叶千金藤中分离得到9个莲花烷类生物碱,分别为aknadinine(1),longanone(2),stephasunoline(3),N-methylstephuline(4),epistephamiersine(5),prostephabyssine(6),aknadilactam(7),dihydroepistephamiersine(8),hasubanonine(9)。结论:化合物2~8为首次从该植物中分离得到。     

独一味镇痛止血有效部位的富集工艺

目的:对独一味镇痛止血有效部位的富集工艺进行研究。方法:采用二甲氨基苯甲醛法测定总环烯醚萜含量、HPLC测定8-epideoxyloganic acid含量,以正交试验法和单因素试验法筛选提取工艺和大孔吸附树脂分离条件。结果:最佳提取工艺为用10倍量60%乙醇渗漉提取,浸泡36 h,渗漉速度5 mL·min-1.kg-1。纯化工艺为将提取物上聚酰胺柱,水洗脱部分上XDA-7大孔吸附树脂,收集30%醇洗脱部分。结论:XDA-7型树脂对独一味中环烯醚萜苷的富集能力优于其他树脂。洗脱溶剂30%乙醇能较好地洗脱环烯醚萜苷类成分。     

基于均匀设计的定量指纹图谱优选丹黄凝胶醇提工艺

目的:运用均匀设计并结合定量指纹图技术优化丹黄凝胶醇提工艺参数。方法:采用HPLC指纹图谱技术,按U8(82×42)均匀设计考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取次数和提取时间4个因素,以大黄酚和小檗碱含量、HPLC指纹图谱特征峰总面积之和以及干浸膏得率为综合评价指标,采用多元非线性拟合,建立效应指标和考察因素之间的数学模型,根据最佳数学模型描绘效应面图和等高线图,确定醇提工艺参数的优化范围及最佳工艺条件。结果:建立的数学模型较好的描述效应指标与因素之间的关系,优化的最佳醇提工艺条件为7倍量65%乙醇,提取3次,每次2 h。结论:运用定量指纹图技术并结合均匀设计和效应面分析优选的醇提工艺合理可行,为丹黄凝胶进一步研究提供了参考。