大孔树脂同时分离纯化淫羊藿中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的工艺优选

目的： 建立大孔树脂同时分离纯化淫羊藿中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的工艺条件。 方法： 以淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的吸附容量、洗脱率为评价指标,通过静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号,采用单因素试验优选淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的吸附和洗脱条件。 结果： 选用DM301型大孔吸附树脂,最佳吸附条件为上样液质量浓度7.45 g·L^-1,上样液流速3 BV·h^-1;淫羊藿苷洗脱条件为加45%乙醇4 BV以1.5 BV·h^-1的流速进行洗脱;淫羊藿次苷Ⅱ洗脱条件为加60%乙醇5 BV以1.5 BV·h^-1的流速进行洗脱;淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ纯度分别达56.23%,67.41%。 结论： 建立的工艺条件可同时分离纯化淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ,且稳定性好、收率较高、生产成本低,适宜于规模化生产推广。     

卡波姆对淫羊藿总黄酮酶解效果的影响

目的：考察生物黏附剂卡波姆对淫羊藿总黄酮酶解效果的影响。方法：将淫羊藿总黄酮与卡波姆混合,加入蜗牛酶酶解,采用HPLC测定酶解液中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷等主要黄酮成分及箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅰ和淫羊藿苷元等主要酶解产物的含量变化,并与未加入卡波姆时淫羊藿总黄酮的酶解过程比较。结果：在37 ℃,含1%卡波姆的缓冲溶液中,淫羊藿总黄酮中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的酶解速率变慢,约需4 h才能完全酶解转化成次级苷,所需时间为无卡波姆时的2倍;酶解液中宝藿苷Ⅰ质量浓度始终高于未加卡波姆时的,最高量48.43 mg·L^-1,6 h时趋于稳定时12.99 mg·L^-1,最高量和稳定量分别为未加卡波姆酶解时的2.2,7.2倍;2~6 h内箭藿苷A和鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ质量浓度都略高于未加卡波姆时的;之后次级苷被继续水解生成苷元,且苷元生成速率基本相同,约7.60 mg·L^-1·h^-1。结论：卡波姆会减缓淫羊藿总黄酮的酶解速率,促进次级苷的生成,对苷元的生成基本无影响。     

淫羊藿苷通过Akt /GSK3β/CDK通路抑制CLC5肝癌细胞增殖

目的 研究淫羊藿苷对肝细胞癌细胞CLC5增殖能力的影响及其可能的机制。方法 通过网络药理学筛选淫羊藿苷作用靶点，构建靶点网络及构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，预测淫羊藿苷可能作用靶点及相关通路；使用梯度浓度（0、6.25、12.5、25、50 μmol·L^-1）淫羊藿苷刺激肝细胞癌CLC5细胞，通过细胞活性及增殖检测（CCK-8）法检测淫羊藿苷对CLC5细胞活力的影响；使用不同浓度（0、25、50 μmol·L^-1）淫羊藿苷处理肝细胞癌CLC5细胞，通过Edu-488及克隆形成实验（Clone Forming）检测淫羊藿苷对CLC5细胞增殖的影响；使用不同浓度淫羊藿苷分别刺激CLC5细胞不同时间，通过蛋白免疫印迹法（Western blot）验证淫羊藿苷对蛋白激酶B（Akt）/糖原合成酶激酶3β（GSK3β）/细胞周期依赖激酶（CDK）通路蛋白表达水平的影响情况。结果 网络药理学分析发现淫羊藿苷作用于肝细胞癌的机制与阻滞细胞周期抑制肿瘤细胞增殖有关；CCK-8法结果表明，与空白组比较，淫羊藿苷组CLC5细胞活力显著下降（P<0.01），呈时间-浓度依赖性；与空白组比较，淫羊藿苷组Edu-488阳性率及克隆形成菌落数量明显减少（P<0.05，P<0.01）；与空白组比较，淫羊藿苷组p-Akt、p-GSK3β、CDK4、细胞周期蛋白D₁（CyclinD₁）的蛋白表达水平明显下降（P<0.05，P<0.01）。结论 淫羊藿苷可抑制阻滞肝细胞癌细胞周期，抑制肝细胞癌增殖，作用机制可能与抑制Akt/GSK3β/CDK通路有关。     

中药淫羊藿主要资源种类药材质量的系统研究

目的：为有效实现淫羊藿药材质量控制,考察药典中规定的淫羊藿Epimedium brevicornu,箭叶淫羊藿E. sagittatum,柔毛淫羊藿E. pubescens,朝鲜淫羊藿E. koreanum和巫山淫羊藿E. wushanense等5个种,以及《贵州省中药材、民族药材标准》收载的粗毛淫羊藿E. acuminatum,天平山淫羊藿E. myrianthum,黔岭淫羊藿E. leptorrhizum 3个种,以及贵州省作为巫山淫羊藿使用的拟巫山淫羊藿E. pseudowushanuse共9个主要资源种类的药材质量情况。方法：采用HPLC,UV测定共102份不同产地的上述9种淫羊藿药材样本的淫羊藿苷、总黄酮含量,并测定了以淫羊藿苷为参照的朝藿定A,B,C和淫羊藿苷（简称淫羊藿多苷,ABCI）4种成分的总量。 结果和结论： 以药典5个品种样品计,仅约有30%的样本淫羊藿苷含量达到药典标准,本研究提出以淫羊藿多苷的总量不低于13%,总黄酮含量不低于50%作为淫羊藿药材质量控制指标,并对各品种进行了质量评价,提出这些品种作为国家标准的参考意见。     

淫羊藿苷抑制体外培养的大鼠股骨组织骨吸收活性

目的： 研究淫羊藿苷对体外培养大鼠股骨组织（骨干和骨骺端）吸收活性的影响。方法： 体外分离培养大鼠股骨组织的骨干和骨骺端,48 h后采用终浓度为1×10^-5 mol·L^-1的淫羊藿苷对体外培养骨干和骨骺端进行处理。测定抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,StrACP）活性;测定培养基中葡萄糖（glucose,Glu）和乳酸（lactic acid,Lac）;Real-Time RT-PCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,StrACP）、集落刺激因子（macrophage colony stimulating factor,MCSF）,组织激酶K（cathepsin K,CTSK）mRNA表达水平。结果： 1×10^-5 mol·L^-1淫羊藿苷可抑制StrACP活性,增加培养基中乳酸含量和减少培养基中葡萄糖含量,抑制StrACP,MCSF,CTSK mRNA的表达水平。结论： 淫羊藿苷抑制体外培养大鼠股骨组织的骨骺端和骨干吸收活性。     

不同产地巫山淫羊藿指纹图谱的主成分、因子和聚类分析

目的：采用HPLC建立巫山淫羊藿的指纹图谱,结合主成分、因子和聚类分析对不同产地巫山淫羊藿综合品质进行研究,为其质量评价提供理论基础。方法：采用Agilent InfinityLab Poroshe1l 120 SB-C₁₈色谱柱（3.0 mm×100 mm,2.7 μm）,流动相乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（0~5 min,25%~26% A;5~6 min,26%~34% A;6~11 min,34%~38.5% A;11~17 min,38.5%~100% A;17~20 min,100% A）,流速0.8 mL·min^-1,检测波长270 nm,柱温30℃。结果：聚类分析较好地对不同产地的巫山淫羊藿进行分类,贵州产巫山淫羊藿和重庆巫山淫羊藿在聚类分析中明显分为二类,相距较远,说明由于环境气候的影响,不同产地的淫羊藿在品质上存在差异。主成分、因子分析结果,重庆巫山淫羊藿质量总体优于贵州产巫山淫羊藿,其中CQWS-02（重庆市巫山县官阳镇鸦鹊村）,CQWS-10（重庆市巫山县官阳镇河湾）两个产地的样品在优质品种筛选时可重点考虑。另外,1号（朝藿定A）,2号（朝藿定B）,4号（淫羊藿苷）,5号（未知成分）共有峰可作为巫山淫羊藿质量评价指标成分。结论：通过主成分、因子和聚类分析,可实现快速分析,发挥各自优势,互相验证和补充,多方面综合评判不同产地巫山淫羊藿药材的质量。     

大鼠肠道水解酶对淫羊藿黄酮苷的处置影响

 目的 研究大鼠肠道水解酶对淫羊藿所含黄酮成分淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C在肠道处置的影响。方法 应用大鼠在体肠灌流模型，用高效液相法测定药物浓度，比较淫羊藿黄酮苷在加入肠道乳糖酶根皮苷水解酶（LPH酶）抑制剂葡糖酸内酯（gluconolactone）前后表观渗透系数的变化。结果 加入抑制剂后，4个淫羊藿黄酮苷在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠的表观渗透系数都有不同程度的下降，其中淫羊藿苷在4个肠段的水解抑制率分别为：62%，50%，40%，46%；朝藿定A分别为：55%，26%，21%，14%；朝藿定B分别为：42%，40%，74%，22%；朝藿定C分别为：42%，40%，52%，35%。结论 LPH酶抑制剂葡糖酸内酯能不同程度地抑制淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C在大鼠肠道的水解，说明大鼠肠黏膜上的LPH酶参与了淫羊藿苷、朝藿定A，B，C在肠道的代谢。     

淫羊藿次苷Ⅰ在大鼠体内的药动学和组织分布研究

 目的研究淫羊藿次苷Ⅰ在血液和各组织中的HPLC检测方法及在大鼠体内的药动学和组织分布。方法采用Dikma-C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相甲醇-0.2%磷酸(73:27),流速1.0mL·min^-1,检测波长270nm,柱温20℃。大鼠按淫羊藿次苷Ⅰ单剂量10mg·kg^-1尾静脉注射后,采用高效液相色谱法测定给药后不同时间的淫羊藿次苷Ⅰ血药浓度和各组织浓度,用3P97程序计算药动学参数。结果淫羊藿次苷Ⅰ的血药浓度-时间曲线符合二室模型,并在心脏和肌肉组织有一定程度的蓄积。结论此方法简便、准确、稳定,可用于淫羊藿次苷Ⅰ的药动学和组织分布研究。     

比较以不同品质的羊脂油炙淫羊藿的温肾阳作用

目的: 对比以不同品质的羊脂油炙淫羊藿对肾阳虚证小鼠的温肾阳作用。方法: 采用肌肉注射(im)大剂量氢化可的松建立肾阳虚证小鼠模型。以生品淫羊藿和不同品种(山羊、绵羊)、不同性别(公、母绵羊)、不同部位(绵羊肚子、尾巴油)的6种羊脂油炙淫羊藿为供试品以淫羊藿总黄酮为阳性对照,加设阴性和模型对照。造模同时给药,其中阴性和模型对照组小鼠ig等体积的生理盐水(N.S),阳性对照组小鼠ig淫羊藿总黄酮提取物0.46 g·kg^-1(含淫羊藿总黄酮0.23 g·kg^-1),各供试品组小鼠ig剂量相当于生药18 g·kg^-1,ig容量均为15 mL·kg^-1,1次·d^-1,连续9 d。以肾阳虚小鼠症状体征(体重、体表温度、自主活动次数),动物抓力、凝血时间,血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量为指标,考察各供试品对肾阳虚证小鼠的影响。结果: 与阴性对照组比较,模型对照组小鼠体重、体表温度、自主活动、血清SOD 含量显著下降,MDA含量升高,差异均有显著性(均P<0.01),此外,抓力和凝血时间亦呈降低趋势,提示造模是成功的。与模型对照组比较,各供试品明显延缓或抑制小鼠体重下降(惟山羊油炙淫羊藿对体重减轻的抑制作用不明显),提高小鼠体表温度,增加小鼠自主活动次数,差异均有显著性(P<0.01或P<0.05);各供试品均可提高小鼠血清SOD水平、降低MDA含量,其中,以山羊油、绵羊油、肚子油、尾巴油炙淫羊藿作用显著(P<0.01或P<0.05);各供试药组小鼠抓力呈增强趋势,但无统计学显著性;除绵羊油炙淫羊藿具有延长模型小鼠凝血时间的作用趋势外,其余各组未见明显影响。与生品比,6种不同品质的羊脂油炙淫羊藿均可不同程度地改善肾阳虚证(如体重下降、自主活动减少、抓力下降)的虚弱状态,差异多具有显著性;而各炙品之间在温肾阳作用上有一定差异,但是差异多不具有显著性。结论: 炙淫羊藿炮制品温肾阳作用优于生品淫羊藿;不同品质的羊脂油对炙淫羊藿的温肾阳药效有一定影响,但差异多不具有显著性。     

淫羊藿黄酮磷脂复合物大鼠体内药动学

 目的：研究淫羊藿黄酮及其磷脂复合物(EFL)中淫羊藿苷在SD大鼠体内药动学。方法：以HPLC测定法测定大鼠血中淫羊藿苷的含量，以同组大鼠（8只，♂♀各半)交叉灌服淫羊藿黄酮及其磷脂复合物，药-时曲线数据经3P87药动学计算程序处理。结果：分别以淫羊藿黄酮及其磷脂复合物给SD大鼠灌胃（剂量为淫羊藿苷100 mg·kg^-1），淫羊藿苷的药-时过程符合一级动力学模型,淫羊藿黄酮中淫羊藿苷的AUC、C_max、T_max分别为（62.5±4.7） mg·h·L^-1，（5.3±1.6） mg·L^-1，（2.9±0.9） h，而EFL中的为（156.1±27.2） mg·h·L^-1，（17.5±3.5） mg·L^-1，（2.1±0.6） h，统计结果表明AUC、C_max之间差异有显著性。结论：磷脂可提高淫羊藿黄酮中淫羊藿苷在大鼠体内的吸收。     

国家标准样品长期稳定性与加速稳定性的比较

目的:探索天然产物标准样品的长期稳定性和加速稳定性之间的关系,为标准样品的有效期确定提供必要的技术支撑。方法:在研制5个国家标准样品(肉桂醛、樱花素、长梗冬青苷、水苏糖和β-谷甾醇)的过程中,将置于0~8℃条件下的样品,分别于第0,1,2,3,6,9,12,18,24个月测定各标准样品的纯度,进行长期稳定性检验。将置于温度(40±2)℃和相对湿度(75±5)%条件下的样品,分别于第0,1,2,3,6个月时测定各标准样品的纯度,进行加速稳定性检验。结果:统计分析的结果显示,长期稳定性检验和加速稳定性检验的稳定性均良好,二者之间无显著性差异。结论:天然产物标准样品24个月的有效期可通过6个月的加速稳定性检验进行预判。     

藤黄酸稳定性研究

目的考察藤黄酸在高温、高湿、强光照、氧化、稀碱水溶液及不同有机溶剂中的稳定性。方法采用高效液相色谱法测定供试品中藤黄酸的量。结果藤黄酸在稀氢氧化钠溶液、高温、乙醇等有机溶剂中不稳定;在强光照、高湿及氧化条件下较稳定。结论藤黄酸对热较敏感,在稀碱溶液、乙醇中不稳定,制剂研究要考虑避免高温及接触碱性溶液、乙醇。     

呋喃妥因片的稳定性加速试验考察

 采用加速试验方法，考察了呋喃妥因片的稳定性。结果表明：温度、湿度对其物理性质（外观、崩解）影响甚大；含量亦有所降低，并有少量分解物产生。木实验为评价呋喃妥因片的稳定性，确定其货架寿命期，提供了依据与信息。     

灵芝孢子油的稳定性考察

目的:考察灵芝孢子油加速试验后的质量变化。方法:以酸值、过氧化值、总三萜及甘油三油酸酯含量为评价指标,考察灵芝孢子油加速0,1,2,3,6个月后的质量变化。采用HPLC测定甘油三油酸酯含量,Kromasil-C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相乙腈-异丙醇(53∶47),流速0.5 mL·min-1,蒸发光散射检测器检测,柱温30℃。结果:与0月相比,灵芝孢子油加速6个月后,酸值呈上升趋势,上升幅度32.11%~39.27%;过氧化值呈下降趋势,下降幅度41.17%~46.67%;总三萜含量呈下降趋势,下降幅度6.72%~8.13%;甘油三油酸酯含量呈下降趋势,下降幅度3.78%~4.54%;酸值与过氧化值均符合食用植物油的卫生标准。结论:灵芝孢子油加速6个月质量较稳定。     

中药杠板归制剂的稳定性试验

按照《新药审批办法》中“中药新药稳定性试验要求”，对中药杠板归制剂，在性状、相对密度、ｐＨ值、含量测定、卫生学检查等方面进行保存考核１８个月，结果各项质量指标均符合质量规定。说明杠板归制剂性质稳定可靠。     

联苯苄唑洗液的稳定性试验

 目的:考察联苯苄唑洗液的稳定性及有效期预测。方法:采用不同条件下的加速试验法，观察其外观性状、pH值及含量的变化情况。结果:40℃加速试脸3个月，其外观无明显变化，pH值及含量不变;60℃加速试脸21d，含量仍在标示量的90%以上;100℃加速试验4h，含量不变。结论:联苯苄唑洗液稳定性较好，有效期可暂定2年。     

丹酚酸D稳定性研究

目的 考察3种因素对丹酚酸D稳定性的影响,为丹参水溶性成分制剂生产提供实验依据.方法 采用高效液相色谱法对不同pH值、水-乙醇溶液及温度下丹酚酸D峰面积进行比较,考察丹酚酸D的稳定性.结果 丹酚酸D在弱酸和低温条件下稳定,强酸和高温条件下易发生转化.结论 为保证溶液中丹酚酸D的稳定,在制剂生产过程中应使溶液处于低温(50℃以下)及弱酸性(pH值为3～5)条件下,并尽量减少溶液的受热时间.     

复方黄酮胶囊稳定性研究

目的：研究复方黄酮胶囊中槲皮素热稳定性变化,为该胶囊剂有效期的确定提供实验参考依据。方法：采用高效液相法及恒温加速试验法,以槲皮素为测定指标。结果：常温下该胶囊剂以槲皮素为指标的有效期为2.5年。结论：该方法简便易行,复方黄酮胶囊稳定性较好。     

蛇芪清毒颗粒稳定性研究

目的：建立蛇芪清毒颗粒中黄芪甲苷、大黄素含量测定的HPLC方法,以此方法为检测手段,考察在高温下上述2种成分含量变化。方法：将供试品置于密封洁净容器中,在60℃条件下放置10 d,分别在0、5、10 d取样,检测相关指标黄芪甲苷和大黄素的含量。与0 d比较,考察上述成分含量的变化。结果：通过10 d的考察,3批样品中黄芪甲苷和大黄素含量没有明显的变化。结论：蛇芪清毒颗粒在60℃下放置10 d,2种药材黄芪、何首乌中的的指标成分黄芪甲苷、大黄素含量没有明显变化,表明制剂质量较稳定     

安吉生溶液的稳定性考查

用恒温加速试验考查了当归乙酸乙酯提取物水溶液(安吉生溶液)的化学动力学,并求得该药液的有效期(t_0.9)为1年。