卡介苗刺激的肺泡巨噬细胞上清液对肺成纤维细胞的作用

７．５－６０ｍｇ／Ｌ卡介苗（ＢＣＧ）刺激的肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）培养上清液能显著促进肺成纤维细胞（ＰＦＢ）增殖，发现上清液中含较高水平的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），且其促ＰＦＢ增殖作用与ＴＮＦ水平成正相关，提示ＢＣＧ在体外能刺激ＰＡＭ产生ＴＮＦ、ＴＮＦ为该上清液促ＰＦＢ增殖的主要因素。５０ｍｇ／ＬＳｉＯ２刺激的ＰＡＭ上清液亦能促进ＰＦＢ增殖，但上清液中几乎检测不到ＴＮＦ，说明其促ＰＦＢ增殖的成份是不同     

川崎病血清对血管内皮细胞表达血小板源生长因子及对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察川崎病血清对血管内皮细胞表达血小板源生长因子Ｂ链蛋白（ＰＤＧＦ－Ｂ）的影响，以及川崎病血清作用后的内皮细胞条件培养基对血管平滑肌细胞表达ＰＤＧＦ受体信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）和对细胞周期的影响。方法：采用免疫细胞化学、核酸杂交和流式细胞分析方法。结果：川崎病血清能够强烈诱导内皮细胞表达ＰＤＧＦ－Ｂ；川崎病血清作用后的内皮细胞条件培养基能够显著促进平滑肌细胞表达ＰＤＧＦ受体ｍＲＮＡ，并强烈诱导平滑肌细胞增殖。结论：ＰＤＧＦ—ＰＤＧＦ受体途径的激活可能参与了川崎病冠状动脉并发症的形成。     

转化生长因子β1单克隆抗体干预成纤维细胞增殖的体外研究

目的观察抗转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）单克隆抗体对成纤维细胞（ＦＢ）增殖及胶原合成的影响。方法将肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养上清液与Ｌ９２９成纤维细胞株共同孵育,并加入不同剂量ＴＧＦβ１单克隆抗体,用３Ｈ胸腺嘧啶掺入法观察ＦＢ增殖及胶原合成的情况。结果抗ＴＧＦβ１单克隆抗体能够抑制ＡＭ条件上清液引起的ＦＢ增殖,在一定剂量范围内（１０μｇ／ｍｌ）呈剂量效应关系。抑制作用在１０μｇ／ｍｌ时达到最大并使ＦＢ培养上清Ⅳ型胶原的合成减少３２％。结论提示抗ＴＧＦβ１单克隆抗体的应用可能为肺纤维化的治疗提供潜在的新途径。     

肺间质病患者肺泡巨噬细胞蛋白激酶C活性的变化

目的 探讨肺间质纤维化时蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的变化。方法 应用放射生测定法检测９名健康者和１５例特发性肺间质纤维化９ＩＰＦ）患者支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中肺泡巨噬细胞（ＡＭ）的ＰＫＣ活性。结果 ＩＰＦ患者ＢＡＬＦ中ＡＭ总ＰＫＣ活性、南和胸膜ＰＫＣ活性均明显高于健康者（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）,ＡＭ的总ＰＫＣ活性与ＢＡＬＦ中细胞总数呈正相关（ｒ＝０．５９１７,Ｐ〈０．０５）。结论 ＰＫＣ     

三种细胞因子表达在特发性肺纤维化中的作用

目的 观察血小板衍生的生长因子（ＰＤＧＦ）、ＡＡ、ＢＢ及转化生长因子（ＴＧＦ）β在特发性肺间质纤维化（ＩＰＦ）支气管灌洗细胞及开胞肺活检标本的蛋白及基因表达，探索其在ＩＰＦ发病中的作用。方法 用免疫组化方法检测７例ＩＰＦ患支气管灌洗细胞ＰＤＧＦ，ＴＧＦ－β蛋白和基因的表达。结果 在肺间质纤维化患支气管灌洗细胞中，ＰＤＧＦ－ＡＡ，ＰＤＧＦ－ＢＢ〉ＴＧＦ－β均定位于肺泡巨噬细胞。三种不同的细胞因子     

血管紧张素转换酶抑制剂对血管紧张素II介导的钙信号传导的…

本研究以血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）为对象，探讨了血管紧张素转换酶换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）对血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的直接作用。结果发现：ＡＣＥＩ呈时间依赖性地抑制ＡｎｇⅡ介导的钙内流，而不影响其钙释放。ＡＣＥＩ的这种作用与ＶＳＭＣ的血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性无关，其抑制ＡｎｇⅡ介导的钙内流特点与不同于钙通道阻滞剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂。ＡＣＥＩ并不直接抑制钙通道，但激活ＶＳＭＣ的内源性蛋白激酶     

转化生长因子—β1单克隆抗体对大鼠肺纤维化的治疗观察

目的探讨转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）单克隆抗体对博莱霉素所致肺间质纤维化的作用。方法结合体内和体外实验，利用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法。结果表明大鼠肺纤维化模型中肺泡巨噬细胞的条件培养基能促进成纤维细胞的增殖和胶原ｍＲＮＡ的表达。ＴＧＦ－β１单克隆抗体对其有抑制作用，同时亦能减轻肺组织的病变程度和胶原ｍＲＮＡ的表达。结论ＴＧＦ－β１单克隆抗体可部分地抑制成纤维细胞增殖和胶原合成。     

血管紧张素转换酶抑制剂对血管紧张素Ⅱ介导的钙信号传导的作用及其机理研究

本研究以血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）为对象，探讨了血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）对血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的直接作用。结果发现：ＡＣＥＩ呈时间依赖性地抑制ＡｎｇⅡ介导的钙内流，而不影响其钙释放。ＡＣＥＩ的这种作用与ＶＳＭＣ的血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性无关，其抑制ＡｎｇⅡ介导的钙内流特点也不同于钙通道阻滞剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂。ＡＣＥＩ并不直接抑制钙通道，但激活ＶＳＭＣ的内源性蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）则可消除ＡＣＥＩ对钙内流的抑制作用。本研究表明：ＡＣＥＩ有新的作用途径，它在受体后可直接影响ＡｎｇⅡ介导的钙信号传导，其机制可能与下调内源性ＰＫＣ活性有关。     

扩张型心肌病与钙通道阻滞剂的心肌保护作用

扩张型心肌病与钙通道阻滞剂的心肌保护作用同济医科大学心血管病研究所廖玉华综述源淑审校近十余年对扩张型心肌病（ＤＣＭ）动物模型，神经体液机制，自身免疫反应机制和细胞电生理的深入研究，揭示ＤＣＭ存在心肌细胞钙代谢紊乱，使钙通道阻滞剂（ＣＣ８）成为治疗ＤＣ...     

地塞米松对细胞因子刺激的人眼球后成纤维细胞的影响

目的 探讨地塞米松治疗Ｇｒａｖｅｓ眼病（ＧＯ）的作用机制。方法 应用细胞培养技术，测定加入细胞因子及地塞米松后细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）表达和ＤＮＡ合成情况。结果 肿瘤坏死因子（ＴＮＭＦ）－α（１０＾Ｕ／ｍｌ）、干扰素（ＩＮＦ）－γ（１００Ｕ／ｍｌ）和白细胞介素（ＩＬ）－１β（１００Ｕ／ｍｌ）均能强烈刺激眼球后成纤维细胞表面ＩＣＡＭ－１表达，而地塞米松能明显地抑制这种刺激作用，但所需浓度及     

血管紧张素Ⅱ对人肾成纤维细胞的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对人肾成纤维细胞（ＫＦＢ）的影响。方法：采用ＥＬＩＳＡ法,四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）法、流式细胞仪、免疫组织化学法分别检测ＡｎｇⅡ对ＫＦＢ分泌的胶原酶活性、ＫＦＢ增生、凋亡、Ⅰ型胶原表达的影响。结果;ＡｎｇⅡ能提高ＫＦＢ分泌的总胶原活性、促进味道一、抑制ＫＦＢ凋亡、促进ＫＦＢⅠ型胶原的表达。结论：ＡｎｇⅡ能通过促进ＫＦＢ增生、抑制ＫＦＢ凋亡、促进ＫＦＢⅠ型胶原的表达     

转化生长因子－β对人胚肺成纤维细胞胶原表达的影响

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一族多功能的细胞因子，具有调节细胞外基质代谢的功能，在肺间质纤维化的形成中具有重要作用。胚原是细胞外基质的主要成分。胶原积聚是肺间质纤维化的一个重要特征。为了进一步探讨肺间质纤维化形成的机制，在体外观察了ＴＧＦ－β对人胚胎肺成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原Ｉ、胶原ＩＩｌｍＲＮＡ表达的影响。结果发现：ＴＧＦ－β能刺激胶原蛋白的合成，胶原Ｉ、胶原ＩＩＩｍＲＮＡ的表达。而对成纤维细胞的增殖影响不明显。因此认为ＴＧＦ－β可能与肺间质纤维化时胶原积聚有关。ＴＧＦ－β胶原合成的调节是通过ｍＲＮＡ水平。     

肺间质巨噬细胞的致纤维化研究

目的评价间质巨噬细胞（ＩＭ）对成纤维细胞增殖的影响。方法在成纤维细胞培养液中分别加入肺纤维化大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）、ＩＭ培养上清培养。结果实验组第１天两种巨噬细胞的促增殖作用即开始升高，第７天达高峰（ＡＭ３３２％，ＩＭ３４２％，Ｐ＜０．０１）；而ＩＭ和ＡＭ培养上清中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）与成纤维细胞增殖活性水平成显著相关（ｒ＝０．６５７，０．７１３，Ｐ＜０．０１）。结论不仅ＡＭ，而且ＩＭ也能释放促成纤维细胞体外增殖的细胞因子。由于ＩＭ与成纤维细胞紧密相邻，对纤维化的形成可能更具有意义。     

类风湿关节炎中转化生长因子β1和细胞间粘附分子的变化

目的：了解类风湿关节炎（ＲＡ）血清、滑液和滑膜组织中转化生长因β１（ＴＧＦβ１）、细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）及细胞间粘附分子３（ＩＣＡＭ３）的变化。方法：采用ＥＬＩＳＡ及ＡＢＣ免疫组化方法检测ＲＡ患者血清、滑液和滑膜中ＴＧＦβ１、ＩＣＡＭ１和ＩＣＡＭ３的浓度和阳性程度。结果：ＲＡ血清中ＴＧＦβ１含量较低，而ＩＣＡＭ１含量明显升高，ＩＣＡＭ３含量正常，滑液中ＩＣＡＭ３含量低于血清含量。ＲＡ血清中ＴＧＦβ１含量与ＩＣＡＭ１含量呈中度负相关，与ＩＣＡＭ３含量无显著相关。在ＲＡ滑膜中巨噬细胞、滑膜衬里细胞和成纤维细胞ＴＧＦβ１染色阳性，巨噬细胞、滑膜衬里细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞ＩＣＡＭ１染色阳性。结论：ＴＧＦβ１和ＩＣＡＭ１参与了ＲＡ的发生和发展过程，在ＲＡ慢性炎症中，ＩＣＡＭ１对炎细胞转移并聚集于滑膜可能有重要作用，ＲＡ外周血ＴＧＦβ１浓度减低伴随ＩＣＡＭ１浓度的增加。     

马来丝虫病特异性诊断抗原研究

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ技术分析马来丝虫成虫（ＭＡＡ）和微丝蚴（ＭＦＡ）可溶性抗原。马来丝虫成虫和微丝蚴采自感染沙鼠腹腔。分析结果表明，ＭＦＡ蛋白组分含有沙鼠腹腔液蛋白组分（６４－６７ｋＤａ和５６－５８ｋＤａ）。健康沙鼠血清与ＭＦＡ作ＥＬＩＢ，可见３条淡反应带（６０ｋＤａ、７４ｋＤａ和１００ｋＤａ），与ＭＡＡ无反应带可见。ＭＡＡ蛋白组分中的４２ｋＤａ和１４．５ｋＤａ可被感染６个月的阳性沙鼠血清识别，而不被阴性沙鼠血清识别。     

硝苯啶和尼卡地平对人成纤维细胞增殖,胶原与透明质酸合成的作用

目的：研究硝苯啶（Ｎｉｆ）和尼卡地平（Ｎｉｃ）对人胚肺成纤维细胞（ＨＬＦ）增殖、胶原与透明质酸合成的影响，为应用钙通道阻滞剂防治器官纤维化提供实验依据。材料和方法：采用ＭＴＴ比色法、３Ｈ－脯氨酸掺入和放射免疫法分别测定细胞增殖、胶原与透明质酸合成。结果：Ｎｉｆ和Ｎｉｃ在１０～４０μｍｏｌ／Ｌ浓度范围内以剂量依赖方式抑制ＨＬＦ增殖及胶原和透明质酸合成，而对细胞无明显毒性作用。结论：Ｎｉｆ和Ｎｉｃ具有抗纤维化作用。     

辛伐他汀对大鼠肾间质成纤维细胞的影响

目的：研究３－羟基－３－甲基戊二酰辅酶Ａ（ＨＭＧ－ＣｏＡ）还原酶抑制剂（辛伐他汀）对大鼠肾间质成纤维细胞（ＲＦＢ）增生，细胞周期及细胞间信号传导的影响。方法：应用ＭＴＴ比色法、流式细胞仪、半定量ＲＴ－ＰＣＲ等技术，分别检测不同浓度辛伐他汀对体外培养的ＲＦＢ的增生、细胞周期以及细胞信号传导中ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：辛伐他汀可抑制ＲＦＢ的增生活性（Ａ值），尤以无血清组显著，各浓度加药组Ａ组与正常对照组比较差异显著（Ｐ〈０．０５）；各浓度加药组Ｇ０／Ｇ１期细胞比增高，Ｓ期细胞比、ＰＩ值和ＤＮＡ含量则逐渐下降，Ｇ２／Ｍ期细胞比变化不明显；各浓度加药组ＲＦＢ ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达逐渐下降，并呈一定的剂量依赖性，与正常对照组比较差异显著（Ｐ〈０．０５）。结论：辛伐他汀可抑制细胞增生，阻止ＲＦＢ由ＧＩ期进     

乙型肝炎病毒X蛋白与RNA聚合酶Ⅱ亚单位竞争结合转录因子ⅡB …

目的 探讨人ＲＮＡ聚合酶Ⅱ亚单位ＲＰＢ５介导蛋白（ＰＲＢ５ ｍｅｄｉａｔｅ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＲＭＰ）抑制乙型肝炎病毒Ｘ蛋白（ＨＢＸ）的反式转录激活作用的机制。方法 应用基因重组技术，体外蛋白和蛋白结构试验（Ｐｕｌｌ－Ｄｏｗｎ试验），氯霉素乙酰转移酶转化率分析（ＣＡＴ试验）等。结果 ＲＭＰ能与普通转录因子（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒｓ，ＴＦ）ⅡＢ结合。ＴＦⅡＢ ｄ１０（１２１－２９５）     

Octreotide治疗Graves'眼病机理探讨

目的　探讨Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ 对细胞因子刺激后的人眼球后成纤维细胞的细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１） 表达及ＤＮＡ 合成的影响。方法　应用细胞培养技术, 测定加入细胞因子及Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ后ＩＣＡＭ１ 表达和ＤＮＡ 合成情况。结果　ＴＮＦα（１０３ Ｕ／ｍｌ） 、γＩＮＦ（１００ Ｕ／ｍｌ） 和ＩＬ１β（１００ Ｕ／ｍｌ） 均能强烈刺激眼球后成纤维细胞表面ＩＣＡＭ１ 表达,而低浓度（ 即药理浓度）Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ 能明显地抑制这种刺激作用,但所需浓度及发挥抑制作用的时间各不相同;同样,低浓度Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ 也能抑制细胞因子（除ＩＬ１β外） 刺激的ＤＮＡ 合成。结论　Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ 治疗Ｇｒａｖｅｓ’眼病的作用途径部分是通过抑制细胞因子的作用,使ＩＣＡＭ１ 表达及ＤＮＡ 合成减少,它可能具有免疫调节的特性。     

抗恶性疟原虫有性期单克隆抗体的制备和鉴定

以培养的恶性疟原虫ＮＦ５４（３Ｄ７）株配子体蛋白抽提液及我国云南现场采集的恶性疟原虫细胞骨架分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，以ＩＦＡ法筛选出８株抗恶性疟原虫有性期ＭｃＡｂ杂交瘤细胞株。经免疫球蛋白类别鉴定，６株为ＩｇＧ１（Ｍ２Ａ１０Ｃ９、Ｍ２Ｃ１Ｂ８、Ｍ４Ｃ７Ｂ１０、Ｍ４Ｇ１２Ｃ１、Ｍ５Ｂ７Ｅ６和Ｍ６Ｅ１Ｇ１１），２株为ＩｇＭ（Ｍ４Ｄ７Ｆ７和Ｍ６Ｆ４Ｄ６）。其中３株ＭｃＡｂｓ（Ｍ４Ｃ７Ｂ１０、Ｍ４Ｄ７Ｆ７和Ｍ６Ｅ１Ｇ１１）的靶抗原定位于配子体以及大滋养体和裂殖体期无性体原虫；其余５株仅定位于配子体。经Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹试验，ＭｃＡｂ所识别的蛋白区带各异（１６－１２０ｋＤ），与已发现的有性期特异性抗原相比较，３２ｋＤ抗原国内外尚未报道。各株ＭｃＡｂ与猴疟（Ｐ．ｃｙｎｏｍｏｌｇｉ）红内期、鸡疟（Ｐ．ｇａｌｉｎａｃｅｕｍ）子孢子和杜氏利什曼原虫前鞭毛体均无交叉反应。