雷公藤多苷通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制小鼠结肠炎症

背景:临床实践中,雷公藤多苷对溃疡性结肠炎(UC)具有良好的疗效,但确切机制不明。目的:探讨雷公藤多苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎模型的治疗作用及其可能机制。方法:60只健康雄性BALB/c小鼠随机分为6组:模型对照组、低、中、高剂量雷公藤多苷组、空白对照组和正常对照组,前四组自由饮用5%DSS溶液1周复制结肠炎模型,同时予蒸馏水或相应浓度雷公藤多苷[9.01、27.03、81.09 mg/(kg·d)]灌胃,持续3周。观察各组动物结肠黏膜组织病理学改变,采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测TLR4 mRNA和蛋白表达,免疫组化染色检测NF-κB p65表达,ELISA法检测IL-1α、TNF-α、IL-13含量。结果:雷公藤多苷组小鼠结肠黏膜出现不同程度的组织损伤和炎症改变,但均轻于模型对照组。各组雷公藤多苷组结肠黏膜组织TLR4 mRNA和蛋白表达、NF-κB p65表达和组织匀浆上清中的IL-1α、TNF-α含量均显著低于模型对照组(P0.01),中、高剂量组间差异无统计学意义(P0.05,除TNF-α),均显著低于低剂量组(P0.05),但仍高于空白对照组和正常对照组(P0.05)。结论:雷公藤多苷对DSS小鼠结肠炎有良好的保护作用,其可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路激活及其下游促炎细胞因子表达、分泌而抑制结肠炎症反应。     

TNF-α、IL-8在溃疡性结肠炎大鼠模型中的表达

目的检测溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型结肠组织中TNF-α、IL-8的表达情况,探讨其在溃疡性结肠炎发病机制中的作用。 方法30只SD大鼠,随机抽取20只为模型组,另外10只为对照组。采用"三硝基苯磺酸＋乙醇"法造模后,采用Elisa法检测TNF-α、IL-8在模型组与对照组的结肠组织中的表达水平。 结果UC模型组TNF-α、IL-8的表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论大鼠结肠黏膜中TNF-α、IL-8的表达与UC的发生、发展密切相关。     

肠安康胶囊对大鼠溃疡性结肠炎结肠组织细胞凋亡及细胞因子表达的影响

目的探讨肠安康胶囊对实验性溃疡性结肠炎结肠组织细胞凋亡及炎性细胞因子表达的影响。方法采用三硝基苯磺酸乙醇溶液给大鼠灌肠建立溃疡性结肠炎模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶（sAsP）组和肠安康大、中、小剂量组,采用TUNEL染色法观察各组结肠组织细胞凋亡的情况,并采用ELISA法测定结肠组织的TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-8。结果与对照组比较,模型组结肠组织凋亡细胞明显增多（P〈0.01）,且细胞凋亡的程度与TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-8的水平分别呈正相关性（r分别为0.703、0.906、0.920、0.756、0.765,P〈0.01）。与模型组比较,各药物处理组结肠组织中凋亡细胞数目明显减少（P〈0.01）,TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-8水平显著上升（P〈0.01）。结论细胞凋亡是溃疡性结肠炎的发病机制之一,凋亡程度与相关炎症因子水平密切相关,肠安康胶囊通过改善相关炎性细胞因子表达的水平,对实验性溃疡性结肠炎有一定的治疗作用。     

溃肠宁对TNBS模型大鼠肠形态、血清及结肠组织IL-6和IL-10影响的观察

[目的]观察中药溃肠宁对三硝基苯磺酸（TNBS）致溃疡性结肠炎（UC）大鼠模型肠黏膜形态、大鼠血清及结肠黏膜组织中白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）表达的影响,探讨溃肠宁抗UC的相关作用机制以及疗效.[方法]采用TNBS复合50％乙醇法复制UC大鼠模型,分别采用中药溃肠宁和柳氮磺胺毗啶（SASP）作为阳性对照组进行治疗,对比模型组和空白对照组采用ELISA法对各组大鼠肠血清以及肠黏膜中IL-6、IL-10进行检测,并对其检测结果进行分析.[结果]模型组大鼠结肠和血清中的IL-6含量明显高于正常组（P＜0.01）,IL-10的含量则明显低于正常组（P＜0.01）;SASP组结肠及血清中IL-6、IL-10含量与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01）;中药组和模型组相比,结肠和血清中IL-6含量明显低于模型组（P＜0.01）,IL-10的含量则明显高于模型组（P＜0.01）;中药组与西药SASP组比较,中药组结肠和血清中IL-6含量低于西药组,IL-10的含量高于西药组,可见2组之间差异有统计学意义（P＜0.01）.[结论]溃肠宁对TNBS复合50％乙醇法UC大鼠疗效显著,其作用机制可能与调节机体的免疫有关.     

清肠泡腾栓对溃疡性结肠炎模型大鼠肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-13的影响

[目的]探讨中药肠道泡腾栓剂治疗溃疡性结肠炎(UC)的免疫学机制.[方法]实验分设正常对照、模型对照、空白泡腾栓、清肠泡腾栓、清肠栓、柳氮磺胺吡啶(SASP)栓共6组,ELLESA法检测血清、结肠上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-13(IL-13).[结果]模型组血清、结肠上清TNF-α较正常对照组升高,IL-13分别轻度降低和升高;清肠泡腾栓组明显降低结肠上清TNF-α含量,与模型对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]①模型组TNF-α、Ⅱ-13较正常组升高或降低,提示UC免疫学发病机制的可能性;②清肠泡腾栓组下调UC模型大鼠TNF-α,对IL-13的调控作用则不甚明显,提示清肠泡腾栓可能在抑制促炎细胞因子方面具有更为确切的优势.     

乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织白细胞介素8及13含量的影响

[目的]观察乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织白细胞介素(IL)-8、IL-13的影响.[方法]84只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,柳氮磺胺吡啶( SASP)组,乌梅丸大、中、小剂量组,每组14只;除正常组外,其他各组大鼠采用2.4-二硝基氯苯(DNCB)加醋酸复合法制备溃疡性结肠炎模型;采用双抗体夹心ELISA法检测各组大鼠结肠组织IL-8、IL-13的含量.[结果]模型组大鼠结肠组织中IL-8含量较正常组显著增高(P＜0.01),乌梅丸各剂量组、SASP组则较模型组明显降低(P＜0.01或P＜0.05);模型组大鼠结肠组织IL-13含量较正常组显著降低(P＜0.01),乌梅丸各剂量组、SASP组较模型组明显升高(P＜0.01或P＜0.05).乌梅丸大剂量组降低IL-8、升高IL-13的效果最显著,其IL-8、IL-13的含量与正常组比较差异无统计学意义.[结论]IL-8、IL-13参与了UC的发生、发展,乌梅丸能通过降低溃疡性结肠炎大鼠结肠组织IL-8的含量、升高IL-13的含量,从而起到治疗UC的作用.     

盐酸青藤碱对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠肠道炎症损伤的影响及其机制

目的 探讨盐酸青藤碱（SIN）对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导溃疡性结肠炎小鼠肠道炎症损伤的影响及其机制。方法 选择雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分为对照组、模型组、SIN组,每组6只。模型组和SIN组予3%DSS溶液自由饮用诱导结肠炎。SIN组在建模同时予100 mg/（kg·d） SIN溶液灌胃。建模结束,评估疾病活动指数（DAI）评分,处死小鼠,剪取结肠组织,测量结肠长度,观察结肠组织病理形态学变化并评估组织学损伤评分表达。采用ELISA法检测结肠组织TNF-α、IL-6、IL-10含量,采用免疫组化法检测结肠组织自噬相关蛋白Beclin1、LC3B、p62表达。结果 与对照组比较,模型组DAI评分显著升高,结肠长度显著缩短,结肠黏膜结构遭到破坏并出现明显炎症细胞浸润,组织学损伤评分显著升高,结肠组织TNF-α、IL-6含量及p62相对表达量显著升高,而IL-10含量及Beclin1、LC3B相对表达量显著降低（P均<0.05）。与模型组比较,SIN组DAI评分有所降低,结肠长度有所延长,结肠黏膜结构破坏及炎症细胞浸润有所改善,组织学损伤评分显著降低,结肠组织TNF-α、...     

甘草酸二铵对溃疡性结肠炎大鼠促炎细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α的影响

目的建立溃疡性结肠炎（UC）大鼠模型，研究甘草酸二铵（DG）对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及对肿瘤坏死因子（TNF—α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）产生和表达的影响。方法30只雌性SD大鼠随机分为实验组、模型组和对照组各10只，建立UC急性期模型，实验组给予DG干预治疗。观察疾病活动指数（DAI）、结肠大体形态损伤、组织学变化；ELISA法测定血清TNF—α、IL-6、IL-8水平。结果与模型组相比，实验组的DAI、结肠大体形态损伤、组织学变化显著改善（P均〈0．01），血清TNF-α、IL-6、IL-8水平显著降低（P均〈0．01）。结论DG对大鼠UC有显著的治疗作用，抑制促炎因子TNF-α、IL-6、IL-8的产生和表达可能是其，治疗机制之一。     

不同剂量雷公藤多苷对小鼠结肠炎模型的作用及机制

目的探讨不同剂量雷公藤多苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎(UC)模型的作用及机制。方法采用简单随机抽样方法将78只BALB/c小鼠分为正常对照组(NC组,n=10)、空白对照组(BC组,n=10)及模型组(n=58),将模型组建模成功的55只小鼠随机分为模型对照组(MC组,n=10)、雷公藤多苷低剂量组(LD组,n=15)、雷公藤多苷中剂量组(MD组,n=15)和雷公藤多苷高剂量组(HD组,n=15)。灌胃给予LD组、MD组和HD组剂量为9.01、27.03和81.09 mg·kg~(-1)·d~(-1)的雷公藤多苷片混悬液,而MC组、NC组及BC组均灌胃给予等量的生理盐水。观察各组小鼠的结肠组织病理学表现,并比较其大体形态改变及组织病理学损伤评分;检测各组小鼠结肠组织中Toll样受体(TLR)4蛋白及核因子(NF)-κB p65的表达水平,测定结肠组织中白细胞介素(IL)-1α、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-13的浓度,并比较各组间的水平差异。结果显微镜下LD组、MD组和HD组小鼠的结肠组织炎症反应较MC组明显减轻;各模型组小鼠的大体形态学评分、组织损伤评分、TLR4含量及NF-κB p65 IHC评分均显著高于BC组及NC组,LD组、MD组和HD组值均明显低于MC组,且HD组MD组LD组(P0.05);各模型组小鼠结肠组织中IL-1α、TNF-α的浓度均明显高于BC组和NC组,LD组、MD组、HD组小鼠IL-1α、TNF-α浓度均明显低于MC组,且HD组MD组LD组(P0.05),而各组小鼠结肠组织中的IL-13浓度比较差异无统计学意义(P0.05)。结论不同剂量雷公藤多苷可有效改善UC小鼠的组织病理损伤,且高剂量组的改善作用更为显著,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB p65通路激活及下游促炎因子的分泌有关。     

雷公藤多苷对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜TLR4信号通路表达的影响

[目的]观察雷公藤多苷对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型结肠黏膜LPS/TLR4信号通路表达的影响,探讨其治疗溃疡性结肠炎的可能作用机制。[方法]BALB/c小鼠随机分为6组:模型组,低、中及高剂量中药雷公藤多苷灌胃组、阴性对照组、正常对照组。采用DSS复制BALB/c小鼠溃疡性结肠炎动物模型,雷公藤多苷灌胃给药21d后,采用荧光定量PCR、western blot法检测TLR4mRNA和蛋白的表达。[结果]3组中药灌胃组较阳性对照组TLR4表达水平显著降低(P0.01),但中、高剂量中药灌胃组、阴性对照组与正常组两两之间表达水平差异无统计学意义(P0.05)。[结论]雷公藤多苷能够抑制LPS/TLR4信号通路的表达,抑制UC小鼠的炎症反应,对UC发病起到一定得保护作用。     

溃疡性结肠炎患者血清IL-1β、TNF-α和IL-10的表达及其意义

目的通过对溃疡性结肠炎（UC）患者血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）表达水平的检测,探讨它们在UC发生、发展过程中的作用。方法实验组分为UC组（60例）和正常对照组（30例）。IL-1β、TNF-α和IL-10表达水平的检测：应用放射免疫法（RIA）检测三者在UC组、正常对照组血清中的表达水平。结果UC组血清中IL-1β、TNF-α表达水平与正常对照组相比明显增高（P〈0.01）,并与临床上病情的严重程度相一致。UC组血清中IL-10的含量与正常对照组间的差异没有统计学意义（P〉0.05）。结论UC发病过程中,促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α与抑炎性细胞因子IL-10的表达水平不一致,可能存在细胞因子网络的平衡失调。     

TNF-α、IL-13在溃疡性结肠炎中的表达及临床意义

目的检测溃疡性结肠炎患者血清中TNF-α、IL-13表达情况,探讨其在溃疡性结肠炎发病过程中所发挥的作用及临床意义。 方法收集来源为溃疡性结肠炎患者(UC组)30例及正常人(对照组)30例的外周静脉血,采用ELISA法检测两组血清TNF-α、IL-13的表达情况。 结果UC组血清水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);UC组患者IL-13的水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论UC组患者血清TNF-α、IL-13水平变化,作为反映溃疡性结肠炎患者结肠炎病症损害程度的灵敏的指标,对于判断溃疡性结肠炎病情变化具有临床意义。     

美沙拉嗪联合康复新液治疗溃疡性结肠炎的临床疗效观察

[目的]探讨康复新液保留灌肠治疗溃疡性结肠炎（UC）的临床疗效.[方法]将67例UC患者随机分为对照组和治疗组,对照组服用美沙拉嗪治疗,治疗组在对照组基础上加用康复新液保留灌肠,2组治疗30天后观察对比其疗效和血清细胞因子IL-1、IL-8、TNF-α的变化.[结果]2组患者的有效率比较差异无统计学意义,但显效率和细胞因子的变化比较差异有统计学意义.[结论]康复新液灌肠治疗溃疡性结肠炎,其疗效显著、确切而且安全.     

培菲康对实验性溃疡性结肠炎大鼠TNF-α、IL-10水平的影响

目的阐明培菲康对三硝基苯磺酸钠(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)TNF-α、IL-10水平的影响,寻求UC治疗的有效新途径。方法成年雌性SD大鼠50只,随机分成5组(n=10):正常对照组(G1)、模型对照组(G2)、培菲康治疗组(G3)、奥沙拉嗪治疗组(G4)、培菲康和奥沙拉嗪联合治疗组(G5),经不同处理和治疗后,通过免疫组化染色观测各组大鼠结肠组织中TNF-α(两步法)、IL-10(S-P法)表达情况,通过实时荧光定量PCR分析结肠组织中TNF-α、IL-10mRNA的表达水平。结果G1组各指标显著低于G2组(P0.001),肠组织结构正常;与G2组相比,G3、G4、G5组TNF-α、IL-10细胞阳性率和TNF-α、IL-10mRNA的表达水平显著降低(P0.001);与G3或G4组相比,G5组TNF-α、IL-10细胞阳性率和TNF-α、IL-10mRNA的表达水平也显著降低(P0.001);G3或G4组之间,TNF-α、IL-10细胞阳性率及TNF-αmRNA水平无差别(P0.05),而G4组IL-10mRNA水平明显低于G3组(P0.001)。结论TNF-α、IL-10在溃疡性结肠炎(UC)的发生、发展过程中起重要作用,培菲康能明显降低该过程中肠组织TNF-α、IL-10的表达水平,可能通过调控这两个细胞因子的表达而发挥疗效。     

沙利度胺对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织MMP-9、COX-2、IL-8水平的影响

[目的]探讨沙利度胺治疗溃疡性结肠炎大鼠的疗效及对结肠组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、环氧合酶-2（COX-2）、白介素-8（IL-8）表达水平的影响。[方法]将40只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶（SASP）组、沙利度胺组,每组10只。应用2,4,6三硝基苯磺酸与乙醇的混合物复制溃疡性结肠炎大鼠模型,除空白对照组和模型组正常饲养不进行药物治疗外,柳氮磺胺吡啶组给予SASP混悬液100mg/（kg·d）灌胃,沙利度胺组给予沙利度胺片混悬液200mg/（kg·d）灌胃。14d后处死全部大鼠,观察大鼠结肠组织大体形态、结肠炎症活动指数（DAI）评分和病理学的改变,并采用免疫组织化学法检测结肠组织中MMP-9、COX-2、IL-8的表达水平。[结果]沙利度胺能显著降低溃疡性结肠炎大鼠DAI评分和结肠组织中MMP-9、COX-2、IL-8的表达水平,并对损伤黏膜有较好的修复作用。[结论]沙利度胺对溃疡性结肠炎大鼠有较好的疗效,主要表现在促进黏膜愈合、降低组织中MMP-9、COX-2、IL-8的表达水平等方面。     

溃疡性结肠炎患者血清IL-6、IL-8、TNF-α水平变化及意义

目的观察溃疡性结肠炎（UC）患者血清IL-6、IL-8、TNF-α水平变化,并探讨其意义。方法 UC患者60例（UC组）,对照组30例。采用ELISA法检测两组血清IL-6、IL-8、TNF-α。结果 UC组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平明显高于对照组（P均〈0.05）;重度UC患者血清IL-6、IL-8、TNF-α水平高于轻中度、中度高于轻度（P均〈0.05）。结论 UC患者血清IL-6、IL-8、TNF-α水平升高,检测血清IL-6、IL-8、TNF-α有助于UC病情的判断。     

肝细胞生长因子对小鼠实验性结肠炎结肠细胞因子的影响

背景：肝细胞生长因子（HGF）是一种多功能因子,近年文献报道其有可能成为炎症性肠病（IBD）的辅助治疗药物。目的：研究HGF对小鼠实验性结肠炎结肠细胞因子的影响,探讨HGF用于IBD辅助治疗的可能机制。方法：30只健康昆明小鼠随机分为正常对照组、结肠炎模型组和HGF干预组,后两组以嗯唑酮溶液灌肠诱导结肠炎模型。造模后予HGF干预组小鼠HGF100μg／d腹腔注射,连续4d。评估各组疾病活动指数（DAI）,第13d处死所有小鼠,观察结肠大体和组织学损伤情况．以荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测结肠黏膜白细胞介素（IL）-4、IL-5、IL-10、干扰素（IFN）-γ和肿瘤坏死因子（TNF）-αmRNA表达。结果：与正常对照组相比,结肠炎模型组的DAI和结肠大体、组织学损伤评分以及结肠黏膜IL-4、IL-5、IL-10、IFN-γ、TNF-αmRNA表达量显著增高（P〈0．01）;HGF干预组上述指标均较结肠炎模型组显著降低（P〈O．01）,与正常对照组相比无明显差异。结论：HGF可能通过抑制结肠黏膜细胞因子的表达,改善小鼠实验性结肠炎的结肠炎症反应。     

瘦素在人溃疡性结肠炎中的表达及作用机制研究

目的观察瘦素在人溃疡性结肠炎组织中的表达及其作用机制。方法收集我院2006年6月~2009年6月确诊的溃疡性结肠炎患者35例,以结肠镜检查无明显异常者25例作为阴性对照。酶联免疫法观察血清细胞因子(TNF-α和IL-2)浓度的变化,免疫组化方法检测溃疡性结肠炎病理组织中瘦素的表达情况。结果在溃疡性结肠炎患者的病理组织中,瘦素的表达明显高于对照者,其血清中TNF-α的含量也高于对照者,IL-2则相反。结论瘦素在溃疡性结肠炎组织中过量表达,可能通过细胞因子TNF-α的上调和IL-2的下调诱导溃疡性结肠炎的发生。     

雷公藤多苷片对溃疡性结肠炎小鼠结肠巨噬细胞自噬的影响

[目的]观察雷公藤多苷片对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型结肠巨噬细胞自噬相关蛋白——自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达变化,探讨其治疗UC的可能作用机制。[方法]SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、雷公藤多苷片混悬液灌胃组和美沙拉嗪片混悬液灌胃组和模型对照组。采用DSS复制BALB/c小鼠UC动物模型,随机分组后分别予美沙拉嗪片混悬液、雷公藤多苷片混悬液及蒸馏水灌胃给药28d后,取出结肠组织,分离培养结肠巨噬细胞,采用Western blot法检测自噬相关蛋白LC3II/I的表达。[结果]雷公藤多苷片混悬液灌胃组和美沙拉嗪片混悬液灌胃组较模型对照组自噬相关蛋白LC3II/I的表达明显下降。[结论]雷公藤多苷片能够通过抑制细胞自噬,抑制UC小鼠的炎症反应,对UC发病起到一定得保护作用。     

四神丸对溃疡性结肠炎模型大鼠血清白细胞介素-1β、-4、肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察四神丸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠白细胞介素(IL)-1β、-4肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响。方法 Wistar大鼠40只分为四组,采用2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)乙醇灌肠法造模,光镜观察结肠组织病理形态并评分,采用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-4的水平。结果模型组大鼠结肠组织黏膜层可见溃疡形成,且有明显的炎症、充血存在,证实造模成功。模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量均高于空白组(P0.05),而IL-4含量低于空白组(P0.01);治疗后,四神丸组血清IL-1β、TNF-α水平均较模型组降低(P0.05、P0.01),而IL-4含量却显著升高(P0.01)。结论四神丸能够通过下调IL-1β、TNF-α的表达,升高IL-4的表达,调节肠道异常免疫反应、抑制炎症反应,修复溃疡,进而治疗UC。