Ki-67在胰岛素瘤中的表达及其意义

胰岛素瘤是最常见的胰腺内分泌肿瘤。Ki-67作为一种细胞增殖标志，与多种肿瘤的分化、浸润、转移和预后密切相关。目的：研究Ki-67在胰岛素瘤中的表达情况。探讨其作为胰岛素瘤良恶性鉴别和预后判断标志物的可能性。方法：选取45例胰岛素瘤组织和9例配对瘤旁正常胰腺组织，以免疫组化方法检测Ki-67的表达。并分析其表达与胰岛素瘤临床病理特征的关系。结果：45例胰岛素瘤组织中18例Ki-67表达阳性，阳性率为40．0％，9例配对瘤旁正常胰腺组织均不表达Ki-67。5例（11．1％）胰岛素瘤组织Ki-67指数≥2％。除术前血糖〈2．8mmol／L者Ki-67表达阳性率显著低于术前血糖≥2．8mmol／L者（P=0．025）外，Ki-67表达阳性与否和Ki-67指数与胰岛素瘤的临床病理特征，包括性别、年龄、症状出现至确诊时间、肿瘤原发部位、大小、是否多发、良恶性、有无转移和术后是否治愈均不相关。结论：根据本研究结果尚不能确定Ki-67能作为鉴别胰岛素瘤良恶性和预后判断的标志物。     

胰岛素瘤抑癌基因p27的表达及其与CpG岛甲基化表型的关系

目的 探讨胰岛素瘤抑癌基因p27的表达及其与CpG岛甲基化表型(CpG island methylation phenotype,CIMP)间的关系.方法 用免疫组化方法检测27例胰岛素瘤组织及11例瘤旁正常胰腺组织中p27的表达.用甲基化特异性PCR (MSP)方法检测这些组织中p16、MLH1、RAR-β、MGMT、THBS1基因的甲基化状态.分析p27表达、CIMP与临床病理参数间的相关性.结果 胰岛素瘤组织p27蛋白表达阳性率较瘤旁胰腺组织显著降低(48％比91％,P=0.008).胰岛素瘤组织的高CIMP发生率为33％(9/27),瘤旁正常胰腺组织的高CIMP发生率为18％(2/11),肿瘤组织为正常胰腺组织的2倍,但差异无统计学意义(P =0.350).胰岛素瘤的MGMT甲基化与p16的甲基化呈显著负相关(P=0.004),胰岛素瘤的p27表达与高CIMP呈负相关的趋势,但差异无统计学意义(P =0.420);p27的表达和CIMP的发生与胰岛素瘤的临床病理参数均无显著相关性.结论 胰岛素瘤p27表达下调,并存在高CIMP,提示p27的失活和多基因的表观遗传学异常在该肿瘤的发生过程中可能起一定作用.     

Mesothelin在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织mesothelin的表达及其与临床肿瘤指标的关系.方法 (1)通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测5株胰腺癌细胞株mesothelin mRNA的表达;(2)收集54例手术切除的胰腺癌及42例相应癌旁胰腺组织石蜡标本,利用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织Mesothelin的表达情况.结果 5株胰腺癌细胞株均有mesothelin mRNA表达;54例胰腺癌中mesothelin阳性表达41例(75.9%),2例癌旁胰腺组织中均无阳性表达;mesothelin阳性率与肿瘤分化程度相关(P ＜ 0.005),与肿瘤大小、淋巴及远处转移无关(P ＞ 0.05).结论 Mesothelin在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其表达有助于胰腺癌的诊断,并可作为判断胰腺癌恶性程度的重要指标.     

错配修复基因hMSH2在散发性胰岛素瘤中的表达及临床意义

目的 探讨错配修复基因hMSH2在散发性胰岛素瘤发生中的作用,以及hMSH2表达能否作为胰岛素瘤良、恶性鉴别的标志物.方法 以取自50例散发性胰岛素瘤患者的55个肿瘤(良性40个,恶性15个)作为研究对象,用免疫组化方法检测hMSH2蛋白表达.提取显微切割组织DNA,用PCR-LOH方法测定hMSH2的杂合缺失.在3条染色体上选择6个微卫星位点,PCR法测定肿瘤组织有无微卫星不稳定(MSI).并与患者的临床、病理资料进行相关分析.结果 13%的散发性胰岛素瘤hMSH2蛋白表达下调.55个胰岛素瘤均未发生hMSH2基因杂合缺失.36%(20/55)的胰岛素瘤中发现高频MSI(MSI-H,即6个位点中至少2个位点发生(MSI).15个恶性肿瘤中有33%存在hMSH2表达下调,而40个良性肿瘤中hMSH2表达下调仅为5%(P=0.019).结论 错配修复基因hMSH2表达丢失或下降可能与胰岛素瘤的恶性程度相关.测定肿瘤中hMSH2表达下调可作为判断该肿瘤良、恶性的潜在标志物.     

运动相关蛋白Fascin在胰腺癌的表达及其临床意义

目的 探讨运动相关蛋白Fascin在胰腺癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用RT-PCR法检测SW1990、Patu8988、BxPC3、CfPAC1 4株胰腺癌细胞株Fascin mRNA表达;采用免疫组化方法 检测54例胰腺癌及42例相应癌旁胰腺组织Fascin蛋白表达.结果 胰腺癌细胞株SW1990、Patu8988、CfPAC1有Fascin mRNA表达,BxPC3无表达;54例胰腺癌组织Fascin蛋白表达阳性35例,占64.8%,42例癌旁胰腺组织中均无阳性表达.Fascin蛋白表达与肿瘤分化程度(P<0.01)和淋巴转移(P<0.05)呈显著正相关,但与肿瘤大小及远处转移无相关性(P>0.05).结论 Fascin蛋白在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其表达有助于胰腺癌的诊断,并有助于判断胰腺癌恶性程度.     

无嘌呤嘧啶核酸内切酶在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织APE的表达及其与临床肿瘤指标的关系.方法 (1)通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测4株胰腺癌细胞株APE mRNA的表达;(2)收集37例手术切除的胰腺癌及12例相应癌旁胰腺组织石蜡标本,应用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织APE的表达情况.结果 4株胰腺癌细胞株均有APE mRNA表达;37例胰腺癌中APE阳性表达33例(89.2%),其中APE胞核阳性表达7例(21.2%),胞质阳性表达5例(15.2%),胞质及胞核均表达21例(63.6%).12例癌旁胰腺组织导管及腺泡呈阴性表达,胰岛胞质呈阳性表达,胰腺上皮内瘤变呈胞核阳性表达.APE阳性率与肿瘤分化程度,肿瘤大小、淋巴及远处转移无关(P ＞ 0.1).结论 APE在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其定位的特异性表达可能有助于胰腺癌的早期诊断.     

12-脂氧合酶在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的 检测胰腺癌组织和胰腺癌细胞株SW1990和PANC1的12-脂氧合酶(12-lipooxygenase,12-LOX)表达,探讨其与胰腺癌临床病理参数的关系.方法 分别应用免疫组化染色、RT-PCR和蛋白质印迹法检测胰腺癌组织、癌旁正常胰腺组织及胰腺癌细胞株SW1990和PANC1中12-LOX mRNA和蛋白的表达.分析胰腺癌组织12-LOX表达与临床病理参数的相关性.结果 30例胰腺癌组织12-LOX表达阴性8例,弱阳性7例,强阳性15例,总阳性率为73.3％.SW1990和PANC1细胞均表达12-LOX.阳性表达的胰腺癌组织及两株胰腺癌细胞株均表达12-LOX mRNA,而癌旁正常胰腺组织不表达12-LOX mRNA及蛋白.胰腺癌组织12-LOX强阳性表达与肿瘤TNM分期、肿瘤病理分级和淋巴结转移相关(P＜0.05),而与患者年龄、性别无关.结论 12-LOX在胰腺癌中表达上调,与胰腺癌的恶性生物学行为有关.     

无嘌呤嘧啶核酸内切酶在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的 研究胰腺癌组织APE的表达及其与临床肿瘤指标的关系。方法 （1）通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测4株胰腺癌细胞株APE mRNA的表达；（2）收集37例手术切除的胰腺癌及12例相应癌旁胰腺组织石蜡标本，应用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织APE的表达情况。结果 4株胰腺癌细胞株均有APE mRNA表达；37例胰腺癌中APE阳性表达33例（89．2％），其中APE胞核阳性表达7例（21．2％），胞质阳性表达5例（15．2％），胞质及胞核均表达21例（63．6％）。12例癌旁胰腺组织导管及腺泡呈阴性表达，胰岛胞质呈阳性表达，胰腺上皮内瘤变呈胞核阳性表达。APE阳性率与肿瘤分化程度，肿瘤大小、淋巴及远处转移无关（P〉0．1）。结论 APE在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率，检测其定位的特异性表达可能有助于胰腺癌的早期诊断。     

Mesothelin在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织mesothelin的表达及其与临床肿瘤指标的关系。方法(1)通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测5株胰腺癌细胞株mesothelin mRNA的表达;(2)收集54例手术切除的胰腺癌及42例相应癌旁胰腺组织石蜡标本,利用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织Mesothelin的表达情况。结果5株胰腺癌细胞株均有mesothelin mRNA表达;54例胰腺癌中mesothelin阳性表达41例(75.9%),42例癌旁胰腺组织中均无阳性表达;mesothelin阳性率与肿瘤分化程度相关(P<0.005),与肿瘤大小、淋巴及远处转移无关(P>0.05)。结论Mesothelin在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其表达有助于胰腺癌的诊断,并可作为判断胰腺癌恶性程度的重要指标。     

人巨噬细胞金属弹性蛋白酶在胃癌细胞株及胃癌组织中的表达及意义

目的测定人巨噬细胞金属弹性蛋白酶（HME）在胃癌细胞及胃癌组织中的表达,评价其在胃癌进展中的作用.方法2003年4月至8月胃肠外科和肿瘤外科胃癌住院手术病人共58例,所有病人均取肿瘤组织、癌旁组织、远处正常组织标本,采用R-PCR、实时荧光定量PCR测定胃癌细胞株（MGC-803、SGC-7901、AGS）及胃癌组织中HME mRNA水平,采用Western印迹和免疫组化法测定HME蛋白水平.结果3株胃癌细胞株中均有HME mRNA和蛋白表达;胃癌组织中的HMEmRNA和蛋白表达高于远处正常组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;而胃癌组织与癌旁组织中的HME mRNA和蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论胃癌患者中HME mRNA和蛋白呈一定比例的阳性表达,胃癌组织中最高,其次为癌旁组织和远处正常组织,说明HME是一项有潜在价值的肿瘤相关标志物.     

妊娠时间与肺结核复发的相关性研究及诊治对策

目的 分析肺结核史患者妊娠时间和肺结核复发间相关性.方法 选取我院收治的有肺结核史的妊娠妇女576例作为研究对象,对其妊娠前肺结核治疗、治愈后妊娠时间、妊娠后复发肺结核等进行分析,总结有肺结核史育龄女性的妊娠时间和肺结核复发之间的关系.结果 肺结核治愈后不同时间段妊娠者的结核复发率比较,差异具有显著性（P＜0.05）,停药后间隔时间越久妊娠,肺结核复发的几率越小.结论 加强孕期痰菌检查,及早发现复发肺结核,提高母婴安全.     

我国骨关节结核诊治的回顾与展望

骨关节结核是危害人们健康的严重感染性疾病,近95％由他处结核病继发而来.罹患骨关节结核疾病后几乎均将致残,严重影响人们的健康、工作和生活.建国以来在党和国家的关心和支持下,骨关节结核的诊治水平取得了长足进步.时至今日,由于多种原因,学科发展和被重视程度受到一定的制约,同整个医疗行业的发展不相适应.回顾过去,展望未来,我们需要重新审视骨关节结核的诊治方法,努力推进骨关节结核诊疗技术的科学发展.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fos and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44~(MAPK), p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44~(MAPK), p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44~(MAPK) and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between P42/44~(MAPK) and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Raf/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44~(MAPK), c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fas and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44MAPK, p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44MAPK, p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44MAPK and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between p42/44MAPK and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Rat/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44MAPK, c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

Replication and Inhibitors of Enteroviruses and Parechoviruses

The Enterovirus (EV) and Parechovirus genera of the picornavirus family include many important human pathogens, including poliovirus, rhinovirus, EV-A71, EV-D68, and human parechoviruses (HPeV). They cause a wide variety of diseases, ranging from a simple common cold to life-threatening diseases such as encephalitis and myocarditis. At the moment, no antiviral therapy is available against these viruses and it is not feasible to develop vaccines against all EVs and HPeVs due to the great number of serotypes. Therefore, a lot of effort is being invested in the development of antiviral drugs. Both viral proteins and host proteins essential for virus replication can be used as targets for virus inhibitors. As such, a good understanding of the complex process of virus replication is pivotal in the design of antiviral strategies goes hand in hand with a good understanding of the complex process of virus replication. In this review, we will give an overview of the current state of knowledge of EV and HPeV replication and how this can be inhibited by small-molecule inhibitors.     

心电图、心电向量图与冠状动脉造影结果对比分析

目的:通过分析心电图(Electrocardiogram,ECG)和心电向量图(Vectorcardiogram,VCG)的改变与冠脉造影（CAG）结果进行对比,探讨ECG、VCG在冠状动脉病变中的诊断价值。方法: 选择2008年1月~2009年12月临床拟诊断为冠心病患者108例,行常规ECG、VCG检查,并于1周内进行CAG,对检查结果依据各自的诊断标准进行判定,以CAG为标准诊断法,利用四格表法,计算相关评价真实性的指标并进行比较。结果: ①VCG检测的灵敏度、特异度、准确度显著高于ECG(P<0.05,P<0．01)。②ECG、VCG阳性率与冠脉病变支数组间比较:在单支病变、双支病变中,VCG阳性率明显高于ECG(P<0.05),左主干或三支病变无统计学意义;组内比较:ECG组左主干或三支病变组较单支病变、双支病变阳性率高(P<0.05,P<0.01);VCG组左主干或三支病变组较单支病变阳性率高(P<0.05);与双支病变阳性率比较无统计学意义;③ECG、VCG阳性率与冠脉病变程度组间比较:冠脉病变狭窄50%～69%的VCG阳性率明显高于ECG (P<0.05),其他两组阳性率比较无统计学意义;组内比较:ECG组冠脉病变狭窄≥90%较50%～69%、70%～89%的阳性率高(P<0.05,P<0.01); VCG组狭窄≥90%较50%～69%阳性率高（P<0.01),其他无统计学意义。结论: VCG对冠心病检测价值显著高于ECG。     

Detection and characterization of the product of hydroethidine and intracellular superoxide by HPLC and limitations of fluorescence

Here we report the structural characterization of the product formed from the reaction between hydroethidine (HE) and superoxide (O(2)(.-)). By using mass spectral and NMR techniques, the chemical structure of this product was determined as 2-hydroxyethidium (2-OH-E(+)). By using an authentic standard, we developed an HPLC approach to detect and quantitate the reaction product of HE and O(2)(.-) formed in bovine aortic endothelial cells after treatment with menadione or antimycin A to induce intracellular reactive oxygen species. Concomitantly, we used a spin trap, 5-tert-butoxycarbonyl-5-methyl-1-pyrroline N-oxide (BMPO), to detect and identify the structure of reactive oxygen species formed. BMPO trapped the O(2)(.-) that formed extracellularly and was detected as the BMPO-OH adduct during use of the EPR technique. BMPO, being cell-permeable, inhibited the intracellular formation of 2-OH-E(+). However, the intracellular BMPO spin adduct was not detected. The definitive characterization of the reaction product of O(2)(.-) with HE described here forms the basis of an unambiguous assay for intracellular detection and quantitation of O(2)(.-). Analysis of the fluorescence characteristics of ethidium (E(+)) and 2-OH-E(+) strongly suggests that the currently available fluorescence methodology is not suitable for quantitating intracellular O(2)(.-). We conclude that the HPLC/fluorescence assay using HE as a probe is more suitable [corrected] for detecting intracellular O(2)(.-).     

Overweight and Obesity and Progression of ADPKD

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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入

目的探讨绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞的可行性。方法采用F icoll-PaqueTMP lus淋巴细胞分离液,根据细胞密度梯度原理,分离大鼠骨髓间充质干细胞(rM SC s)并进行体外原代培养和传代扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,免疫细胞化学法对其初步鉴定。流式细胞仪分析转染效率。结果原代和传代培养的细胞呈现梭形外观,具有较强的生长增殖能力;细胞均一表达CD44、CD54、CD106、CD29抗原。电穿孔法转染rM SC s转染率为32.8%±3%。结论采用比重为1.077 g/L的F icoll-PaqueTMP lus能分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,经原代培养和传代培养能够迅速扩增。电穿孔法具有较高的介导外源基因表达于rM SC s的效率。     

血清C-反应蛋白和红细胞分布宽度在AECOPD与稳定期的变化及意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重期入院、出院时血清C-反应蛋白(CRP)和红细胞分布宽度(RDW)与正常人的差异。方法分别检测健康老年组(年龄≥65岁)、COPD急性加重期患者入院、出院时CRP和RDW水平,比较组间各指标的差异。结果急性加重期患者入院、出院时CRP和RDW水平均高于健康老年组,入院时CRP水平高于出院时(P0.01),入院、出院时RDW水平无统计学差异。结论 CRP和RDW可一定程度评估COPD病情及反映病情变化。