幽门螺杆菌核酸疫苗的研究

幽门螺杆菌(H.pylori)与多种胃肠道疾病密切相关，在人群中的感染率较高，目前的“三联”或“四联”抗H.pylori治疗由于治疗费用、抗生素耐药等受到一定限制，为了有效控制H.pylori感染，疫苗尤其是核酸疫苗的研制逐渐成为该研究领域的热点，被认为是防治H.pylori最有前景的方法。     

幽门螺杆菌感染动物模型的应用研究进展

幽门螺杆菌(H．pylori)和上消化道疾病关系密切，H．pylori感染动物模型的应用为深入研究其传播途径、与胃肠道疾病关系、致病机制、治疗方法、宿主免疫反应和抗H．pylori疫苗等提供了有效手段和方法。本就H．pylori感染动物模型应用研究进展作一综述。     

幽门螺杆菌疫苗的研究进展

摘要幽门螺杆菌（H.pylori）是人类上消化道疾病的重要致病菌，为慢性胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡的主要病因。目前临床治疗尚存在诸多不足，研制疫苗对预防和控制H.pylori感染具有十分重要的意义。经过20余年的发展，H.pylori疫苗在动物模型建立、候选抗原的选择、佐剂和投递方式的优化等方面均已取得了较大突破。本文主要就全菌疫苗、亚单位疫苗（基因工程疫苗）、活载体疫苗和DNA疫苗四种类型的H．pylori疫苗的研究现状作一概述。     

幽门螺杆菌核酸疫苗的研究

幽门螺杆菌(H.pylori)与多种胃肠道疾病密切相关,在人群中的感染率较高,目前的"三联"或"四联"抗H.pylori治疗由于治疗费用、抗生素耐药等受到一定限制,为了有效控制H.pylori感染,疫苗尤其是核酸疫苗的研制逐渐成为该研究领域的热点,被认为是防治H.pylori最有前景的方法.     

幽门螺杆菌疫苗免疫机制的研究进展

世界上近一半的人口感染了幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)。近20年的研究证实,幽门螺杆菌是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的致病因子,而且与胃腺癌和胃粘膜组织相关性淋巴瘤(MALT)的发生密切相关。由于现行抗生素联合治疗H.pylori感染存在着耐药菌株增多和药费昂贵等问题,所以免疫防治H.pylori感染成为研究的热点,人们相继开发了蛋白组分疫苗,载体疫苗以及核酸疫苗,并在动物模型上证实有免疫保护作用,同时对H.pylori疫苗免疫     

幽门螺杆菌外膜蛋白质组二维凝胶电脉和图像分析

幽门螺杆菌(H．pylori)对胃黏膜的致病免疫机制十分复杂．人们迫切需要了解不同H．pylori蛋白分子对机体的作用．目前有关H．pylori外膜蛋白质的研究尚不多。目的：建立针对H．pylori外膜蛋白质组学研究的二维凝胶电泳(2-DE)及其相关技术体系．比较不同胃病相关Hpylori菌株外膜蛋白质组2-DE图谱的差异，为研究H．pylori外膜蛋白质的免疫蛋白质组学提供技术基础。方法：分别选用分离自2例不同胃病患者胃黏膜的H．pylori菌株(H．pylori 185和H．pylori 161)．采用2-DE分离此两种H．pylori菌株的外膜蛋白质．通过图像分析软件进行蛋白斑点检测和匹配分析。结果：对H．pylori外膜蛋白质重复进行2-DE和图像分析．发现蛋白斑点匹配率约为98％．绝大部分蛋白能较好地重叠，重复性好，分辨率较高。Mpylori 185菌株和H．pylori 161菌株分别有蛋白斑点116个(主蛋白斑点39个)和129个(主蛋白斑点48个)，两者有35个相同的主蛋白斑点，但其蛋白含量略有差异。结论：不同胃病相关H．pylori的菌株外膜蛋白质存在许多共同的蛋白斑点．且各有特异的蛋白斑点，有些蛋白含量略有差异。2-DE分离H．pylori外膜蛋白质是研究H．pylori外膜蛋白质组学的重要途径之一。对不同胃病相关Mpylori菌株的外膜蛋白质进行分析．可为临床诊治H．pylori相关疾病提供理论基础。     

携带幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位基因重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌的构建和鉴定

背景：幽门螺杆菌(h.pylori)是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的重要致病菌，以减毒鼠伤寒沙门菌为载体构建活疫苗己成为探索新型H．pylori疫苗的重要途径。目的：构建携带H．pylori热休克蛋白B亚单位(hspB)基因的重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌。方法：应用基因工程技术将1640bp的hspB基因克隆入原核表达质粒pTrc99A。对重组质粒进行序列测定，并将测序结果与基因文库中H.pylori-hspB的基因和蛋白序列进行BLAST分析，再将重组质粒导入活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261。结果：重组质粒经聚合酶链反应(PCR)和双酶切，证实构建了携带hspB基因的重组原核表达质粒pTrc99A—hspB，后者成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261。所构建的重组质粒pTrc99A—hspB中所含的H.pylori-hspB与基因文库中量H.pylori-hspB基因和蛋白的同源性均为97％。结论：成功构建并鉴定了携带量H.pylori-hspB基因的重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌，为研制H.pylori口服疫苗奠定了基础。     

幽门螺杆菌疫苗接种小鼠产生免疫后胃炎的影响因素

目的:研究幽门螺杆菌(H pylorl)疫苗接种小鼠产生免疫后胃炎的影响因素．方法:将H pylori疫苗免疫C57BL／6和BALB／c的小鼠,观察攻击后胃黏膜H pylori定植和炎症情况．将H pylori疫苗免疫C57BL／6小鼠,然后予不同菌量的H pylori攻击,观察胃黏膜H Pylori定植和炎症情况．将H pylori疫苗经口和经腹腔免疫C57BL／6小鼠,观察攻击后胃黏膜H pylori定植和炎症情况.对感染H pylori的C57BL／6小鼠予H pylori疫苗治疗,观察治疗免疫后胃黏膜H pylori定植和炎症情况．结果:不同品系的小鼠免疫保护程度无明显差异,但C57BL／6小鼠免疫后胃炎重于BALB／c小鼠．接受不同攻击茵量的小鼠保护程度无明显差异,但大的攻击茵量可诱导更严重的免疫后炎症．不同免疫途径诱导的免疫保护程度及攻击后不同时间点的炎症程度均无显著性差异．治疗性免疫导致H pylori定植明显降低,同时也引发更为严重的胃炎．结论:在不同的免疫宿主、免疫途径和治疗性免疫中均存在免疫后胃炎．免疫后胃炎的强弱程度受免疫宿主和攻击菌量的影响．     

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位编码基因的克隆与序列分析

目的 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)热休克蛋白A亚单位的编码基因(hspA)克隆和序列分析，为H.pyiori基因工程疫苗的研究奠定基础。方法 应用PCR方法获得国内分离H.pylori菌株MEI，HP27和国际标准参考株H.pylori的hspA基因，通过定向克隆的方法分别插入克隆载体pNEB193中，用质粒酶切电泳和特异PCR方法鉴定重组质粒。克隆基因经测序后进行核苷酸和氨基酸的同源性比较。结果 重组质粒经双酶切后得到0．35kb的hspA基因片段，特异PCR可扩增出hspA基因片段，证实H.pylori hspA基因的重组克隆质粒构建成功。经测序，国内分离HpMEL-HP27的hspA基因全长357bp(Genbank收录号：AY295084)，编码由118个氨基酸残基组成的肽链，hspA基因序列与GenBank公布的H.pylorl相应基因同源性高达95．20％～97．48％，氨基酸序列同源性在95．76％～97．46％之间。结论 克隆了H．pylori菌株MEL-HP27的hspA基因，其核酸序列与国际参考株NCTC11637同源性为97．48％。     

幽门螺杆菌培养及抗原蛋白的分离纯化

幽门螺杆菌(H pylori)是一种生存于人胃中的弯曲状菌,能导致人的慢性胃炎,消化性溃疡和胃癌,其治疗多用抗生素治疗,但其副作用较大.给奶牛免疫H pylori疫苗后,其分泌的牛奶中含抗H pylori的免疫球蛋白,能够预防和治疗人类H pylori感染.且没副作用.在生产免疫乳时,Hpylori疫苗制备是基础性工作,并且在亚单位疫苗中,抗原蛋白的制备和分离纯化又最为关键.本文就H pylori的培养(固体和液体培养)和抗原蛋白(尿素酶、空泡毒素、毒素相关蛋白和脂多糖)的理化性质、重组表达以及分离纯化方法进行比较研究.