日本血吸虫虫卵抗原诱导CD4+CD5+T细胞及其细胞因子表达

目的 探讨日本血吸虫虫卵抗原诱导宿主免疫应答下调的机制.方法 6～8周龄雌性队LB/c小鼠分为2组,实验组小鼠口服血吸虫虫卵10 000个以及尾静脉注射可溶性虫卵抗原(SEA)200μg,每周免疫1次,共4次;对照组注射PBS.流式细胞仪检测SEA免疫小鼠CD4+CD25+T细胞数量;与CD4+CD25-T细胞共同培养,检测CD4+CD25+T细胞抑制功能;流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞表达IL-4、IL-10与IFN-γ水平;酶联免疫吸附试验检测静脉血IL-10和转化生长因子-β表达水平.结果 实验组小鼠CD4+CD25+T细胞数量为14.7%,对照组为7.4%;实验组IL-10为29.2 pg/ml,对照组为11.0 pg/ml.与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞主要合成IL-10及少量IFN-γ.CD4+CD25+T细胞显著抑制CD4+T细胞增殖. 结论 日本血吸虫虫卵抗原可能通过诱导CD4+CD25+T细胞和IL-10下调机体免疫应答.     

日本血吸虫虫卵抗原诱导CD4+CD25+T细胞及其细胞因子表达

目的 探讨日本血吸虫虫卵抗原诱导宿主免疫应答下调的机制.方法 6～8周龄雌性队LB/c小鼠分为2组,实验组小鼠口服血吸虫虫卵10 000个以及尾静脉注射可溶性虫卵抗原(SEA)200μg,每周免疫1次,共4次;对照组注射PBS.流式细胞仪检测SEA免疫小鼠CD4+CD25+T细胞数量;与CD4+CD25-T细胞共同培养,检测CD4+CD25+T细胞抑制功能;流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞表达IL-4、IL-10与IFN-γ水平;酶联免疫吸附试验检测静脉血IL-10和转化生长因子-β表达水平.结果 实验组小鼠CD4+CD25+T细胞数量为14.7%,对照组为7.4%;实验组IL-10为29.2 pg/ml,对照组为11.0 pg/ml.与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞主要合成IL-10及少量IFN-γ.CD4+CD25+T细胞显著抑制CD4+T细胞增殖. 结论 日本血吸虫虫卵抗原可能通过诱导CD4+CD25+T细胞和IL-10下调机体免疫应答.     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞在血吸虫可溶性虫卵抗原影响哮喘中的作用研究

目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)与哮喘发生的关系及其对CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)及相关基因Foxp3表达的影响。方法 BALB/C小鼠腹腔及足垫共注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠产生过敏性哮喘。剖杀小鼠,取肺组织,做病理学检查;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片、染色后进行细胞分类计数;分离脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)占CD4+T细胞的比例;提取脾脏RNA,以逆转录得到的cDNA为模板扩增Foxp3基因,检测脾脏Foxp3mRNA表达水平。结果 SEA免疫并OVA致哮喘组小鼠肺组织炎症较OVA单纯哮喘对照组轻,只有少量炎性细胞浸润。BALF涂片染色检查SEA免疫组BALF中的细胞密度低于对照组,其中嗜酸粒细胞占总细胞数的(2.22±1.52)%,对照组占(19.93±4.08)%,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测SEA免疫组小鼠脾细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞总数的(32.24±2.19)%,对照组占(27.41...     

HO-1调节Th17/Treg失衡延缓动脉粥样硬化进程的机制研究

目的:探讨Th17/Treg平衡是否参与血红素氧合酶-1(heme oxygenase,HO-1)对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块保护作用。方法:8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为3组,给予8周西方饮食的同时,分别经腹腔注射0.9%氯化钠(对照组)、氯化血红素(诱导HO-1,HO-1组)和锌原卟啉(抑制HO-1,Zn组),并维持8周。8周后处死小鼠,检测斑块面积、斑块组分构成和HO-1表达、脾脏Th17与Treg比例、血浆IL-17、IL-6、IL-10和TGF-β1水平。结果:与对照组相比,HO-1组动脉内HO-1表达以及HO-1活性明显增加,伴随血浆脂质氢过氧化物(plasma lipid hydroperoxide,LPO)浓度降低。同时,HO-1组主动脉根处斑块显著减轻,且斑块更稳定,表现为平滑肌细胞、胶原增多,巨噬细胞和CD4+细胞减少。进一步研究发现,HO-1组小鼠脾脏Th17比例显著降低,调节性T细胞(CD4~+CD25~+Foxp3~+)明显增高,血浆IL-17、IL-6水平降低,IL-10、TGF-β1水平升高。Zn组检测结果显示斑块明显加重,更趋于易损状态,且效应性/调节性T细胞(主要为Th17/Treg)失衡加剧。结论:HO-1通过调整Th17/Treg失衡抑制动脉粥样硬化进程。     

SIRT6延缓动脉粥样硬化病程进展的机制研究

目的 分析SIRT6延缓动脉粥样硬化病程进展的机制。方法 本实验时间为2022年1—10月。动物实验：将10只SPF级野生型雄性C57BL小鼠作为对照组，随机选取10只雄性ApoE-/-小鼠作为动脉粥样硬化组，剩余10只雄性ApoE-/-小鼠作为动脉粥样硬化+SIRT6-/-组。对照组小鼠采用普通饲料喂养16周。动脉粥样硬化组和动脉粥样硬化+SIRT6-/-组小鼠采用高脂饲料喂养16周以构建动脉粥样硬化模型。此外，动脉粥样硬化+SIRT6-/-组小鼠采用CreLoxP方法构建巨噬细胞特异性SIRT6缺陷模型。采用HE染色检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块面积，Western blot法检测各组小鼠主动脉组织中SIRT6、IL-32、细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达水平，免疫荧光染色检测各组小鼠主动脉组织中CD31表达情况。细胞实验：取对数生长期的巨噬细胞RAW 264.7，将其随机分为对照组（不进行干预）、动脉粥样硬化组[采用50μg/ml的氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）干预24 h]、动脉粥样硬化+Ad-SIRT6组（转染腺病毒Ad-SIRT6,24 h后用50μg/ml的ox-L...     

热休克蛋白60口服耐受诱导特异性调节T细胞对动脉粥样硬化斑块的影响

目的 探讨热休克蛋白60口服耐受诱导特异性调节T细胞对栽脂蛋白E~(-/-)小鼠动脉粥样硬化宽块形成的影响.方法 8周龄载脂蛋白E~(-/-)小鼠分别口服重组鼠热休克蛋白60-PBS溶液和单纯PBS溶液(对照组),连续5天后高脂饲养12周.比较两组宽块面积;分析脾细胞中CD4~+CD25~+调节性T细胞百分比和功能;酶联免疫吸附法检测上清液细胞因子浓度.结果 与对照组比较,口服热休克蛋白60组斑块面积显著减小,脾细胞中CD4~+CD25~+调节性T细胞百分比显著升高,CD4~+CD25~+调节性T细胞增殖反应下降,上清液中转化生长因子β和白细胞介素10浓度显著升高,而γ干扰素浓度显著下降.结论 热休克蛋白60口服耐受能诱导CD4~+CD25~+调节性T细胞介导抗原特异性免疫耐受;口服热休克蛋白60可能会抑制小鼠动脉粥样硬化斑块的形成.     

口服胰岛素预防昆明株小鼠免疫性糖尿病的机理

目的　探讨口服胰岛素预防链尿菌素 (STZ)引起的胰岛炎及糖尿病的机理。　方法　正常昆明株小鼠 2 0只随机分为 2组 ,实验组 ,口服猪胰岛素 1mg,2次 /周 ;对照组 :口服等量的蒸馏水。 10周后 2组小鼠均腹腔注射STZ 4 0mg·kg-1·d-1× 5d。以血糖≥ 16 .7mmol/L诊断为糖尿病。监测 2组小鼠的血糖 6周。 6周后处死 2组小鼠 ,观察胰岛与脾内T细胞亚群及Fas/FasL的表达。　结果　 6周后实验组发病率为 0 % ;对照组为 90 % (P <0 .0 1) ,胰岛炎的评分实验组为 0 .0 6± 0 .19,对照组为 2 .5 4±0 .2 9(P <0 .0 1)。对照组胰岛内浸润的T细胞以CD8+为主 ( 5 9% ) ;而实验组以CD4+为主 ( 73% )。组织学检查示 :对照组胰岛 β细胞数显著减少 ,且 β细胞上出现Fas表达 ;而实验组胰岛 β细胞数显著多于对照组 ,实验组 90 %小鼠显示正常胰岛结构 ,β细胞上未见Fas表达 ;而两组胰岛内浸润T细胞均有FasL表达。　结论　口服胰岛素可抑制CD8+T细胞在胰岛局部的聚集及 β细胞表达Fas,避免FasL( + )T细胞引起的 β细胞凋亡 ,从而预防了糖尿病的发生。     

Kupffer细胞对日本血吸虫病肉芽肿期CD4~+CD25~+T细胞的影响

目的探讨Kupffer细胞对日本血吸虫病肉芽肿期CD4+CD25+T细胞的影响。方法6～8周龄雌性C57BL/6J小鼠30只分为对照组、感染组与感染/氯化钆组3组,每组10只。感染组和感染/氯化钆组小鼠通过腹部感染尾蚴(10条/只),感染/氯化钆组于感染后第4周经尾静脉注射氯化钆,剂量为每次15mg/kg,每周2次;对照组通过尾静脉注射PBS。感染8周后流式细胞仪检测小鼠CD4+CD25+T细胞数量;免疫组织化学染色检测Foxp3的分布;ELISA检测血清细胞因子IL-4、IL-5、IL-10、TGF-β1与IFN-γ的水平,并进行肝功能检测。结果感染组小鼠CD4+CD25+T细胞数量为13.8%,感染/氯化钆组为9.3%;感染组IL-10为41.4pg/ml,感染/氯化钆组为22.6pg/ml;氯化钆可下调Foxp3的分布、血清丙氨酸氨基转移酶的水平,并减轻血吸虫肉芽肿周围的炎症反应。结论Kupffer细胞通过调控CD4+CD25+T细胞数量而参与日本血吸虫肉芽肿的形成。     

弓形虫亲环蛋白亚单位疫苗的免疫保护性研究

目的研究弓形虫亲环蛋白(Cyclophilin,CyP)亚单位疫苗的免疫保护性。方法 30只BALB/c小鼠随机分为3组:实验组、佐剂组和PBS对照组,分别肌注pET-28a-TgCyP重组蛋白100μg/只、佐剂100 ul/只和PBS 100 ul/只,共免疫3次,每次间隔2周。末次免疫后2周,各组分别取4只小鼠处死,取脾脏,检测CD4+、CD8+及细胞因子。同时,采用阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒性检测试剂测定小鼠脾淋巴细胞的增殖应答。其余小鼠腹腔攻击感染Rh株弓形虫速殖子500个,观察其存活情况。结果 pET-28a-TgCyP重组蛋白亚单位疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,小鼠的CD4+T细胞(62.59±4.17)%、CD8+T细胞(8.53±0.46)%与PBS及佐剂对照组比较显著增殖(P<0.01),其脾细胞培养液白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)显著升高,小鼠脾淋巴细胞增殖应答显著增强(P<0.01)。弓形虫攻击感染216 h后,实验组小鼠免疫保护率为33.3%,佐剂对照组及PBS对照组小鼠均全部死亡。结论 pET-28a-TgCyP重组蛋白亚单位疫苗具有较强的免疫原性,能...     

结核分枝杆菌H37Ra感染对小鼠T细胞及Th1/Th2反应的影响北大核心CSCD

目的探讨结核分枝杆菌H37Ra菌株(H37Ra)感染对BALB/c小鼠T细胞及Th1/Th2反应的影响。方法建立H37Ra菌株BALB/c小鼠感染模型,设生理盐水(NS)处理小鼠作为对照组。在感染早期(4周)和晚期(8周)分别取小鼠脾脏细胞及淋巴结细胞,或培养后的细胞,经荧光抗体染色后采用流式细胞术对不同感染时期小鼠的T细胞表型进行检测分析。结果实验组小鼠感染H37Ra 4周时与对照组比较,脾脏总T细胞(CD3^+)、CD4^+T细胞百分率(CD3^+CD4^+CD8^-)降低((43.03±5.57)%,t=5.804,P=0.000;(47.76±6.22)%,t=2.327,P=0.042),CD8^+T细胞百分率(CD3^+CD4^-CD8^+)增高((47.72±4.39)%,t=-3.698,P=0.004);与感染4周时比较,感染8周时脾脏总T细胞、CD4^+T细胞百分率增高((68.23±4.38)%,t=-8.712,P=0.000;(57.89±4.93)%,t=-3.125,P=0.011),CD8^+T细胞百分率降低((39.23±3.80)%,t=3.585,P=0.005),且晚期时恢复至正常。H37Ra感染4周和8周时与对照组比较,H37Ra感染对小鼠淋巴结总T细胞(CD90.2^+)及T细胞亚群(CD4^+T细胞及CD8^+T细胞)分布无显著影响(P>0.05)。H37Ra感染晚期,与对照组比较,IFN-γ表达升高(加培养液而无TB-PPD组:(7.50±1.60)%,t=-4.173,P=0.002;加入PPD组:(6.80±1.36)%,t=-5.014,P=0.001)。结论 H37Ra感染可影响T淋巴细胞及亚群的分布,并出现Th1反应而未见明显Th2反应,促进了机体的抗结核感染作用。     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

Complex of genotypes of cytokines as a genetic factor of risk of development of myocardial infarction of in Europien population of Russia men

Cytokines as regulators of activity of inflammation play significant role in mechanisms of formation of atherosclerotic plaques and in processes of their destabilization. One of leading genetic factors determining level of their production appears to be polymorphism of cytokine genes structure at their promoter loci. We have conducted an analysis of distribution in groups of healthy male and female survivors of myocardial infarction (MI) of combined genetic signs represented as a complex of genotypes of a number of studied cytokine genes : TNF-A863C; TNF-A308G; TNF-A238G; IL1B-C511T; IL1B-C-31T; IL4-C590T; IL6-C174G; IL10A-1082G IL10-A592C. Among these homozygous combinations of cytokine genotypes characterizing a group of men who have lived up to middle and old age without development of MI there are widely represented genotypes associated with high levels of production of both cytokines with pronounced proinflammatory (IL-1) and antiinflammatory (IL-4, IL-10) activity. Absence of such multidirectional combinations in genome of patients with myocardial infarction can be considered one of genetic factors of risk of development of acute distirbances of coronary circulation.