辛伐他汀对高脂血症大鼠胸主动脉壁白介素-2、RANTES和趋化因子受体1表达的影响

目的探讨辛伐他汀对高脂血症大鼠胸主动脉壁白介素-2(IL)-2、RANTES和趋化化因子受体(CCR)-1 mRNA和蛋白表达的影响。方法将30只健康8周龄SD雄性大鼠随机分为对照组、高脂饮食组和辛伐他汀组,每组10只。对照组用普通饲料喂养,高脂饮食组用高脂饲料喂养,辛伐他汀组以高脂饮食饲料喂养4 w后,每天以5 mg/kg的辛伐他汀灌胃,并继续给予高脂饮食饲料。两个月后心脏采血处死大鼠,取胸主动脉。采用酶法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。用HE染色方法观察胸主动脉病理形态学改变,采用免疫织化和RT-PCR方法检测各组动脉壁细胞IL-2、RANTES和CCR-1蛋白及mRNA的表达情况。结果高脂饮食组大鼠血清TC、TG含量明显高于对照组(均P0.01)和辛伐他汀组(均P0.01)。对照组胸主动脉内膜光滑,内皮细胞排列整齐。高脂饮食组动脉内膜脂质浸润,粗糙,隆起,有泡沫细胞形成,细胞排列紊乱,辛伐他汀组介于二者之间。高脂饮食组大鼠动脉壁IL-2、RANTES和CCR-1蛋白及mRNA表达水平均显著高于对照组(均P0.01)和辛伐他汀(均P0.05)。结论高脂饮食能使SD大鼠发生高脂血症和动脉粥样硬化(AS)。高脂血症可能通过诱导大鼠胸主动脉血管壁细胞中IL-2、RANTES和CCR-1的表达引起AS的发生,辛伐他汀可以抑制这一过程。     

骨形态发生蛋白4在肥胖小鼠心肌、动脉和脂肪组织的表达与炎症的相关性研究

目的:探讨肥胖老鼠体内心脏、动脉与脂肪组织中骨形态发生蛋白4(BMP4)的表达及其与炎症程度的相关性。方法:将ob/ob小鼠分为实验组与干扰组,以C57BL/6小鼠为对照组。每组各8只,普通饮食喂养,干扰组尾静脉注射BMP4shRNA腺病毒,每周1次,持续12周。12周后心脏采血处死,取心肌组织、腹主动脉及腹部脂肪组织。免疫组织化学染色定位半定量BMP4的表达水平。PCR荧光定量和免疫蛋白印迹法检测BMP4、白细胞介素(IL)-1β和IL-9mRNA与蛋白的表达水平。结果:实验组BMP4、IL-1β和IL-9的mRNA与蛋白在心肌组织和动脉血管的表达均显著高于干扰组和对照组,实验组和干扰组BMP4蛋白在脂肪组织中的表达要显著低于对照组(均P0.05)。结论:BMP4在肥胖小鼠体内心肌组织和动脉血管中明显高表达,是促进局部炎症反应发生的独立危险因子。     

NLRP3炎症小体在高脂诱导大鼠冠状动脉硬化性心脏病形成中的表达水平及意义

目的探讨NLRP3炎症小体在冠状动脉硬化性心脏病(冠心病,CAD)大鼠心肌组织和冠状动脉(冠脉)组织中的表达水平,并初步探索NLRP3炎症小体致大鼠冠心病形成中的作用。方法通过高脂饮食诱导制备大鼠冠心病动物模型,分析各组实验动物血液中总胆固醇(TC),三酰甘油(TG)水平;通过RT-qPCR及Western Blot等方法对NLRP3炎症小体及其作用蛋白白介素1β(IL-1β)心肌组织中的m RNA及蛋白表达水平进行测定;通过心脏超声检查、心肌及冠状动脉组织病理切片评价NLRP3炎症小体对CAD形成的影响。结果血清学检测发现高脂饮食大鼠与正常饮食大鼠相比较TC与TG水平明显增高(P0.05);通过RT-qPCR及Western Blot检测NLRP3炎症小体及作用蛋白IL-1β在高脂饮食组大鼠心肌组织中表达水平明显上调(P0.05);通过大鼠冠状动脉、心肌组织病理切片及心脏超声发现,高脂饮食组大鼠冠状动脉出现明显粥样斑块并伴管腔内径缩小,心脏增大明显且心功能下降明显(P0.05);心脏结构和功能改变与NLRP3炎症小体及作用蛋白IL-1β表达上调有关。结论 NLRP3炎症小体参与了CAD的发生发展过程。     

氨溴索对百草枯中毒性急性肺损伤大鼠肺组织HO-1表达的影响

目的 探讨氨溴索治疗百草枯(PQ)中毒性急性肺损伤的效果及机制.方法 将120只大鼠随机分为4组,正常对照组(C组)、氨溴索对照组(AC组)各12只,均腹腔注射生理盐水1.25 ml/kg,AC组再腹腔注射氨溴索35 mg/kg;PQ中毒组(PQ组)及氨溴索治疗组(AT组)各48只,均腹腔注入2%PQ液25 mg/kg制造中毒模型;AT组造模后腹腔注射氨溴索35 mg/kg,1次/d.PQ组、AT组于腹腔注射PQ后1、3、5 d各处死16只,C组、AC组各处死4只.取肺组织HE染色评价肺组织损伤情况;检测血清中IL-1β水平;采用RT-PCR法检测肺组织HO-1 mRNA表达;采用Western blot方法分析肺组织HO-1蛋白表达.结果 C组、AC组肺组织结构基本正常,PQ组肺组织损伤较C组明显加重,IL-1β的表达水平明显升高(P<0.01),肺组织的HO-1 mRNA和蛋白表达水平亦升高(P均<0.05).而AT组肺组织损伤较PQ组有所减轻,IL-1β的表达水平亦降低(P<0.01),肺组织的HO-1 mRNA和蛋白表达水平皆高于PQ组(P均<0.01).结论 氨溴索可减轻大鼠PQ中毒所致的肺损伤,其机制可能与降低IL-1β表达及升高肺组织中HO-1基因和蛋白表达有关.     

TRALI大鼠肺泡活化巨噬细胞及共刺激分子CD40、ICAM-1的表达变化分析

目的探讨输血相关急性肺损伤(TRALI)大鼠肺泡活化巨噬细胞及共刺激分子CD40、血浆及肺组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达变化及其意义。方法选取60只SPF级、6-7周龄的雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为假手术组(腹腔注射等量生理盐水)、对照组(腹腔注射2mg/kg脂多糖)、模型组(静脉输注脂多糖5mg/kg)和TRALI组(腹腔注射2mg/kg脂多糖+静脉输注血浆1m L/只)各15只,采用RTPCR技术检测活化巨噬细胞中Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达,采用Northern bolt检测CD40 mRNA的表达,采用免疫组化染色检测ICAM-1蛋白的表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-β)、ICAM-1的水平。结果模型组和TRALI组的活化巨噬细胞中TLR4 mRNA、肺组织中CD40 mRNA、ICAM-1蛋白表达水平显著高于假手术组和对照组(P0.05),TRALI组的活化巨噬细胞中TLR4 mRNA、肺组织中CD40 mRNA、ICAM-1蛋白表达水平显著的低于模型组(P0.05);模型组和TRALI组的血清中TNF-ɑ、IL-β、ICAM-1的水平显著的高于假手术组和对照组(P0.05),TRALI组的血清中TNF-ɑ、IL-β、ICAM-1的水平显著的低于模型组(P0.05)。结论 TRALI大鼠肺TLR4 mRNA、CD40 mRNA、ICAM-1蛋白高表达,这可能与促进炎症因子释放,引起肺损伤有关。     

miR-431调控CaMK Ⅳ信号通路参与坏死性小肠结肠炎症的机制

[目的]探讨miR-431调控CaMKⅣ信号通路对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)的影响。[方法]将新生SD雄性大鼠32只随机分为对照组、模型组、阴性对照组、miR-431 antagomir组,每组8只。通过苏木素-伊红(HE)染色对各组大鼠进行肠组织病理评分;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组IL-6、TNF-α表达水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组miR-431、CaMKⅣmRNA的表达水平;蛋白印迹(Western blot)检测各组CaMKⅣ蛋白及pCaMKⅣ蛋白的表达水平。[结果]对照组肠组织结构清晰,上皮完整,腺体规则排列,无黏膜层及黏膜下层充血水肿及炎症细胞浸润;模型组及阴性对照组肠组织坏死严重,腺体排列紊乱,黏膜下层或固有层有重度分离,黏膜下层和肌层有严重水肿,绒毛崩解分离和缺血坏死,存在大量炎症细胞浸润,IL-6、TNF-α、miR-431、CaMKⅣmRNA及蛋白、pCaMKⅣ蛋白表达水平显著升高(P0.05);miR-431 antagomir组肠道组织充血水肿情况较模型组减轻,腺体排列稍显紊乱,肠黏膜及黏膜下层可见轻度水肿,有少量炎症细胞浸润,IL-6、TNF-α、miR-431、CaMKⅣmRNA及蛋白、pCaMKⅣ蛋白表达水平较模型组和阴性对照组显著降低(P0.05)。[结论]敲低miR-431的表达可减轻NEC新生大鼠的炎症水平,改善其肠组织的损伤情况,其机制可能与miR-431低表达抑制CaMKⅣ信号通路活化有关。     

马来酸曲美布汀对寒冷束缚应激大鼠结肠平滑肌细胞离子通道的作用

目的 探讨马来酸曲美布汀(TM)对寒冷束缚应激(CRS)大鼠结肠平滑肌细胞大电导钙激活的钾通道(BKCa)及雷诺定受体(RyR) mRNA和蛋白表达的影响.方法 24只Wistar大鼠均分为CRS组、CRS+TM组和对照组,CRS组大鼠每日按6 ml/kg予0.9％ NaCl溶液灌胃,CRS+TM组大鼠每日按6 ml/kg予15 g/L TM灌胃,置铁丝笼中,在4℃环境限制活动2h,连续5d.对照组大鼠按6 ml/kg予0.9％NaCl溶液灌胃1次,不予应激.观察各组大鼠排便量和粪便性状改变,分离结肠平滑肌组织进行RT-PCR和Western印迹分析测定BKCa以及RyR2通道mRNA和蛋白的表达.结果 CRS组大鼠排便颗粒中位数为6,对照组为1,CRS+ TM组为5,肉眼观察CRS组及CRS+ TM组大鼠粪便外观较对照组稀,含水量多.与对照组比较,CRS组及CRS+ TM组大鼠结肠组织无明显病理学改变.对照组与CRS组大鼠结肠平滑肌细胞BKCa和RyR2 mRNA表达无明显差异,CRS+TM组BKCa mRNA表达较对照组上调1.45倍,CRS+ TM组RyR2 mRNA较对照组上调1.32倍.与对照组相比,CRS组大鼠结肠平滑肌细胞BKCa和RyR2蛋白表达无明显差异,CRS+TM组BKCa蛋白较对照组表达上调1.39倍,未见RyR2蛋白表达条带.结论 TM对CRS大鼠结肠平滑肌收缩的影响可能是通过大鼠结肠平滑肌细胞BKCa通道mRNA、蛋白表达上调和RyR mRNA表达上调而起作用.     

饮食限制联合维生素D对Beclin1表达的诱导作用

目的探讨维生素D联合饮食限制诱导细胞自噬的发生以及对自噬相关蛋白Beclin1表达的影响。方法将18月老龄大鼠随机分为对照组、维生素D组、饮食限制组、维生素D联合饮食限食组,喂养6个月后,透视电镜观察大鼠肝脏细胞中的自噬体,免疫组化检测大鼠肾皮质细胞中自噬相关蛋白Beclin1的表达情况。结果电镜下维生素D组、饮食限制组、维生素D联合饮食限制组均出现自噬细胞形态学改变。免疫组化显示,与对照组相比,维生素D组、饮食限制组、维生素D联合饮食限制组Beclin1蛋白表达的比值均明显提高(P0.01),且维生素D联合饮食限制组Beclin1蛋白的表达高于维生素D组、饮食限制组(P0.01)。结论两种不同的检测细胞自噬方法证实,维生素D以及维生素D联合饮食限制均可增强细胞发生自体吞噬,且维生素D联合饮食限制比单独维生素D或者单独饮食限制引起自噬的程度更高,提示维生素D与饮食限制可能通过不同的信号转导途径来诱导细胞自噬的发生。     

动脉粥样硬化大鼠动脉组织中组织蛋白酶D的表达

目的用基因芯片技术研究动脉粥样硬化大鼠动脉组织中差异表达的基因,以分析组织蛋白酶D基因表达变化。方法以高脂饲料喂养加维生素D3腹腔注射建立大鼠动脉粥样硬化模型,测定血清总胆固醇及甘油三酯;病理学观察HE及油红O染色的冠状动脉及主动脉;提取主动脉RNA作基因芯片检查,用免疫荧光及免疫印迹法检测组织蛋白酶D在动脉中表达的分布情况及表达水平。结果14周时模型组总胆固醇和甘油三酯较对照组明显升高(P均<0.01);病理学观察发现模型组形成纤维增生性动脉粥样硬化病变;基因芯片结果显示与对照组比较,模型组组织蛋白酶基因表达上调,组织蛋白酶D表达上调,R值(Cy3/Cy5)为2.14(P<0.01);免疫荧光检测发现模型组中组织蛋白酶D表达主要分布在动脉内膜、中膜;免疫印迹法检测动脉中组织蛋白酶D蛋白显示模型组表达较对照组增加(P<0.05)。结论组织蛋白酶及其内源性抑制剂的失衡可能是导致动脉粥样硬化的因素之一,组织蛋白酶D可能参与了血管重塑及细胞凋亡从而促进动脉粥样硬化的发展。     

小剂量IL-17A对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用

目的探讨小剂量白细胞介素(IL)-17A对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法雄性SD大鼠45只,随机分为正常对照组、糖尿病肾病(DN)组及IL-17A组。DN组及IL-17A组均以高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素建立DN大鼠模型。IL-17A组给予小剂量IL-17A重组蛋白,连续给药12 w后,下腔静脉取血,检测糖化血红蛋白(Hb A1c)、肌酐、尿素氮等;水平代谢笼收集各组大鼠24 h尿液,测定大鼠24 h尿蛋白;实时荧光定量PCR检测肾组织炎症因子表达;Western印迹测定IL-17A蛋白表达情况。结果 DN组及IL-17A组尿蛋白、Hb A1c、肌酐、尿素氮水平均显著高于正常对照组,IL-17A组均显著低于DN组(均P<0.05)。DN组在注射IL-17A后促炎因子表达显著减少,抑制性炎症因子表达显著降低。DN模型大鼠IL-17A蛋白显著减少。结论 IL-17A具有改善DN大鼠肾功能作用,并有可能逆转DN,是治疗DN的有效靶点。     

地塞米松对哮喘大鼠气道重建、肥大细胞及IL-10的影响

目的观察地塞米松对哮喘大鼠模型气道重建和肺组织肥大细胞、IL-10的影响,探讨地塞米松在气道炎症和气道重塑中的作用机制,为临床治疗提供依据。方法采用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型,30只SD大鼠随机分为3组,正常对照组（A）、哮喘组（B）、地塞米松干预组（C）,每组10只。对肺组织切片行苏木精-伊红（HE）染色观察气道重塑情况。采用免疫组化和图像分析技术测定各组大鼠肺组织肥大细胞、IL-10的表达。结果哮喘组动物出现管壁增厚、平滑肌增生、黏液分泌增加等气道重塑的特征性改变,免疫组化染色显示气道各层细胞及炎性细胞均有IL-10表达减少。地塞米松干预组与哮喘组比较,炎症反应轻微,平滑肌增生、黏液分泌不明显,免疫组化染色显示各类细胞IL-10表达增高,与对照组比较差异有统计学意义。结论长期吸入变应原可导致气道重塑,肥大细胞、IL-10在气道重塑中发挥重要作用,地塞米松可通过抑制肥大细胞脱颗粒、增加IL-10表达发挥抑制炎症作用,进而缓解哮喘大鼠气道重塑的发生。     

Ghrelin对脓毒症小鼠肺脏炎症及JAK/STAT通路的影响

目的 通过观察生长素释放肽(ghrelin)对脓毒症小鼠肺组织炎症反应、肺组织janus激酶/信号转导通路和转录激活因子mRNA、STAT3蛋白及肺组织炎细胞因子肿瘤细胞α(TNF-α)、IL-6的表达水平的影响,探讨ghrelin在脓毒症炎症反应中的调节作用及可能的分子机制.方法 选用腹腔注射脂多糖的方法制作小鼠脓毒性模型:选取雌性小鼠54只,随机分为对照组、模型组及ghrelin干预组,对照组经腹腔注射等量生理盐水;模型组经腹腔内注射脂多糖(6 mg/kg);干预组先经腹腔注射ghrelin(200 μg/kg),30 min后再经腹腔注射脂多糖(6 mg/kg);各组分别于3、9、18h随机处死小鼠各6只,光镜下观察肺组织炎症改变;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检查肺组织STAT3mRNA的基因转录水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织STAT3、TNF-α、IL-6的表达量.结果 Ghrelin可抑制肺组织STAT3mRNA基因转录活性,从而降低STAT3蛋白表达、减少炎症因子TNF-α、IL-6的分泌(P值均＜0.05);改善脓毒症小鼠肺组织病理结构损伤(充血、水肿、炎症细胞浸润).结论 ghrelin可减轻脓毒症小鼠肺脏炎症反应,其作用机制可能与抑制了janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT通路)、下调TNF-α和IL-6的表达有关.     

1,25-二羟维生素D3对于哮喘大鼠及其肺泡巨噬细胞中VDUP1/TRX的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3（1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25（OH）2D3）对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fuluid,BALF）中维生素D上调蛋白1（vitamin D up-regulated protein 1,VDUP1）和硫氧还蛋白（thioredoxin,TRX）表达及气道炎症的影响。方法将28只Wistar大鼠随机分为4组,以卵白蛋白（ovalbumin,OVA）诱导哮喘发作,并给予1,25（OH）2D3和地塞米松干预,同时设对照组。测定BALF中IL-4和IL-10水平,细胞总数和肺组织病理变化。同时提取7只哮喘模型大鼠BALF中的巨噬细胞,体外给予1,25（OH）2D3干预。用逆转录-聚合酶链反应检测肺组织及BALF中巨噬细胞表达VDUP1和TRX的水平。结果 1,25（OH）2D3治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数和IL-4水平降低,IL-10水平增高。肺组织及肺泡巨噬细胞中VDUP1和TRX表达增加。结论给予哮喘大鼠1,25（OH）2D3可抑制气道炎症,增加TRX和VDUP1的表达,两者可作为哮喘氧化应激的监测指标。     

大鼠肺纤维化模型中NLRP3、IL-18表达及意义的探讨

目的观察博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中NLRP3、IL-18的表达水平,探讨其在肺纤维化发生、发展中的意义。方法将45只清洁级Wistar大鼠按随机数字表法分为健康对照组(N组)、博来霉素组(B组)、地塞米松治疗组(D组),每组大鼠各15只,B组及D组大鼠给予气管内注射博来霉素4mg/kg制作肺纤维化模型,N组给予相同体积生理盐水作为对照,D组大鼠于肺纤维化造模基础上第2天每日腹腔注射地塞米松3mg/kg,N、B组大鼠腹腔注射生理盐水作为对照。各组大鼠分别于造模后7、14、28天处死,HE染色评价肺组织病理形态学变化,碱水解法及酶联免疫吸附法分别测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)、NLRP3含量,RT-PCR法测定肺组织中IL-18mRNA表达量。结果 (1)HE染色示B、D组大鼠第7天肺间质和肺泡腔内可见大量炎细胞浸润,此后炎症随时间推移逐渐减轻,逐渐发展为晚期纤维化性变;B、D组HYP含量随时间推移逐渐升高,以28天为著,P0.05;(2)B、D组NLRP3、IL-18mRNA表达于第7天升高至最高点,后逐渐降低,至28天均高于N组,差异有统计学意义(P0.05);(3)D组NLRP3、IL-18mRNA表达在同一时间均低于B组,P0.05。结论 NLRP3、IL-18在大鼠肺纤维化发病早期起重要作用,可能参与了肺纤维化发生与发展。     

过氧化物酶增殖体激活受体γ辅助激活子-1α在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的探讨脓毒症肺损伤大鼠过氧化物酶增殖体激活受体γ辅助激活子-1α(PGC-1α)在急性肺损伤(ALI)发病中的作用。方法将54只SD大鼠随机分为9组:正常对照组(6只);假手术组3、6、12、24 h(各6只);盲肠结扎穿孔组3、6、12、24 h(各6只)。利用盲肠结扎穿孔手术复制大鼠急性肺损伤模型。HE染色观察大鼠肺组织病理情况;ELISA检测血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)表达变化;real-time PCR检测肺组织PGC-1αmRNA表达;Western blot检测肺组织PGC-1α蛋白表达情况。结果大鼠经盲肠结扎穿孔后,肺组织显示出血、肺泡塌陷、肺泡间隔增厚、肺间质水肿及大量炎症细胞浸润等肺部炎症的表现。与正常对照组比较,假手术组各时间点大鼠血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)、肺组织PGC-1αmRNA及蛋白表达水平均无统计学差异(P>0.05);盲肠结扎穿孔组各时间点血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)表达水平较正常对照组明显升高(P<0.05),且成时间效应关系;肺组织PGC-1αmRNA及蛋白表达水平较正常对照组明显降低(P<0.05),并随着术后时间的延长逐渐降低(P<0.05)。结论正常大鼠肺组织可表达PGC-1α,脓毒症肺损伤大鼠肺组织内PGC-1α的mRNA和蛋白表达水平下降,提示PGC-1α可能参与ALI的发生发展过程。     

白细胞介素-6抑制剂对银屑病模型大鼠背部皮肤组织的影响及作用机制

目的研究白细胞介素(IL)-6抑制剂对银屑病模型大鼠背部皮肤组织的影响及作用机制。方法选取30只SD健康大鼠,随机分为空白对照组、银屑病组和IL-6抑制剂组各10只,建立银屑病模型,建模成功后,IL-6抑制剂组大鼠腹腔注射5 mg/kg IL-6抑制剂,空白对照组、银屑病组腹腔注射等剂量的生理盐水。在对大鼠最后一次给药后2 d观察大鼠变化,采集大鼠背部皮肤组织行苏木素-伊红(HE)染色、背部皮损表皮厚度检测、Baker病理评分、炎性细胞计数及检测背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6受体/Janus激酶/信号转导和转录激活因子(IL-6R/JAK/STAT3)通路因子mRNA表达量。结果银屑病组、IL-6抑制剂组大鼠Baker评分、炎症细胞浸润数、表皮厚度、背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6R、JAK1、STAT3、CD80、CCL5mRNA表达量均显著高于空白对照组(P<0.05);IL-6抑制剂组大鼠Baker评分、炎症细胞浸润数、表皮厚度、背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6R、JAK1、STAT3、CD80、CCL5mRNA表达量均显著低于银屑病组(P<0.05)。结论 IL-6抑制剂可有效抑制银屑病大鼠背部皮肤组织角质增殖、炎症反应,其作用机制可能与调控IL-6R/JAK/STAT3通路转导因子有关。     

T淋巴细胞介导急性心肌梗死后心肌IL-6的表达

目的:探讨心肌梗死后介导自身免疫应答和细胞因子分泌的细胞类型。方法:体外分离同源大鼠T细胞和树突状细胞,与大鼠心肌肌球蛋白共培养,使T细胞活化,然后将活化的、未活化的T细胞分别过继转输给同源大鼠(转输组、对照组),观察3d、1周和4周后心肌的病理改变,分别采用免疫组织化学和RT-PCR的方法检测各时间点白细胞介素-6(IL-6)蛋白和mRNA的表达。结果:转输组大鼠心肌有不同程度地炎性细胞浸润,主要为淋巴细胞,偶见心肌水肿、变性及坏死,炎性细胞浸润以1周最明显,呈弥漫性;对照组大鼠心肌未见类似病理改变。转输组IL-6mRNA和蛋白表达在转输后3d开始升高,1周末达到高峰,4周末开始下降,1周末和4周末心肌组织的IL-6mRNA和蛋白表达均明显高于对照组(P<0·01)。结论:T细胞介导心肌自身免疫性炎症的发生,同时也促使心肌细胞致炎因子IL-6的表达,共同导致急性心肌梗死后心肌细胞的损伤。     

高糖通过白介素1β促进1型糖尿病大鼠原代主动脉平滑肌细胞迁移参与内膜新生的研究

目的探讨在动脉损伤后内膜新生中高糖促进血管平滑肌迁移的机制。方法采用组织块贴壁法分离大鼠原代主动脉平滑肌细胞,免疫荧光染色法进行细胞鉴定。大鼠原代主动脉平滑肌细胞分为正常对照组(Con)、高糖组(HG)、HG+半胱氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)抑制剂组(HG+VX-765)、Con+Caspase-1抑制剂组(VX-765)。大鼠随机分别为假手术组(C)、正常颈动脉球囊损伤组(I)、糖尿病假手术组(DM)、糖尿病球囊损伤组(DMI)。RT-PCR检测含NLR家族pyrin域蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、IL-1βmRNA水平表达。术后24 h并2周后免疫荧光染色法检测IL-1β表达,HE染色检测血管损伤后内膜新生情况,ELISA法检测IL-1β水平,划痕实验测定平滑肌细胞迁移能力。结果分离的细胞经免疫荧光染色确定为大鼠原代主动脉平滑细胞。与Con组比较,HG组IL-1β水平、细胞迁移率、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1βmRNA表达水平升高(P0.05或P0.01)。与HG组比较,HG+VX-765组IL-1β水平、细胞迁移率降低(P0.05或P0.01)。24 h和2周后,与C组比较,DM组IL-1β表达水平、内膜面积/中膜面积升高(P0.05或P0.01);与I组比较,DMI组IL-1β表达升高(P0.01)。结论高糖诱导细胞焦亡分泌的IL-1β促进大鼠原代主动脉平滑肌细胞迁移,参与动脉损伤后的内膜新生过程。     

Cyclin B1基因在大鼠肝癌组织中的表达及意义

目的 探讨Cyclin B1基因在大鼠肝癌组织中的表达及意义.方法 实验组为15只腹腔注射黄曲霉毒素B1诱发形成肝癌的大鼠,在诱癌第13、33、53周行肝活检取肝组织,第73周处死全部大鼠取肝组织.采用Q-PCR、Western blot和免疫组化方法检测其肝组织中Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达.对照组为10只腹腔注射等量溶媒DMSO大鼠,研究方法同上.结果 实验组第73周的肝组织Cyclin B1 mRNA表达明显高于其他时间点和对照组（P均＜0.05）.实验组第53、73周的肝组织Cyclin B1蛋白表达阳性率高于其他时间点和对照组,第53、73周表达比较有统计学差异（P均＜0.05）.结论 在肝癌发生过程中,Cyclin B1表达随肝癌形成而升高,且在肝癌组织中表达最高,Cyclin B1基因可能是参与肝癌发生的关键基因之一.     

姜黄素对COPD大鼠IL-1β和IL-17的影响

目的 探讨姜黄素干预对COPD大鼠IL-1β和IL-17水平的影响.方法 将雄性SD大鼠38只随机分为正常对照组、COPD模型组、姜黄素干预组和溶剂对照组,采用香烟烟熏加气管内注射脂多糖方法建立COPD大鼠模型,并按照分组情况对大鼠进行干预.干预结束后计数BALF中的炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量,HE染色观察大鼠气道炎症及肺气肿程度,酶联免疫吸附测定检测血清和BALF中IL-1β、IL-17含量,实时荧光定量聚合酶链式反应检测肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平.结果 与正常对照组比较,COPD模型组BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量均显著升高(P＜0.05);姜黄素干预组大鼠BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量较COPD模型组降低(P＜0.05).组织病理学显示COPD模型组大鼠小气道周围大量炎症细胞聚集、肺泡腔扩张,姜黄素干预可减轻小气道周围炎症细胞聚集及肺泡腔扩张.与正常对照组相比,COPD模型组大鼠血清和BALF中IL-1β、IL-17含量升高,肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平上调,差异有统计学意义(P＜0.05).姜黄素干预后COPD大鼠血清和BALF中IL-1β、IL-17含量下降,肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平降低,与COPD模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 姜黄素对COPD具有保护作用,其机制可能与抑制IL-1β、IL-17炎症因子释放有关.