细胞色素c在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞凋亡中的作用

目的观察年龄相关性白内障晶状体上皮细胞细胞色素c表达情况，探讨其与晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法取手术中取下的年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜。采用免疫组织化学染色法（SP）检测晶状体上皮细胞细胞色素c表达情况，TUNEL法检测晶状体上皮细胞凋亡情况，并分析与细胞色素c表达的关系。透射电镜观察分析晶状体上皮细胞超微结构。结果正常人晶状体上皮细胞可见细胞色素c均匀胞浆低表达。年龄相关性白内障组在细胞色素c胞浆低表达细胞中，可见散在分布的胞浆高表达细胞。TUNEL阳性细胞仅存在于白内障组。细胞色素c表达与凋亡指数成正相关（P〈0．01）。电镜下可见染色质边集、凋亡小体和线粒体肿胀等特征。结论晶状体上皮细胞凋亡可能参与年龄相关性白内障的形成，线粒体细胞色素c凋亡途径可能在白内障的发生发展中起重要作用。     

老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及相关基因蛋白的表达

目的 探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法透射电镜下观察老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构；Tunel法检测凋亡细胞百分率；并对其晶状体上皮细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳；免疫组化法检测P53、bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达。结果 透射电镜下发现老年性白内障晶状体上皮细胞中有凋亡细胞；凋亡细胞百分率为8．4％～37．8％，琼脂糖凝胶电泳出现梯状条带；P53在老年白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16．9％～19．1％，bcl-2无蛋白表达。结论 老年性白内障的发生可能与其晶状体上皮细胞凋亡有关。     

SIRT1基因在糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞表达的初步研究

目的:探讨SIRT1基因在糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的表达.方法:选取2012-01/2014-10来我院治疗的糖尿病性白内障患者、年龄相关性白内障患者和外伤性白内障患者各20例,采用RT-PCR法检测各组患者晶状体上皮细胞中SIRT1基因含量,Western blot法检测晶状体上皮细胞中SIRT1蛋白含量,TUNEL法检测晶状体上皮细胞的凋亡率.结果:RT-PCR检测结果显示,外伤性白内障患者组SIRT1 mRNA相对含量最高为1.000±0.078,其次为年龄相关性白内障患者组为0.427±0.067,糖尿病性白内障组为0.389±0.112,与外伤性白内障组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot检测显示,外伤性白内障患者晶状体上皮细胞中SIRT1蛋白的表达量最高,其次是年龄相关性白内障组,糖尿病性白内障组SIRT1蛋白的表达量最低;TUNEL法检测结果显示,外伤性白内障组和年龄相关性白内障组患者LECs细胞凋亡率分别为(4.5±2.3)％和(8.7±4.1)％,差异无统计学意义;而糖尿病性白内障组LECs凋亡率为(24.3±6.1)％,与外伤性白内障组及年龄相关性白内障组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:糖尿病性白内障患者晶体上皮细胞中SIRT1基因及蛋白表达下降,提示该基因参与了糖尿病性白内障的发生,这为我们今后进一步的研究提供了可靠的理论依据.探索调节SIRT1基因在晶状体上皮细胞中表达的有效途径,将为糖尿病性白内障的早期干预治疗提供新的思路.     

p53和 bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达

目的：研究p53,bcl-2基因在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达，探讨p53,bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡中的作用。方法：应用免疫组织化学方法，对30例老年性白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞进行p53,bcl-2基因蛋白表达的检测，计算p53,bcl-2基因蛋白表达阳性细胞百分率，结果：p53在正常晶状体上皮细胞中无蛋白表达，在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16．9％－19．1％，bcl-2在2组中均无蛋白表达，结论：p53在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白高表达，p53可能促进了老年性白内障中晶状体上皮细胞的凋亡。     

老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡的DNA片段分析及TUNEL检测

目的 探讨老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡的生化特征。方法 用ＤＮＡ片段分析及ＴＵＮＥＬ法共检测３１例老年性白内障患者晶状体上皮细胞凋亡。结果 ＤＮＡ片段分析显示,老年性白内障患者晶状体上皮细胞有ＤＮＡ“梯状”图谱,而健康成年人晶状体上皮细胞未见ＤＮＡ断裂现象;ＴＵＮＥＬ检测发现,老年性白内障患者晶本上皮细胞中有凋亡细胞,而健康成年人晶状体上皮中无明显的凋亡细胞。结论 老年性白内障发生与晶状体上皮细     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的超微结构研究

目的:研究年龄相关性白内障晶状体上皮的超微结构变化。方法:用日本产HU-12A型电镜对8例年龄相关性白内障及3例正常透明晶状体上皮细胞的超微结构进行观察。结果:7例年龄相关性白内障晶状体前囊上皮细胞形状不规则,相邻细胞间以许多复杂的指状突超紧密镶嵌,部分上皮细胞内水肿,细胞间隙亦水肿呈较大的空泡状,细胞内线粒体等细胞器肿胀,个别区域上皮细胞坏死脱落,1例年龄相关性白内障晶状体前囊上皮细胞体积固缩,细胞核染色质分裂并出现凝聚的凋亡小体。结论:晶状体上皮细胞超微结构的病理形态学改变是年龄相关性白内障发生发展的重要原因之一。     

miR-181调控人晶状体上皮细胞凋亡的机制研究

目的：探讨 miR-181在白内障晶状体组织中的表达情况,及其对人晶状体上皮细胞凋亡的调控机制。
　　方法：利用Real time q-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和人晶状体上皮细胞凋亡模型中miR-181的表达情况;利用Lipofectamine 2000瞬时转染miR-181 mimic 和 inhibitor 调节人晶状体上皮细胞中miR-181的表达,利用Real time q-PCR方法验证转染效率,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。
　　结果：与对照组相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组和人晶状体上皮细胞凋亡模型组,miR-181的表达显著升高;miR-181 mimic转染组,miR-181的表达显著升高,细胞凋亡率显著升高;miR-181 inhibitor转染组, miR-181的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。
　　结论：miR-181在年龄相关性白内障晶状体组织中呈高表达,miR-181能够促进人晶状体上皮细胞凋亡,从而可能在年龄相关性白内障的发病过程中发挥一定作用,miR-181可能成为白内障非手术治疗的一种新途径,但具体机制有待进一步研究。     

白内障晶状体上皮细胞端粒酶与凋亡增龄性研究

目的 探讨白内障晶状体上皮细胞端粒酶活性的表达随着年龄的增长与凋亡的关系,及其在白内障发生发展中的作用机制.方法 选取行超声乳化白内障手术的患者91例91眼,取晶状体前囊膜.根据年龄分为三组,即Ⅰ组为≤30岁的患者11例,Ⅱ组为31-60岁的患者30例,Ⅲ组为≥61岁的患者50例.采用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法(the terminal deoxynueleotidyl transferass (TDT)-medinted dUTP nick-end lsbeling(TUNEL)检测三个不同年龄组白内障患者晶状体上皮细胞的凋亡细胞.采用TRAP-ELISA法检测三个不同年龄组白内障患者晶状体上皮细胞的端粒酶活性.结果 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组白内障晶状体上皮细胞凋亡百分率分别0%、13%、23%.三组白内障晶状体上皮细胞中端粒酶活性随着年龄增高明显降低.各项指标经统计学分析具有统计学意义(P＜0.05).结论 随着年龄的增长白内障晶状体上皮细胞端粒酶的活性逐渐降低,凋亡逐渐增强,端粒酶活性的降低促进了晶状体上皮的凋亡,是引起发生白内障的一个重要机制.     

MRG15的克隆及其在正常和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达

目的克隆死亡因子相关基因15(MRG15)并研究其在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达，比较二者的差异。方法用改良的消减杂交法克隆死亡因子相关基因15，地高辛标记MRG15cDNA片断制作探针，用原位杂交法研究其在晶状体前囊膜切片上的表达，并作统计学处理。结果克隆到了死亡因子相关基因15的cDNA片断，长约639bp，死亡因子相关基因15在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达；经统计分析，其在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达高于其在正常晶状体上皮细胞中的表达。结论MRG15在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达；在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中，其表达较正常晶状体增高，提示其可能在白内障的发生中起重要作用。     

人及小鼠白内障晶状体上皮细胞凋亡的超微结构

目的 探讨人老年性白内障及小鼠先天性白内障与其晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法 用透射电镜观察４例老年性白内障患者及２例先天性白内障小鼠晶状体上皮细胞凋亡的超微结构,并分别与同类正常晶状体上皮细胞超微结构进行比较。结果 老年性白内障患者及先天性白内障小鼠晶状体上皮细胞中均可见凋亡细胞,而正常晶状体未见凋亡细胞。结论 人老年性白内障及小鼠先天性白内障的发生均与其晶体上皮细胞的凋亡有关。     

老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构改变

目的 观察正常人,老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构,探讨细胞凋亡在白内障发生中的作用。方法 收集正常人、老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体前囊膜送透射电镜扫描,取老年性白内障和糖尿病性白内障前囊膜各15例,用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法,检测晶状体上皮的凋亡细胞。结果 老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构在形态上为扁平状,胞浆出现空泡变性,胞核出现固缩,染色质边聚,浓缩等改变。糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的胞浆空泡变性更加严重。在光镜下老年性和糖尿病性白内障的晶状体上皮均有凋亡细胞。结论 老年性白内障和糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮的细胞凋亡密切相关。     

老年性白内障晶状体上皮细胞超微结构观察

目的 研究老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构,探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡关系。方法 用透射电镜对20例老年白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞的超微结构进行观察,拍照。结果 老年白内障组晶状体上皮细胞中发现了典型的凋亡小体,正常对照组未见凋亡细胞。结论 老年性白内障的发生与晶体上皮细胞的凋亡有关。     

紫外线诱导晶状体上皮细胞凋亡的实验研究

目的 探讨紫外线对体外培养的牛眼晶状体上皮细胞凋亡作用。方法 以TUNEL技术和DNA片段分析法研究紫外线照射牛晶状体后不同时间晶状体上皮细胞发生凋亡的情况。结果 经紫外线照射后,TUNEL法显示,照射组晶状体上皮细胞中有凋亡细胞,对照组晶状体上皮细胞中无明显的凋亡细胞;DNA片段分析发现照射组晶状体上皮细胞有DNA“梯状”图谱,而对照组晶状体上皮细胞未见DNA断裂现象。结论 紫外线可诱导牛晶状体上皮细胞发生凋亡。     

Different Sensitivities to Apoptotic Induction by Camptothecin between Normal and Senescent Lens Epithelial Cells

PURPOSE: To investigate whether normal and senescent lens epithelial cells have different defense abilities to apoptotic induction factor in vitro. METHODS: Rabbit lens epithelial cells were cultured, passed. When reaching confluence, cells from the first and seventh passage were stained by x-gal staining to detect cell senescence. Cell apoptosis was detected by TUNEL(Roche). 10 micromol/L camptothecin was used to induce cell apoptosis from the lens epithelial cells of the first and seventh passage to distinguish different sensitivities to apoptotic induction factor between normal and senescent cells. RESULTS: The senescent cells (41.17% +/- 5.24%) were detected in the lens epithelial cell culture of the seventh passage, which are higher than those of the first passage (0.98% +/- 0.39%). There was no apoptotic cell detected in the cell cultures undisturbed. Exposure of the first passage cells to camptothecin resulted in death of approximately 23.87% +/- 3.45% of the cells during a 36 hour exposure period. In contrast, significantly more lens epithelial cells died through the apoptosis (38.29% +/- 4.01%) from the seventh passage. CONCLUSION: Senescent cells increased with cell passage. Senescence lens epithelial cells do not undergo apoptosis if they were not disturbed. But the vulnerabilities to apoptotic induction between health and senescence cells were different.     

牛磺酸抑制过氧化氢诱发牛晶状体上皮细胞凋亡的实验研究

观察牛磺酸对对过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱发牛晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用。方法采用牛晶状体器官培养及ＤＮＡ缺口末端原位标记法检测牛磺酸对Ｈ２Ｏ２诱发的牛晶状体上皮凋亡细胞数量的影响,并进行相关比较及统计学分析。结果晶状体上皮细胞凋亡发生于晶状体混浊之前;牛磺酸可明显抑制Ｈ２Ｏ２所致的牛晶状体上皮细胞凋亡。