茶碱对培养的牛眼小梁细胞骨架及细胞间黏附的影响

目的 观察茶碱对培养的牛眼小梁细胞的增殖、细胞骨架、细胞间黏附的影响，探讨其降眼压机制。方法 组织块法培养牛眼小梁细胞。不同浓度的茶碱(1、10、50mmol／L)分别作用4h、8h，免疫细胞化学法观察小梁细胞微丝及微管的改变，MTT法观察小梁细胞的增殖。ELISA法检测不同浓度的茶碱作用4h后连接素(β-catenin)的相对表达量。结果 茶碱作用8h抑制细胞增殖。茶碱明显改变细胞形态、微管及微丝染色浓集，变化程度与药物浓度及作用时间有关。茶碱降低连接素的表达量。结论 茶碱抑制小梁细胞增殖，改变细胞骨架，降低细胞间黏附，提示茶碱可能通过影响细胞骨架及细胞间黏附减少房水流出阻力从而降低眼压。     

纤维连接蛋白HepⅡ功能域作用于体外培养的人眼小梁细胞的研究

目的 探讨纤维连接蛋白Hep Ⅱ功能域对体外培养的人眼小梁细胞的作用.方法 对照实验研究.在体外培养的人眼小梁细胞中加入纤维连接蛋白HepⅡ功能域片段,孵育18、24 h,通过光镜与电镜观察小梁细胞的形态学变化,同时应用免疫荧光染色观察纤维连接蛋白HepⅡ功能域对体外培养的人眼小梁细胞肌动蛋白、纽蛋白、β-连接蛋白的影响.结果 加入纤维连接蛋白HepⅡ功能域片段10～24 h,光镜下观察,可见小梁细胞逐渐发生形态学变化,表现为细胞收缩、变圆、彼此间分离;激光共聚焦显微镜下观察,呈红色细丝状着染的小梁细胞肌动蛋白染色减少;位于肌动蛋白两端绿色点、簇状着染的Vinculin染色明显减少;β-Catenin免疫荧光染色呈绿色点状,在沿细胞相连的胞膜处分布减少.电镜下观察,可见小梁细胞突起间缝隙增宽.加入纤维连接蛋白Hep Ⅱ功能域片段24 h,小梁细胞恢复至加入Hep Ⅱ功能域片段前的状态.结论 纤维连接蛋白Hep Ⅱ功能域能够可逆性的阻断人眼小梁细胞肌动蛋白及其细胞连接.通过信号转导并重组细胞骨架肌动蛋白及其细胞连接有可能成为重要的研究方向.     

人眼小梁细胞体外培养及生物学特性研究

目的:建立人眼小梁细胞培养方法并研究其生物学特性。方法:以体外组织块培养的方法获得培养的人小梁细胞,应用光镜、电镜观察细胞的形态学特征,并观察其免疫组化特性和细胞的生长曲线。结果:光镜下小梁细胞为扁平多角形、单层生长;电镜下细胞连接为点粘连和缝隙连接、细胞表面可见微绒毛、胞浆细胞器丰富;免疫组化染色对抗纤维连接蛋白(Anti—FN)、抗层粘连蛋白(Anti—LN)、抗神经元特异性烯醇化酶(Anti—NSE)单抗呈阳性,对抗第Ⅷ因子(Anti-ⅧFactor)单抗呈阴性;传代小梁细胞繁殖时间较长,10天后为平台期。结论:根据体外培养的小梁细胞的形态特点、生长特征、免疫组化特性可对其进行鉴定。人小梁细胞体外培养的成功,为在细胞和分子水平研究青光眼的发病机制提供了有利的条件。眼科学报 1996;12:64—69。     

白细胞介素-1α对培养的人眼小梁细胞吞噬功能的影响

目的观察白细胞介素-1α（IL-1α）对体外培养的人眼小梁细胞（HTM）吞噬功能的影响。方法取人眼小梁组织进行小梁细胞体外培养,取传3～5代的人眼小梁细胞,加入不同浓度的IL-1α的DMEM-F12培养液,用倒置相差显微镜、光镜、电镜观察细胞吞噬功能的变化。结果小梁细胞吞噬乳胶微球数与IL-1α浓度（F=3．603,P=0．046）和作用时间（F=15．846,P=0．005）均有相关性（F=18．069,P=0．000）。结论IL-1α可以直接损害体外培养的人眼小梁细胞吞噬功能,其吞噬程度与IL-1α作用时间和浓度相关。     

内源性大麻素AEA对体外培养的牛眼小梁细胞形态和细胞骨架的影响

目的:研究内源性大麻素(AEA)对体外培养牛眼小梁细胞形态和细胞骨架的影响,探讨大麻素在原发性开角性青光眼(POAG)中的降眼压的机制,为大麻素的眼部用药提供帮助。方法:原代培养的牛眼小梁细胞,经不同质量浓度的AEA作用后,于光学显微镜下观察小梁细胞形态的改变,免疫荧光染色后在荧光显微镜下观察肌动蛋白微丝束的形态改变。免疫组化(SABC法)对a-tubulin(微管蛋白)染色,结果以计算机图像分析系统分析,并统计学检验。结果:经AEA作用后的牛眼小梁细胞,细胞间隙扩大,细胞变圆,细胞立体感增强;肌动蛋白微丝纤维变稀疏,断裂,排列紊乱。各浓度组与对照组比较,微管蛋白的含量减少,其下调呈浓度依赖性。结论:大麻素可改变体外培养的小梁细胞的形态和细胞骨架,引起细胞内的微管蛋白含量的减少,有利于降低小梁网房水引流阻力。     

体外培养牛眼小梁细胞表达转化生长因子-β及其受体蛋白

从蛋白质水平了解体外培养牛眼小梁细胞是否表达转化生长因子β及其受体。方法采用Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ法对体外培养第３代牛眼小梁细胞进行ＴＧＦ－β１，ＴＧＦ－βＲ免疫组化的检测。结果小梁细胞ＴＧＦ－β，－β２和ＴＧＦ－βＲⅠ，ＲⅡ，ＲⅢ免疫组化染色的阳性信号分别位于胞浆内和胞膜上，阴性对照未见阳性信号。结论牛眼小梁细胞表达ＴＧＦ－β，ＴＧＦ－βＲ蛋白。较之猪眼小梁细胞，牛眼小梁细胞更适用于今后研究ＴＧ     

血管紧张素Ⅱ对体外培养的牛眼小梁细胞微管及微丝动力学影响的研究

目的 研究血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ)对体外培养的牛眼小梁细胞骨架的动力学影响,探讨AngⅡ对房水的调节作用及在青光眼发病机制中的意义。方法 （1）牛眼小梁细胞的体外培养,应用免疫组化方法（NSE,Ⅷ因子相关抗原染色）细胞鉴定,光学及电子透射显微镜对细胞进行形态学及生长特性的观察;（2）以含不同浓度AngⅡ-的培养液孵育小梁细胞12-24h,（终浓度分别是10^-5、10^-6、10^-7mol.L^-1)。免疫组化法（SABC）对α-smooth-actin、tubulin-α染色,结果以计算机图像分析系统分析,并统计学检验。结果 牛眼小梁细胞培养成功,成活率80%——100%,上皮型为主,AngⅡ产生明显的细胞收缩效应,actin是收缩的主要效应器。结论 体外培养牛眼小梁细胞技术是研究小梁细胞特性的重要实验技术,AngⅡ可以引起小梁细胞的浓度依赖性的收缩,提示Ang可能是房水排出途径的调节姻子之一,对眼压及青光眼的发生发展有一定的影响。     

体外培养人眼小梁细胞表达转化生长因子—β2

目的：了解体外培养人眼小梁细胞是否会表达转化生长因子－β2(Transforming growth factor-β2,TGF-β2)，以确定TGF-β2的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关。方法：一步法提取体外培养人眼的小梁细胞RNA，利用RT－PCR检测TGF－β2的m RNA, 用双链测序鉴定PCR产物，并用免疫组化SUPERVISION法检测TGF－β2蛋白的表达。结果：RT－PCR扩增得到的单一产物，其序列与已知序列完全一致。TGF－β2免疫组化染色呈阳性。结论：小梁细胞自身产生的TGF－β2，是小梁网局部微环境和房水中TGF－β2的来源之一，TGF－β2不仅通过旁分泌式，也可通过自分泌方式作用于小梁细胞。小梁细胞产生TGF－β2的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关，值得进一步研究。     

细胞因子对体外牛眼小梁细胞生成SPARC的调节

目的:了解房水中细胞因子对体外培养牛眼小梁细胞合成富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secretedprotein,acidicandrichincysteine,SPARC)的影响。方法:体外培养牛眼小梁细胞并传3代,应用免疫组化染色法验证SPARC存在于小梁细胞内,并将传3代的小梁细胞无血清培养24h后分别加入房水中的细胞因子bFGF,TGF-β,EGF及IGF-1,72h后提取细胞上清液,并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定SPARC的浓度。结果:细胞因子bFGF,TGF-β不影响小梁细胞对SPARC的合成,EGF和IGF-1分别减少和增加小梁细胞对SPARC的合成。结论:细胞因子可通过影响SPARC的生成而调节眼内压。     

肌动蛋白药物对小梁细胞的作用及对房水引流的影响

正常房水引流阻力主要来自于小梁、近管结缔组织和Schlemm管内壁细胞。细胞骨架肌动蛋白在调节细胞形态的稳定性、细胞与细胞、细胞与细胞基质间的附着连接方面起着重要作用。肌动蛋白药物能够引起小梁细胞细胞骨架的改变。蛋白激酶抑制剂、肌动蛋白降解剂等几类肌动蛋白药物均可作用于小梁细胞细胞骨架，影响房水引流，降低眼压．说明肌动蛋白药物可能成为一种有用的抗青光眼治疗药物。就肌动蛋白药物降眼压作用及其作用机制进行综述。     

角膜曲率的分析

目的：探讨我国人角膜曲率半径的正常值及不同性别、不同年龄的角膜曲率半径差异。方法：对10998只眼的角膜曲率进行检测，并按男、女10岁一组进行统计分析。结果：（1）K1为7.65mm,K2为7.71mm，平均K值为7.67mm。较眼科学正常值K:7.77mm短0.1mm。（2）K的平均值男性较女性的长0.1155mm。且女性各年龄段角膜曲率半径均男性的有不同程度的减短。（3）男女均随年龄的增长，角膜曲率半径大致呈递减趋势，即：角膜曲率半径与年龄成反比关系。（４）男女K1,K2之比，均随年龄增长而增长，即K1逐渐增长而增长，即　K1值逐渐增长，K2逐渐减短。结论：本文测定的角膜曲率较眼科文献中的提供的正常值短0.1mm，并且存在着年龄、性别上的差异。     

Analysis of some of the possible neonatal risk factors of development of retinopathy of prematurity

PURPOSE: The aim of the study was to evaluate some of the possible risk factors for retinopathy of prematurity (ROP) treated with laser photocoagulation or cryocoagulation. MATERIAL AND METHODS: The study comprised 71 preterm infants with ROP needing treatment and 118 prematures without ROP or with ROP requiring no treatment, as a control group. All infants were born with gestational age < or = 32 weeks and birth weight < or = 1500g. The perinatal variables, including some of clinical data, the length of mechanical ventilation as well as continous positive airway pressure (CPAP), duration of total parenteral nutrition and some of laboratory data were analyzed, to evaluate their correlation with the development of ROP. RESULTS: Gestational age before 28 weeks (OR = 5.11), episodes of convulsiones (OR = 2.15), mechanical ventilation for more than 20 days (OR = 5.86) and > 30 days (OR = 7.47), CPAP for more than 5 days (OR = 4.15) and > 10 days (OR = 2.84), total parenteral nutrition for more than 10 days (OR = 7.84) and > 20 days (OR = 9.02) and elevated peak of alanine aminotransferase (AIAT) levels (OR = 3.17) were significant risk factors for ROP requiring treatment. CONCLUSIONS: The opthalmic examination for retinopathy of prematurity requiring laser photocoagulation or cryocoagulation should be obligatory for prematures born < or = 32 weeks of gestational age, with birth weight < or = 1500 g.The frequency of the consecutive ophthalmic examinations depends on the severity of prematurity and on the presence and intensification of the risk factors for ROP.     

Treatment of retinal detachment of the course of retinopathy of prematurity

Cryo- and laser therapy of stage 3 have reduced, but not eliminated the occurrence of retinal detachment in stages 4a, 4b and 5 of ROP. In this disease the treatment of these stages is still the greatest challenge to the ophthalmologist. Therefore, the aim of this paper is to present our up-to-date possibilities of treatment of different kinds of retinal detachments in ROP, including segmental scleral buckling, encircling scleral buckling, scleral resection, vitrectomy and its modifications in ROP. Guidelines of surgery of retinal detachment in active stage 4 and 5 of retinopathy of prematurity have been described.     

亟待新型早产儿视网膜病变动物模型的问世

早产儿视网膜病变（ROP）病因和发病机制尚不完全清楚,制约了其有效防治和相关研究的深入开展。尽管氧诱导视网膜病变动物模型为探索ROP复杂的病因和发病机制发挥了重要作用,但特异性较差,与人类ROP临床本质存在一定差异。因此,有必要对现有动物模型进行改良或建立新动物模型。通过更新观念、在多学科交叉中寻求突破,融合更多ROP危险因素,并结合新兴的转基因技术以及完善模型评价系统,建立科学的实验研究平台,为更好地开展ROP防治研究奠定基础。