T、B淋巴细胞联合免疫缺陷对急性高眼压小鼠视网膜神经细胞的影响

目的研究T、B淋巴细胞联合缺陷对急性高眼压小鼠视网膜神经细胞的影响。方法选取重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠和野生型C57BL／6小鼠各16只。2种小鼠分别随机取6只不做任何处理作为正常对照组,剩余10只作为模型组。采用前房穿刺的方法建立缺血一再灌注模型,每只小鼠取右眼为实验眼,左眼为模型对照眼。通过荧光金逆行标记技术,观察并计数再灌注后21d存活的视网膜神经节细胞（RGCs）;同时进行视网膜切片苏木精一伊红染色,观察再灌注后21d视网膜形态并测量内核层厚度。结果正常对照组SCID小鼠和C57BL／6小鼠的RGCs形态和数量、视网膜结构及厚度均无明显差异。视网膜缺血一再灌注损伤后21d,SCID小鼠RGCs的存活率为91％±5％,C57BL／6小鼠RGCs的存活率为78％±5％,二者比较差异有统计学意义（P=0．003）;SCID小鼠实验眼内核层厚度为（33．52±2．13）μm,模型对照眼为（34．06±3．00）μm,二者比较差异无统计学意义（P〉0．05）;C57BL／6小鼠实验眼内核层厚度为（22．44±1．70）μm,模型对照眼为（31．06±3．75）μm,二者比较差异有统计学意义（P=0．004）。结论急性高眼压模型中,T、B淋巴细胞联合免疫缺陷小鼠RGCs的存活率较高,视网膜损伤明显轻于野生型C57BL／6小鼠。     

频域光学相干断层扫描对C57BL／6小鼠及色素兔眼前后节结构特点的活体观察

背景频域光学相干断层扫描（SD—OCT）可进行活体组织的测量。目前SD—OCT对人眼活体组织测量的研究已有较多报道,但对实验动物眼的活体测量结果少有研究。目的应用SD—OCT活体观察正常C57BL／6小鼠的眼前节结构及色素兔的角膜、视盘及视网膜形态结构。方法利用轴向分辨率为5μm、扫描速度为26000次／s的SD—OCT对4只健康SPF级C57BL／6小鼠8只眼扩瞳前后进行眼前节形态学检查;利用SD—OCT对6只健康SPF级色素兔12只眼进行角膜及视盘、视网膜形态学检查。结果SD—OCT进行眼前节扫描,清晰可见C57BL／6小鼠角膜、虹膜及瞳孔区对应的晶状体结构,而且扩瞳前后晶状体结构形态发生明显改变,角膜SD—OCT扫描断层图与相应的切片图结构相对应,扩瞳前平均中央角膜厚度（CCT）为（96±9）μm,平均前房深度（ACD）为（460-e8）汕m,平均角膜水平直径（wTw）为（2．86±0．41）mm;扩瞳后CCT为（96±8）μm,ACD为（356±20）μm,wTW为（2．87±0．62）mm,C57BL／6小鼠扩瞳前后CCT、wTw测量值的比较差异均无统计学意义（t=0．478,P=0．647;t=0．737,P=0．485）;扩瞳后ACD较扩瞳前明显变浅,差异有统计学意义（t=-13．022,P〈0．001）。色素兔的SD—OCT眼前节检查均可见明显的角膜及视网膜分层,结构分别与相应的组织学切片相对应,扩瞳后角膜最薄点均值为（370±10）μm,视网膜厚度均值为（175：e4）Ixm,水平扫描后手动测量数据视盘深度均值为（1．35±0．51）mm,宽度均值为（4．52±0．82）mm。结论SD—OCT作为一种非接触、非侵人性检查,可清晰呈现C57BL／6小鼠眼前节结构及色素兔相应的角膜和视网膜结构,测量指标可用于实验研究过程中相应组织结构的活体观察。     

远视性弱视儿童视网膜神经纤维层厚度分析

目的研究远视性弱视儿童视盘周围视网膜神经纤维层（RNFL）厚度和黄斑中心凹厚度的变化,并与单眼弱视儿童对侧正常眼的检查结果进行比较。方法对32例（41只眼）远视性弱视儿童和18例（18只眼）单眼弱视儿童对侧正常眼进行光学相干断层扫描（OCT）检查,记录视盘周围RNFL的平均厚度和黄斑中心凹的视网膜厚度。结果远视性弱视组和对照组视盘周围RNFL的平均厚度分别为118.77±11.43μm和109.12±11.09μm,两者相比,差异有统计学意义;远视性弱视组和对照组黄斑中心凹处视网膜厚度分别为155.98±29.30μm和147.28±13.11μm,两组之间无明显差异（P=0.121）。将弱视分组发现,轻度弱视组和中度弱视组的视盘周围RNFL的平均厚度分别为118.42±10.95μm和119.12±12.19μm,,黄斑中心凹处视网膜厚度分别为154.29±34.23μm和157.75±23.81μm。两者分别与对照组比较,视盘周围RNFL厚度差异有统计学意义;黄斑中心凹视网膜厚度差异无统计学意义（P=0.777,0.629）。结论远视性弱视儿童视盘周围RNFL变厚,而黄斑视网膜厚度无明显变化。     

中央角膜厚度与视网膜神经纤维层厚度关系在正常眼和高眼压患者之间的比较研究

目的通过角膜中央厚度分组,观察正常眼和高眼压患者的角膜厚度和视网膜神经纤维层（RNFL）厚度之间的关系,并通过相干光断层扫描成像（OCT）和偏振激光扫描仪联合个体化角膜补偿技术（GDx-VCC）检查高眼压患者是否存在RNFL的异常,并分析OCT和GDx-VCC测得的RNFL厚度之间的相关性。方法对眼压高于21 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）的患者测量其中央角膜厚度（CCT）,根据CCT值对眼压进行校正。OCTOPUS-101自动视野仪检查及视盘观察入选高眼压组患者180只眼,均予OCT、GDx-VCC测量视盘一周视网膜神经纤维层厚度,另设正常人180只眼作为对照,获得数据进行统计学分析。结果高眼压患者的平均CCT为（536.14±35.99）（433～609）μm,正常组患者的平均CCT为（516.68±38.27）（368～598）μm。根据平均中央角膜厚度555μm分组,组间平均视网膜神经纤维层厚度（Average RNFL）、上方（S）、下方（I）的RNFL厚度以及其它参数有显著性差异,高眼压组CCT≤555μm的患者平均视网膜神经纤维层厚度要低于CCT〉555μm的患者。结论高眼压患者RNFL厚度GDx-VCC与OCT的检测值低于正常人。高眼压组CCT与平均视网膜神经纤维层厚度正相关。GDx-VCC与OCT有着较好的一致性。     

相干光断层扫描对孔源性视网膜脱离黄斑区视网膜组织结构观察初步研究

应用相干光断层扫描（ OCT）观察孔源性视网膜脱离术前出现的黄斑结构改变及黄斑区视网膜水肿的发生情况。方法对42例（42只眼）视网膜脱离患眼在术前进行OCT检查,观察视网膜脱离后出现的黄斑结构改变及黄斑区视网膜水肿的发生情况。根据术前视网膜脱离发生的时间分为A组（＜3个月）和B组（＞个3个月）。结果（1）OCT 检查黄斑部形态：黄斑未出现脱离有13只眼,黄斑部分或全部脱离有29只眼,其中黄斑囊样变6只眼,视网膜水肿14只眼,视网膜劈裂2只眼,黄斑前膜2只眼。（2）黄斑区视网膜厚度的改变：未出现黄斑脱离和已出现黄斑脱离的视网膜厚度为比较,结果两者之间具有统计学差异（ P ＜0．05）;A、B两组的黄斑区视网膜厚度比较,两者之间无有统计学差异（ P ＞0．05）。（3）视网膜水肿的发生率：A、B两组的视网膜水肿发生率比较,两组差异具有统计学意义（ P ＜0．05）。结论 OCT检查对孔源性视网膜脱离黄斑区视网膜组织结构研究有意义。     

两种相干光断层扫描仪测量兔眼视网膜厚度和组织学检查的对比研究

目的探讨兔眼视网膜厚度的国产与进口Stratus相干光断层扫描（OCT）仪检测与组织学检查值之间的相关性。设计实验研究。研究对象15只兔眼。方法先对兔眼的视网膜检测部位进行激光标记定位,分别用国产OSE－1800型OCT实验样机和Stratus OCT扫描并测量该部位的视网膜厚度值,再采用组织学方法检测相应部位的视网膜厚度值,应用SPSS11．5软件统计学对比分析。主要指标视网膜神经上皮层厚度值。结果OSE－1800 OCT测量兔眼视网膜神经上皮层厚度平均值为（122．5±7．4）μm,Stratus OCT测量值为（118．0±5．6）μm,组织学测量值为（116．3±8．8）μm,P=0．292;OSE－1800 OCT与Stratus OCT测量兔眼视网膜神经上皮层厚度的相关系数为0．914（P=0．000）,OSE－1800 OCT与组织学测量值的相关系数为0．872（P=0．001）,OSE－1800 OCT与组织学测量值的相关系数为0．833（P=0．002）。结论OSE－1800型OCT与Stratus OCT均能准确地定量测量兔眼视网膜厚度,它们与组织形态学测量值均有较好的相关性。（眼科,2009,18：239-242）     

糖尿病视网膜病变黄斑水肿的检查比较

目的运用裂隙灯前置镜、眼底荧光血管造影(FFA)及光学相干断层扫描术(OCT)对正常人及糖尿病视网膜病变黄斑水肿(DME)进行检测,客观定量分析糖尿病性黄斑水肿,以期早期发现糖尿病性黄斑水肿。方法正常对照组20例(40只眼)。回顾性分析我院2003年5月~2005年10月间非增生性糖尿病患者76例(114只眼),分别行裂隙灯前置镜、FFA和OCT检查。裂隙灯前置镜、FFA检查按常规进行,OCT测量以黄斑中心凹为中心的6mm直径区域内视网膜形态及厚度,对各种检查记录进行比较。结果所有眼均行裂隙灯前置镜检查,肯定有DME者75只眼(65%),怀疑有者9只眼(8%),肯定无者30只眼(18%)。FFA确诊有DME者89只眼(78%),未发现DME者25只眼(22%),其中黄斑局限性水肿占18%,弥漫性水肿占32%,弥漫性水肿伴囊样变性占28%。用OCT检查正常对照组黄斑中心凹6mm直径区域内视网膜平均厚度为(157±10)μm,在糖尿病组同样区域内无黄斑区视网膜增厚者10只眼(9%),有黄斑区视网膜增厚者104只眼(90%),局限性水肿组视网膜平均厚度为(257±43)μm,弥漫性水肿伴囊样变性组视网膜平均厚度为(379±122)μm。经比较,OCT检查的敏感性大大高于裂隙灯前置镜检查,FFA检查无DME组中有15只眼经OCT检查与正常对照组间比较,有显著性差异(P<0.05),另外局限视网膜病变荧光渗漏组、弥漫性荧光渗漏伴囊变组间两两比较也均有显著性差异(P<0.05)。结论对于糖尿病视网膜病变黄斑区水肿,OCT检查其敏感性大大高于裂隙灯前置镜检查,并随着病程的延长,黄斑水肿加重,视网膜厚度及形态改变明显。OCT与FFA检查相互配合,才能较准确评估DME的发生及发展。     

相干光断层扫描对532nm激光治疗糖尿病黄斑水肿的疗效观察

目的评价使用相干光断层扫描（OCT）对532 nm激光治疗糖尿病黄斑水肿的疗效进行观察的有效性。方法对糖尿病性有临床意义的黄斑部水肿病例46例（61只眼）,给予532 nm激光黄斑格栅样光凝、局灶光凝以及全视网膜光凝,在治疗前、治疗后3个月分别进行裸眼视力、眼底照相、荧光素眼底血管造影及OCT黄斑区视网膜厚度及视网膜容积等检查。比较光凝前后黄斑区视网膜厚度和视网膜容积的变化。结果在46例（61只眼）中,41只眼视力提高,17只眼不变,所有患者荧光素眼底血管造影显示黄斑区荧光渗漏不同程度减轻或消失,OCT显示光凝治疗前黄斑中心凹视网膜神经上皮厚度为（354.7±93.2）μm,光凝3个月后为（203.5±49.6）μm（P〈0.05）,光凝治疗前黄斑区6 mm直径神经上皮总体容积为（8.32±0.53）mm3,光凝3个月后为（7.24±0.41）mm3（P〈0.05）。结论 OCT可以对糖尿病性黄斑水肿进行定量的诊断,并且可以对激光光凝治疗后黄斑水肿的消退进行准确的测量和评价。     

屈光参差性弱视儿童视网膜光学相干断层成像研究

目的：应用视网膜光学相干断层成像方法（OCT）研究屈光参差性弱视儿童视网膜神经纤维层（RNFL）和黄斑中心凹厚度,探讨弱视的发病机制。方法对屈光参差性单眼弱视儿童38例进行OCT检查,据弱视眼屈光状态分为远视散光弱视组18例,单纯远视弱视组20例,对侧健眼为正常对照组。分析比较三组视盘周围RNFL厚度和黄斑中心凹厚度的差异。结果远视散光弱视组、单纯远视弱视组和正常对照组视盘周围RNFL厚度分别为115.77±13.42μm、111.34±10.30μm 和103.05±11.10μm,黄斑中心凹厚度分别为198.86±28.30μm、191.98±27.81μm,181.18±29.06μm。两弱视组分别与正常对照组、两弱视组组间比较视盘周围RNFL厚度及黄斑中心凹厚度,差异均有统计学意义,P＜0.05。结论屈光参差性弱视其弱视眼视盘周围RNFL厚度及黄斑中心凹厚度较对侧正常眼增厚,且远视散光弱视眼厚于单纯远视弱视眼。     

弱视眼与正常眼视网膜厚度的比较

目的 探讨成人弱视眼黄斑部视网膜厚度与正常眼的差异.方法 使用光学相干断层成像技术分别对弱视眼组（47例,65眼）与正常眼组（35例,70眼）黄斑区进行水平和垂直扫描,测定黄斑中心小凹和距离中心小凹鼻侧、上方、颞侧、下方700 μm的中心凹区及1000 μm黄斑旁中心凹区的视网膜厚度,所得数据进行t检验分析.结果 弱视眼组黄斑中心小凹及距离中心小凹鼻侧、上方、颞侧、下方700 μm视网膜厚度分别为（153.45±12.37）μm、（257.68±12.73）μm、（263.27±15.17）μm、（247.55±13.62）μm、（262.41±16.37）μm,正常眼组相应位置的视网膜厚度分别为（142.27±9.61）μm、（251.39±16.29）μm、（254.92±13.83）μm、（240.27±14.54）μm、（256.71±15.81）μm,弱视眼视网膜厚度较正常眼大,差异均有统计学意义（t=5.39、2.49、3.34、2.99、2.05,P〈0.05）;弱视眼距离中心小凹鼻侧、上方、颞侧、下方1000 μm视网膜厚度分别为（262.09±13.67）μm、（266.46±12.76）μm、（252.11±13.47）μm、（264.32±15.23）μm,正常眼组相应位置的视网膜厚度分别为（264.25±14.42）μm、（269.61±13.66）μm、（250.91±13.27）μm、（261.75±14.18）μm,两组相比差异无统计学意义（t=0.89、1.38、0.52、1.06,P〉0.05）.结论 弱视患者的黄斑中心小凹及中心凹处视网膜较正常服厚,弱视的发生可能与黄斑中心小凹及中心凹处视网膜异常有关.     

光相干断层扫描连续监测大鼠慢性高眼压模型视盘神经纤维厚度变化

目的:用光相干断层扫描（OCT）连续观测大鼠慢性高眼压模型视 盘神经纤维层（RNFL）厚度的变化。 方法:选用Wistar大鼠48只，随机分为3组，每组16只鼠32只眼 ，右眼为激光光凝眼，左眼为对照眼。用波长为532 nm氩激光在全麻下光凝右眼小梁网，引 起眼压 慢性、中等程度升高并观测眼压变化。眼压升高后第3、6、9周时用OCT做视盘线性扫描， 计算机自动测量视盘RNFL厚度，然后处死大鼠，将每组8只大鼠右眼做光学切片行组织学 测量RNFL厚度，将另外8只大鼠右眼做全视网膜铺片甲苯胺蓝染色，记数视网膜神经元细胞 密度，将结果进行比较分析。 结果:激光光凝后大鼠眼压缓慢、中等程 度升高，在第3、6、9 周时光凝眼眼压分别比对照眼眼压为显著升高，差异有统计学意义(P＜0.001)。 OCT检查结果显示在3、6、9周时大鼠光凝眼视盘RNFL厚度分别小于对照眼，差 异有统计学意义（P＜0.05）。处死大鼠后组织学测量RNFL厚度，在3、6、9周时，光 凝眼为（64.38±6.54）、（51.47±6.4）、（42.10±6.10）μm，对照眼厚度为（76.23±6.78）、（78.64±6.15）、（77.64±6.63）μm。将两种方法测 得RNF L厚度值进行回归分析，两者变化趋势一致，相关系数(R=0.932，P＜0.001)。全视网 膜铺片甲胺蓝染色结果显示两组视网膜神经元细胞（RGC）密度值差异有统计学意义（P＜0.0 5）。 结论:激光光凝大鼠小梁可以成功建立大鼠慢性高眼压模型；OCT对大鼠慢性高眼压模型视盘RNFL厚度的测量与 在光学显微镜下的测量值变化趋势一致，相关性好；OCT可以连续活体监测大鼠慢性高眼压 模型视盘神经纤维厚度变化，从而了解大鼠青光眼视神经病变的进展。     

N-甲基-N-亚硝基脲诱导大鼠视网膜变性早期基因表达谱分析

背景N-甲基-N-亚硝基脲（MNU）诱导的大鼠光感受器细胞凋亡可用于研究视网膜变性类疾病,但视网膜变性类疾病早期基因水平的研究尚未见报道。目的应用基因芯片技术研究MNU诱导的视网膜变性大鼠早期基因表达谱的变化。方法6周龄雌性SD大鼠50只分为正常组20只、12h模型组20只和24h模型组10只。模型组大鼠皮下注射MNU（40mg／kg）,正常组大鼠皮下注射等容量的生理盐水作为对照。分别于造模后12、12、24h处死正常组和12h模型组、24h模型组大鼠,大鼠右眼球进行常规视网膜组织病理学检查,正常组和12h模型组大鼠左眼的新鲜视网膜用基因芯片技术检测差异基因的表达,用荧光实时定量PCR（real—timePCR）法验证基因芯片技术检测出的差异表达率≥2．0的基因mRNA表达水平。结果全层视网膜厚度测量表明,24h模型组大鼠的厚度值明显低于正常组大鼠和12h模型组大鼠,差异均有统计学意义（t=9．926,P=0．002;t=2．736,P=0．028）。24h模型组大鼠外核层厚度值为（26．58±2．90）仙m,明显低于正常组的（38．11±1．01）μm和12h模型组的（35．07±3．03）μm,差异均有统计学意义（t=6．028,P=0．009;f=6．839,P=0．006）,正常组与12h模型组间大鼠全层视网膜厚度和外核层厚度值比较差异均无统计学意义（全层厚度：t=1．541,P=0．324;外核层厚度：t=2．040,P=0．134）。大鼠cDNA基因芯片技术检测结果表明,12h模型组大鼠全部17000个基因的表达谱中涉及生物过程的基因为142个,涉及分子功能的基因为94个,排除重复基因共有74个基因,差异表达基因主要涉及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路、Toll样受体通路和细胞凋亡通路。对基因芯片技术检测的差异表达率≥2．0的基因进行的real．timePCR定量分析表明,CCL2、,L—Jb、CCL3、c-fos、c—myc、p53和MMP3基因mRNA表达值与基因芯片技术检测的表达趋势一致。结论MNU诱导的视网膜变性早期有明显的基因表达改变。基因芯片检测的基因表达改变结果与real—timePCR定量分析结果一致。     

傅里叶频域光学相干断层成像技术在急慢性视神经损伤动物模型中的应用及评价

目的 评价傅里叶频域光学相干断层成像技术(FD-OCT)在大鼠急慢性视神经损伤动物模型中的应用及其与组织学研究的一致性.方法 利用经眶部视神经切断方法及巩膜上静脉烧灼方法建立大鼠急慢性视神经损伤动物模型.在急性视神经损伤模型中,于视神经切断术后即刻、3d、7d、10 d、14 d,分别用FD-OCT、视网膜神经节细胞(RGC)逆行标记、视神经纤维顺行标记方法检测视神经损伤状态.在慢性视神经损伤模型中,于巩膜上静脉烧灼术后即刻、1周、2周、3周、4周、5周、6周分别行上述方法检测.所有实验动物右眼为实验眼,左眼为对照眼.统计数据采用SPSS13.0软件进行分析,不同时间点的视网膜厚度比较采用重复测量资料的方差分析.结果 在急性视神经损伤动物模型中,视网膜厚度由术前(71.6±0.7)μm逐渐在术后3d、7d、10 d、14 d分别减薄至(71.0±0.9)μm、(67.4±1.7) μm、(58.6±2.2) μm、(54.6±1.2)μm,RGC数量在各时间点减少为对照组的(90.6±1.3)％、(53.1±3.8)％、(30.2±1.0)％、(11.3±4.6)％.在慢性视神经损伤动物模型中,视网膜厚度由术前(71.4±1.3) μm逐渐在术后1周、2周、3周、4周、5周、6周分别减薄至(70.4±1.1) μm、(65.9±1.2) μm、(59.9±1.0)μm、(57.3±2.4) μm、(54.7 ±2.9) μm、(51.3±2.6) μm,RGC数量在各时间点减少为对照组的(95.9±0.7)％、(91.9±0.9)％、(85.5±1.3)％、(82.3±0.9)％、(78.1±1.5)％、(74.5±1.4)％.两种动物模型中,视网膜厚度变薄及RGC数量减少与对照组相比差异均具有统计学意义.结论 FD-OCT对于评价慢性视神经损伤动物模型具有良好的应用价值,与组织学检测具有良好的一致性.(中国眼耳鼻喉科杂志,2012,12:20-25)     

FFA及OCT对STZ诱导的早期糖尿病大鼠视网膜的活体观察

背景 链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病SD大鼠是进行糖尿病视网膜病变（DR）发病机制研究常用的动物模型,以往主要用离体眼球进行观察,荧光素眼底血管造影（FFA）和光学相干断层扫描（OCT）技术可活体观察眼底,但目前FFA和OCT联合用于DR模型的观察尚未报道. 目的 将FFA和OCT联合用于STZ诱导的糖尿病SD大鼠的眼底检查,动态观察糖尿病模型早期阶段视网膜血管的渗漏及视网膜厚度的变化情况.方法 将60只清洁级SD大鼠按随机数字表法随机分为2个组,糖尿病组大鼠一次性腹腔内注射溶于柠檬酸钠溶液的STZ诱导糖尿病大鼠模型,对照组大鼠以同样的方式注射柠檬酸钠溶液.分别于造模前及造模成功后第4、8、12周在大鼠全身麻醉状态下采用FFA联合Spectralis HRA＋OCT（SD-OCT）动态观察和比较各组大鼠左眼视网膜血管的渗漏情况及视网膜厚度的变化情况.FFA检查时大鼠腹腔内注射质量分数20％荧光素钠（0.012 ml/g）并快速观察视盘及上方、下方、鼻侧、颞侧、鼻上、鼻下、颞上、颞下视网膜共9个方位的视网膜血管情况,OCT检查时测量距视盘上方、下方、鼻侧、颞侧2个视盘直径（DD）处的视网膜厚度.采用组织病理学检查测量视网膜厚度并与OCT测量结果进行比较.结果 FFA检查结果显示,大鼠的视盘位于视网膜中央,血管走行呈放射状.荧光素钠注射后60 s背景荧光消失,需重复注射.至造模成功后12周,各组大鼠视网膜均未发现荧光素渗漏.OCT结果显示,正常SD大鼠的OCT图像与人类相似,共分为十层,与组织病理学检测的结果相吻合.距视盘2 DD处上方、下方、鼻侧、颞侧4个方向视网膜厚度及内外界膜间的厚度比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.造模后4周、8周,与对照组大鼠比较,糖尿病组大鼠视网膜厚度无明显增加,差异均无统计学意义（P＞0.05）;造模后12周糖尿病组大鼠的视网膜厚度和内外界膜间厚度与对照组大鼠比较均明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）.OCT测量的视网膜厚度和内外界膜间量化分析结果与组织病理学结果并不完全一致. 结论 SD-OCT联合FFA有助于活体观察糖尿病大鼠视网膜厚度的动态变化,评估血管渗漏情况,为糖尿病的发病机制研究、防治及病情监测提供依据.     

正常人视盘周围不同直径的神经纤维层厚度测量

目的采用相干光断层扫描（OCT）观察正常人环绕视乳头周围2．4mm直径和3．4mm直径视网膜神经纤维层（RNFL）厚度,评价两者之间的差异及其临床意义。方法采用波兰哥白尼SOCT对正常人72例（118只眼）,分别进行以视乳头为中心2．4mm直径和3．4mm直径的圆周环形扫描,结果用RNFL thickness graph程序分析RNFL厚度。结果正常人常规2．4mm直径扫描的颞、上、鼻、下象限、平均RNFL厚度分别为（73．12±12．15）μm、（121．97±15．65）μm、（70．13±10．64）μm、（127．78±13．90）μm、（98．25±8．49）μm。正常人常规3．4mm直径扫描的颞、上、鼻、下象限、平均RNFL厚度分别为（54．92±8．93）μm、（96．50±11．51）μm、（55．81±8．89）μm、（97．28±9．98）μm、（76．13±6．18）μm。以年龄分组,在两种扫描直径下测得的各个象限RNFL数值及平均值比较,2．4mm直径扫描下上方,下方象限及平均数值有显著差异（P=0．024,P=O．035,P=0．024）。3．4mm直径扫描下上方象限数值有显著差异（P=0．012）。以性别和眼别分组,在两种扫描直径下测得的各个象限RNFL数值及平均值比较无统计学意义。2．4mm直径扫描下各象限与3．4mm直径扫描下各象限数值有非常显著的差异（P〈0．000）,2．4mm直径扫描下上下象限数值有非常显著性差异,鼻颞侧象限数值之间无统计学意义。3．4mm直径扫描下上下象限数值之间和鼻颞侧象限数值之间无统计学意义。结论OCT定量检测正常人RNFL厚度重复性好,采用不同的扫描直径可提供不同的RNFL厚度值,为临床诊断提供依据。     

人脐带间充质干细胞对大鼠视网膜光损伤的保护作用

目的　观察体外人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs）能否由视网膜匀浆上清液诱导分化为神经样细胞及移植到视网膜光损伤大鼠玻璃体内后存活、迁移、整合及分化的情况。方法　无菌条件下采集健康足月剖宫产胎儿的正常脐带组织，经2.5 g·L^-1胰蛋白酶和1 g·L^-1胶原酶消化、贴壁培养获得hUCMSCs。将CM-Dil标记的hUCMSCs注入光损伤大鼠玻璃体内，观察眼内整合分化情况，对正常对照组、光损伤组、PBS治疗组和hUCMSCs治疗组大鼠视网膜外核层层数和厚度进行对比分析。结果　hUCMSCs培养48 h后贴壁生长，呈长梭形，14 d后可见细胞融合成片。光损伤后大鼠视网膜外核层结构紊乱、细胞层数减少，厚度变薄，与正常对照组［（40.73±1.32）μm］相比，hUCMSCs治疗组［（31.28±1.79）μm］与PBS治疗组［（17.21±1.02）μm］及光损伤组［（12.68±1.42）μm］的视网膜外核层厚度均变薄（均为P<0.05）。与光损伤组相比，PBS治疗组和hUCMSCs治疗组视网膜外核层层数显著增加。结论　HUCMSCs移植到光损伤大鼠玻璃体内后能存活、迁移及整合到受损伤视网膜，hUCMSCs玻璃体内移植可抑制光损伤大鼠光感受器的凋亡。     

自动化分割算法分析RTVue100 OCT黄斑区视网膜各层厚度的重复性和再现性研究

背景视网膜各层厚度的检测和评估对多种眼科疾病的诊断、治疗及预后的监测至关重要,频域光学相干断层扫描（OCT）是目前常用的测量工具。以往的测量方法采用软件分析法,但关于视网膜自动分层软件可靠性的研究较少。目的评估自动化分割算法分析RTVue100 OCT测量黄斑区视网膜各层厚度的重复性和再现性。方法采用横断面研究设计,纳入正常受试者18人18眼,用RTVue100 OCT拍摄受试者右眼以黄斑中心凹为中心6mm扫描区的视网膜各层厚度图像,采用自动化分割算法将视网膜图像分割成神经纤维层（RNFL）、神经节细胞层和内丛状层（GCL＋IPL）、内核层（INL）、外丛状层（OPL）、外核层（ONL）、光感受器内节（IS）、光感受器外节（OS）、视网膜色素上皮（RPE）层,并用Matlab软件进行分析,通过将自动探测得到的相邻两条边界相对应的位置相减获得结果。每个受检眼先由一位操作者连续拍摄2次,然后由另一位操作者拍摄1次,采用组内相关系数（ICC）和重复性系数（COR）分析测得结果的重复性和再现性。结果RTVue100 OCT测量得到水平方向视网膜全层厚度为（303．22±14．10）μm,垂直方向为（306．68±13．32）μm。视网膜各层结构中,最厚的为GCL＋IPL以及ONL。同一检查者测量2次的重复性结果和不同检查者之间的再现性结果均表明,无论在水平方向还是在垂直方向,OPL、IS和OS的ICC和COR均〈0．60,而RNFL、GCL＋IPL、INL、ONL和RPE层的ICC和COR均〉0．70。结论自动化分割算法分析RTVue OCT图像是一种可靠的工具,可提供重复性的OCT视网膜厚度资料,有利于视网膜疾病的诊断和监测。     

缺血后适应对视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

背景研究证明,缺血后适应（IPC）对多种组织器官的缺血缺氧损伤均有一定的抵抗作用,但其对视网膜缺血缺氧的作用仍受到关注。目的探讨IPC对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤（RIRI）后视网膜结构和功能的保护作用。方法将36只健康雄性Wistar大鼠以随机数字表法分为正常对照组、伪手术组、缺血-再灌注组、IPC组。利用前房灌注生理盐水升高眼压至100mmHg（1mmHg=0．133kPa）维持60min的方法制备RIRI大鼠模型,实施IPC处理鼠亚分为再灌注后即刻、1min、10min组（即IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组）,分别于实验后1d、7d行大鼠视网膜电图（ERG）检测,然后用过量麻醉法处死大鼠并制备视网膜切片,行苏木精-伊红染色,对各组大鼠视网膜厚度的变化和视网膜形态进行观察。采用SPSS13．0统计学软件的单因素方差分析对各组大鼠ERG各波振幅恢复率和视网膜厚度值的差异进行比较。结果实验后1d,与正常对照组大鼠比较,伪手术组大鼠视网膜结构接近正常,而缺血-再灌注组及IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠视网膜均出现水肿,可见空泡变性,主要在内丛状层（IPL）及内核层（INL）。缺血-再灌注组及IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠视网膜全层、INL、IPL及视网膜外层厚度值均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。再灌注后7d,缺血-再灌注组大鼠视网膜全层厚度值明显低于正常对照组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）,尤以INL、IPL显著。IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠视网膜全层、INL、IPL及视网膜外层厚度值均明显高于缺血-再灌注组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。再灌注后7d,缺血-再灌注组、IPC各组大鼠ERG a波、b波和OPs振幅恢复率明显低于伪手术组和正常对照组大鼠,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;而IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠ERG a波、b波和OPs振幅恢复率明显高于缺血-再灌注组,差异均有统计学意义（均P〈0,05）。结论IPC对RIRI具有保护作用,在大鼠模型中,这种保护作用在再灌注后即刻至1min时最强。     

大鼠视觉发育关键期视网膜相干光断层成像变化与Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达的相关性研究

目的 了解SD大鼠视觉发育关键期内视网膜厚度的变化,探讨细胞凋亡的相关作用.方法 实验研究.选择新生SD大鼠50只,其中10只(20只眼)于生后14、18、21、24及42 d行双眼眼底相干光断层扫描(OCT),测量视网膜厚度.另10只大鼠(20只眼)分别于生后14、18、21、24及42 d各取2只大鼠(4只眼),提取视网膜组织总RNA,实时荧光定量PCR法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平.另20只大鼠(40只眼)于各对应时间点取4只(8只眼),制作眼球石蜡切片行HE染色并行视网膜厚度测量.同时取10只大鼠(20只眼)于各对应时间点取2只(4只眼)制作冰冻切片行TUNEL染色.对不同时间点的视网膜厚度,Bcl-2、Bax及Caspase-3的mRNA相对表达量进行方差分析,对两种方法所测视网膜厚度进行线性回归分析.结果 大鼠生后14、18、21、24及42 d视网膜厚度OCT测量值分别为(243.42±13.83)、(218.78±8.21)、(195.42±8.02)、(195.74±14.85)及(190.79±11.70)μm,差异有统计学意义(F=15.425,P=0.000).在大鼠生后3周内,视网膜厚度逐渐变薄,此后变化不显著.其结果与HE切片视网膜厚度测量呈线性相关(R=0.794,P=0.000).比较不同时间点大鼠视网膜组织Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA相对表达量,差异均有统计学意义(F=18.684,F=47.307,F:49.611;P=0.000).Bax和Caspase-3 mRNA表达呈增加趋势,并在生后24 d呈现峰值,生后42 d表达量明显下降.TUNEL染色结果显示生后18 d至42 d视网膜神经节细胞层、内核层和外核层均可见较多凋亡细胞,生后42 d视网膜细胞凋亡明显减少.结论 视觉发育关键期内大鼠视网膜厚度逐渐变薄.Cirrus HD-OCT可较准确测量大鼠视网膜厚度,是观察视网膜形态学变化的有效检查方法之一.视觉发育关键期内,细胞凋亡参与大鼠视网膜发育,可能影响视网膜厚度的变化.

Abstract：

Objective To observe the changes of retinal thickness during critical period plasticity in rat, and to investigate whether apoptosis participates in the structural forming of retina. Methods Experimental research. 50 normal newborn pups of SD rat were randomly selected in the experiment In vivo consecutive scanning of retinal image was taken and the retinal thickness from RPE to ILM was recorded in 10 pups (20 eyes) with spectral domain optical coherence tomography (OCT) at postnatal day 14 (P14), P18, P21, P24 and P42. Bcl-2, Bax, Caspase-3 Mrna was assessed with fluorescent quantitative real-time polymerase chain reaction after total RNA extracted from 4 retinas of 2 pups at each time point from P14 to P42. Histological measurement of retinal thickness of sections with HE staining from 4 pups (8 eyes) at each time point was compared with the results of OCT scanning. TUNEL staining was used to detect the apoptotic cells in retinal cyrosections of 2 pups (4 eyes) at the same time point The data were analyzed by One-way ANOVA and Linear Regression through SPSS 11.5 software. Results There was significant difference between the retinal thickness measured through OCT in pups from P14 to P42 (F = 15.425 ,P = 0. 001). And the values were (243. 42 ± 13. 83) μm at P14, ( 218. 78 ± 8. 21) (μm at P18, (195.42 ± 8. 02) μm at P21, (195. 74 ± 14. 85) μm at P24, (190. 79 ± 11. 70) um at P42. The retinal thickness measured through OCT decreased significantly during the first 3 weeks after birth. The results of OCT measurement had linear correlation with histology measurement ( R = 0. 794, P = 0. 000 ) . There was significant difference between Mrna expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in pups from P14 to P42 ( F = 18.684, F=47. 307,F =49. 611 ;P =0.000). The relative expression of Bax and Caspase-3 peaked at P24 while Bcl-2 was much more stable. There were a lot of apoptotic cells in the ganglion cells layer, the inner nuclear layer and the outer nuclear layer during P18 to P24 by TUNEL staining. And the apoptosis alleviated at P42. Conclusions The retinal thickness decreases when the retina continues to develop during critical period plasticity. Cirrus HD-OCT can be used as an effective instrument to show the layers of retina in rat in vivo. Apoptosis participates in the course of retinal development which possibly leads to the thinning of retina.