应用VITEK2-compact分析系统对菌株ESBLs的检测分析

目的:分析VITEK2-compact分析系统对菌株ESBLs检测的可靠性。方法:对临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌应用标准纸片扩散表型确证试验检测ESBLs,同时应用VITEK2-compact分析系统的药敏卡AST-GN13检测ESBLs,比较两种方法的检出率、检测时间;通过2种方法检测,分别依据头孢噻肟和头孢他啶的耐药表型推测产ESBLs类型,并做一致性比较。结果:2种方法检测78株大肠埃希菌ESBLs符合率达97.37%,检测28株肺炎克雷伯菌ESBLs符合率100%。VITEK2-compact分析系统平均检测时间5.5 h,标准纸片扩散表型确证法平均检测时间17.0 h。2种方法中,依据头孢噻肟和头孢他啶的耐药表型推测产ESBLs类型,一致性是100%。结论:VITEK2-compact分析系统对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检测方法快速,结果可靠,适合临床推广。     

住院精神病患者呼吸道感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的 分析住院精神病患者呼吸道感染流行所分离的113株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药特征,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法 对呼吸道分泌物标本采用梅里埃VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对菌株鉴定到金黄色葡萄球菌; MRSA表型检测采用美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的头孢西丁纸片扩散法; MRSA菌株mec A基因检测采用PCR法;药敏试验采用CLSI推荐的K-B纸片扩散法。结果 从呼吸道分泌物标本中共分离到117株金黄色葡萄球菌,经MRSA表型检测均阳性,再经mec A基因检测113株为MRSA;药敏试验结果显示,MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁100%敏感,耐药率超过50%的有14种,其中对青霉素G、苯唑西林、头孢唑啉、氨苄西林100%耐药。结论 本院住院精神病患者呼吸道感染分泌物标本分离的MRSA耐药谱广,耐药率高,并且MRSA表现为多重耐药。提示临床应合理使用抗菌药物,加强MRSA监测与防控工作,避免MRSA菌株进一步扩散传播。     

泌尿道感染肠杆菌科细菌的产酶率及耐药性分析

目的 了解泌尿道感染肠杆菌科细菌的产酶率和耐药性，为临床治疗提供依据。方法 常规培养分离细菌，应用VITEK微生物自动分析仪或API鉴定系统鉴定到种；超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测采用双纸片确认法；AmpC酶检测采用三维试验确认法；药敏试验采用K—B纸片扩散法和肉汤定量稀释法，按美国临床实验室标准化委员会规定的标准进行。结果 176株肠杆菌科细菌中大肠埃希菌占66．48％，产ESBLs和AmpC酶的阳性率为28．41％和6．82％，同时产ESBLs和AmpC酶的菌株占5．11％。产酶菌对亚胺培南100％敏感，对阿米卡星的耐药率最高为44．44％，对头孢吡肟的耐药率最低为42．00％。亚胺培南对肠杆菌科细菌的MIC90≤2mg／L。结论 由肠杆菌科细菌引起的泌尿道感染主要以大肠埃希菌为主，产ESBLs较高。对产酶菌引起的感染应首选亚胺培南治疗，对非产酶菌应根据药敏试验结果选择阿米卡星、哌拉西林／他唑巴坦、氨曲南、头孢噻肟治疗。     

整合子介导儿童产ESBLs沙门菌耐药性的初步研究

目的研究儿童沙门菌整合子分布及其与产β-内酰胺酶细菌耐药性的关系。方法采用MIC法或纸片扩散法进行沙门菌药敏培养及表型鉴定;PCR方法检测沙门菌整合子和ESBLs耐药基因。结果 80株沙门菌检测出ESBLs耐药表型阳性率为21.3%(17/80)。ESBLs耐药基因阳性率为17.5%(14/80),其中CTX-M、TEM、CTX-M/TEM耐药基因阳性株分别为6株、6株和2株,未检测到SHV耐药基因。80株沙门菌检测出整合子阳性率为11.3%(9/80),其中8株为Ⅰ类整合子,1株为Ⅱ类整合子,未检出Ⅲ类整合子。1株Ⅰ类整合子阳性株表现对全部β-内酰胺类抗生素敏感,其余为对氨苄西林和/或氨苄西林/舒巴坦和/或头孢噻肟耐药。结论杭州地区腹泻患儿沙门菌对β-内酰胺抗生素耐药主要是CTX-M型ESBLs耐药基因;整合子在腹泻患儿产ESBLs沙门菌中的分布明显低于非产ESBLs菌株,与ESBLs耐药表型及ESBLs耐药基因之间无明显关系,且与β-内酰胺抗生素耐药性无明显关系。     

呼吸系统不动杆菌感染的多重耐药性与耐药基因的检测

目的　检测引起呼吸系统感染的不动杆菌多重耐药性及耐药基因。方法　采用标准的纸片扩散法 (KirbyBauer法 )检测不动杆菌对 16种抗生素耐药状况 ,用单纸片扩散法检测ESBLs表型 ,并用PCR方法对多重耐药菌株进行超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)TEM、SHV、OXA、IMP、CTX M耐药基因的检测。结果　 10 8株不动杆菌中77.78%对 >2种的抗生素具有耐药性 ,其中有 8株菌对 15种抗菌药物均耐药 ;10 8株不动杆菌检出ESBLs表型阳性 2株 ,且均为多重耐药菌株 ;2株ESBLs表型阳性的耐药基因为TEM型 ,扩增产物长 5 35bp ,SHV、OXA、IMP、CTX M耐药基因均未检出。结论　不动杆菌对抗生素已产生明显多重耐性药 ,对有些常规使用的抗生素正向耐药方面转变 ,山东济南地区不动杆菌的ESBLs耐药基因可见TEM型。     

改良Hodge试验阳性肠杆菌科细菌对碳青酶烯类药物的耐药性检测方法比较

目的:了解Hodge试验阳性菌株对碳青酶烯类抗菌药物的耐药模式和评价临床常用的4种药物敏感性试验对KPC酶介导的碳青酶烯类抗菌药物耐药性的检出率。方法:收集经改良Hodge试验筛查为阳性的59株肠杆菌科细菌,用肉汤微量稀释法、纸片扩散法、VITEK-32型全自动微生物分析仪GNS-448药敏卡和ATB半自动细菌鉴定及药敏分析仪G-5药敏卡检测亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药性。结果:Hodge试验阳性菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药表型模式以三者均耐药为最常见,该模式在肺炎克雷伯菌耐药表型中占59.6%,在大肠埃希菌耐药表型中占30%。纸片扩散法、肉汤微量稀释法、VITEK-32、ATB法检测亚胺培南耐药率分别为69.4%、56.0%、50.8%和18.6%,美罗培南的耐药率分别为49.3%、91.5%、56.0%和25.4%,纸片扩散法和肉汤微量稀释法对厄他培南的耐药检出率为84.7%和86.4%。结论:纸片扩散法和肉汤微量稀释法能更好的检出KPC酶介导的碳青酶烯类抗菌药物的耐药性,厄他培南可作为筛选产KPC酶菌株的指示药物。     

水产品中大肠埃希菌耐药性研究

目的:测定水产品中的大肠杆菌的耐药性。方法:进行水产品中大肠埃希菌分离,用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪鉴定和做药敏分析。结果:共分离得到85株具有抗生素抗性或中介性的大肠埃希菌,其中有5株菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),对抗生素的总耐药率高于50%。结论:应尽快做出有效措施,以遏制细菌耐药性的进一步发展。     

2007-2016年分泌物中金黄色葡萄球菌耐药分析

目的探讨分泌物中金黄色葡萄球菌分布及耐药性,为皮肤感染、软组织感染、烧伤感染和手术部位感染的诊治预防提供理论依据。方法回顾性分析2007年1月-2016年12月2 477份分泌物培养为金黄色葡萄球菌的资料,常规方法培养分离细菌,用VITEK Compact 2全自动细菌分析仪鉴定到种,药敏试验采用VITEK Compact 2全自动细菌分析仪测试最低抑菌浓度(MIC)、K-B纸片扩散法补充,按CLSI规定的标准操作及判断结果进行。结果烧伤科和皮肤科分离率高,分别为32.22%(798/2 477)和23.54%(583/2 477)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为40.82%;青霉素、红霉素和克林霉素耐药率最高,为70.81～99.31%;利福平、左氧氟沙星、阿米卡星和头孢唑林耐药尚可,为29.19～41.02%;替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺耐药率最低,未检出对替考拉宁和万古霉素耐药菌株,发现对利奈唑胺耐药菌株,耐药率<0.15%;MIC分布集中且有逐年缓慢上升趋势。结论金黄色葡萄球菌是分泌物中重要病原菌,全面掌握感染分布、耐药现状及趋势,有助于合理用药、有效诊治。     

庆阳地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药性及表型分析

目的分析庆阳地区耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(CRAB)的分布特点及耐药情况,检测耐药表型,指导临床用药。方法常规培养分离细菌,应用VITEK 2 Compact全自动细菌分析仪鉴定细菌;用GN-AST09和K-B法检测细菌耐药性;通过改良Hodge试验和EDTA协同试验对碳青霉烯酶进行表型检测。结果 110株CRAB主要分离自痰液标本(70%),其次为肺泡灌洗液和伤口分泌物;科室分布以ICU比率最高(56%),其次为神经外科(20%),呼吸内科(9%)。在检测的12种药物中,对丁胺卡那、复方新诺明、左氧氟沙星敏感性较低,分别为33%、33%和7%,对其他抗生素耐药率均为100%;改良Hodge实验除1株为阴性外其他均为阳性;EDTA协同法实验均为阳性。结论 CRAB具有广泛的耐药性,应加强CRAB的耐药监测,建立有效的感染控制措施并合理应用抗菌药物,防止CRAB的流行。     

超广谱β-内酰胺酶表型检测与CTX-M型酶基因型检测的相关性分析

目的了解采用双纸片协同法进行CTX-M酶的表型检测与多重PCR法检测基因型的相关性。方法按CLSI/NCCLS所推荐的方法进行ESBLs表型确证试验,多重PCR法对ESBLs表型阳性株进一步进行CTX-M酶基因型的检测。结果233株多重耐药革兰阴性杆菌中136株ESBLs表型阳性,经多重PCR扩增证实99株携带CTX-M型ESBL,CTX-M型ESBL检出率占ESBLs72.8%(99/136)。根据多重PCR检测结果再回顾性地观察表型检测结果,发现以头孢他啶和头孢他啶/棒酸这对纸片进行试验,产CTX-M型ESBLs细菌检出数为0;以头孢噻肟纸片及头孢噻肟/棒酸这对纸片进行试验,产CTX-M型ESBLs细菌检出率72.8%(99/136),其中用上述两对纸片共同检出产CTX-M型ESBLs细菌检出率41.7%(58/136)。结论以头孢噻肟,头孢噻肟/克拉维酸这对纸片可达到有效进行CTX-M酶的表型检测的目的;用头孢噻肟,头孢噻肟/克拉维酸、头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸这两对纸片同时进行筛检超广谱β-内酰胺酶,可有效降低ESBLs漏检率。     

VITEK2-compact系统对克林霉素诱导实验检测分析

目的:用VITEK2-compact系统对红霉素诱导克林霉素耐药性的可靠性分析。方法:对临床分离的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌应用双纸片法进行D实验确证,同时应用VITEK2-compact分析系统的药敏卡GP-67检测,比较两种方法的检出率、检测时间。通过2种方法检测,并做一致性比较。结果:2种方法检测124株金黄色葡萄球菌D实验符合率97%,检测255株凝固酶阴性的葡萄球菌符合率98.5%。VITEK2-compact分析系统平均检测时间6 h,标准纸片扩散表型确证法平均检测时间18 h。结论:VITEK2-compact分析系统对克林霉素诱导实验的检测方法快速,结果可靠,适合临床推广。     

VITEK-32对肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检测观察

目的 调查肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产超广谱β—内酰胺酶(ESBLs)细菌的耐药现状。方法 对585株肺炎克雷伯菌(269株)和大肠埃希菌(316株)用V1TEK—32和GNS—506药敏卡测定ESBLs，同时用NCCLs(1999年版)推荐的筛选法和表型确证法同时进行对照监测。结果 仪器法、确证法、筛选法检测ESBLs菌株阳性率23．9％、23．4％、21．5％，产ESBLs菌耐药率明显高于非产酶菌株。结论 选择准确快速的检测方法，提高ESBLs菌株的阳性检出率，具有重要意义。     

两种检测超广谱β 内酰胺酶表型方法的比较

目的了解某医院临床产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）细菌的耐药性与基因型,比较两种方法对ESBLs表型检测的效果。方法随机收集100株ESBLs阳性菌株（初筛试验阳性）为实验组,30株ESBLs阴性菌株（初筛试验阴性）为对照组。经Vitek2 Compact自动化系统鉴定细菌,纸片扩散法进行药敏试验;采用改良Hodge试验检测耐碳青霉烯类药物菌株;美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的ESBLs表型确证试验和利用3 氨基苯酚硼酸改良的ESBLs表型确证试验进行表型检测;同时用聚合酶链反应(PCR)检测全部菌株的ESBLs基因。结果ESBLs初筛试验阳性菌株均耐头孢噻肟,但对碳青霉烯类药物仍敏感;2株耐碳青霉烯类药物的菌株,改良Hodge试验阳性。ESBLs基因检出率为84.00%,基因型以SHV和CTX M型为主。以PCR检测ESBLs基因结果为金标准,ESBLs表型确证试验和改良ESBLs表型确证试验的灵敏度、特异性、阴性预期值、阳性预期值分别为72.61%、100.00%、100.00%、66.67%和98.81%、100.00%、100.00%、97.87%,两种方法比较,差异有统计学意义(χ2=7.53,P=0.006)。结论ESBLs初筛试验阳性菌株对碳青霉烯类药物具有较高的敏感性。利用3 氨基苯酚硼酸改良的ESBLs表型确证试验检测ESBLs表型,效果更好。     

大肠埃希菌在尿路感染的分布及耐药分析

目的分析大肠埃希菌在尿路感染中的分布特点及耐药现状,为临床合理用药提供参考。方法采用法国生物梅里埃公司VITEK2-Compact微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏分析。对2008年4月—2010年4月住院及门诊尿路感染患者尿培养分离出的652例大肠埃希菌进行药敏分析,同时进行ESBLs检测。结果尿路感染大肠埃希菌中产ESBLs大肠埃希菌检出率为38%。药敏结果显示,大肠埃希菌对丁胺卡那霉素、呋喃妥因、美洛培南、亚胺培南等耐药率低,对青霉素类和环丙沙星、左旋氧氟沙星及庆大霉素耐药率大于60%。ESBLs阳性耐药率明显高于ESBLs阴性。病房标本分离菌株耐药率明显高于门诊。结论尿路感染中大肠埃希菌的耐药严重,尤是ESBLs阳性菌株,应加强耐药监测,指导临床合理用药,减缓耐药菌株出现。     

VITEK-2 Compact高级专家系统对CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的检测分析

目的 评估VITEK-2 Compact(V2C)高级专家系统(AES)对CTX-M型ESBLs的检测分析能力.方法 随机抽取2010年1-8月AES所提示的产ESBLs菌株194株,进行CTX-M表型分析,并与聚合酶链反应(PCR)方法加以比较.结果 194株产ESBLs菌株经AES提示CTX-M型94株,检出率为48.5％,PCR证实携带CTX-M基因型164株,检出率为84.5％,差异有统计学意义(P＜0.05);AES报告的94株CTX-M型产ESBLs,经PCR确认为89株,头孢他啶MIC值≤1μg/ml占95.5％,其耐药表型以CTX-M型为主,而漏检的75株中,头孢他啶MIC值≤1 μg/ml只占2.7％,其耐药表型大肠埃希菌以产ESBLs为主,肺炎克雷伯菌以产ESBLs或ESBLs+膜渗透障碍为主;AES与PCR漏检株对氨曲南、头孢他啶、头孢吡肟耐药率要高于符合株.结论 AES对混合型耐药机制的CTX-M型产ESBLs检测有一定的漏检;如需进一步进行产ESBLs的亚型研究或相关流行病学调查,仍需要以分子生物学方法进行验证.     

头孢西丁纸片法检测mecA基因介导的MRS

目的评价应用头孢西丁纸片扩散法检测mecA基因介导的耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)。方法分别用头孢西丁纸片法扩散法、苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、VITEK微生物自动分析系统及聚合酶链反应(PCR)mecA基因检测4种方法对MRS进行检测比较,最低抑菌浓度(MIC)测定应用VITEK微生物自动分析系统GPS卡。结果96株葡萄球菌属(金黄色葡萄球菌16株、凝固酶阴性葡萄球菌80株)中苯唑西林纸片法扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、VITEK微生物自动分析系统3种方法检出MRS菌株54株(金黄色葡萄球菌2株、凝固酶阴性葡萄球菌52株),而PCR法检出mecA基因48株(金黄色葡萄球菌2株、凝固酶阴性葡萄球菌46株),头孢西丁纸片法扩散法与PCR法一致。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测法高度一致,是筛选和确认mecA基因介导的MRS一种可靠的方法。     

大肠埃希菌表型分布及其耐药性分析

目的调查临床分离的大肠埃希菌产不同β-内酰胺酶株分布情况、表型特征及耐药现状。方法收集某院2007年7月--2008年7月临床分离大肠埃希菌株,用VITEK2Compact对其进行鉴定和17种常用抗菌药物的药敏试验,以高级专家系统软件（AESTM）验证和解释药敏测试结果。结果421株大肠埃希菌中,表型主要分为三类：产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）株、产获得性青霉素酶株和野生株。产ESBLs菌株共249株,占59．14％,其中67株为CTX-M型;产获得性青霉素酶菌株120株,占28．50％;产碳青霉烯酶菌株8株,占1．90％;野生株47株,占11．16％。产酶总阳性率为88．84％（374／421）。主要标本来源为洁净中段尿,分离174株（41．33％）,其次为痰标本101株（23．99％）;而科室来源则比较分散,最多为肾内科39株（9．26％）。各型产酶株的耐药性有很大差异;产ESBLS仍是大肠埃希菌产生耐药性的主要原因,其对大多数β-内酰胺类抗生素的耐药性明显高于产获得性青霉素酶株和野生株（P〈0．05）,并对大多数抗菌药物高度耐药。结论大肠埃希菌产酶率非常高,并存在多种耐药表型,其中以产ESBLs最为常见;产酶株的多重耐药和交叉耐药现象十分严重,应高度重视对产酶株的监控,合理使用抗菌药物,以控制耐药株的产生与扩散。     

长春地区儿科院内感染肺炎克雷伯菌耐药性分析及产超广谱β-内酰胺酶检测

目的:探讨儿科院内感染肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药特征,为产ESBLs细菌的治疗提供参考。方法:采用纸片琼脂扩散法和双纸片协同试验对肺炎克雷伯菌耐药性及产ESBLs菌株进行监测。结果:从306份标本中分离出85株肺炎克雷伯菌,产ESBLs菌株阳性率为31.8%(27/85);ESBLs阳性株对多种抗生素的耐药率高于ESBLs阴性株,只对亚胺培南敏感。结论:长春地区儿科院内感染肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率高并呈多重耐药性。     

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌对喹诺酮类耐药机制的研究

目的研究质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因在耐碳青霉烯类肠杆菌(CRE)中的流行情况及耐药机制。方法收集2015年3月—2018年3月某院临床分离的CRE菌株,VITEK2 Compact分析仪对其进行鉴定及药物敏感试验,采用聚合酶链反应(PCR)及测序确定PMQR基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA、acc(6’)Ib-cr携带情况,通过质粒接合试验验证PMQR基因的水平转移。结果耐碳青霉烯类大肠埃希菌对喹诺酮类药物的耐药率达100%,耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物的耐药率为15.56%～33.33%。acc(6’)Ib-cr基因检出率最高(87.72%),其次为qnrB(77.19%)和qnrS(17.54%),有2株菌携带qnrA基因(3.51%),未分离出qepA基因,菌株同时含有2种或3种PMQR基因(84.21%)。8株接合成功的菌株均存在PMQR基因转入,但喹诺酮药物对其最低抑菌浓度无明显改变。结论虽然该院CRE质粒介导喹诺酮耐药基因检出率高,但对喹诺酮类药物仍存在一定敏感性。