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2.
3.
目的:建立针对真菌类中药材茯苓的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)鉴定技术,从分子生物学角度出发,对茯苓的真伪进行鉴定。方法:对经典十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法进行改良,提取样品基因组DNA,以茯苓内转录间隔区(internal transcribed space, ITS)为目的序列,设计特异性引物,优化PCR反应体系,建立茯苓PCR鉴定方法,同时克隆特异性扩增的目的条带,测序鉴定其准确性,最后进行方法学验证。结果:提取的基因组DNA浓度较高、纯度较好、完整度良好。琼脂糖凝胶电泳结果表明正品茯苓可以在199 bp处出现单一明亮的特异性扩增条带,而伪品不出现扩增条带,引物的特异性为100%,克隆后的目的片段电泳图谱清晰明亮,克隆片段与Genbank数据库中已登记的茯苓物种序列相似性高达100%。在操作人员不知样品真伪的情况对样本检测,目标条带出现位置与预期一致;灵敏度检测结果表明,DNA检测下限可达1 ng·μL-1;挑选3位实验室人员进行茯苓真伪检测,结果相同且和预期一致,建立的茯苓PCR鉴定方法特异性良好,准确... 相似文献
4.
目的探讨以北豆根、白头翁为主药的复方胶体制剂对阴道毛滴虫耐药株的抑制活性,为开发治疗阴道毛滴虫耐药株感染的新剂型药物进行基础研究。方法分别从北豆根、白头翁和怍蚕蛹中提取北豆根总碱、白头翁素和蚕蛹甲壳素,与矿物质络合成胶体溶液制剂,采用肉汤稀释法测定胶体制剂对阴道毛滴虫耐药株的抑制效应。结果北豆根、白头翁提取物胶体制剂在1.0 g/ml、0.1 g/ml时,滴虫的死亡率与药物作用具有量-效和时-效关系。药物作用24h后,全部滴虫死亡,两组的滴虫死亡率均高于空白对照组(P0.01)。结论北豆根、白头翁联合组成的中药复方胶体制剂体外可明显抑制阴道毛滴虫耐药株生长,表现出高活性抑制阴道毛滴虫耐药株生长的药效。 相似文献
5.
目的探讨中药白头翁活性成分白头翁素联合铜绿治疗解脲支原体性非淋菌性尿道炎(NGU)的效果及对其复发率的影响。方法98例NGU患者随机分为两组,治疗组(59例)应用白头翁素、铜绿合成的胶体液冲洗阴道并阴道内置药,1次/d,7d为1疗程;对照组(39例)根据药敏实验选择敏感强力霉素片治疗,2周为1疗程。结果随访3个月,治疗组无1例复发;对照组复发23例(59.0%);两组比较,X^2=17.93,P〈0.01。结论应用白头翁素、铜绿合成的胶体溶液冲洗阴道和阴道内置药可彻底治愈NGU。 相似文献
6.
7.
白头翁制剂胶体溶液对耐药解脲脲原体的体外抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨白头翁制剂胶体溶液对耐药解脲脲原体的抑菌作用。方法制备白头翁制剂胶体溶液,选用20株耐四环素解脲脲原体临床分离株,以微量肉汤稀释法测定对解脲脲原体耐药株的最低抑菌浓度。结果白头翁制剂胶体溶液(1.0mg/mL)最低抑菌浓度为(0.08±0.07)mg/mL,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论白头翁制剂胶体溶液对耐药解脲脲原体有明显的抑制作用。 相似文献
8.
目的:探讨新生儿结膜炎分泌物中耐甲氧西林葡萄球菌的耐药特征及机制。方法:常规分离培养葡萄球菌,K-B法药敏实验,PCR技术检测mecA、ermA、ermC基因。结果:55例新生儿患者眼分泌物中常规培养出葡萄球菌24例。药敏试验显示葡萄球菌对苯唑西林耐药率为79.2%(19/24),头孢菌素、红霉素、克林霉素、交沙霉素、四环素、新诺明耐药率超过50%,对万古霉素敏感。耐甲氧西林葡萄球菌携带mecA、ermA和ermC基因。结论:吉林地区新生儿结膜炎分泌物中耐甲氧西林葡萄球菌分离率高,表现多重耐药特征。对甲氧西林耐药菌株携带mecA基因,红霉素耐药菌株携带ermA和ermC基因。 相似文献
9.
目的 通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与核酸试纸条相结合的方法,实现鹿茸真伪的可视化检测。方法 采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulfate,SDS)碱变性法提取正品及伪品鹿茸样品基因组DNA,通过查找细胞色素C氧化酶亚基I(COI)特异性位点,应用Primer 3.0软件设计鹿茸特异引物,摸索PCR最佳反应体系及条件,建立PCR-核酸试纸条及琼脂糖凝胶电泳鉴定鹿茸真伪的最优条件。同时,通过克隆测序,验证鹿茸真伪鉴定的准确性。结果 本实验中正品鹿茸在PCR-核酸试纸条上均出现两条带,阴性对照及伪品出现一条带,与琼脂糖凝胶电泳结果吻合,且试纸条检测的灵敏度可达1 ng·μL-1。对9个市售鹿茸样品检测,正品鹿茸5个,合格率为45%。结论 自主构建的PCR-核酸试纸条检测方法简单、快速、特异性较好,可在较短时间内实现鹿茸真伪的可视化检测,检测结果稳定,为中药材鉴定提供又一新的方法。 相似文献
10.
目的为了探究药厂工作环境中是否存在病原微生物污染。方法采集药厂工作环境可能存在的细菌样本,进行增菌培养后观察细菌菌落特征和显微镜下革兰染色特征。用水煮法提取分离出细菌的DNA,采用16SrRNA通用引物扩增出DNA片段,纯化PCR产物,统一送去华大基因公司测序,并进行拼接和校对DNA序列。在NCBI官方网站进行基因序列BLAST,鉴定细菌类别。结果 6个样品经分离培养后被鉴定为弯曲芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、藤黄微球菌、科氏葡萄球菌、尿芽胞八叠球菌。结论该药厂工作环境中存在一定的病原微生物污染,应注意严格执行相应管理制度和卫生标准,保持工作环境符合无菌标准。 相似文献