兽残留蛋白芯片检测系统的研制和应用

本研究根据抗原和抗体特异性结合的免疫学原理,采用荧光标记竞争免疫法,构建蛋白芯片测定样品中的兽药残留含量.同时设计了一种简便快速的样品制备方法,能够从多种组织样品同时提取多种残留兽药.结合博奥生物有限公司研发的样品分子提取仪、芯片扫描仪以及配套的自动化数据分析软件,开发了晶芯(R)兽药残留蛋白芯片检测系统.该系统可用于猪肉、猪肝、鸡肉、鸡肝、牛奶中磺胺二甲基嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺甲噁唑、磺胺异噁唑、磺胺间甲氧嘧啶、链霉素、双氢链霉素、恩诺沙星以及氯霉素的定量检测.     

动物性食品中11种兽药残留量的高效液相色谱(HPLC)法测定

[目的]建立动物性食品中磺胺、喹乙醇、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺甲嘧啶、甲氧苄啶、磺胺二甲嘧啶、呋喃唑酮、磺胺甲基异噁唑、磺胺(二甲)异噁唑、磺胺喹噁啉残留量的高效液相色谱(HPLC）测定方法。[方法]碎肉分两次用乙腈提取，正己烷洗涤净化，将乙腈层过无水硫酸钠后挥干乙腈，用pH2．5 KH2PO4 CH3CN(1 1)洗脱、溶解后测定。[结果]平均回收率磺胺82．1％、喹乙醇76．5％、磺胺嘧啶77．0％、磺胺噻唑75．9％、磺胺甲嘧啶80．5％、甲氧苄啶89．6％、磺胺二甲嘧啶78．2％、呋喃唑酮76．0％、磺胺甲基异嗯唑76．5％、磺胺(二甲)异嗯唑69．9％、磺胺喹嗯啉64．1％。检出限：磺胺0．023mg／kg、喹乙醇0．050mg／kg、磺胺嘧啶0．030mg／kg、磺胺噻唑0．052mg／kg、磺胺甲嘧啶0．046mg／kg、甲氧苄啶0．11mg／kg、磺胺二甲嘧啶0．075mg／kg、呋喃唑酮0．068mg／kg、磺胺甲基异口恶唑0．022mg／kg、磺胺(二甲)异噁唑0．037mg／kg、磺胺喹噁啉0．043mg／kg。【结论]高效液相色谱(HPLC)测定动物性食品中磺胺、喹乙醇、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺甲嘧啶、甲氧苄啶、磺胺二甲嘧啶、呋喃唑酮、磺胺甲基异噁唑、磺胺(二甲)异噁唑、磺胺喹噁啉的多残留是一种灵敏度高、简便的方法。     

霍乱弧菌多重耐药及SXT耐药相关基因初步研究

目的研究福建省霍乱弧菌多重耐药情况,分析耐药基因SXT、sulⅡ、dfr18、dfrA1与复方磺胺甲噁唑耐药表型的相关性。方法选取100株1994-2005年福建省保留的霍乱弧菌菌株,采用WHO推荐的改良K-B纸片法进行21种抗生素的敏感性试验。PCR方法检测耐药基因SXT、sulⅡ、dfr18、dfrA1。使用SPSS软件分析耐药基因与耐药表型的相关性,采用χ2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果福建省霍乱弧菌试验菌株对呋喃妥因、痢特灵、链霉素、多黏菌素B、磺胺甲噁唑、复方磺胺甲噁唑耐药严重,多重耐药率为63%。耐药基因SXT、sulⅡ、dfr18、dfrA1与复方磺胺甲噁唑耐药表型相关。结论福建省霍乱弧菌的多重耐药率高,初步研究发现了复方磺胺甲噁唑相关的耐药基因,进一步需要研究更多的耐药分子机制。     

肇庆星湖抗生素污染特征分析及风险评价研究

目的分析肇庆市星湖水体中抗生素的污染特征,评价其生态与健康风险。方法分别于2018年7月(丰水期)、12月(枯水期),用超高压液相色谱-三重四级杆串联质谱法对星湖地区仙女湖、青莲湖、中心湖、波海湖、里湖水中磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺二甲嘧啶、红霉素、罗红霉素、氧氟沙星、环丙沙星、林可霉素4类8种抗生素浓度进行检测,应用风险熵法评价其生态风险,采用日均可接受摄入量风险熵计算模型评价其健康风险。结果星湖各采样点位抗生素的浓度为11.64～192.98 ng/L,丰水期抗生素的累积浓度高于枯水期,丰水期青莲湖点位的抗生素浓度最高,里湖点位的抗生素浓度最低。星湖水体中共检出了7种抗生素(磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺二甲嘧啶、红霉素、罗红霉素、氧氟沙星、林可霉素),浓度为0.04～149.52 ng/L,环丙沙星在所有采样点均未被检出。磺胺甲基异噁唑和磺胺二甲嘧啶为星湖水体中的主要抗生素污染物。生态和健康风险评价结果表明,磺胺甲基异噁唑为星湖主要的生态风险因子,同时,星湖水域抗生素联合生态风险较高,总体风险熵属于高风险范畴;氧氟沙星和磺胺甲基异噁唑是主要的健康风险因子,但抗生素的健康风险指数远低于1。结论肇庆星湖水域抗生素联合生态风险较高,但是健康风险指数较低,不会对人体产生明显的健康危害。     

深圳市畜、禽肉中部分兽药残留水平的调查

目的:了解深圳市售畜、禽肉中部分兽药残留水平,进一步采取预防、控制和减少畜、禽肉兽药残留的措施,保证消费者的健康.方法:2007年对深圳市6个行政区域的摊档、市场、餐厅、酒楼及超市出售的畜、禽肉类食品进行现场采集样品180份,按国标等检测方法进行8种兽药残留检测,测定结果依据GB16869-2005及<动物性食品中兽药最高残留限量>评价.结果:畜、禽肉中检出有4种兽药残留;有7.22%的畜、禽肉中兽药残留超过国家标准;畜、禽肉内脏中兽药残留较高;鸡、鸭肉样品中氯霉素残留检出率与超标率均有统计学差异(P＜0.05).结论:兽药污染问题不容忽视,需要采取多种措施来预防和控制畜、禽肉,特别是高毒性兽药在畜、禽肉中的残留.     

超高效液相色谱-串联质谱联用法同时测定鸡肉中磺胺和喹诺酮类兽药残留

目的建立超高效液相色谱-串联质谱联用仪同时检测鸡肉中16种磺胺类和15种喹诺酮类兽药残留。方法称取5.0 g样品加入酸化乙腈均质3 min后,超声提取5 min,正己烷去除油脂,0℃、10 000 r/min高速离心5 min,取中间提取液10.0 ml,氮气吹干,初始流动相定容到1.0 ml,过0.20μm滤膜,供超高效液相色谱-串联质谱仪分析,内标法定量。结果当浓度为10.0μg/L~500μg/L时,31种兽药的线性关系良好,相关系数(r)均≥0.999 0,当加标量为50.0μg/kg时,31种兽药的加标回收率为84.0%~94.7%,相对标准偏差(RSD)均2.5%。31种兽药的检出限均为0.10μg/kg,定量限为0.30μg/kg。结论通过均质提取的办法,大大提高提取的效率。本方法专属性强,灵敏度高,操作简单,快捷,可作为鸡肉中磺胺和喹诺酮类兽药残留的检测。     

霍乱弧菌多重耐药及ＳＸＴ 耐药相关基因初步研究

摘要：目的　研究福建省霍乱弧菌多重耐药情况,分析耐药基因ＳＸＴ、sulⅡ、dfr１８、dfrＡ１与复方磺胺甲唑耐药表型的相关性。方法　选取１００株１９９４－２００５年福建省保留的霍乱弧菌菌株,采用ＷＨＯ 推荐的改良Ｋ Ｂ 纸片法进行２１ 种抗生素的敏感性试验。ＰＣＲ 方法检测耐药基因ＳＸＴ、sulⅡ、dfr１８、dfrＡ１。使用ＳＰＳＳ软件分析耐药基因与耐药表型的相关性,采用χ^２ 检验,P＜０．０５为差异有统计学意义。结果　福建省霍乱弧菌试验菌株对呋喃妥因、痢特灵、链霉素、多黏菌素Ｂ、磺胺甲噁唑、复方磺胺甲噁唑耐药严重,多重耐药率为６３％。耐药基因ＳＸＴ、sulⅡ、dfr１８、dfrＡ１与复方磺胺甲噁唑耐药表型相关。结论 福建省霍乱弧菌的多重耐药率高,初步研究发现了复方磺胺甲噁唑相关的耐药基因,进一步需要研究更多的耐药分子机制。     

多药耐药肺炎克雷伯菌对利福平及磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药机制的研究

目的 研究多药耐药肺炎克雷伯菌对利福平及磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药机制.方法 收集2008年8月-2010年5月浙江省杭州市和湖州市6所医院共47株肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1种利福平耐药相关基因和5种磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药相关基因.结果 该组肺炎克雷伯菌共检出1种利福平耐药相关基因和3种磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药相关基因.结论 携带1种利福平耐药相关基因和3种磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药相关基因是该组菌对利福平和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药的一个重要原因.     

QuEChERS-高效液相色谱法同时检测动物组织中的克球酚,地克珠利和磺胺类药物残留量

目的：建立一种动物组织中兽药残留量的QuEChERS-HPLC检测方法。方法：样品以乙腈提取,混合型分散固相萃取净化,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,270 nm检测,流速1.0 ml/min。结果：检测限分别为：克球酚、磺胺类：0.05 mg/kg、地克珠利：0.10 mg/kg。在添加浓度为0.10-1.0 mg/kg范围内,回收率均可在65%-100%,相对标准偏差1%-10%。结论：将改良后的农药多残留检测QuEChERS样品处理技术成功应用于兽药残留的检测,对动物组织中的克球酚、地克珠利和磺胺类药物残留量进行同时分析,满意结果。     

复方磺胺甲噁唑致阴茎水肿1例

复方磺胺甲噁唑是一种临床应用比较广泛的广谱抗菌药物，不良反应较多。在临床上曾遇到1例服用复方磺胺甲噁唑致阴茎水肿的病例，现报告如下。