MMP-9/TIMP-1在稽留流产中的表达及其相关性研究

目的:研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)在稽留流产蜕膜组织中的表达,探讨MMP-9/TIMP-1失衡与稽留流产的关系。方法:选取早孕和稽留流产妇女的蜕膜组织各36例和32例,采用免疫组化法检测MMP-9和TIMP-1的蛋白表达率。结果:MMP-9在早孕组和稽留流产组的蛋白表达率分别为22.2%和25.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.01);TIMP-1在稽留流产组的表达率为100.0%,显著高于早孕组(22.0%)(P<0.01)。结论:MMP-9/TIMP-1的动态失衡参与了稽留流产的发生和发展。     

早期流产者绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3的表达及其意义

目的:了解MMP-9和TIMP-3在早孕、先兆流产和药物流产绒毛及蜕膜组织中的定位及表达水平,探讨其水平及平衡在维持正常妊娠中的作用。方法:选取90例早孕妇女作为研究对象,其中行负压吸宫术者30例为对照组,行药物流产术者30例为药物流产组;自愿行吸宫术的先兆流产妇女30例为先兆流产组,均留取绒毛和蜕膜组织,应用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测MMP-9和TIMP-3在不同早孕流产绒毛和蜕膜组织中的表达。结果:MMP-9和TIMP-3在3组绒毛的合体滋养细胞、细胞滋养细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆,蜕膜的蜕膜细胞、腺上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆呈不同程度的阳性染色。通过定量分析,药物流产组绒毛和蜕膜MMP-9的表达高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05);3组绒毛和蜕膜TIMP-3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。绒毛和蜕膜中MMP-9/TIMP-3药物流产组高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05)。结论:MMP-9表达水平的升高在流产发生过程中具有重要作用,MMP-9和TIMP-3的平衡对维持正常妊娠起重要作用。     

111例稽留流产胎儿绒毛染色体核型分析

目的:对111例稽留流产患者胎儿绒毛染色体进行分析,探寻流产原因。方法:对111例稽留流产患者取无菌绒毛进行细胞培养和染色体制备及核型分析。结果:111例稽留流产绒毛染色体中,染色体核型正常28例(25.23%),染色体核型异常83例(74.77%)。异常核型中,性染色单体2例(2.41%),三体19例(22.89%),嵌合体51例(61.45%),复合三体1例(1.20%),三倍体7例(8.43%),四倍体3例(3.61%)。结论:胚胎染色体异常是稽留流产的主要原因,绒毛染色体核型分析有利于查明胚胎停育的原因,为遗传咨询和优生优育指导提供依据。     

基质金属蛋白酶在稽留流产发生中的作用和调控机制研究

目的研究基质金属蛋白酶在稽留流产患者绒毛组织中的表达变化,探讨其在稽留流产中的作用及其调控机制。方法选取2015年11月至2016年5月期间就诊于苏州大学附属第一医院计划生育门诊和苏州市立医院北区妇产科的稽留流产患者30例作为实验组,同期健康早孕流产患者30例作为对照组。采用ELISA法检测血浆TGF-β1水平,定量PCR(RT-PCR)检测患者绒毛组织中NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的mRNA表达情况,采用蛋白印迹法(Western Blot)检测分析NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的蛋白水平。结果实验组血浆中TGF-β1的平均水平低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的mRNA表达量高于对照组,而NF-κB1、TGF-β1和TIMP-1mRNA表达量均低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的蛋白表达水平高于对照组,NF-κB p50、TGF-β1和TIMP-1的蛋白表达水平均低于对照组(P0.05)。结论 NF-κB表达水平的降低导致TGF-β1水平降低,从而影响MMP-9/TIMP-1的平衡,使ECM过度降解,导致胚胎植入失败及胎盘形成障碍,最终发生胚胎停育。     

白血病抑制因子在稽留流产中的表达

目的探讨白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的表达与稽留流产的关系。方法选择30例稽留流产患者为观察组,同期自愿选择人工流产术终止妊娠的正常早孕妇女30例为对照组,用免疫组化链酶素抗生物蛋白—过氧化物酶连接(streptavidin-perosidase,SP)法检测LIF在两组绒毛及蜕膜组织中的表达情况。结果①LIF在绒毛组织中表达于滋养细胞胞浆中;在蜕膜组织中表达于腺体细胞胞浆。②LIF在两组蜕膜组织中的表达均明显高于绒毛组织,差异有统计学意义(P<0.05)。③LIF在观察组绒毛及蜕膜组织中的表达较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LIF在绒毛及蜕膜组织中的表达强度降低,胚胎着床后发育不良导致稽留流产。     

HIF-1α、TLR 4与稽留流产妊娠滋养细胞凋亡的关系研究

目的研究稽留流产患者绒毛组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)、Toll样受体4(Toll like receptor 4, TLR 4)、Fas、FasL的表达、分布情况并进行相关性分析,探讨HIF-1α、TLR 4与稽留流产妊娠滋养细胞凋亡的关系。方法选取2017年1～8月于南通市第一人民医院妇科就诊的40例稽留流产患者为稽留流产组,同期行人工流产手术的正常妊娠孕妇40例为对照组。负压吸宫留取胎膜绒毛组织,采用HE染色及电镜检查,观察绒毛组织结构;酶联免疫吸附试验法检测绒毛组织中HIF-1α、TLR 4的浓度;免疫组织化学SP法检测绒毛组织中HIF-1α、TLR 4、Fas、FasL蛋白表达情况,并进行相关性分析。结果两组HE染色、ELISA检测、Fas/FasL蛋白表达、相关性分析4个方面比较,差异均有统计学意义(P0.05);稽留流产组绒毛组织中HIF-1α、TLR 4、Fas和FasL表达均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HIF-lα、TLR 4、Fas/FasL在稽留流产发生过程中均有一定作用,TLR 4-NF-κB-HIF-1α通路所导致的缺氧和炎症反应与稽留流产的发生密切相关。     

单核苷酸多态性微阵列芯片技术在稽留流产伴复发性流产诊断中的应用

目的 探讨单核苷酸多态性微阵列芯片技术(single nucleotide polymorphism array,SNP array)在稽留流产伴复发性流产病因诊断中的应用价值。方法 选择2018年3月—2019年6月于本院临床诊断的稽留流产患者105例,根据有无复发性流产分为单纯稽留流产组(对照组,48例)和稽留流产伴复发性流产组(观察组,57例)。采用STR-PCR检测染色体异常,进一步通过SNP array检查并分析绒毛组织染色体核型异常情况,结合数据库对染色体致病基因进行分析。结果 观察组患者平均孕周小于对照组,且孕次≥3次比例、合并内科疾病率高于对照组(P＜0.05)。观察组患者共检出染色体异常33例(57.89%,33/57),其中染色体核型异常29例,染色体结构异常4例。对照组共检出染色体异常25例(52.08%,25/48),均为染色体核型异常。两组在染色体异常方面差异无统计学意义(P>0.05)。但进一步分析不同异常核型分布两组存在一定差异,观察组异常核型47,XN,+16(12/29,41.38%)比例高于对照组(3/25,12.00%),差异有统计学意义(P＜0.05)。此外,4例存在染色体结构异常的患者均为观察组。结论 染色体异常可能是导致稽留流产的重要原因,其中47,XN,+16核型异常多表现为稽留流产伴复发性流产。SNP array技术在检测染色体结构和核型异常方面有一定优势,有助于明确稽留流产病因,对提供合理的遗传咨询并指导下一次良好妊娠有积极的意义。     

稽留流产患者绒毛组织中Netrin-1、DCC、UNC5B和VEGF表达

目的:探讨神经轴突导向因子(Ntrin-1)、结直肠癌缺失基因(dDCC)、不协调同源基因5B(BUNC5B)与血管内皮生长因子(VEGF)在稽留流产绒毛组织表达。方法:收集2020年2月-2020年8月在本院就诊的孕妇60例,其中正常早孕待行人工流产30例为对照组,稽留流产并待行人工流产30例为稽留流产组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术及免疫组织化学技术检测两组绒毛组织中Netrin-1、DCC、UNC5B、VEGF mRNA及蛋白表达。结果:稽留流产组绒毛组织中Neterin-1、DCC和VEGF mRNA的相对表达量均低于对照组,UNC5B mRNA高于对照组(P0.05);Netrin-1(0.78±0.22)、DCC(0.52±0.15)、VEGF(0.81±0.23)蛋白相对表达量均低于对照组(1.24±0.29、1.09±0.25、1.42±0.35)(P0.05),UNC5B蛋白(1.82±0.34)高于对照组(1.04±0.21)(P0.05)。结论:稽留流产患者绒毛组织中Netrin-1、DCC、VEGF蛋白及mRNA表达均低于正常孕妇,UNC5B蛋白及mRNA表达高于正常孕妇,这种异常表达与稽留流产绒毛血管的生成障碍可能有关。     

滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系

目的:探讨滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系。方法:对30例正常早孕吸宫流产病例和35例稽留流产病例的绒毛滋养层细胞进行凋亡研究。常规光镜观察细胞形态学变化;免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原PCNA、抑凋亡基因Survivin和促凋亡基因P53在细胞中的表达。结果:稽留流产组绒毛形态学结构均出现不同程度的退行性改变,绒毛细胞滋养层细胞中PCNA表达较正常早孕组明显减少,差异具有非常显著性意义(P<0.01),合体滋养层细胞PCNA少量表达;稽留流产组绒毛滋养层细胞Survivin低于正常早孕组,而P53则高于正常早孕组,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:滋养层细胞凋亡的增加可能是稽留流产发生的一个重要病理过程,其机制可能与PCNA、Survivin和P53基因的表达异常有关。     

稽留流产病因研究中绒毛染色体检测的应用价值

目的:探讨绒毛染色体检测对稽留流产病因研究的价值。方法:采集161例稽留流产患者绒毛组织,采用培养法和直接法制备绒毛染色体标本,G显带分析。结果:稽留流产绒毛染色体161例中,158例成功制备绒毛染色体,3例因稽留时间问题培养失败。158例中发现核型异常82例,检出率为51.90%,三体型45例,占54.88%,其中常染色体三体占51.22%,16-三体17例,占20.73%。结论:染色体异常是早期稽留流产的主要原因,绒毛染色体检测是稽留流产病因诊断的重要手段,有助于指导再次妊娠。     

TNF-α、NF-κB蛋白表达在稽留流产患者绒毛组织中的变化及其意义分析

目的观察稽留流产患者绒毛组织中TNF-α、NF-κB的表达情况,并分析其在稽留流产中的作用。方法将2016年1月至2017年1月本院收治的30例早期稽留流产患者纳入研究,并纳入同期在本院正常妊娠早期妇女30例为正常对照组,两组患者自愿要求终止妊娠。收集以上对象的绒毛组织作为研究对象,通过免疫组化法观察TNF-α、NF-κB在研究对象中的表达阳性率,并观察TNF-α、NF-κB蛋白表达情况,探讨这种变化在稽留流产发生中的意义。结果稽留流产组绒毛组织的TNF-α表达阳性率为93.3%,显著高于正常对照组(10.0%,P<0.05);稽留流产组的TNF-α平均染色分值为(3.2±1.7),高于正常对照组[(1.6±1.0),P<0.05]。而在NF-κB的表达方面,稽留流产组的表达阳性率为90.0%,高于正常对照组(16.7%,P<0.05);稽留流产组的平均染色分值为(3.7±1.7),高于正常对照组[(2.2±1.1),P<0.05]。结论稽留流产患者绒毛组织中TNF-α和NF-κB的表达阳性率显著提高,这可能与稽留流产的发生与母体免疫功能异常或感染引起炎症相关。     

凋亡抑制基因Twist、Livin与稽留流产的关系探讨

目的:探讨凋亡抑制基因Twist及Livin在稽留流产绒毛滋养细胞中的表达及其关系.方法:采用免疫组织化学SP法分别检测40例稽留流产患者(实验组)和30例正常早孕女性(对照组)绒毛滋养细胞中Twist、Livin表达.结果:Twist和Livin在两组滋养层细胞中均有表达,其中Twist表达部位以合体滋养层细胞为主,Livin表达部位以细胞滋养层细胞为主;Twist和Livin在实验组阳性表达率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:Twist、Livin的低表达诱导的滋养层细胞凋亡的增加可能参与了稽留流产的发生.     

稽留流产患者绒毛组织中TNF-α、NF-κB以及caspase-3的表达及其相关性

目的观察稽留流产患者绒毛组织中TNF-α、NF-κB的表达情况及其表达之间的相关性。方法将2016年1月—2017年1月本院收治的30例早期稽留流产患者纳入研究,为稽留流产组;选择同期在本院自愿要求终止妊娠的正常妊娠早期妇女30例为对照组。收集以上研究对象的绒毛组织,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定其中TNF-α、NF-κB、caspase-3 mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)测定TNF-α、NF-κB、caspase-3蛋白的表达情况;并通过Person分析三者之间的相关性。结果 RT-PCR结果显示,在稽留流产患者的绒毛组织中TNF-α、NF-κB、caspase-3 mRNA表达水平均显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P均0.05)。ELISA测定结果显示,在稽留流产患者的绒毛组织中TNF-α、NF-κB、caspase-3蛋白水平分别为(0.5±0.0)(0.4±0.0)(0.9±0.2),稽留流产组的蛋白表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P均0.05)。Person分析结果显示,TNF-α与NF-κB的表达成正相关(r=0.415,P0.05);TNF-α与caspase-3表达呈正相关(r=0.628,P0.05)。结论在稽留流产患者的绒毛组织中TNF-α、NF-κB、caspase-3 mRNA及蛋白的表达含量均会增高,这提示稽留流产的发生与患者体内的炎症反应及滋养层细胞过度凋亡可能存在一定的联系。     

30例体外受精-胚胎移植后流产绒毛原代培养及染色体核型分析

目的:分析30例体外受精-胚胎移植(IVF-ET)流产胚胎绒毛染色体核型组成,探讨流产原因。方法:收集30例IVF-ET流产胚胎绒毛,行体外原代培养、染色体制备及核型分析。观察既往不同流产次数对胚胎绒毛染色体异常率的影响;按流产胚胎性别,分析性别差异与染色体异常率间的关系。结果:30例IVF-ET流产胚胎绒毛体外培养成功30例,成功率100%。30例标本中染色体异常核型20例,占66.70%,其中三体核型14例,21单体型1例,多倍体1例,嵌合体2例,其他异常核型2例。单次流产史患者13例,胚胎异常核型9例(69.23%);反复流产(≥2次)史患者17例,胚胎异常核型11例(64.71%),两组间比较无显著性差异。14例男胎中异常核型10例,占71.42%;15例女胎中异常核型9例,占60.00%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胚胎染色体异常是IVF-ET早期自然流产的主要原因,绒毛染色体检查对寻找IVF-ET失败原因具有重要的指导意义。     

HIF-1α和VEGF在稽留流产患者血清和绒毛中的表达研究

目的:探讨稽留流产患者缺氧诱导因子(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)在其血清和绒毛中的表达情况并进行二者相关性研究。方法:采用ELISA试验和SP法分别测定66例稽留流产患者(流产组)与54例正常早孕孕妇(对照组)血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达水平,并将稽留流产组按有无明确原因分为有因组和无因组;同时根据胚胎死亡后稽留宫内时间分为>4周组、2~4周组和<2周组分析相关性。结果:流产组血清HIF-1α和VEGF的水平分别为(317.3±116.8)ng/L和(34.2±4.9)ng/L,对照组分别为(416.8±121.1)ng/L和(51.4±55.2)ng/L,两组差异有统计学意义(P<0.05);流产组患者绒毛中HIF-1α和VEGF的表达量分别为(3.1±2.2)ng/L和(3.7±2.1)ng/L,对照组分别为6.1±4.2和6.9±3.4,两组差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清VEGF和HIF-1α的表达成呈正相关(P<0.05),两组绒毛中VEGF与HIF-1α表达呈正相关(P<0.05);但稽留宫内时间<2周组、2~4周组和>4周组血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:HIF-1α和VEGF在血清和绒毛中的低表达可能是导致稽留流产的重要原因之一。     

稽留流产患者绒毛组织中血管内皮生长因子及其受体的表达

目的检测稽留流产患者绒毛组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGFR-1、VEGFR-2的表达水平,探讨其在稽留流产发病中的作用机制。方法选择该院2015年2-10月收治的稽留流产患者96例,其中试验组1(原因明确)51例,试验组2(原因不明)45例;另取同期孕妇57例作为对照组。采用免疫组化法测定绒毛组织中VEGF、VEGFR-1及VEGFR-2的表达水平。结果试验组1、试验组2患者绒毛组织中VEGF、VEGFR-1和VEGFR-2(+++~++++)阳性细胞表达分别为:29.41%(15/51)、33.33%(17/51)、45.10%(23/51)和31.11%(14/45)、28.89%(13/45)、31.11%(14/45),差异无统计学意义(P0.05),且均低于对照组(P0.05)。结论稽留流产患者绒毛组织中VEGF及其受体VEGFR-1、VEGFR-2呈低表达,其发生机制可能与胚胎血管生成不足有关。     

稽留流产绒毛中线粒体膜电位和活性氧的变化

目的:通过对稽留流产患者绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential MMP)、活性氧物质(reactive oxygen species ROS)的测定,探讨MMP、ROS与稽留流产的关系。方法:稽留流产患者20例作为研究组,正常早孕要求流产妇女20例作为对照组。研究组20例胚胎稽留宫内时间<4周。应用荧光分光光度计和流式细胞仪检测研究组及对照组绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位(MMP)、活性氧物质(ROS)的水平。结果:与正常早孕妇女相比较,稽留流产患者绒毛滋养叶细胞中MMP水平显著降低(P<0.05),ROS水平显著增高(P<0.05)。结论:绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位下降、活性氧物质增多可能是稽留流产发生的信号。     

稽留流产两种处理方法比较

目的:探讨稽留流产两种处理方法临床效果.方法:对80例稽留流产患者分析,承受机分为观察组(米索前列醇+刮宫术)和对照组(米非司酮配伍米索前列醇+刮宫术)各40例.比较两组妊娠组织物排出、阴道流血及住院时间.结果:两组妊娠组织物排出无明显差异,阴道流血及住院时间观察组明显低于对照组,有统计学差异(P＜0.05).结论:单用米索前列醇+刮宫术治疗稽留流产是安全、经济、有效的处理方法.     

非小细胞肺癌中MMP-9和TIMP-1表达及意义

目的:观察血清中MMP-9和TIMP-1在非小细胞肺癌表达水平和相互关系。方法:ELISA法对44例NSCLC为观察组和28例健康人为健康对照组进行MMP-9和TIMP-1血清测定及分析。结果:MMP-9和TIMP-1在NSCLC血清表达水平显著高于健康对照组(P0.01),NSCLC中与TNM分期、淋巴结转移有相关性。NSCLC患者血清中Ⅲ+Ⅳ期MMP-9和TIMP-1高于Ⅰ+Ⅱ期患者,有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组。结论:MMP-9和TIMP-1在NSCLC转移和侵袭中起重要作用,可作为监测NSCLC疾病发展程度的指标。     

稽留流产胚胎绒毛染色体异常的分析研究

目的 探讨稽留流产与胚胎染色体异常之间的关系。方法 在无菌条件下，采集87例首次稽留流产患者的胚胎绒毛，采用长期培养法制备绒毛染色体标本，进行绒毛320～400条带染色体分析。结果 有84例绒毛染色体制备成功，绒毛培养的成功率为96．6％，其中发现核型异常45例（核型异常发生率为53．6％），染色体数目异常43例（染色体数目异常发生率为95．6％）。年龄≥35岁的患者核型异常的发生率为71．4％，＜35岁的患者核型异常的发生率为44．6％，两者比较有显著性差异（χ^2=5．385，P＜0．05）。结论 染色体数目异常是稽留流产的重要原因之一，尤其是≥35岁患者的染色体数目异常的发生率明显升高。绒毛染色体分析是稽留流产病因诊断的重要手段，可为再次生育提供优生指导依据。