长沙地区汉族RhD阴性个体RHD基因多态性研究

目的研究长沙地区人群Rh阴性个体RHD基因多态性的分布及血清学表型与RH基因型之间的关系。方法应用PCR-SSP技术检测长沙地区108名Rh阴性献血者的RHD基因和RHCE基因。结果 108例Rh阴性个体中,ccee表型66例、Ccee32例、CCee7例、CcEe2例、ccEe1例;108例Rh阴性个体中68例RHD基因外显子完全缺失、24例完整、16例部分缺失。吸收放散试验检测出21例RhD放散型。结论长沙汉族Rh阴性人群的RHD基因结构呈现多态性,常规血清学鉴定的RhD阴性者中存在较高比例的RhD放散型（Del型）,且有可能带有完整的RHD基因。携带D基因的吸收放散试验阴性个体中具有C抗原者比例较高,但亦有cc表型存在,有别于文献中认为全属RhC抗原表达者的报告。     

湖南省RhD阴性献血者D基因多态性研究

目的 血清学方法研究湖南省133名Rh阴性献血者RHD基因多态性的分布以及RHD基因组结构与血清学的关系.方法 应用PCR-SSP技术检测湖南省133名Rh阴性献血者的RHD基因的第2、3、4、5、6、7、9、10外显子、1227A等位基因和RHCE基因的第1、2及5外显子,并分别检测二者的第4内显子.并对部分样本进行吸收放散实验.结果 133例Rh阴性个体中,ccee表型69例、Ccee57例、cCee4例、CcEe3例、ccEe1例;133例Rh阴性个体中85例RHD基因所检测的8个外显子完全缺失(63.9%)、24例完整(18.05%)、16例部分缺失(12.03%).吸收放散试验检测出24例RhD放散型. 结论 湖南省Rh阴性人群的RFID基因结构呈现多态性,常规血清学鉴定的RhD阴性者中存在较高比例的RhD放散型(Del型),且部分带有完整的RHD基因.携带D基因的吸收放散试验阴性个体中具有C抗原者比例较高,但亦有cc表型存在.提示在中国用RHD基因分型完全替代血清学检测RhD表型条件尚不成熟,仍需二者结合以提高检测的准确性.     

新乡地区48例RhD阴性汉人RHD基因多态性研究

目的 研究新乡地区红细胞RhD阴性汉人RHD基因（EXON1、EXON5、EXON6、EXON7、845A、845G、1227A、D9）多态性。 方法 应用PCR-SSP方法,对新乡地区48例血清学鉴定为RhD阴性的汉族无偿献血者进行RHD基因分析。基因频率计算采用直接计数法。 结果 48例RhD阴性无偿献血者存在4种表型:ccdee 29例（60.4%）、Ccdee 14例（29.2%）、CCdee 3例（6.3%）、ccdEe 2例（4.2%）;其ABO血型所占比例分别为A 12例（25.0%）、B 24例（50.0%）、O 12例（25.0%）;48例样本RHD基因分析发现RHD全缺失型30例,占62.5%;DEL RHD1227A杂合型12例（25.0%）,均为Ccdee表型;RHD-CE(2-9)-D 4例（8.3%）,为Ccdee、CCdee、ccdEe表型;2例EXON1、845G、D9有特异性扩增,不能判断其变异类型。 结论 新乡地区Rh阴性汉人以B型血为主,存在部分D、DEL变异型,且变异型通常C抗原阳性。     

信阳市2008年献血者Rh阴性血型调查报告

目的调查信阳市2008年献血者Rh阴性血型的血清学表型及不规则抗体的检出情况。方法采用血清学方法确定Rh表型,使用凝聚胺介质进行不规则抗体的筛选。结果检测献血者样本20425份,共检出Rh阴性血型49份（约为0．2％）,Rh阴性无偿献血者中检出不规则抗体的标本1份（约为2．0％）。结论Rh阴性献血者血清学表型和不规则抗体调查有利于提高输血的安全性。     

常州地区首例cisAB血型基因特征分析及家系调查

目的 研究1例ABO亚型及基因特征。 方法 采用试管法对家系3代共7例标本进行ABO血型血清学鉴定;对正反定型不一致的标本运用聚合酶链式反应序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP)法基因分型;并对ABO基因第6和7外显子扩增产物进行测序分析。 结果 ABO血型血清学发现7例标本中正反定型不符3例,其中2例红细胞表型为cisAB/A 或ABx,1例为cisAB/O或A2Bx;基因分型为ABO*cisAB01/A101、ABO*cisAB01/O01。ABO基因序列分析:ABO*cisAB01/A101第7外显子发生467C>T、803G>C的特征性突变,ABO*cisAB01/O01第6外显子261位缺失G,第7外显子在467C>T、803G>C存在特征性突变。测序结果均携带有ABO*cisAB01基因。 结论 ABO*cisAB01基因能导致A抗原或者B抗原的弱表达并能稳定遗传,因此应将血型血清学和分子生物学方法相结合才能准确鉴定ABO亚型。     

A3亚型血型的血清学和分子生物学鉴定分析

目的探讨A3亚型血型的血清学和分子生物学特征。方法采用单克隆抗-A、抗-B、抗-A1血型试剂检测2例ABO正反定型不符先证者的红细胞ABO抗原,采用标准A、B、O反定型细胞检测先证者血清中的抗-A和(或)抗-B抗体,采用PCR-序列特异性引物分析法确定基因型,采用基因测序法检测ABO基因第6内含子和第7外显子基因序列,同时采集先证者1妻子、女儿的血液标本进行血清学血型和基因检测。结果先证者1、2红细胞与抗-A呈混合视野反应,血清与B型红细胞呈4+,PCR-序列特异性引物分析基因型分别为A307/O02和A102/O01,基因测序结果第7号外显子分别为C745T和C467T突变;先证者1妻子、女儿血型分别为A型、O型,基因型分别为A101/O02、O02/O02。结论 A3亚型ABO等位基因存在遗传的多态性。     

中国5个民族人群中HAP1基因编码区遗传多态性分布的研究

目的：研究中国5个民族健康人群中HAP1基因多态性分布，为建立中华民族特色的DNA修复基因多态性数据库提供基础资料。方法：PCR-SSCP分析及银染检测后，进行DNA序列测定。结果：所有样本的PCR-SSCP分析及银染检测均显示所测片段不存在多态性位点，DNA测序结果与Genebank中已知序列完全一致。结论：本实验条件下，未发现中国南方地区汉族人群及几个少数民族健康人群HAP1基因3、4、5外显子存在多态性位点。     

孕妇RhD基因表达对新生儿溶血病的诊断价值

目的研究孕妇Rh D基因对新生儿溶血病(HDN)的诊断价值。方法纳入150例Rh D阴性孕妇作为研究对象,采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测胎儿Rh D血型基因型,并采用微柱凝胶抗人球蛋白试验检测孕妇血浆Ig G抗-D抗体效价,记录检测结果,分析Rh D基因型、Ig G抗-D效价对诊断Rh-HDN的价值。结果扩增试验结果显示有134例胎儿Rh D基因外显子5、7和内含子4,为Rh D阳性,与表型结果相比,其中3例假阳性,16例无外显子和内含子,为Rh D阴性,与表型结果一致,基因型结果与表型结果一致性满意(Kappa=0.903,P=0.000)。Rh D阴性孕妇中,不规则抗体筛查阳性孕妇产前Ig G抗-D不同效价的Rh-HDN发生率差异有统计学意义(χ2=13.412,P=0.020)。结论 Rh D阴性孕妇中游离胎儿DNA基因型和抗体与HDN关系密切,产前行Rh D基因型和抗D抗体检测有助于Rh-HDN诊断。     

多囊卵巢综合征患者瘦素受体基因突变的研究

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者瘦素受体基因突变与瘦素抵抗的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)银染技术结合DNA直接测序,检测PCOS患者33例(PCOS组)及育龄期单纯子宫肌瘤患者33例(对照组)腹壁脂肪组织中瘦素受体(LEPR)基因第2、4、6、7、8、13/14、20外显子的突变。结果共发现24例外显子4上有位置异常的电泳条带,其中PCOS患者18例,对照组6例。经直接测序分析,为A670→G670的纯合多态性突变,即109位氨基酸由赖氨酸(Lys K)置换成精氨酸(ArgR)。PCOS患者的该位点检测到的A→G的多态性变异频率明显高于对照组(P0.05)。所有检出第4外显子K109R多态性的患者血清瘦素水平高于未检出变异者(P0.01)。结论 PCOS患者LEPR基因胞外区第4外显子突变频率高于对照组,第4外显子K109R多态性可能与PCOS有遗传倾向的瘦素抵抗有关。     

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1多态性的检测

目的 检测人类聚腺苷二磷酸核糖聚合酶—1(PARP—1)5个外显子核苷酸多态性。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)—单链构象多态性(SSCP)和银染技术检测3个民族634名正常人PARP—1基因多态性。结果 在3个民族634名正常人血标本的5个外显子扩增产物SSCP电泳条带中，219名汉族人PARP—1基因5个外显子均未检出多态性条带；203名布依族和212名壮族人PARP—1基因的5个外显子扩增产物中分别有2例的外显子20的SSCP电泳条带检出1条多态性条带。其余4个外显子扩增产物SSCP电泳未见多态性条带。结论 PARP—1基因第20外显子上可能存在多态性。PCR—SSCP银染技术具有简便、高效、快速、重现性好等优点，是对大样本进行PARP—1基因突变筛检的一种有效的方法。可用于分子流行病学研究。     

2009～2011年枣庄市无偿献血者RhD阴性血型调查

[目的]了解枣庄市RhD阴性者血型分布情况,以满足临床对Rh阴性血的需求。[方法]2009年1月至2011年5月,对枣庄市五区和滕州市的20 369名初次街头无偿献血者进行血型分型。[结果]合计调查献血员20 369人,检出RhD阴性者59人,RhD阴性率为0.28%。RhD阴性率,五区和滕州市分别为0.28%、0.30%,男性和女性分别为0.30%、0.27%。59名Rh阴性者表型分布,ccdee型占59.32%,Ccdee型占27.12%,CcdEe型占8.47%,ccdEe型占5.08%。[结论]枣庄市献血者RhD阴性表型分布以ccdee型居多。     

2009-2011年枣庄市无偿献血者RhD阴性血型调查

[目的]了解枣庄市RhD阴性者血型分布情况,以满足临床对Rh阴性血的需求。[方法]2009年1月至2011年5月,对枣庄市五区和滕州市的20369名初次街头无偿献血者进行血型分型。[结果]合计调查献血员20369人,检出RhD阴性者59人,RhD阴性率为0．28％。RhD阴性率,五区和滕州市分别为0．28％、0．30％,男性和女性分别为0．30％、0．27％。59名Rh阴性者表型分布,ccdee型占59．32％,Ccdee型占27．12％,CcdEe型占8．47％,ccdEe型占5．08%。[结论]枣庄市献血者RhD阴性表型分布以ccdee型居多。     

济南市无偿献血人群ABO血型及与Rh血型分布研究

目的 研究济南市无偿献血人群中ABO、Rh血型的分布特点,并分析其ABO、Rh抗原表现型及基因频率,是否符合Hardy-Weinberg平衡定律。方法 对山东省血液中心采集的282 413份无偿献血样本采用血型血清学方法进行ABO、Rh血型检测,利用血型群体遗传学研究方法进行描述性分析。结果 2015—2017年无偿献血者282 413人,ABO表现型特征分布为B>O>A>AB;ABO基因频率为r>q>p,期望值和观察值符合Hardy-Weinberg平衡定律;不同性别、汉族和少数民族间ABO血型分布差异无统计学意义（均P>0.05）;Rh（+）中的ABO血型构成比与Rh（-）中的ABO血型构成比、汉族Rh（-）献血人群表现型与ABO血型表现型、Rh（-）献血人群表现型与ABO血型表现型差异均无统计学意义（均P>0.05）。共确认Rh（-）1 802名,占0.64%（含少数民族和重复献血者）,多表现为ccdee>Ccdee>ccdEe>CCdee>CcdEe>ccdEE>CCdEe,cde单倍型频率最高。无偿献血者中汉族266 498名,Rh（-）1 015名,占0.38%;RhD抗原在ABO血型系统中分布为B>O>A>AB,Rh血型表现型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。结论 济南市ABO血型与Rh血型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,两者间无相关性,是独立遗传的两个不同的血型系统。     

Serological evidence of Cryptosporidium infections in southern Europe

Although cryptosporidiosis outbreaks have been frequently reported in the United States, Canada and the United Kingdom, few outbreaks have been reported on the European continent. The reasons for this are unclear. To ascertain whether a European population has been previously exposed to Cryptosporidium, we conducted a survey of 100 resident blood donors in a northern Italian city for IgG serological response to two oocyst antigen groups. A serological response to the 15/17-kDa antigen group was detected in 83% of blood donors and response to the 27-kDa antigen group in 62%. Donors who traveled outside of Italy during the prior 12 months were less likely to have had a response to the 15/17-kDa antigen group (p < 0.04) and to have a less intense response (p < 0.05). Older age was predictive of a more intense response to each antigen group (p < 0.01). The fraction of Italian blood donors with a serological response to either antigen group was higher than in four United States blood donor populations, with differences more pronounced for response to the 15/17-kDa antigen group (p < 0.01). A lower fraction of Italian donors had a serological response to either antigen group than persons tested at the time of a cryptosporidiosis outbreak in the United States or blood donors tested six months after that outbreak (p < 0.05). Since the presence of serological responses to these antigen groups predicts a reduced risk of cryptosporidiosis, the high prevalence of serological responses in these Italian blood donors may explain the infrequent occurrences of clinically detectable cryptosporidiosis in this city.     

Role of ALAT level in preventing post-transfusional hepatitis. Prospective study of 1,180 blood donors in Tunisia

In Tunisia, regular serological tests for prevention of blood transmitted hepatitis consist in the research of HBS antigen and HCV antibodies. Our purpose in this study is to estimate the prevalence of hypertransaminasemia in blood-donors and to determinate to what extent it could prevent blood-transmitted hepatitis. Therefore we have assessed ALAT sera level in 1180 blood-donors. It rate is considered elevated if higher than twofold the normal rate (> N = 40 Ul/l). Donors with high ALAT level were summoned three months later after their blood gift to undergo clinical examination and a new serological test, researching seroconversion of HBS Ag and HCV antibodies. With regarding to estimation of residuel HCV infection risk, we were based on M.P Busch's data. Hpertransaminasemia was modified in 134 individuals (11.5%). Only 67 had replied to our summons. Alcoholism was involved in one case. Smoking was found in most of male donors. We had discovered neither weight excess nor drug or medicines consumption which could explain increasing ALAT. New serological list had revealed seroconversion for HCV antibodies in ELISA but with undeterminated profile in Immunoblot (anti NS5 solely). PCR was not carried out. Residual infection risk being considered, use of hypertransaminasemia detection in blood donors should prevent nearly 1.67 blood transmitted hepatitis per million transfusions units. However if we consider shortage in blood derivates in Tunisia, such a decision should be comprehensively weighted numerous blood donors will be moved aside.     

Serological evaluation of Cryptosporidium oocyst findings in the water supply for Sydney,Australia

From July to September, 1998, high levels of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts were detected in Sydney, Australia drinking water. To evaluate whether Sydney residents had an elevated risk of infection, serological responses to two Cryptosporidium antigen groups (15/17- and 27-kDa) were compared for 104 Sydney blood donors and 104 Melbourne blood donors. Over half of all donors had a detectable response to the 15/17-kDa antigen group (Sydney-56.7%, Melbourne-61.5%) and to the 27-kDa antigen group (Sydney-66.3%, Melbourne-77.9%). There were no statistically significant differences between Sydney and Melbourne donors in the intensity of serological responses for either the 15/17-kDa (p = 0.81) or the 27-kDa (p = 0.45) antigen groups. These results are not consistent with an elevated risk of Cryptosporidium infection among either Sydney or Melbourne blood donors, despite the detection of oocysts in the Sydney drinking water. Given the public health concerns over detecting oocysts in drinking water, serological studies offer a rapid and inexpensive method for comparing the levels of infection in an exposed and unexposed population.     

血清学检测与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究

目的评价血清学检测与核酸检测在降低输血相关风险中的相关性。方法对大连市血液中心2012年12月1日-2013年5月31日共计33 708份献血者标本同时进行血清学检测(HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶)和HBV/HCV/HIV三联核酸定性检测。单纯核酸检测反应性的标本需进行鉴别试验,对鉴别阴性的献血者进行跟踪检测。将HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体三项酶联免疫检测与核酸检测结果对比分析。结果酶联免疫检测单试剂不合格率为1.38%。酶联免疫检测双试剂反应性而核酸检测无反应性的不合格标本有40份,其中HBsAg反应性12份,HCV抗体反应性28份。单纯核酸检测反应性标本有46份,经鉴别和追踪确认HBV感染献血者15例,HIV窗口期感染1例,无HCV RNA的检出。结论核酸检测对于血清学阴性的HBV感染检出效果明显;但对于感染了HBV但病毒载量极低的献血者,核酸检测存在漏检的可能;血液筛查中核酸检测不能代替血清学检测;慎重对待核酸检测的假阳性结果,制定合理的献血者评估策略以减少献血者流失。     

中国人热性惊厥与MASS1基因的分子生物学研究

目的:研究中国人热性惊厥患者MASS1单核苷酸多态性位点(SNP)与基因突变情况。方法:抽取44位热性惊厥患者外周血,提取DNA,设计MASS1基因全部35个编码外显子引物,经PCR扩增,采用Sanger双脱氧链终止法测序。结果:共发现3个单核苷酸多态性位点,其中1个为位于第13外显子尚未有文献报道的新单核苷酸多态性位点2625A>C,致使原来的密码子CGA变成CGC,均编码精氨酸。另有2个单核苷酸多态性位点与已有文献报道相符,分别为第29外显子6666G>A及第33外显子7798T>G单核苷酸多态性位点。未发现新的基因突变。结论:MASS1基因存在多个单核苷酸多态性位点,对进一步研究中国人热性惊厥分子遗传学机制具有理论积累意义。