IL-27基因转染人食管癌细胞诱导PBMC产生IFN-γ和IL-12的研究

目的：探讨小鼠白介素（mIL-27）基因转染人食管癌细胞株诱导正常人外周血单个核细胞（PBMC）产生IFN-γ和IL-12的作用。方法：以逆转录病毒作为载体，将mIL-27基因转染入人食管癌细胞株Ecal09获得表达mIL-27的阳性细胞克隆（Eca109／mIL-27），RT-PCR检测目的基因的表达，用MTT法检测转基因mIL-27对细胞增殖的影响，用EUSA法检测其诱导正常人PBMC产生IFN-γ和IL-12的能力。结果：建立了表达mIL-27基因的人食管癌细胞株，Eca109／mIL-27细胞中有mIL-27p28和EBI3亚基基因表达，而Eca109／LXSN和Eca109细胞中未见表达，P〈0．01；Eca109／mIL-27与Eca109／LXSN和Eca109体外的体外增殖差异无统计学意义，P〉0．05；Eca109／mIL-27诱导正常人PB—MC产生IFN-γ和IL-12的含量高于Eca109／LXSN和Eca109，P〈0．01。结论：IL-27基因转染人食管癌细胞后可以诱导PBMC产生IFN-γ和IL-12的能力提高，提示可以用于肿瘤的免疫治疗。     

促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡

目的： 探讨 IL-27 基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用。 方法： 重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染 IL-27 基因的Aspc1细胞（Aspc1/IL-27）。ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响。将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN（稳定转染空质粒的Aspc1细胞）和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化。 结果： 成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株。Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27（P<0.01）。PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达（P>0.05）。Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组（P<0.05）,且生存期延长（P<0.05）。Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组\[（19.5±2.4）% vs（8.5±03）%、（9.1±0.8）%,P<0.01\]。 结论： IL-27 基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

IL-23基因转染小鼠乳腺癌细胞的体内外促凋亡作用研究

目的:将小鼠IL-23基因转染小鼠乳腺癌细胞MA-891,检测该细胞在体内外的凋亡变化,探讨IL-23抗肿瘤作用机制.方法:应用逆转录病毒载体(LXSN)将含 IL-23 基因质粒经ψ2(亲嗜性)和PA317(双嗜性) 2种细胞包装,G418筛选获得携带 IL-23 基因的病毒,后者转染MA-891细胞,经G418筛选后获得IL-23/MA-891阳性克隆.用ELISA法检测IL 23/MA-891细胞分泌IL-23的能力,用MTT比色法检测细胞体外增殖能力.小鼠皮下接种转染IL-23/MA-891细胞,观察其体内致瘤性变化;用流式细胞术及TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况;用RT-PCR和Western 印迹法检测肿瘤组织Fas和survivin的表达.结果: IL-23 基因成功转染MA-891细胞,获得了IL-23高表达细胞IL-23/MA-891.转染 IL-23 基因不影响MA-891细胞的体外生长和细胞凋亡,但体内 IL-23 基因转染组肿瘤生长明显受到抑制,肿瘤组织细胞凋亡率增高( P <0.01),细胞表面Fas的表达水平明显增加( P <0.01),survivin表达水平明显降低( P <0.01).结论:转染小鼠 IL-23 基因后对小鼠乳腺癌细胞MA-891的体外凋亡无影响,但在体内 IL-23 可能通过降低survivin表达和上调Fas表达,诱导细胞凋亡而产生抗肿瘤作用.     

Mda-7/IL-24基因转染对肝癌细胞生长的影响

目的研究Mda-7/IL-24基因对肝癌细胞系Hep3B生长的影响。方法构建Mda-7/IL-24基因的真核表达载体pcDNA3.1/Mda-7/IL-24,用脂质体介导的基因转染法分别将真核重组体pcD-NA3.1/Mda-7/IL-24和pcDNA3.1空载体质粒导入人肝癌细胞系Hep3B细胞中,经G418筛选获得细胞克隆。通过聚合酶链式反应（PCR）、免疫组织化学等方法检测基因和蛋白的表达、细胞生长增殖情况。结果将pcDNA3.1载体和pcDNA3.1/Mda-7/IL-24重组体转染肝癌细胞系Hep3B中,RT-PCR结果显示pcDNA3.1/Mda-7/IL-24克隆中有680bp的扩增条带,而pcDNA3.1空载体转染的克隆未见的扩增条带,未转染的Hep3B细胞亦未见680bp的条带;转染Mda-7/IL-24的Hep3B细胞与空白质粒载体转染的Hep3B细胞和Hep3B细胞的生长速度相比,后两者生长速度较快。结论将外源性Mda-7/IL-24基因导入Hep3B细胞后,可以抑制细胞生长。     

黏蛋白1基因磁转染树突状细胞诱导细胞毒性T细胞抗膀胱肿瘤免疫效应的研究

目的：探讨黏蛋白1（mucins 1,MUC1）基因磁转染体外人树突状细胞（dendritic cell,DC）的可行性,观察其诱导的特异性抗MUC1膀胱癌CTL的免疫效应。方法：以葡聚糖磁性纳米颗粒（DMN）作为载体,在多聚赖氨酸（PLL）的辅助下,通过静电作用结合MUC1基因的真核表达载体pEGFP-C1-MUC1,在钕-铁-硼稀土强磁块的磁场作用下转染DC,荧光显微镜下观察及流式细胞术检测转染效率,并用RT-PCR法检测转基因DC中MUC1基因的表达;再将转染MUC1基因的DC与自体T细胞共培养,并分别用乳酸脱氢酶释放法检测所致敏的细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte,CTL）对MUC1特异性抗膀胱癌（膀胱肿瘤BIU87细胞系）的杀伤活性,用透射电镜观察CTL诱导靶细胞凋亡情况;ELISA法测定MUC1基因修饰后的DC刺激自体T细胞分泌IFN-γ的能力。结果：pEGFP-C1-MUC1转染效率为10%左右,荧光显微镜下可观察到明显绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法可检测到MUC1条带,转染MUC1基因的DC与自体T细胞混合培养后能诱导出MUC1特异性的CTL,对BIU87细胞的杀伤实验表明T-DC-MUC1的杀伤活性显著高于对照组T-DC-pEGFP-C1和T-DC诱导的CTL（P均〈0.05）;在透射电镜下也可观察到部分BIU87膀胱肿瘤细胞出现了细胞核核仁消失,染色质浓集于核膜周围等早期凋亡表现;基因修饰后的DC能刺激自体T细胞分泌高水平的IFN-γ,明显高于未转染的DC（P〈0.05）。结论：葡聚糖磁性纳米颗粒在固定磁场的作用下成功将MUC1基因转入DC,并可有效诱导出特异性抗MUC1膀胱癌的细胞毒性T细胞。     

IL-27促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡

目的:探讨IL-27基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用.方法:重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染IL-27基因的Aspc1细胞(Aspc1/IL-27).ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响.将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN(稳定转染空质粒的Aspc1细胞)和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化.结果:成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株.Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27(P＜0.01).PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达(P＞0.05).Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组(P＜0.05),且生存期延长(P＜0.05).Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组[(19.5±2.4)%vs(8.5±0.3)%、(9.1±0.8)%,P＜0.01].结论:IL-27基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用.     

CRISPR/Cas9 介导的PD-1基因敲除对食蟹猴T细胞增殖、表型及IFN-γ和IL-2 分泌的影响

目的：探讨CRISPR/Cas9 基因编辑技术敲除食蟹猴T细胞PD-1 基因对T细胞增殖、表型及IFN-γ、IL-2 分泌的影响。方法: 设计靶向食蟹猴PD-1 基因的gRNA，构建并提取质粒，分离食蟹猴外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC），加入质粒DNA，用Lonza 4D电转仪进行细胞转染，转染48 h 后用流式细胞术和荧光显微镜技术检测转染效率。提取细胞基因组DNA进行PCR扩增及T7E1 酶切鉴定。在人源性CD3 抗体和IL-2 刺激下诱导食蟹猴T细胞增殖并绘制细胞生长曲线，PI 染色流式细胞术检测T细胞的细胞周期及CD4、CD8 表达水平，ELISA检测IFN-γ、IL-2 的分泌水平。结果: 转染48 h 后，荧光显微镜下见实验组出现绿色荧光蛋白表达的细胞，其转染效率为（21.6±3.2）%；实验组细胞基因组DNA PCR产物经T7E1 酶切显示3 条带，出现目的分裂条带（243、197 bp）。与未转染组比较，（1）实验组T细胞增殖缓慢、集落形成时间延迟、细胞体积较小、折光性较弱；（2）实验组处于G0/G1 期的T 细胞数显著增多（P<0.05）、G2/M 期细胞数显著减少（P<0.05）；（3）实验组T 细胞IFN-γ、IL-2 的分泌水平显著升高（均P<0.05），但CD4、CD8 表达水平比较差异无统计学意义（均P>0.05）。结论: PD-1 基因敲除可使食蟹猴T细胞阻滞于G0/G1 期从而抑制其增殖，同时上调了IFN-γ、IL-2 的分泌水平。     

乳腺癌耐药蛋白(BCRP)高表达耐药细胞系的建立及其耐药机制的初步研究

目的:建立稳定表达乳腺癌耐药蛋白(Breast cancer resistance protein,BCRP)的小鼠成纤维细胞系PA317/BCRP,初步探讨其耐药机制.方法:从乳腺癌耐药细胞系MCF-7/ADR中克隆BCRP基因.将编码序列克隆导入真核表达载体pcDNA3.1,转化感受态E.Coli DH5α,获得重组质粒pcDNA3.1/BCRP,酶切并测序鉴定.用电穿孔法将质粒转染PA317细胞,同时转染pcDNA3.1/EGFP.G418筛选阳性克隆.阳性转染细胞提取细胞总RNA,RT-PCR检测BCRP的mRNA表达.Western blot检测BCRP蛋白表达.MTT法检测耐药克隆PA317/BCRP细胞对米托蒽醌(Mitoxantrone,MTZ)耐药性,罗丹明123外排实验验证转染后细胞外排罗丹明123功能.Western blot检测P13K-AKT信号转导通路下游靶点AKT表达变化.结果:构建质粒pcDNA3.1/BCRP,转染PA317细胞,G418筛选.RT-PCR和Westem blot,均检测到细胞中BCRP基因转录及蛋白表达.与空质粒转染细胞、未转染细胞时照组相比,PA317/BCRP细胞对MTZ耐药性增强,且外排罗丹明123能力增强.检测P13K-AKT途径下游靶点AKT蛋白磷酸化水平在PA317/BCRP细胞内明显增高.结论:1、成功获得稳定表达BCRP的PA317细胞系-PA317/BCRP,经MTT和罗丹明123外排实验证实,其耐药和外排功能增强.2、检测PA317/BCRP细胞P13K-AKT途径下游靶点AKT的表达,观察到耐药细胞的AKT表达含量明显高于转染空质粒和未转染的PA317细胞.推测BCRP可能通过影响AKT表达上调发挥其耐药作用.     

表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗增强DC活性

目的：观察表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗体内外对DC活性的影响。方法：以脂质体法将CD40L基因转染colon26细胞获得稳定表达CD40L的colon26/CD40L瘤苗。colon26/CD40L细胞与小鼠骨髓来源DC共培养,流式细胞术检测DC表型变化,RT-PCR法检测细胞因子基因P19、P35、P40、IL-18和IFN-γ的表达,ELISA法检测共培养上清中IL-12、IL-23和IFN-γ的水平。BALB/c小鼠皮下注射colon26细胞制备荷瘤小鼠模型,colon26/CD40L致敏DC治疗荷结肠癌小鼠,ELISA法检测荷瘤小鼠外周血中IL-12、IL-23、IFN-γ、IL-10和TGF-β的水平,H-E染色观察肝、脾和肿瘤组织的病理学变化。结果：成功获得高表达CD40L的丝裂霉素（MMC)处理的colon26/CD40L瘤苗。DC与colon26/CD40L瘤苗共培养后,DC表面共刺激分子CD80、CD86、MHCⅠ和MHCⅡ表达增高（P<0.01）;共培养体系中可检测到P19、P35、P40、IL-18和IFN-γ mRNA的表达,而在其他组未检测到上述基因的表达;共培养细胞上清中有较高水平的IL-12、IL-23和IFN-γ（P<0.01）。colon26/CD40L瘤苗致敏DC治疗组与colon26/CD40L瘤苗治疗组、DC治疗组比较,小鼠移植瘤的体积和质量明显减小和减少（P<0.05）;小鼠外周血IL-12、IL-23和IFN-γ明显升高（P<0.01）,IL-10和TGF-β明显降低（P<0.01）;小鼠移植瘤组织病理变化显著减轻。结论：表达CD40L的丝裂霉素（MMC)处理的结肠癌瘤苗可促进DC的成熟,刺激DC分泌细胞因子,增强DC体内外活性,从而增强治疗体系的抗肿瘤免疫效应。     

bax嵌合基因克隆及其在人舌癌细胞的表达

目的；构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的box嵌合基因。方法：将RT－PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX-5T，再将bax cDNA插入人α1(Ⅰ）胶原基因作用元件（CIP）与报告基因CAT之间，构成pSV-CIP-bax-CAT嵌合基因；用阳离子脂质体DOSPER将此嵌合基因转染至人舌鳞部细胞Tca8113；用免疫狭印迹和ELISA方法分析报告基因CAT和目的基因bax在细胞中的表达。结果：bax基因编码序列及嵌合基因限制性酶谱正确；CAT表达的ELISA检测证实，转染是成功的，且CIP在Tca8113细胞中有促进其下游基因表达的作用（为对照组的15倍）；免疫狭缝印迹和ELISA证实，转染细胞能高效表达Bax蛋白（为对照组的8倍）。结论：bax嵌合基因pSV-CIP-bax-CAT能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白，为进一步研究bax基因对舌癌细胞生长与凋亡的影响奠定了基础。     

IL-18的抗肿瘤作用

白细胞介素 18(IL 18)是近年发现的新型细胞因子 ,具有诱生IFN γ、增强NK细胞活性、增强Th1型免疫反应、抗肿瘤作用等多种生物学功能 ,是一种应用前景较好的抗肿瘤细胞因子。综述IL 18的发现与来源、理化特性、生物学活性及抗肿瘤机理。     

白细胞介素-18及其抗肿瘤作用

白细胞介素-18（IL-18）是新近发现的一种多效能细胞因子，在刺激T细胞增殖，增强Th、细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞等活性，抗肿瘤、免疫调节等方面有着积极的作用，有潜在广阔的应用前景。进一步研究IL-18抑制肿瘤的机制及其生物学作用具有重要的意义。     

IL-18-producing Salmonella inhibit tumor growth

Previous studies have shown that intravenously applied bacteria can accumulate in tumors and lead to sporadic tumor regression. Recently, systemic administration of attenuated Salmonella typhimurium was demonstrated to generate no significant side effects in humans, but also no antitumor responses. We report the enhanced antitumor activity in preclinical mouse cancer models of nonvirulent S. typhimurium engineered to synthesize the cytokine Interleukin-18 (IL-18). IL-18-producing bacteria (but not control bacteria) inhibit the growth of primary subcutaneous tumors as well as pulmonary metastases in immunocompetent mice challenged with syngeneic multidrug-resistant clones of murine carcinoma cell lines, without overt toxicity to normal tissues. Antitumor activity was associated with increased accumulation of T-lymphocytes and NK cells in tumors, and massive infiltration of granulocytes, as well as increased intra-tumoral production of several cytokines. In summary, these findings provide evidence of promising preclinical antitumor activity of IL-18-expressing, attenuated S. typhimurium, suggesting a novel strategy for cancer immunotherapy.     

良恶性原发肝肿瘤患者血IL-18及IL-18BP含量测定及临床意义

目的:探讨血清IL-18、IL-18BP的水平与原发性肝癌、良性肝肿瘤及肝硬化的发生、发展关东.揭示血清IL-18及IL-18BP在原发性肝癌诊断中的作用.方法:应用ELISA法检测原发性肝癌36例、良性肝肿瘤18例、肝硬化25例及正常人20例的血清IL-18及IL-18BP含量及原发性肝癌患者血中AFP的含量,比较各组间IL-18及IL-18BP含量的差别及原发性肝癌患者血AFP与IL-18、JL-18BP的关系.结果:原发性肝癌患者血清JL-18水平明显低于正常对照组、肝硬化组及良性肝肿瘤组,而血清IL-18BP的水平明显高于正常对照组、肝硬化组和良性肝肿瘤组,差异有显著性(P<0.001),且原发性肝癌组的血清IL-18及IL-18BP水平与其临床分期有密切联系:临床分期越晚,血清IL-18水平越低,血清IL-18BP水平越高;临床分期越低,血清IL-18水平越高,血清IL-18BP水平越低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).另外.原发性肝癌惠者的血清IL-18水平与AFP含量成负相关(γ=-0.715 2,n=36,P<0.01),血清IL-18BP的水平与AFP含量成正相关(γ=631 5,n=36,P<0.01);肝硬化患者、良性肝肿瘤患者血清IL-18及IL-18BP水平均明显高于正常人,差异有显著性(P<0.01).结论:外周血IL-18及IL-18BP水平可反映原发性肝癌、良性肝肿瘤及肝硬化患者的免疫功能状态及原发性肝癌患者的临床分期,可作为原发性肝癌的辅助诊断及临床分期的有效指标,与AFP同时检测,可提高原发性肝癌的诊断符合率.     

Clinical significance of serum IL-18 and IL-18BP in patients with benign or malignant primary liver tumors

OBJECTIVE To study the relationship between the serum levels of IL-18 and IL-18BP in the development and growth of primary liver cancer, benign liver tumors and liver cirrhosis and to determine the value of serum IL-18 and IL-18BP in the diagnosis of primary liver cancer. METHODS The serum levels of IL-18 and IL-18BP in 36 patients with primary hepatic carcinoma （PHC） were detected. Eighteen patients were diagnosed with various benign liver tumors and 21 patients with cirrhosis of liver （LC）, determined by using an ELISA assay. The serum levels of AFP in 36 patients with primary liver cancer were examined. The relationship among levels of serum IL-18, IL-18BP and AFP in the primary liver cancer was explored. RESULTS The sIL-18 levels in PHC were significantly lower than in control group, the benign liver tumor group and the LC group. The sIL-18BP in PHC was significantly higher than that in control group, benign liver tumor group and LC group （P 〈 0.001）. There was a close correlation between the levels of IL-18, IL-18BP and clinical stage in PHC： the later clinical stages had lower levels of IL-18 and higher levels of IL-18BP while the earlier clinical stages had higher levels of IL-18 and lower levels of IL-18BP. There was a negative correlation between serum levels of IL-18 and AFP in the PHC group （r = -0.7152, n = 36, P 〈 0.01）, and there was a positive correlation between serum levels of IL-18 BP and AFP in the patients with PHC （r = 0.6315, n = 36, P 〈 0.01）. The IL-18 and IL- 18BP in the patients with various benign liver tumors or LC were significantly higher than those in control group. The differences were statistically significant （P 〈 0.01）. CONCLUSION Serum levels of IL-18 and IL-18BP can reflect the immune function of patients with primary liver cancer, with various benign liver tumors or with LC and can also be indicative of the clinic stage of primary liver cancer. It can be used to assist in making a diagnosis and in determining the clinical stage of PHC. Detecting AFP concurrently can help make the diagnosis of primary liver cancer more precise.     

重组人IL-18的基因克隆与表达的研究

目的 :利用基因重组技术构建人IL 18(rhIL 18)的真核表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法 :利用RT PCR技术从外周血细胞扩增得到IL 18的cDNA并测定其核酸序列。将扩增产物酶切后克隆到pORF5质粒的NcoⅠ /NheⅠ酶切位点 ,转化大肠杆菌JM10 9,筛选阳性重组子 ,构建真核表达质粒pORF5 hIL 18。结果 :真核表达质粒pORF5 hIL 18在大肠杆菌JM10 9表达 ,能够诱导PBMC合成GM CSF ,具有协同rhIL 2增强NK细胞细胞毒作用的能力。结论 :重组表达的rhIL 18具有生物活性 ,可用于进一步的功能研究     

Cancer-induced immunosuppression: IL-18-elicited immunoablative NK cells

During cancer development, a number of regulatory cell subsets and immunosuppressive cytokines subvert adaptive immune responses. Although it has been shown that tumor-derived interleukin (IL)-18 participates in the PD-1-dependent tumor progression in NK cell-controlled cancers, the mechanistic cues underlying this immunosuppression remain unknown. Here, we show that IL-18 converts a subset of Kit(-) (CD11b(-)) into Kit(+) natural killer (NK) cells, which accumulate in all lymphoid organs of tumor bearers and mediate immunoablative functions. Kit(+) NK cells overexpressed B7-H1/PD-L1, a ligand for PD-1. The adoptive transfer of Kit(+) NK cells promoted tumor growth in two pulmonary metastases tumor models and significantly reduced the dendritic and NK cell pools residing in lymphoid organs in a B7-H1-dependent manner. Neutralization of IL-18 by RNA interference in tumors or systemically by IL-18-binding protein dramatically reduced the accumulation of Kit(+)CD11b(-) NK cells in tumor bearers. Together, our findings show that IL-18 produced by tumor cells elicits Kit(+)CD11b(-) NK cells endowed with B7-H1-dependent immunoablative functions in mice.     

IL-18 induces PD-1-dependent immunosuppression in cancer

Immunosuppressive cytokines subvert innate and adaptive immune responses during cancer progression. The inflammatory cytokine interleukin-18 (IL-18) is known to accumulate in cancer patients, but its pathophysiological role remains unclear. In this study, we show that low levels of circulating IL-18, either exogenous or tumor derived, act to suppress the NK cell arm of tumor immunosurveillance. IL-18 produced by tumor cells promotes the development of NK-controlled metastases in a PD-1-dependent manner. Accordingly, PD-1 is expressed by activated mature NK cells in lymphoid organs of tumor bearers and is upregulated by IL-18. RNAi-mediated knockdown of IL-18 in tumors, or its systemic depletion by IL-18-binding protein, are sufficient to stimulate NK cell-dependent immunosurveillance in various tumor models. Together, these results define IL-18 as an immunosuppressive cytokine in cancer. Our findings suggest novel clinical implementations of anti-PD-1 antibodies in human malignancies that produce IL-18.