电针预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质神经元pSTAT3蛋白表达的影响

目的 评价电针预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质神经元磷酸化信号转导及转录激活因子3(pSTAT3)蛋白表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠45只,体重280 ～ 320 g,采用随机数字表法,将其随机分为假手术组、局灶性脑缺血再灌注组和电针预处理组(n=15).局灶性脑缺血再灌注组采用线栓阻塞颈总动脉和颈外动脉24 h恢复灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.电针预处理组电针刺激百会穴30 min,处理后24h时制备模型,再灌注24 h时进行神经行为学评分,随后处死大鼠取脑测定脑梗死体积,计算脑梗死体积百分比,采用免疫荧光染色和Westem blot法检测缺血半暗带皮质神经元pSTAT3蛋白的表达.结果 与假手术组比较,局灶性脑缺血再灌注组和电针预处理组神经行为学评分降低,脑梗死体积百分比增加,皮质神经元pSTAT3蛋白表达上调(P＜0.05);与局灶性脑缺血再灌注组比较,电针预处理组神经行为学评分升高,脑梗死体积百分比减少,皮质神经元pSTAT3蛋白表达上调(P＜0.05).结论 电针预处理通过上调皮质神经元pSTAT3蛋白的表达减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

Notch信号通路在电针预处理诱导大鼠脑缺血耐受中的作用

目的 探讨Noah信号通路在电针预处理诱导大鼠脑缺血耐受中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠52只,体重280～320 g,随机分为2组(n=26):正常对照组(C组)不做任何处理;电针预处理组(EA组)于百会穴进行电针刺激(刺激条件:疏密波2/15Hz,电流强度1 mA),30 min次,1次/d,连续5 d.最后一次电针刺激结束后24 h采用阻断单侧大脑中动脉120 min再灌注72 h的方法制备局灶性脑缺血再灌注模型.分别于缺血前即刻、再灌注24 h及再灌注72 h时采用Western blot法测定缺血侧大脑皮层Notch细胞内片段(NICD)蛋白的表达,采用实时定量PCR法测定缺血侧大脑皮层Notch通路信号分子的表达;于再灌注72 h时进行神经功能损伤评分,评分完毕后测定脑梗死体积百分比.结果 缺血前即刻两组大脑皮层Hesl mRNA及NICD蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与缺血前即刻比较,两组再灌注24、72 h时NICD蛋白表达上调,C组再灌注72 h时Hesl mRNA 表达上调,EA组再灌注24 h时Hesl mRNA表达上调(P<0.05);与再灌注24 h时比较,再灌注72 h时C组Hesl mRNA及NICD蛋白表达均上调,EA组Hesl mRNA及NICD蛋白表达均下调(P<0.05);与C组比较,EA组缺血前即刻Notchl mRNA、Notch4 mRNA及Jagl mRNA的表达上调,再灌注24 h时Hesl mRNA及NICD蛋白表达上调,再灌注72 h时Hesl mRNA及NICD蛋白表达下调,脑梗死体积百分比降低,神经功能损伤评分升高(P<0.05).结论 Notch信号通路可能参与了电针预处理诱导的大鼠脑缺血耐受.     

缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法36只雄性SD 大鼠随机分为3组(n=12),对照组:即单纯缺血再灌注组;缺血后处理15s组(I-15 s组):大脑中动脉线栓阻闭(MCAO)90 min后,再灌注15 s,缺血15 s,反复3次;缺血后处理30 s组(I-30 s组):MCAO 90 min后,再灌注30 s,缺血30 s,反复3次。再灌注24 h后对所有动物行神经功能障碍评分(NDS),然后取大脑测定脑梗死容积。结果再灌注24 h后I-15 s和I-30 s组NDS与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。再灌注24 h后脑梗死容积I-15s组为(271±97)mm3,I-30 s组为(217±85)mm3,小于对照组[(378±103)mm3](P<0.01),I-15 s和I-30 s组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血后处理可减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠脑的病理性损伤。     

雷米芬太尼预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察雷米芬太尼预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法23只雄性大鼠,随机分为两组。雷米芬太尼预处理(R)组(n=13)经股静脉注入雷米芬太尼(0.6μg·kg-1·min-1),每次5min输注,连续3次,中间间隔5min;盐水对照(C)组(n=10)经股静脉注入盐水,每次5min输注,连续3次,中间间隔5min;30min后,所有动物用右侧颈内动脉尼龙线线栓法致大脑中动脉阻闭120min,然后拔出尼龙线恢复再灌注。观察再灌注后24h神经功能障碍改变并评分。再灌注24h时处死动物,取大脑行2,3,5triphenyltetrazolium(TTC)染色以计算脑梗死容积百分比。结果缺血再灌注后动物均表现一定神经功能障碍,再灌注24h内C组神经功能障碍逐渐加重,R组则呈减轻趋势;再灌注24h时神经功能障碍评分(NDS)R组明显低于C组(P<0.05);再灌注24h时脑梗死容积百分比,R组明显小于C组(P<0.01)。结论雷米芬太尼预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤可产生保护作用。     

重复电针预处理对脑缺血再灌注大鼠脑皮层热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨重复电针刺激百会穴预处理对脑缺血再灌注大鼠脑皮质热休克蛋白70表达的影响。方法 20只雄性SD大鼠,随机分为对照组(n=10)和电针组(n=10)。对照组未行任何预处理;电针组予电针刺激百会穴,30 min·d-1,连续5d。最后一次预处理后24 h时,两组均采用颈内动脉尼龙线线栓法致大脑中动脉阻闭(120 min)。缺血再灌注后24 h将大鼠灌注固定,取脑组织行病理学观察及免疫组织化学染色,并按照McCarthy等的方法对免疫组化染色结果进行半定量分析。结果 半定量分析结果,电针组皮层HSP70表达(1.9±0.6)明显强于对照组(0.9±0.4)(P<0.05)。电针组组织病理学损害轻于对照组。结论 重复电针刺激百会穴预处理减轻脑缺血再灌注损伤与皮层HSP70表达增强有关。     

舒芬太尼预先给药对大鼠急性局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 观察舒芬太尼预先给药对大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)所致局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用.方法 40只雄性大鼠随机均分为四组,分别于缺血造模前腹腔注射舒芬太尼3μg/kg(S_1组)、6μg/kg(S_2组)、9μg/kg(S_3组)和等容积生理盐水为对照组(C组).给药后30 min,所有动物用右侧颈内动脉尼龙线线栓法致MCAO,120 min后恢复再灌注.再灌注24 h后记录神经功能障碍评分(NDS).随后取大脑切片行TTC染色,计算脑梗死容积百分比.结果 再灌注后24h,S_1组NDS评分明显高于其他三组(P<0.05),梗死容积百分比明显低于其他三组(P<0.05),S_2、S_3、C组间NDS评分和梗死容积百分比差异均无统计学意义.结论 舒芬太尼3μg/kg预先给药可明显减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤.     

七氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察七氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血一再灌注损伤的保护作用。方法32只雄性SD大鼠随机均分为四组，假手术组：仅分离血管，不留置线栓；Sevol、Sevo2和对照组：分别在缺血前吸入2％、3％七氟醚和纯氧30min。用左颈内动脉尼龙线线栓法使大脑中动脉阻闭120min，拔出尼龙线恢复再灌注。观察再灌注24h后神经功能损害改变并评分，然后处死动物取大脑行2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色以测量脑梗死体积。结果缺血-再灌注损伤后对照组大鼠神经功能损害较Sevol和Sevo2组更明显（P〈0．05或P〈0．01）。缺血-再灌注损伤24h后Sevo1组和Sevo2组脑梗死体积和梗死体积百分比，较对照组减小（P〈0．01）。结论缺血前吸入2％、3％七氟醚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤可产生保护作用。     

七氟醚后处理对局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的评价在缺血后期及再灌注早期吸入不同浓度的七氟醚行后处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其剂量依赖性。方法雄性SD大鼠50只,随机分为空白对照组、吸氧组和0.5、1.0、1.5MAC七氟醚后处理组,每组10只。采用大脑中动脉线栓法阻闭(middle cerebral artery occlusion,MCAO)120min后再灌注72h制备局灶性脑缺血模型。各七氟醚后处理组于再灌注即刻的前20min和后10min给予不同浓度七氟醚吸入。再灌注后的24、48和72h行神经功能评分(NDS),并于最后一次评分后测定脑梗死容积比。结果0.5、1.0和1.5MAC组的脑梗死容积比分别为0.39±0.03,0.31±0.03和0.24±0.03(P<0.05),明显小于对照组0.53±0.05(P<0.05)。吸氧组为0.51±0.05,与对照组比差异无统计学意义。各个时间点七氟醚后处理组NDS明显优于对照组和吸氧组。结论在局灶性脑缺血-再灌注的缺血后期和再灌注早期吸入0.5、1.0和1.5MAC七氟醚行后处理均具有脑保护作用,并呈现剂量依赖性。     

线粒体KATP通道介导七氟醚预处理对大鼠的脑保护作用

目的 探讨七氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注(IR)损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠60只随机均分为七氟醚预处理组(S组)、5-HD+七氟醚预处理组(HS组)、5-羟葵酸(5-HD)组(H组)、IR组和假手术组(C组).采用大脑中动脉线栓法缺血2 h、再灌注24 h制备大鼠局灶性脑IR模型(MCAO).S组于缺血前1 h经半密闭的吸入箱吸入七氟醚(呼气末浓度维持2.4%,持续30 min).HS、H组缺血前或七氟醚预处理前经尾静脉注射5-HD(10 mg/kg).再灌注24 h后用Zea Longa评分法进行神经功能缺陷评分,TTC染色法测大鼠脑梗死容积,免疫组化法测定大脑皮质Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 与IR组比较,S组神经功能缺陷评分明显降低,脑梗死容积显著减少(P＜0.05);但HS、H、IR组神经功能缺陷评分和脑梗死容积差异无统计学意义.S组Bcl-2、Bax表达明显高于HS、H、IR组.结论 七氟醚预处理对局灶性脑IR损伤有一定程度的保护作用.其保护作用与mitoKATP通道的激活有关,并可能是通过调控凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达来实现.     

不同剂量乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨不同剂量乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠96只,体重250～300 g,采用大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.大鼠随机分为6组(n=16),假手术组(S组)腹腔注射生理盐水(NS)10.5 ml/kg,24 h后只分离血管;缺血再灌注组(I/R组)腹腔注射NS 10.5 ml/kg,24 h后制备模型;低剂量乳化异氟醚预处理组(L组)、中剂量乳化异氟醚预处理组(M组)、高剂量乳化异氟醚预处理组(H组)和脂肪乳剂组(IL组)分别腹腔注射8%乳化异氟醚3.5 ml/kg+NS 7.0 ml/kg、8%乳化异氟醚7.0 ml/kg+NS 3.5 ml/kg、8%乳化异氟醚10.5 ml/kg和30%脂肪乳10.5 ml/kg,24 h后制备模型.于缺血前10 min和再灌注10 min时记录体温、心率和呼吸频率.再灌注24 h时行神经功能缺陷评分,然后取脑组织,测定脑梗死体积,行凋亡细胞计数,并观察脑组织病理学结果.结果 大鼠脑缺血再灌注时体温升高,心率加快,呼吸频率减慢.与S组比较,其余各组神经功能缺陷评分、脑梗死体积和凋亡细胞计数均升高(P＜0.05);与I/R组比较,L组、M组和H组神经功能缺陷评分、脑梗死体积和凋亡细胞计数均降低(P＜0.05),IL组差异无统计学意义(P＞0.05);L组、M组和H组神经功能缺陷评分、脑梗死体积和凋亡细胞计数依次降低(P＜0.05).结论乳化异氟醚可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,且呈剂量依赖性.     

远端动脉缺血后适应干预对大鼠局灶性缺血损伤的脑保护作用

目的 观察远端缺血后适应干预对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用.方法 大脑中动脉线栓法(MCAO)制作Vistar大鼠大脑缺血/再灌注损伤模型.36只雄性Vistar大鼠被随机分为3组,早期双侧股动脉缺血后适应干预组、延迟双侧股动脉缺血后适应干预组和对照组,每组各12只.栓塞1 h后进行神经功能缺失评分,随即行复通供血,实验组分别在复通供血早期(30 min之内)和延迟期(6 h后)行双侧股动脉缺血后适应干预,相同的干预方法,1 min夹闭/1min复通、循环次数5次.72 h后断颈处死,处死前进行神经功能缺失评分,氯化三苯四氮唑(TTC)染色计算梗死灶体积.结果 栓塞1h后神经功能缺失评分,两实验组和对照组均为3～4级,差异无统计学意义.复通72 h后神经功能缺失评分,早期缺血后适应干预实验组神经功能缺失评分为2～3级,对照组仍为3～4级,神经功能有明显改善.72 h后TTC染色脑组织梗死灶体积对照组(40.3±2.2)%,早期干预组(23.6±3.3)%,实验组比对照组减少脑组织梗死体积约60%,明显减小梗死体积.延迟干预组神经功能缺失评分3～4级,平均梗死体积(33.2±1.9)%,与对照组比较,神经功能改善和梗死体积减小有一定变化,并不显著.结论 双侧股动脉反复缺血后适应对脑缺血/再灌注损伤产生保护作用,早期实施干预能显著减小大鼠局部脑缺血的梗死体积,改善神经功能.     

Neuroprotective effect of peroxynitrite decomposition catalyst and poly(adenosine diphosphate-ribose) polymerase inhibitor alone and in combination in rats with focal cerebral ischemia

OBJECT: The authors evaluated the neuroprotective effect of 5,10,15,20-tetrakis(N-methyl-4'-pyridyl)porphyrinato-iron(III) (FeTMPyP), a peroxynitrite decomposition catalyst, and 1,5-isoquinolinediol (ISO), a poly(adenosine diphosphate [ADP]-ribose) polymerase (PARP) inhibitor, alone and in combination in rats with focal cerebral ischemia induced by middle cerebral artery occlusion (MCAO). METHODS: Male Sprague-Dawley rats were subjected to 2 hours of MCAO followed by 22 hours of reperfusion. Cerebral infarction and neurological deficits were estimated after ischemia. Intraperitoneal injections of FeTMPyP (1 and 2 mg/kg) and ISO (0.05 and 0.1 mg/kg) were administered alone or in combination in ischemic animals. The PARP activity in vehicle- and drug-treated groups was estimated using anti-poly(ADP-ribose) antibody in immunofluorescence and immunoblotting studies. Two hours of MCAO and 22 hours of reperfusion produced significant cerebral infarction and neurological deficits. Treatment with FeTMPyP (1 and 2 mg/kg) and ISO (0.05 and 0.1 mg/kg) produced a significant reduction in cerebral infarction and neurological deficits. Combination therapy (2 mg/kg FeTMPyP and 0.1 mg/kg ISO) enhanced the inhibition of ischemic volume (77.81+/-0.86%) compared with monotherapies (FeTMPyP 54.07+/-5.6% and ISO 53.06+/-3.88%). Immunoblotting and immunofluorescence studies showed PARP activation after ischemia, which was reduced by drug treatment. CONCLUSIONS: Neuroprotection observed with FeTMPyP and ISO alone and in combination may be attributed to inhibition of the peroxynitrite-PARP cascade of cerebral ischemia/reperfusion injury.     

艾芬地尔预先给药对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血半暗带区iNOS和细胞凋亡的影响

目的 观察艾芬地尔预先给药对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血半暗带区诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和细胞凋亡的影响,探讨艾芬地尔脑保护的可能机制.方法 健康雄性SD大鼠54只,体重280～320 g,周龄9～10周,随机分为3组(n=18):假手术组(S组);缺血再灌注组(IR组)缺血前即刻腹腔注射与艾芬地尔等容量的生理盐水;艾芬地尔预先给药组(IF组)缺血前即刻腹腔注射艾芬地尔10 mg/kg(5 mg/ml).IR组和IF组制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,阻闭2 h后恢复再灌注48 h.于再灌注结束时进行神经功能评估,随后断头取脑,测定梗死核心区和缺血半暗带区iNOS表达、iNOS酶活性及NO含量,观察细胞凋亡情况.结果 与S组比较,IR组和IF组神经功能缺陷评分升高,缺血半暗带区和梗死核心区iNOS表达上调,iNOS活性升高,NO含量升高,凋亡细胞计数增多(P<0.01);与IR组比较,IF组梗死核心区域减小,神经功能缺陷评分降低,缺血半暗带区和梗死核心区iNOS表达下调,iNOS活性降低,NO含量降低,缺血半暗带区凋亡细胞计数减少(P<0.05).与梗死核心区比较,缺血半暗带区IR组和IF组iNOS活性和NO含量降低,凋亡细胞计数增高(P<0.05).结论 艾芬地尔预先给药通过下调缺血半暗带区iNOS蛋白表达,降低iNOS活性和NO含量,减少细胞凋亡,从而发挥脑保护作用.     

右美托咪定对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后抗氧化能力的影响

目的观察右美托咪定预先处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后抗氧化能力的影响。方法健康雄性SD大鼠42只,体重250~280g,随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(IR组)和右美托咪定组(DEX组),每组14只。采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,具体方法为线栓法栓塞大脑中动脉2h后恢复再灌注。Sham组仅分离血管,不留置线栓;于大脑中动脉栓塞前30 min DEX组给予腹腔注射盐酸右美托咪定注射液100μg/kg(4μg/ml),IR组腹腔注射等量的生理盐水。三组均于再灌注24h后取8只大鼠进行神经功能评分,测定脑梗死体积;剩余6只大鼠取脑组织检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果 IR组和DEX组神经功能评分明显高于Sham组,脑梗死体积明显大于Sham组,SOD、GSH-PX、GR、CAT活性明显低于Sham组(P0.05);DEX组大鼠神经功能评分明显低于IR组,脑梗死体积明显小于IR组,SOD、GSH-PX、GR、CAT活性明显高于IR组(P0.05)。结论右美托咪定有保护内源性抗氧化酶活性作用,可能有助于减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤。     

脂氧素A4对局灶性脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响

目的 探讨脂氧素A4对局灶性脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠54只,体重200～250 g,随机分为3组(n=18):假手术组(S组)、局灶性脑缺血再灌注组(I/R组)和脂氧素A4组(L组).采用改良线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,阻断右侧大脑中动脉缺血2 h后行再灌注.L组缺血即刻右侧侧脑室注射脂氧素A4 100 ng,S组和I/R组右侧侧脑室注射等容量生理盐水5 μl.于再灌注24 h时行神经功能缺陷评分,静脉注射2%伊文斯蓝4 ml/kg,1 h后处死大鼠取脑,测定右侧脑水含量和伊文斯蓝含量,检测脑皮质基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达.结果 与S组比较,I/R组和L组神经功能缺陷评分、脑水含量和伊文斯蓝含量升高,脑皮质MMP-9表达上凋(P＜0.05或0.01);与I/R组比较,L组神经功能缺陷评分、脑水含量和伊文斯蓝含量降低,脑皮质MMP-9表达下调(P＜0.01).结论 脂氧素A4可降低血脑屏障通透性,减轻脑水肿,促进局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能恢复,其机制与抑制MMP-9表达上调有关.     

Comparison of two rat models of cerebral ischemia under hyperglycemic conditions

Hyperglycemia worsens outcome of stroke either in the clinical setting or in animal models. In the present study, two focal cerebral ischemia models, permanent middle cerebral artery occlusion (MCAO, 3-4 h) and reversible MCAO (1 h ischemia + 3 h reperfusion), under hyperglycemic conditions were compared. Using 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride staining to define viable tissue, this resulted in the infarction area being confined primarily to the cerebral cortex in the permanent MCAO group, while it extended to the subcortical area in the reversible MCAO group, and the lesion areas were respectively 27.7 +/- 5.3% and 46.8 +/- 12.0% of the ipsilateral hemisphere (P = 0.012). Hyperglycemia accelerated the cerebral damage compared to normoglycemia and ascorbic acid pre-treatment maintained tissue viability during the acute phase of hyperglycemic MCAO. In conclusion, hyperglycemia combined with either of the two MCAO models resulted in rapid infarction associated with increased oxidative stress. The hyperglycemic models are suitable for pharmaceutical therapeutic studies of antioxidant efficacy.     

七氟醚预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠皮质C/EBP同源蛋白表达的影响

目的 探讨七氟醚预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠皮质C/EBP同源蛋白(CHOP)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠36只,体重250～280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=12):假手术组(S组)、局灶性脑缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚预处理组(Sevo-pc 组).采用线栓法阻断右侧大脑中动脉1 h,再灌注24 h,制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型.Sevo-pc 组于缺血前1 h吸入2.7%七氟醚.各组于再灌注24 h时行神经功能缺陷评分后断头取脑,TIC染色法测定脑梗死体积,免疫组化法测定缺血侧皮质CHOP表达,TUNEL法计数凋亡神经细胞.结果 与S组比较,I/R组和Sevo-pc组神经功能缺陷评分升高,脑梗死体积比升高,缺血侧皮质CHOP表达上调,凋亡细胞数增加(P＜0.01);与I/R组比较,Sevo-pc组神经功能缺陷评分降低,脑梗死体积比降低,缺血侧皮质CHOP表达下调,凋亡细胞数减少(P＜0.05或0.01).结论 七氟醚预处理可能通过下调皮质CHOP表达减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effect of sevoflurane preconditioning on CCAAT/enhancer binding protein (C/EBP) homologous protein (CHOP) expression in the cerebral cortex after focal cerebral ischemiareperfusion (I/R) injury in rats and the mechanism. Methods Thirty-six male SD rats weighing 250-280 g were randomly divided into 3 groups ( n = 12 each) : sham operation group (group S) , focal cerebral I/R group (group I/R) and sevoflurane preconditioning group (group Sevo-pc). The animals were anesthetized with intraperitoneal chloral hydrate 300 mg/kg. In groups I/R and Sevo-pc, focal cerebral ischemia was induced by middle cerebral artery occlusion using a nylon thread with rounded tip inserted into the right internal carotid artery and advanced cranially until resistance was met. The occlusion was maintained for 1 h followed by 24 h reperfusion. Group Sevo-pc inhaled 2.7% sevoflurane for 1 h before ischemia. Neurological deficits were assessed and scored at the end of 24 h reperfusion and then the rats were decapitated. Their brains were immediately removed. The cerebral infarct size was determined by TTC staining. The CHOP expression in the ischemic cerebral cortex was determined by immunohistochemistry. The number of apoptotic neurons was counted using TUNEL. Results The neurological deficit scores were significantly higher, the cerebral infarct size was significantly larger, and the CHOP expression and the number of apoptotic neurons were significantly higher in groups I/R and Sevo-pc than in group S ( P ＜ 0.01) . The neurological deficit scores were significantly lower, the cerebral infarct size was significantly smaller, and the CHOP expression and the number of apoptosis neurons were significantly lower in group Sevo-pc than in group I/R ( P ＜ 0.05 or 0.01) . Conclusion Sevoflurane preconditioning may protect the brain against focal cerebral I/R injury by down-regulating CHOP expression in the cerebral cortex in rats.     

七氟烷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体通透性转换孔的影响

目的 探讨七氟烷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体通透性转换孔(mPTP)的影响.方法 成年雄性SD大鼠60只,体重250～300 g,随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟烷预处理组(Sev组)、线粒体ATP敏感性钾离子通道(mito-KATP通道)阻断剂5-羟癸酸(5-HD)+Sev组和5-HD组.采用大脑中动脉阻断法制备局灶性脑缺血再灌注模型.S组只分离血管不置入线栓;I/R组制备局灶性脑缺血再灌注模型;Sev组吸入2.4%七氟烷60 min行预处理,24 h后制备局灶性脑缺血再灌注模型;5-HD+Sev组腹腔注射5-HD 40mg/kg,30 min后行七氟醚预处理,其余处理同Sev组;5-HD组腹腔注射5-HD 40 mg/kg,30 min后制备局灶性脑缺血再灌注模型.于再灌注24 h时断头取缺血侧顶叶皮层组织,测定mPTP活性,Western blot法测定Bcl-2、Bax表达水平,并计算Bcl-2/Bax比值,采用TUNEL法检测神经元凋亡情况.结果 与S组比较,I/R组、Sev组、5-HD+Sev组和5-HD组凋亡神经元计数升高,Bcl-2和Bax表达上调,Bcl-2/Bax比值升高,mPTP活性升高(P＜0.05);与I/R组比较,Sev组凋亡神经元计数减少,Bcl-2表达上调,Bcl-2/Bax比值升高,mPTP活性降低(P＜0.05);与Sev组比较,5-HD+Sev组和5-HD组Bcl-2表达下凋,Bcl-2/Bax比值降低,mPTP活性升高(P＜0.05);5-HD+Sev组与5-HD组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 七氟烷预处理可能通过激活神经元mito-KATP通道,上调Bcl-2的表达,从而抑制mPTP的大量开放减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注时的神经元凋亡.     

乳化异氟烷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 评价8%乳化异氟烷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性成年SD大鼠56只,体重250～280 g,随机分为4组(n=14),假手术组(S组)仅分离血管,不留置线栓;脑缺血再灌注组(IR组)、乳化异氟烷预处理组(EIP组)和脂肪乳剂组预处理(FIP组)分别腹腔注射生理盐水、8%乳化异氟烷或30%脂肪乳剂7.5 ml/kg,24 h后制备局灶性脑缺血再灌注模型.于再灌注24 h各组取8只大鼠,进行神经功能缺陷评分,然后处死大鼠,取脑组织,测定脑梗死体积;各组处死6只大鼠,取脑组织,检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率,并测定Bcl-2、Bax、caspase-3和Cyt C的蛋白表达水平.结果 与S组比较,IR组、EIP组和FIP组神经功能缺陷评分和细胞凋亡率升高,脑组织Bcl-2、Bax、caspase-3和Cyt C的蛋白表达上调(P＜0.01);与IR组和FIP组比较,EIP组神经功能缺陷评分和细胞凋亡率降低,脑梗死体积减小,脑组织Bcl-2蛋白表达上调,Bax、caspase-3和Cyt C 的蛋白表达下调(P＜0.05);IR组和FIP组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 8%乳化异氟烷预处理可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少线粒体释放Cyt C,降低caspase-3活化,抑制神经元凋亡有关.