供者肝脏非实质细胞输注诱导免疫耐受模型的建立

目的探讨供者肝脏非实质细胞输注诱导受者特异性免疫耐受的效果.方法将2×107个C3H/HE小鼠的肝脏非实质细胞通过尾静脉输入C57BL/6小鼠的体内,48*!h后给其腹腔注射环磷酰胺200*!mg/kg,18*!d后接受C3H/HE小鼠的皮片移植,观察皮片的存活情况.于肝脏非实质细胞输注前及输注后18*!d、30*!d、60*!d进行供、受者混合淋巴细胞培养.结果15只输注C3H/HE小鼠肝脏非实质细胞的C57BL/6小鼠,其移植皮片的存活时间明显延长(74.6*!d±9.7*!d,对照组仅存活10*!d±0.4*!d);混合淋巴细胞培养的结果证实受者的T淋巴细胞对供者小鼠淋巴细胞的反应程度明显降低.结论肝脏非实质细胞可以有效诱导免疫耐受.     

基于桌面虚拟现实技术实现髋臼骨折Letournel-Judet分类的三维浏览

目的 介绍使用HTML和虚拟现实建模语言(VRML)建立通过Web远程访问的髋臼骨折Letournel-Judet分类三维数字化浏览. 方法 首先,根据髋臼骨折Letounel-Judet分型,将重建的1例女性志愿者髋部骨骼模型通过Mimics软件的仿真模块切割模拟每一种骨折类型,将每一种骨折类型的骨折块以虚拟现实建模语言的格式.wrl导出.其次,编辑html网页,为每个骨折块建一个主菜单,每个主菜单设立调整透明度(透明、恢复、隐藏和显示)的子菜单.最后,编辑VRML文件,基于JavaScript语言建立 HTML与 VRML的通迅,实现各种骨折类型骨折块不同透明度的任意组合显示.结果 建立了髋臼骨折Letournel-Judet三维数字化分类系统(它分为5个部分),可以方便的通过远程网络访问.结论 该方法可以方便地应用于临床,提供对髋臼骨折的诊断与分析功能,使临床医生在极短的时间内可以对各类骨折的发生状况做出正确诊断.     

去甲基酶JHDM2 A的功能研究概况

JHDM2A是一种组蛋白赖氨酸去甲基酶,可特异性催化甲基化H3K9脱甲基,发挥表观遗传学效应,在雄性生殖细胞和于细胞的分化方面有重要功能.     

髋臼骨缺损结构性植骨的术前数字化设计

目的 探讨髋臼骨缺损结构性植骨术前数字化设计的临床应用价值. 方法 选择一例左侧髋臼缺损老年女性患者,经16排螺旋CT断层扫描获得的髋臼骨缺损患者的骨盆原始.dicom数据输入Mimics 10.0软件重建骨盆三维实体模型,经镜像、3D蒙罩编辑等处理,获得结构性植骨骨块的三维实体模型.选择同种异体跟骨,根据三维模型所测量数据切割和修琢植骨块,行缺损区植骨. 结果 重建的骨盆三维模型逼真,可以多彩、透明和多种组合显示,可以从不同的角度观察骨缺损部位.结构性植骨块三维立体形态可以逼真显示,并可获得植骨块的各种几何数据.术中植骨块与缺损区吻合好,临床应用效果良好. 结论 髋臼骨缺损结构性植骨术前可简便、快捷地建立所需植骨块的数字化模型,且所建模型形态逼真,可以增加植骨块与缺损区的匹配度,提高一次手术的成功率,具有良好的临床应用前景.     

混合培养的供、受者骨髓细胞过继回输延长小鼠移植心脏存活时间

目的 将供、受者骨髓细胞经混合培养后过继回输,以观察其对同种异体移植心脏存活时间和受者免疫功能的影响.方法 取Balb/c小鼠和C57BL/6J小鼠的骨髓细胞,进行混合培养.配制含Balb/c小鼠和C57BL/6J小鼠脾淋巴细胞的混合淋巴细胞反应体系(MLR)以及含Balb/c小鼠和C3H小鼠脾淋巴细胞的MLR,分别加入混合培养的骨髓细胞,观察其对MLR中细胞增殖的影响.以C57BL/6J小鼠为供者,Balb/c小鼠为受者行腹腔异位心脏移植,实验分为4组:(1)移植对照组,受者仅进行心脏移植,不作其他处理;(2)实验对照组,心脏移植后给予西罗莫司灌胃;(3)实验组,移植手术结束前注射混合培养的骨髓细胞1×10~7个,术后给予西罗莫司;(4)第三方对照组,受者接受C3H小鼠的移植心脏,手术结束前注射混合培养的骨髓细胞1×10~7个,术后给予西罗莫司.记录移植心脏存活时间;移植心脏停跳当日,取受者外周血,检测CD4~+ CD25~+ T淋巴细胞的比例及供者来源的H-2K~b细胞的比例.结果 加入混合培养的骨髓细胞后,Balb/c和C57BL/6J的MLR的淋巴细胞增殖率低于Balb/c和C3H的MLR.实验组移植心脏的存活时间长于其他3组(P<0.05).实验组CD4~+CD25~+T淋巴细胞的百分率高于其他3组(P<0.05).实验组外周血中H-2K~b细胞的比例高于其他3组(P<0.05).结论 受者输注混合培养的供、受者骨髓细胞可在一定程度上调节免疫应答,延长小鼠移植心脏的存活时间,该作用具有供者抗原特异性.     

共刺激分子B7-2对小鼠肝癌治疗作用的实验研究

目的　应用转染有小鼠 B7- 2基因片段的肝癌细胞 ,建立小鼠肝癌模型 ,观察小鼠肿瘤生长和消退情况 ,研究共刺激分子 B7- 2对肿瘤的免疫治疗作用。方法　建立 BAL B/ c小鼠转 B7- 2基因肝癌细胞株 H2 2 / B7- 2 ,细胞计数法测定肿瘤细胞体外增殖能力 ;BAL B/ c鼠皮下接种 H2 2 / B7- 2及野生型 H2 2细胞 H2 2 / Wt,以空载体转染细胞 H2 2 / neo为对照 ,建立小鼠肝癌模型 ,观察小鼠成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节大小 ;同源淋巴细胞肿瘤细胞混合培养 (MTL Cs)后测定淋巴细胞增殖指数和 CTLs活性 ,同时测定培养上清 IL- 2、IFNγ,研究 B7- 2分子的抗肿瘤免疫效果。结果　细胞在体外增殖能力一致 (P= 0 .782 ) ;当接种不同肿瘤细胞后 ,三组动物都发生肿瘤 ,接种 H2 2 / B7- 2组肿瘤形成有迟发性 ,并在接种 18d后肿瘤都开始缩小 ,但最终不会完全消失 ;接种 H2 2 / Wt和 H2 2 / neo组动物肿瘤都开始缩小 ,但最终不会完全消失 ;接种 H2 2 / Wt和 H2 2 /neo组动物肿瘤呈进行性生长。H2 2 / B7- 2在体外刺激淋巴细胞增殖和诱导 CTLs的能力明显强于对照细胞 (P<0 .0 5 )。结论　共刺激分子 B7- 2能增强肝癌细胞的免疫原性 ,它在抗肿瘤早期发挥作用。用其治疗肝癌是有效的 ,但不能介导完全和长期的抗肿瘤效应     

直接识别和间接识别在猪到人异种移植中的作用研究

目的　探讨直接识别和间接识别在异种移植中的作用。方法　分别以中国内江猪和人的外周血淋巴细胞做为刺激细胞和效应细胞,进行异种单向混合淋巴细胞反应,并与同种异体和自体混合淋巴细胞反应作对照,采用3H-TdR检测混合反应的增殖性。结果　在三种混合方式中,同种异体混合淋巴细胞反应的增殖最强,其次为异种混合,自体混合的增殖最低[采用改良Terasaki血清法对人和猪进行HLA-A、B、DR、DQ 配型,人H1 为A 9,33 34;B27,16(40);DR4,8;DQ 1,- 。人H2为A 29(10),23(9);B22,27(7);DR12,9(52);DQ 2,3。]。猪配型不成功。结论　从单向混合淋巴细胞反应的结果提示主要组织相容复合物(MHC)的适配性在异种移植中仍起作用;异种移植中,MHC配型可能也值得考虑,但现行血清法配型不适合于猪的配型     

自杀基因联合全反式维甲酸治疗对前列腺癌PC-3细胞旁观者效应的影响

目的 观察单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统联合全反式维甲酸(ATRA)对人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞旁观者效应的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测HSV-TK(Ad-TK)/GCV系统对PC-3细胞的杀伤力.流式细胞仪检查连接蛋白(Cx)43阳性细胞数.结果 单纯Ad-TK/GCV系统对PC-3细胞旁观者效应在TK+:TK-细胞混合比例为5:5时明显出现(P<0.05),而联合ATRA后,在TK+:TK-细胞混合比例为3:7时就明显出现(P<0.05).Ad-TK/GCV联合ATRA处理PC-3细胞后,在细胞抑制率均达到约50%时,其TK+PC-3细胞混合比例可降低20%.ATRA(10-6 moL/L)处理PC-3细胞1、3、5 d后,Cx43阳性细胞率由10.5%分别升高为25.8%、50.8%和62.4%(P<0.01).结论 ATRA可能通过增强基于Cx43的旁观者效应,从而提高Ad-TK/GCV系统对前列腺癌的杀伤效应.     

同种异基因肝脏非实质细胞对小鼠移植皮片存活的影响

目的探讨输注同种异基因肝脏非实质细胞(NPC)对小鼠移植皮片存活的影响及其机制。方法选用123只近交系小鼠,其中C3H小鼠65只、C57BL/6小鼠58只。20只C3H小鼠作移植供体;40只C3H小鼠肝脏为NPC来源;余下5只C3H小鼠作混合淋巴细胞培养(MLC)的刺激物,由每分钟放射性荧光闪烁计数(cpm)值表示。58只C57BL/6小鼠分为实验组50只、对照组8只。对照组小鼠仅作皮肤移植,未行NPC输注。实验组50只小鼠尾静脉输入由40只C3H小鼠肝脏制备的2×107个NPC,48h后腹腔注射环磷酰胺200mg/kg,并接受C3H小鼠皮片移植。于NPC输注前及输注后各时相点处死实验组小鼠,每时相点5只。检测血清白细胞介素(IL)4水平、脾淋巴细胞嵌合体水平及cpm值,并观察2组小鼠的存活时间。结果实验组小鼠皮片存活时间为(70.0±17.2)d明显长于对照组;NPC输注后IL4、嵌合体水平逐渐上升,而cpm值逐渐降低。NPC输注后60d实验组小鼠IL4为(251.5±11.0)ng/L,脾脏嵌合体水平达到(26.30±1.04)%。结论IL4、嵌合体水平的升高对诱导和保持免疫耐受起着重要的作用。     

TGF-β1对病理性瘢痕成纤维细胞中β-catenin表达的影响及意义

目的 探讨TGF-β/Smad信号转导通路与Wnt/β-catenin信号转导通路在病理性瘢痕发病机制中的作用及相互关系.方法 随机选取瘢痕疙瘩(K组)、增生性瘢痕(H组)和正常皮肤组织(N组)各3例,进行原代成纤维细胞培养,用不同浓度的TGF-β1处理细胞,应用免疫组化技术检测β-catenin在各组中的表达变化.结果 β-catenin在各组中的表达水平随TGF-β1浓度变化,呈先递增后递减趋势,三者β-catenin表达变化幅度为K组＜H组＜N组,K组成纤维细胞与H组成纤维细胞相比,差异无统计学意义(P＞0.05),而N组成纤维细胞与K组、H组成纤维细胞相比,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 TGF-β/Smad信号转导通路与Wnt/β-catenin信号转导通路联合作用,导致病理性瘢痕形成.     

Suprarenal filter placement

Purpose: This study was undertaken to determine the clinical outcomes for patients with Greenfield filters placed in the suprarenal (SR) inferior vena cava (IVC). Methods: We collected data prospectively from annual follow-up evaluations of patients with filters. Patients underwent venous color-flow duplex examinations of the IVC and lower extremities, abdominal radiographs, and physical assessment. The outcomes for those patients with filters in the SR IVC were compared with the outcomes previously reported and with the outcomes for patients with filters in the infrarenal cava. Results: SR placement accounted for 7.6% (148/1932) of all filter placements. Follow-up data were available for 73 placements, or 49%. No cases of renal dysfunction were related to filter placement. The rate of recurrent pulmonary embolism (PE) was 8%, and the rate of long-term caval occlusion was 2.7%. These rates did not differ statistically from the rates for patients with infrarenal filters (P > .05). Male patients tended to be older by 15 years, to have more recurrent PE, and to experience more filter migration (6 vs 2 mm). Failure of SR filters to prevent PE was associated statistically with the primary indication for placement. Recurrent PE was the indication in 5 of 6 patients who sustained PE after SR filter placement (P = .007). Filter limb fracture was seen only with the stainless-steel Greenfield filter. Conclusion: Greenfield filters placed above the renal vein provide protection from PE with a minimal risk of occlusion. Twenty-five years of experience with Greenfield filters shows that they are safe and effective both in young female patients of child-bearing potential and in all patients with appropriate indications for SR placement. (J Vasc Surg 1998;28:432-8.)     

Indications for filter placement

Indications for placement of a vena caval filter reflect the perception of efficacy and safety of these devices. The traditional indications include contraindications to or complications of anticoagulation. Over time, physicians have expanded these indications to include prophylactic placement in patients at high risk of pulmonary embolism. The decision to place a filter should be made only after weighing the risks and benefit in each situation. Long-term outcomes should be carefully evaluated.     

The acoustic filter: an ultrasonic blood filter for the heart-lung machine.

Cardiopulmonary bypass-associated encephalopathy is thought to be due in part to continuous microembolization of the brain with gas microbubbles more than 40 microns in diameter during bypass. Current barrier filter technology cannot effectively remove such small microbubbles in fragile fluids such as blood. The design concepts for a new nonbarrier ultrasound-based fluid filtration system (an "acoustic filter") capable of filtering small microbubbles from blood are presented. The acoustic filter uses a field of high-intensity ultrasound to push microbubbles down an acoustic gradient, where they can be collected and removed. To test the filtration efficiency of the system, a Doppler ultrasound bubble detector was built. By monitoring the prefilter and postfilter Doppler signal an assessment of filtration efficiency was made. A suspension of stable albumin-encapsulated microbubbles (4 to 32 microns) were used as a model of the microbubble contaminants that might be found in the arterial return line of the heart-lung machine. Inactivated, the acoustic filter neither removed nor added microbubbles to the fluid. Activated, the acoustic filter provided total or near-total clearing of microbubbles. We conclude that the acoustic filter can remove microbubbles from a cardiopulmonary bypass-like apparatus.