核因子-kB在肝细胞增殖与凋亡中的研究进展

多种肝脏疾病过程中均伴随着肝细胞增殖与凋亡这一矛盾现象，且往往与疾病的发展和预后有着密切的关系。近年来的研究表明，限柏及其所调控的相关基因在细胞增殖与凋亡的调控中具有非常重要的作用，阐明NF-kB出在肝脏增殖与凋亡中的具体作用机制，将对预防肝脏疾病的发生以及控制疾病的发展和预后具有重要意义。     

核因子-κB活性在创伤性炎症大鼠肝脏损伤中的变化及其意义

目的探讨核因子-kB（NF-kB）活性在创伤性炎症大鼠肝脏损伤中的变化及其意义。方法Wistar大鼠60只，随机分成对照组和创伤性是症组。运用匀浆法提取肝细胞的核蛋白，运用凝胶阻滞实验检测创伤性炎症术后肝脏组织NF-kB的活性，检测血浆转氨酶的水平，在光镜下观察肝细胞损伤程度，电镜下观察肝脏超微结构改变，以线拉体的肿胀程度作为肝细胞损伤的评价指标。结果大鼠创伤性炎症术后第3小时，肝脏NF—kB的活性开始升高，第12小时达高峰，第72小时后基本降至正常。血浆ALT含量在伤后明显上升。于第24小时达高峰，同时肝细胞出现明显的水肿、变性和坏死，肝小叶结构破坏明显。结论大鼠创伤性炎症肝脏损伤后，NF—kB活性明显升高。与肝脏结构和功能改变基本一致，NF—kB在创伤性炎症肝脏损伤中具有重要意义。     

大鼠肝脏缺血不同时间再灌注时肝细胞凋亡的动态变化及凋亡相关基因Bcl-2的表达

目的:探讨大鼠肝脏经历不同缺血时间后再灌注时肝细胞凋亡、Bcl-2蛋白表达的变化及二者的相关性.方法:参照Nauta的方法制作大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,用流式细胞仪检测肝细胞凋亡百分率及Bcl-2蛋白的表达.结果:随着肝脏热缺血时间的延长,肝细胞凋亡百分率明显增加,而Bcl-2蛋白表达量逐渐下降.结论:肝细胞凋亡在肝脏缺血再灌注损伤过程中发挥着重要作用,Bcl-2蛋白对肝细胞凋亡具有抑制作用.     

冷缺血与热缺血对大鼠肝细胞凋亡的影响

目的:观察冷保存与热缺血对大鼠肝细胞凋亡的影响。方法:用流式细胞检测技术，分组检测冷保存时和热缺血时的肝细胞凋亡率与增殖率。结果:冷保存时各组之间的肝细胞凋亡率与增殖率差异无显著性（P>0.05）；随着热缺血时间的延长，细胞凋亡率明显加重（P＜0.05），但细胞增殖率的改变不明显（P>0.05）。结论:大鼠肝脏冷保存/再灌注时肝细胞凋亡可能在有氧再灌注后加重；大鼠肝脏热缺血/再灌注时肝细胞凋亡可能在缺血时和再灌注后均可加重。     

FK506对大鼠离体肝脏保存再灌注肝细胞凋亡的影响

肝细胞凋亡是引起肝脏缺血再灌注损伤的重要机制[1].我们建立离体大鼠肝脏保存再灌注模型,观察肝脏保存再灌注中肝细胞凋亡变化和FK506对肝细胞凋亡的影响.为临床肝移植围手术期提供肝保护探讨新的方法和理论依据.     

自制KYL液对大鼠肝脏低温保存后细胞凋亡影响的研究

目的 研究自制的KYL液对大鼠肝脏低温保存后细胞凋亡的影响。方法 采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型（noncirculated isolated perfusion of ratliver，IPRL），随机以KYL液和UW液对大鼠肝脏保存0、4、8、16、24、48h，测定灌注流出液氧自由基代谢产物（丙二醛MDA和超氧化物歧化酶SOD）的含量，检测肝细胞内钙离子浓度，检测肝细胞凋亡率和凋亡相关基因表达，观察肝脏组织形态学变化。同时设生理盐水保存阴性对照组，了解器官保存液对大鼠肝脏有无保护作用。结果 KYL液保存的大鼠肝脏肝细胞内钙离子浓度较UW液保存者低，灌注流出液MDA和SOD含量与UW液保存者相近，两者肝细胞凋亡率及凋亡基因表达情况相近，光、电镜观察两者形态学变化基本一致。两组所有指标均较生理盐水保存组好，说明两种液体对大鼠肝脏均有保护作用。结论 自制的KYL液对大鼠肝脏的保存效果在钙拮抗方面略优于UW液，在抑制细胞凋亡方面与UW液相当，而在防止细胞水肿方面较UW液稍差。     

核因子-kB"圈套"策略对创伤性炎症大鼠肝脏损伤的抑制作用

目的 探讨核因子-kB"圈套"策略对创伤性炎症大鼠肝脏损伤的抑制作用.方法 Wistar大鼠108只,随机分成对照组、创伤性炎症组和"圈套"ODN组,各组动物分别于术后3、6、12、24、48和72 h分批处死.检测血浆转氨酶的水平,在光镜下观察肝细胞损伤程度.运用凝胶阻滞实验检测创伤性炎症术后肝脏组织NF-kB的活性及合成"圈套"ODN的体外竞争抑制试验.检测大鼠肝脏组织TNF-α和IL-6的mRNA及蛋白水平.结果 大鼠创伤性炎症术后3 h肝脏NF-kB的活性开始升高,术后12 h达高峰.肝脏组织TNF-α和IL-6 mRNA和蛋白表达明显上升,血浆转氨酶含量也明显上升,肝细胞变性坏死,肝小叶结构破坏明显."圈套"ODN治疗后大鼠肝脏组织TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达均明显下降,血浆转氨酶水平明显下降,光镜下肝小叶结构损伤明显好转.结论 NF-kB靶向性"圈套"ODN通过特异性抑制NF-kB活性,可以有效地抑制创伤性炎症大鼠肝脏炎症介质TNF-α和IL-6的释放,从而明显改善肝脏结构和功能的损伤.     

近70%门静脉分支高位结扎对大鼠肝脏结构和功能的影响

目的 观察近70％门静脉分支高位结扎对大鼠肝脏结构和功能的影响。方法 Wistar大鼠60只，随机分成假手术对照组和门静脉结扎组。观察术后0．5、1、2、3、7和14d肝脏大体结构和血浆转氨酶的变化。用TUNEL法对结扎侧肝细胞凋亡进行定量分析，光学显微镜下观察对侧肝细胞的增殖情况，透射电子显微镜下观察结扎侧肝脏的超微结构改变。结果 70％门静脉分支高位结扎后，结扎侧肝叶呈进行性萎缩变小，对侧则成比例的代偿性增生。在整个观察过程中，全肝的总重量维持恒定，肝脏功能基本保持正常。TUNEL显示结扎侧肝细胞在术后凋亡明显增加，于第2天达高峰，同时对侧肝细胞却明显增殖。电子显微镜显示结扎侧肝脏早期出现典型的凋亡改变，晚期明显纤维化。结论 近70％门静脉分支高位结扎后，结扎侧由于肝细胞大量凋亡呈进行性萎缩，对侧则成比例的代偿性增生，全肝的总重量和肝脏功能保持正常。     

细胞凋亡与病毒性肝炎研究进展

病毒性肝炎是我国一种高发性传染病，以乙型和丙型肝炎最为常见。诸多因素参与了嗜肝病毒的致病过程，细胞凋亡为其中之一。肝脏被病毒感染后可以通过细胞凋亡清除病毒感染的细胞，但肝脏生理功能亦会因此受损，可见肝细胞凋亡在病毒性肝炎发病过程中是把双刃剑。肝细胞凋亡可以由嗜肝病毒的直接作用引起，包括特异性病毒蛋白产物和肝细胞膜上可触发细胞凋亡的各种受体的表达；也可以由病毒所引发的免疫反应引起[1]，主要通过穿孔素/颗粒酶途径以及Fas/FasL途径。     

大黄素对大鼠移植肝细胞凋亡的作用

目的探讨大黄素对大鼠肝脏移植术后肝细胞凋亡的作用。方法建立大鼠肝移植模型,分为三组:对照组,供受体均为LEW大鼠;移植组;供体为LEW大鼠,受体为BN大鼠;大黄素组,在移植组基础上,移植术后每日以大黄素50mg·kg-1腹腔注射。分别于术后第1,3,5,7天各取6只移植大鼠的肝脏,TUNEL法染色,检测肝脏细胞凋亡。以肝脏细胞凋亡阳性细胞数占总肝脏细胞数的百分比作为肝细胞凋亡指数(AI)。结果移植组肝细胞于术后第1天即已出现凋亡,第3天明显增加,第7天达到高峰。大黄素组各时间点肝细胞凋亡指数明显小于对应的移植组(P<0.01)。结论大黄素对肝移植急性排斥反应中肝细胞凋亡有显著抑制作用。