液氮冷冻法制备兔股骨头坏死模型新方法及效果评估

目的通过改良的手术路径,应用液氮冷冻法制备兔股骨头坏死模型,建立模拟人股骨头坏死病理变化的实验动物模型,为股骨头坏死的基础研究提供动物模型。 方法选取10只健康雌性新西兰大白兔,月龄（3.0±0.2）,体重（3.2±0.4）Kg,选取左侧股骨头为实验组,右侧股骨头为空白对照。使用股骨头坏死髓芯减压手术路径,沿股骨颈方向钻入2.0 mm克氏针,将液氮冷冻仪探针插入孔道进入股骨头区域,对股骨头进行冷冻—复温2个循环,冷冻、复温时间均为半分钟,缝合切口后放回原笼位。于术后4周处死实验动物,取出股骨头观察股骨头大体变化,并即刻行股骨头X线等影像学检查,最后行病理切片检查。 结果所有实验动物术后均无死亡。通过对实验兔双侧股骨头大体形态观察,实验组股骨头软骨下骨颜色变深,呈暗红色,负重区有小片状坏死灶。X线结果示实验组与对照组相比,股骨头无明显的骨质密度改变。micro-CT示实验组股骨头软骨下骨小梁稀疏、紊乱,出现多处骨小梁连续性中断。MRI示实验组股骨头表现为以高信号为主的片状的高、低混合信号区。病理组织切片结果可以发现软骨变薄、细胞排列紊乱,骨小梁变细、排列紊乱,脂肪细胞融合,空骨陷窝形成等。10只实验兔的左侧股骨头均出现早期坏死的表现,成功率100%。 结论本实验通过新的手术路径用液氮冷冻法成功制备了兔股骨头坏死的模型,手术创伤小,无需切开关节囊和脱位股骨头,操作简单,可作为兔股骨头坏死造模的新方法。     

股骨头钻孔液氮冷冻法建立山羊股骨头坏死模型

[目的]研究通过股骨头钻孔液氮冷冻法建立山羊股骨头坏死模型。[方法]12只山羊24髋随机法分配为实验组、对照组。实验组山羊采用股骨头钻孔液氮冷冻灌注法灌注山羊股骨头,对照组山羊采用股骨头钻孔灌注生理盐水法,术后80万IU青霉素连续抗感染3 d,干预2周后行影像学检查,分别行X线、三维CT、大体标本、组织学(HE染色)观察骨结构改变及空骨陷窝率,空骨陷窝率超过50%定义为骨坏死。[结果]山羊手术后完全苏醒后可完全负重站立行走。术后3 d山羊活动、饮食恢复至术前水平。术后山羊伤口干燥,未见明显渗血渗液以及炎症反应等。术后2周山羊X线及三维CT示:实验组股骨头骨小梁稀疏、钻孔通道周围可见明显骨质硬化;对照组骨小梁正常,钻孔通道周围未见骨质硬化。处死山羊后实验组与对照组标本大体形态未见明显改变,但实验组股骨头关节面软骨颜色变暗、光泽度下降。组织切片HE染色提示对照组空骨陷窝率(11.3±1.6)%<50%,实验组空骨陷窝率(59.2±5.2)%>50%,空骨陷窝率实验组明显高于对照组(P<0.05)。股骨头坏死造模成功率91.67%(11/12)。[结论]股骨头钻孔液氮冷冻法可以成功建立山羊股骨头坏死模型,此法安全、简单易行、周期短、造模成功率高,为进一步研究股骨头坏死保头治疗提供有力的途径。     

淫羊藿苷干预兔早期激素性股骨头坏死的实验研究

目的探讨淫羊藿苷对激素诱导的兔早期激素性股骨头坏死干预效果。方法50只成年新西兰兔(体质量2.5~3.0 kg)随机分为对照组(n=10)、模型组(n=20)及实验组(n=20)。模型组和实验组采用脂多糖联合甲泼尼龙注射制备早期激素性股骨头坏死模型;实验组首次注射甲泼尼龙开始每日灌服淫羊藿苷药液1次,对照组及模型组灌服等量生理盐水,连续6周。于6周后取左侧股骨头行大体观察;Micro-CT扫描观察骨小梁微结构,测量骨小梁相对体积(bone volume to total volume,BV/TV)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Tn)及骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp),并构建三维图像观察;HE染色观察骨小梁结构、骨细胞及骨髓脂肪细胞形态变化,按照病理学诊断标准检测股骨头坏死模型造模是否成功,计算空骨陷窝率。结果实验期间共7只动物死亡,最终对照组9只、模型组16只、实验组18只纳入研究。大体及Micro-CT扫描、三维重建显示,与对照组相比,模型组股骨头塌陷明显,骨小梁断裂、排列紊乱稀疏;实验组股骨头表面皱褶,塌陷不明显,骨小梁结构轻度退变。与对照组相比,模型组和实验组Tb.N、Tb.Tn、BV/TV下降、Tb.Sp升高;与模型组相比,实验组Tb.N、Tb.Tn、BV/TV升高、Tb.Sp降低;组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色示模型组骨小梁中骨细胞减少,空骨陷窝较多,骨小梁间脂肪细胞堆积,部分呈囊状融合;实验组骨小梁形态较模型组完整,骨细胞坏死及脂肪细胞肥大不明显。按照股骨头坏死病理学诊断标准,对照组无骨坏死发生,模型组骨坏死发生率为81.3%(13/16),实验组为66.7%(12/18),差异无统计学意义(P=0.448)。模型组和实验组发生坏死的股骨头标本其空骨陷窝率分别为33.1%±1.4%及18.9%±0.8%,均高于对照组12.7%±1.5%,且模型组明显高于实验组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论淫羊藿苷对激素诱导的兔早期激素性股骨头坏死具有保护作用,可以降低骨细胞凋亡,改善骨微结构,延缓骨坏死发生。     

胶质细胞源性神经营养因子对股骨头缺血坏死的保护作用

目的探究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对早期激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of the femoral head,SANFH)的保护作用。方法采用改良技术建立早期激素性股骨头坏死兔模型,随机分成实验组(n=12)和对照组(n=12)。实验组给予髋周臀大肌注射GDNF(8.0μg/只),对照组相同部位注射等体积生理盐水,干预1周。分别于第5、10、15、20天进行股骨头多排螺旋CT、显微CT及苏木素-伊红(HE)染色检测。结果影像学观察示,GDNF注射后第15天开始,实验组股骨头骨小梁逐渐丰富、密集,间距变窄,骨皮质厚度及密度增加;对照组股骨头骨小梁分布稀疏,间距增宽,部分断裂,骨质密度减低。第15、20天,实验组与对照组股骨头骨矿物质密度、组织骨矿物质密度及骨体积分数,比较差异具有统计学意义(P0.05)。组织学观察示,实验组股骨头内骨小梁粗大,骨细胞分布广泛,细胞核着色深,脂肪细胞分布较少;对照组骨小梁分布稀疏,形态不完整,部分断裂,骨细胞空陷窝和脂肪细胞增多,骨细胞和造血细胞减少。第15、20天,实验组与对照组股骨头骨细胞空陷窝率分别为:13.3±3.2%、10.6±2.4%和71.0±7.5%、78.6±5.3%,两组比较,实验组骨细胞空陷窝率显著减低(P0.05)。结论 GDNF可通过抑制骨细胞坏死,保持骨小梁的完整性。     

酒精性骨质疏松的实验研究

为了证明酒精中毒导致骨质疏松，本实验取健康新西兰种家兔８０只，随机分为实验组和对照组，每组４０只。采用灌胃法，实验组给予烈性酒（含乙醇４５％）１０ｍｌ／（ｋｇ·ｄ），对照组给予１０％的葡萄糖溶液１０ｍｌ（ｋｇ·ｄ）。两组动物在实验第１、２、３、６月时分批处死。观察股骨头的病理组织学改变。结果显示：与对照组相比，实验组结果显示股骨头髓内脂肪细胞增多、增大，空骨陷窝百分比升高，骨小梁变细、稀疏，骨小梁面积分数降低。透射电镜下见股骨头软骨下骨细胞内脂质沉积，甚或脂肪充满整个骨陷窝，骨细胞固缩、死亡。放射学检查显示，骨皮质变薄，骨密度降低。这些结果提示，长期过量饮酒发生的酒精中毒可导致骨质疏松，后者是股骨头缺血性坏死的一个发病因素。     

带血管蒂骨膜瓣移植治疗幼犬股骨头坏死实验研究

目的 评价幼犬带血管蒂骨膜成骨能力及对股骨头无菌性坏死的修复效果.方法 结扎、破坏幼龄家犬股骨颈动脉环、液氮冷冻股骨头,建立股骨头坏死动物模型.建模4周后通过X线、MRI、ECT及组织学检查评价动物模型建立成功与否;然后实验动物随机分成3组,实验组(12只)植入带旋股外侧动脉横支为蒂大转子骨膜瓣;对照组(9只)植入带旋股外侧动脉横支为蒂大转子骨瓣:空白组(8只)不予治疗,以观察股骨头坏死的病程进展.分别于手术后第4、8、12周进行大体形态、X线、MRI、ECT观测,12周处死所有动物行组织学检查,观察不同时期股骨头坏死修复情况.结果 术后12周实验组X线股骨头形态基本正常,MRI股骨头信号不均,ECT放射性核素与健侧相比稍减低,苏木精-伊红(HE)染色毛细血管及成骨细胞大量增殖,新生骨小梁成熟.对照组X线股骨头轮廓欠规则,MRI股骨头高低信号混杂,ECT股骨头放射性核素明显减低,HE染色成骨细胞活跃,可见新生骨小梁,脂肪细胞.空白组X线股骨头塌陷变形,MRI表现T1、T2加权低信号,ECT见放射性缺损.苏木精-伊红染色骨小梁崩解,大量空虚的骨陷窝.术后12周实验组、对照组移植骨膜/骨瓣区ECT扫描核素计数差异有统计学意义(P<0.01).结论 带血管蒂骨膜移植较带血管蒂骨瓣移植具有更强的成骨能力.能够有效地修复幼犬股骨头无菌性坏死.     

改良型大鼠激素性股骨头坏死模型建立和相关评价

目的建立疲劳状态下大鼠激素性股骨头坏死模型,为激素性股骨头坏死的实验研究提供可靠的动物模型。方法4月龄健康Wistar大鼠随机分成实验组与对照组。臀肌注射地塞米松磷酸钠（20mg／kg）,每周1次,共8周。实验组,置于跑步机中,以1km／h速度匀速跑动;对照组,生理状态下正常负重。分别于2、4、6、8周处死动物,一侧股骨头行病理学检查,一侧行生物力学检查。结果建立了股骨头坏死模型,病理学上单位面积内骨小梁面积、骨小梁宽度、每高倍视野单位面积下空泡陷窝率,两组比较有明显统计学差异（P〈0．05）。生物力学上实验组中各个时期骨小梁刚度低于同期对照组;最大形变、压缩能量吸收均高于同期对照组（P〈0．05）。结论成功建立了疲劳状态下激素性股骨头坏死的动物模型,突出了机械负重在股骨头坏死中的作用,是研究激素性股骨头坏死的良好实验模型。     

激素诱发兔股骨头坏死发生过程中组织学和影像学动态对比研究

目的 研究兔激素性股骨头坏死发生、发展过程中组织学改变和影像学表现之间的相关关系.方法 健康成年日本大白兔46只,随机分为实验组30只,肌内注射甲基泼尼松龙(20mg/kg,1次/d,连续3 d);对照组16只,肌内注射相同剂量生理盐水.分别于注射后2、4、8、12周行X线、CT、MRI与股骨头血管动脉造影检查,并于处死动物前股骨头血管墨汁灌注后进行组织学检查,常规HE染色以及微血栓染色.结果 组织学:实验组2周时出现骨髓细胞碎片集聚,骨小梁出现空骨陷窝,骨髓造血组织消失,大量脂肪细胞堆积,墨汁灌注,血管数量减少;4-12周时骨髓内脂肪细胞增大,骨小梁开始萎缩、变细,骨细胞核边聚、固缩,空骨陷窝数增多,骨髓造血组织几乎完全消失,被脂肪组织、脂肪细胞替代填充,墨汁灌注血管消失.影像学:2-12周X线、CT均未见异常,在应用激素2周双侧股骨头MR T_1加权像显示信号强度明显降低,低信号区呈线样,T_2和准T_2加权像呈不均匀高信号,高信号区呈线样,并延续至12周.动脉介入造影,2周后即出现股骨头血管管腔变细,4、8周时血管数量减少,尚存在的血管变细.各时间点股骨头坏死组织学改变与MRI异常表现密切相关.对照组均未见明显异常.结论 糖皮质激素诱发兔股骨头坏死发生、发展过程中,骨坏死组织学变化和股骨头MRI异常表现密切相关;MRI异常表现在一定程度上可以反映股骨头坏死后的组织学改变;MRI是早期诊断股骨头坏死最具灵敏度、特异性,并能反映骨坏死真实情况的非侵入性检查方法.     

大剂量激素冲击应用与长期应用对股骨头坏死影响的动物实验

从动物实验对大剂量激素冲击应用与长期应用对于动物机体及股骨头坏死的不同影响进行对比研究,为临床上激素应用后产生股骨头缺血性坏死提供依据,强调股骨头缺血性坏死预防的必要性。采用SD大鼠21只,随机分成3组,剂量参照Wang的实验,第一组臀肌注射醋酸强的松龙49mg/kg·d,每日一次,应用6d;第二组24.5mg/kg,每周一次,应用12周,两组累计剂量均为294mg/kg;第三组为正常对照组。实验期间观察各组动物全身情况,动物处死后观察动物内脏大体情况及内脏、股骨头光镜检查,并对3组切片中的空骨陷窝率进行了统计学处理。结果:①冲击组动物全身情况及内脏损害程度较长期组严重。②长期组的股骨头坏死征较冲击组严重,空骨陷窝率更高,两组的空骨陷窝率与正常组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论:①大剂量激素对动物体的毒副作用严重。②大剂量激素应用对全身血液循环系统的损害与股骨头内的血管变化一致。③单纯激素可以产生股骨头坏死。④激素的冲击疗法与长期应用都能促进股骨头坏死的发展,因此必须重视预防。     

激素诱发兔股骨头坏死发生过程中组织学和影像学动态对比研究

目的 研究兔激素性股骨头缺血坏死发生、发展过程中组织学改变和影像学表现之间的关系,探讨股骨头缺血坏死早期最佳诊断方法及治疗.方法 健康成年日本大白兔46只,随机分为实验组30只,肌肉注射甲强龙(20 mg/kg,单次),对照组16只肌肉注射相同剂量生理盐水.分别于注射后2、4、8、12周行X线、CT、MRI、股骨头血管动脉造影,以及处死动物前股骨头血管墨汁灌注后进行组织学检查、常规HE染色以及微血栓染色.结果 组织学:实验组2周时出现骨髓细胞碎片集聚,骨小梁出现空骨陷窝骨髓造血组织消失,大量脂肪细胞堆积,墨汁灌注,血管数量减少;4～12周时骨髓内脂肪细胞增大,骨小梁开始萎缩、变细,骨细胞核边聚、固缩;空骨陷窝数增多,骨髓造血组织几乎完全消失,被脂肪组织、脂肪细胞替代填充,墨汁灌注血管消失.影像学:2～12周X线、CT均未见异常,MRI在应用激素2周双侧股骨头T1WI显示信号强度明显降低,低信号区呈线样,T2WI和准,T2WI呈不均匀高信号,高信号区呈线样,并延续至12周.动脉介入造影2周后即出现股骨头血管管腔变细,4及8周时血管数量减少、尚存在的血管变得纤细.对照组均未见明显异常.结论 股骨头缺血坏死发生发展过程中组织学变化和MRI表现密切相关,MRI是早期检查发现、诊断股骨头缺血坏死最具灵敏度、特异性的非侵入性检查方法.     

局部无水酒精注射诱导家犬股骨头坏死的实验研究

[目的]观察局部无水酒精注射法建立家犬早期股骨头坏死模型的有效性.[方法]选取健康成年家犬18只,体重15 ～ 18 kg,两侧股骨头分别设立实验组和空白对照组,实验组行股骨头脱位和无水酒精注射处理,注射剂量为6 ml,术后分别于2、3、4周行X线片和CT扫描检查,并取材进行组织学观察,比较两组的空骨陷窝率,并进行统计学分析.[结果]术后2～4周,实验组股骨头均表现出不同程度的坏死,X线片显示关节面软骨下出现带状低密度影与伴行的带状高密度影,髋关节轴位CT平扫显示实验侧股骨头关节面下出现低密度区域,周围有斑块状硬化灶.无水酒精注射部位组织学显示部分骨小梁断裂、骨陷窝变空虚、髓腔内造血细胞减少、脂肪细胞变性坏死,LSD -t检验显示各时间点实验组空骨陷窝发生率明显高于空白对照组(P＜0.05),除2只家犬外(1只术后第3d死亡,1只术后因股骨头脱位予以剔除),16只家犬(89％)均出现明显的股骨头早期坏死.[结论]局部无水酒精注射法可以成功诱导家犬股骨头坏死,该方法可作为建立大动物早期股骨头坏死模型的有效方法.     

激素致股骨头骨细胞坏死、凋亡及对bcl-2表达影响的实验研究

目的：探讨激素性股骨头坏死的发病机制。方法：选用健康成年大白鼠30只，体重约200g，随机分为实验组(冲击注射地塞米松)和对照组。实验8周处死动物，取股骨头作骨细胞组织病理学、超微结构观察，并用TUNEL及免疫组化技术分别检测骨细胞凋亡和bcl-2表达情况。结果：光镜下实验组较对照组股骨头骨小梁变细、稀疏、空骨陷窝明显增多，脂肪细胞增大。电镜下实验组骨细胞体积缩小，核固缩，线粒体及高尔基体肿胀，染色质边聚较多见。实验组凋亡骨细胞增多，bcl-2表达骨细胞轻度增加。结论：激素性股骨头坏死是骨细胞凋亡和坏死共同作用的结果。     

马血清致敏条件下鸡乙醇性股骨头坏死模型的制作

目的 制作马血清致敏条件下鸡乙醇性股骨头坏死的动物模型.方法 取64只健康成年雄性三黄鸡随机分为4组.A组:马血清+乙醇组;B组:单纯乙醇组;C组:单纯马血清组;D组:空白对照组.于灌胃第4、8周末分批处死,取股骨头制作苏木素-伊红(HE)和冰冻切片,光镜观察组织学变化并测算骨小梁面积分数、空骨陷窝计数、最大脂肪细胞平均直径、股骨头坏死发生率等指标.于灌胃第8周末取股骨头制作标本在扫描电镜下观察组织学变化.结果 灌胃第4周末,各组股骨头组织未见明显病理改变.灌胃第8周末,A组股骨头软骨下骨髓内造血组织明显?栽 减少,脂肪细胞增殖肥大,骨小梁明显变细、稀疏,多处断裂,骨小梁面积分数降低,空骨陷窝显著增多,与其他3组比较,P<0.01.A、B、C、D组股骨头坏死发生率分别为87.5%、25.0%、25.0%、0%.扫描电镜下观察可见A组股骨头表面凹陷,伴有多处裂痕,骨小梁失去原有形态,变细、稀疏,多处断裂,空骨陷窝增多,而B、C、D组未见到这些变化.结论 鸡是制作乙醇性股骨头坏死动物模型的理想动物;马血清致敏条件下,可以缩短造模周期,提高造模成功率.     

甲强龙联合脂多糖诱导兔股骨头坏死模型的建立

目的观察甲强龙联合脂多糖诱导兔股骨头坏死的实验效果。方法 30只健康雄性新西兰兔,随机分为实验组(20只)和对照组(10只),实验组耳缘静脉注射脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)10μg/kg,24 h后肌注甲强龙20 mg/kg,1次/d,共3 d。对照组注射同等剂量的生理盐水。6周后观察兔股骨头X射线、磁共振及病理学等指标的改变。结果对照组X线:双侧股骨头骨皮质完整,大小及形态正常,骨密度均匀,骨小梁清晰;实验组X线:兔股骨头密度减低,骨小梁模糊不清,可见一囊状透亮区,股骨头保持完整;MRI示:股骨头见一类圆形高信号影,边界相对清晰,关节面完整;病理:骨小梁纤细,部分骨小梁断裂,髓腔内造血细胞减少,脂肪细胞体积增大,有的融合成泡状。结论甲强龙联合脂多糖能够成功安全便捷地诱导兔股骨头坏死动物模型。     

甲基强的松龙联合内毒素诱导兔股骨头缺血性坏死的实验研究

目的 建立兔激素性股骨头缺血性坏死模型,为进一步研究早期股骨头缺血性坏死的治疗奠定基础. 方法 健康成年雄性新西兰白兔36只,体重3～4 kg,根据给药方式不同随机分成4组.A组(n=10)于耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(10μg/kg),24 h后重复给药1次;B组(n=10)大肠杆菌内毒素注射同A组,注射完毕后,立即臀肌注射甲基强的松龙(40 mg/kg)3次,每次间隔24 hC组(n=10)单纯臀肌注射甲基强的松龙(40 mg/kg)3次,每次间隔24 h;D组(n=6)与B组相同时间点注射等量生理盐水,作为对照.注射后观察动物一般情况;于注射前及末次注射后2、4及6周,行MRI检查,观察股骨头改变;6周时通过组织学检查、墨汁血管灌注和透射电镜观察各组股骨头病理和血管形态变化,并计算空骨陷窝率、微血管密度和骨小梁面积百分比,根据组织学和MRI检查结果计算各组骨坏死发生率. 结果 A、B组动物注射内毒素后出现精神萎靡,眼睑充血发红等症状,活 动及饮食减少.B、C组动物于末次注射后3周明显消瘦,体重减轻;A、D组动物于末次注射后4周体重增加.B、C组分别于末次注射后2 d和16 d各有1只动物死亡.注射前及末次注射后2周各组动物股骨头MRI信号未见异常.4、6周时B、C组股骨头MRI检查T1WI表现为不规则低信号,T2WI呈高信号或低信号;A、D组股骨头MRI信号未见异常.A、B、C及D组空骨陷窝率分别为11.8%±4.7%、34.4%±6.2%、20.0%±4.7%、9.3%±4.6%;骨小梁面积百分比分别为59.2%±6.8%、40.1%±6.0%、51.5%±5.6%、63.2%±8.3%;微血管密度分别为14.3%±2.7%、4.5%±2.1%、10.2%±3.1%、15.4%±4.1%;各指标B组与A、C及D组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).透射电镜观察,B组和C组骨细胞和内皮细胞胞浆内均出现脂滴,B组骨细胞皱缩,核膜失去连续性、染色质溶解或固缩,A组和B组血管内皮细胞肿胀,细胞之间的连接增宽、破坏.B组骨坏死发生率为88.9%,显著高于C组的22.2%(P＜0.05),A、D组无骨坏死发生. 结论 甲基强的松龙联合内毒素能诱导出典型的兔早期股骨头缺血性坏死模型,成功率高,重复性好.     

酒精性股骨头坏死动物模型的制作和观察

目的 制作酒精性股骨头坏死动物模型，探讨其发病机理。方法 将80只家兔随机分为实验组和对照组各40只，采用灌胃法,实验组给烈酒(含乙醇45％)10ml/(kg·d)，对照组给10％葡萄糖溶液10ml／(kg·d)，于1、2、3、6月分批处死，观察股骨头组织学变化。结果 灌酒后家兔股骨头软骨下骨髓内脂肪细胞增殖肥大，骨小梁变细稀疏，面积分数降低，骨细胞脂肪变性，空骨陷窝百分比升高(P＜0．01)。透射电镜下见骨细胞内大量脂质沉积。结论 长期大量饮酒可导致股骨头缺血性坏死。     

辛伐他汀联合BMSCs治疗激素性股骨头坏死的实验研究

目的 单纯BMSCs治疗激素性股骨头坏死的效果尚不理想,探讨辛伐他汀联合BMSCs治疗激素性股骨头坏死的可行性. 方法 取24只新西兰大白兔骨髓分离培养BMSCs,取第2代细胞制备为1×107/mL,细胞悬液,与明胶海绵复合.取70只新西兰大白兔经耳缘静脉注射10.μg/kg脂多糖,24 h后臀肌注射20 mg/kg甲基强的松龙琥珀酸钠,共3次,每次间隔24 h,制备股骨头坏死模型.选取制备成功的48只,随机分为4组,每组12只.A组不作任何处理B组单纯减压,并于减压通道植入明胶海绵;C组减压同时植入复合BMSCs的明胶海绵;D组减压同时植入复合BMSCs的明胶海绵,每日灌服辛伐他汀(10 mg/kg)至处死.观察动物一般情况,于术后4、8周各组取6只行MRI扫描后,处死取股骨头行组织学及免疫组织化学染色,扫描电镜观察. 结果 术后8周C、D组动物走路姿势逐步好转.术后4周各组MRI未见明显坏死区信号改变,8周时A组可见坏死低信号区明显扩大,B组无变化,C组范围缩小,D组明显缩小.组织病理学观察,术后4周A组见空骨陷窝,无新生毛细血管;B组空骨陷窝较多,有少量新生毛细血管;C、D组空骨陷窝减少,坏死区有大量增生活跃的成骨细胞及新生毛细血管.D组空骨陷窝阳性数及微血管密度分别为19.30±1.52和7.08±1.09,与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05).术后8周,A组可见部分骨小梁断裂;B组减压孔道有纤维性骨痂形成;C组空骨陷窝少见,髓腔形态不规则;D组大量新生骨形成,髓腔较规则,髓内脂肪细胞大小及分布均匀.D组空骨陷窝阳性数及微血管密度分别为11.31±1.28和12.37±1.32,与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与术后4周比较差异有统计学意义(P＜0.05).扫描电镜观察术后8周,A组骨小梁见多处断裂塌陷,骨小梁表面未见骨细胞,髓腔内有大量脂肪细胞堆积;B组部分骨小梁可见裂痕;C组骨小梁不致密;D组骨小梁结构规整致密,成骨细胞多,骨细胞及基质胶原纤维正常,髓腔规则. 结论 辛伐他汀能促进BMSCs成骨及成血管化,辛伐他汀联合BMSCs治疗激素性股骨头坏死具有较好的应用前景.     

激素性和酒精性股骨头坏死组织形态学的对比分析

目的比较分析激素性股骨头坏死和酒精性股骨头坏死的组织形态学特点。方法选取自2012-12—2013-12诊治的股骨头坏死26例,激素性股骨头坏死14例(激素组),酒精性股骨头坏死12例(酒精组),将同期行THA的6例股骨颈骨折(股骨头正常)作为对照组。将26例坏死股骨头及6例正常股骨头制备成病理切片标本进行HE染色、改良Masson染色,通过光学显微镜进行组织形态学定量分析。结果与对照组相比,激素组和酒精组同源软骨细胞数减少、骨小梁面积减小,而空骨陷窝率、骨陷窝面积及长径、软骨成骨指数、脂肪细胞长径、血管形成量及新生骨小梁面积等均高于正常水平,差异有统计学意义(P0.05)。激素组空骨陷窝率、骨小梁面积、新生骨小梁面积及脂肪细胞长径等均低于酒精组,而软骨成骨指数高于酒精组,差异有统计学意义(P0.05);2组在骨陷窝面积及长径、有效血管及无效血管数、同源软骨细胞数方面差异无统计学意义(P0.05)。结论酒精性股骨头坏死在组织形态学表现上更为复杂,坏死程度更加严重,在修复过程中也不同于激素性股骨头坏死。     

采用经导管动脉栓塞术建立猪股骨头缺血性坏死模型

目的探讨经皮穿刺供血动脉栓塞建立猪股骨头缺血性坏死（ANFH）模型的可行性。方法健康杂种家猪20只,随机分为实验组和对照组,每组10只。实验组：采用经皮穿刺插管的方法经右侧股动脉插入5F Cobra导管至左侧股动脉,超选择性插入股骨头供血动脉,用长约500μm的真丝微粒栓塞供血动脉;对照组：仅行左侧髂总动脉造影,不行动脉栓塞。术后2周和4周分别行左侧髋关节X线摄片、CT和MR检查;第4周影像学检查结束后行病理学检查,观察细胞形态,并计算单位面积的骨小梁体积和空缺骨陷窝百分比,对两组影像学和病理学资料进行比较。结果栓塞术后2周,股骨头X线平片无明显异常表现;CT示髋部软组织肿胀,MRI显示髋关节腔内长T2信号。栓塞4周后,X线平片、CT和MRI示实验组股骨头典型缺血性坏死改变;对照组未见明显异常改变。组织病理学检查显示,实验组骨细胞核固缩、深染,骨细胞减少或消失;单位面积的空缺骨陷窝百分比增多,骨小梁体积减少,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论采用经皮穿刺股骨头供血动脉栓塞可成功建立猪ANFH模型,并较好地模拟ANFH的临床病理过程。     

液氮冷冻并血管破坏建立犬月骨缺血性坏死动物模型的实验研究

目的 探索建立犬月骨缺血性坏死动物实验模型的方法.方法 成年健康杂种犬12只,通过剥离左侧月骨周围组织及液氮冷冻的方法致其缺血坏死,分别在术后第3、6、12周动态地观察其影像学(X线片、CT及MBI)表现,并取月骨进行大体标本及组织形态学检查.结果 第3周时X线片及CT检查没有明显的影像学改变,MRI检查T2WI上表现为弥漫性的点状高信号影.第6周时X线片及CT检查没有明显的影像学改变;MRI表现异常,T2WI上表现为片状高信号影.第12周时X线片示腕骨骨密度不均匀,腕骨外形不规则,压缩变扁;CT示大面积不规则的低密度灶;MRI检查T2WI上见腕骨内部大面积的高信号影;此时大体标本见大片白色死骨,关节软骨脱落;光镜下见骨小梁密度减低,大量骨陷窝形成.结论 运用液氮冷冻并血管破坏可以制备典型的犬月骨缺血性坏死动物实验模型.