神经干细胞移植在神经系统疾病治疗中的应用

神经干细胞(NSC)来源于胚胎或者成体,能自我更新,可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等,具有低免疫原性.NSC在体外能大量增殖,移植后在神经系统长期存活,并能分化整合到宿主中枢神经系统中.     

骨髓间充质干细胞移植修复脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤的治疗目前仍然是世界性难题,至今未能有理想的方法.随着对中枢神经再生研究的深入,尤其是1992年Revnolds等从成年鼠脑中首先分离出神经干细胞（NSC）,1998年Eriksson等证实成人脑部存在NSC后.人们对神经再生和神经疾病的治疗有了新的认识.然而内源性NSC在神经受损时因量少且缺乏正向信号的激活,无法进行组织修复;外源性NSC又不易获取,从活体组织中获得NSC具有危险性,而从胚胎中获得NSC又涉及伦理问题,不能满足大量的临床及实验需要,寻找一种新的神经干细胞或神经细胞的来源对于中枢神经系统移植治疗至关重要.     

Lentivirus介导分泌神经营养因子-3的基因工程神经干细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究

神经干细胞（NSC）是中枢神经系统中具有自我更新能力和多种分化潜能的细胞，是脊髓损伤（SCI）后再生修复的理想材料和基因载体。我们探讨了Lentivirus介导分泌神经营养因子-3（NT-3）的基因工程NSC移植治疗SCI的可行性，以期为SCI后功能恢复的实验研究以及进一步临床研究提供基础资料。     

神经干细胞转染胶质细胞源性神经营养因子基因后的分化表现

目的观察转基因神经干细胞(NSC)体外外源基因的表达及转基因后的分化。方法体外转基因筛选得到稳定表达胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的脊髓源神经干细胞系(SP-NSC),通过流式分选(FACS),比较转基因前、后及血清对NSC分化为神经元及神经胶质细胞比例的变化;并采用Westernblot法检测传代后目的基因的表达。结果转基因后GDNF表达至少能稳定到转基因后6周;转基因后NSC分化为神经元的比例由转基因前(53.9±3.5)%提高到转基因后的(67.5±1.2)%,而血清组胶质细胞分化明显。结论SP-NSC转染GDNF后能稳定表达目的基因,转基因能显著增加后裔细胞中神经元比例,为转基因治疗中枢神经系统疾病研究奠定了基础。     

间充质干细胞恶性转化的研究进展

间充质干细胞(MSCs)作为一种多能干细胞,可以在体外快速增殖并具备向多种细胞谱系分化的潜能,这样可作为种子细胞来治疗疾病和组织损伤,如利用MSCs促进骨折和软骨愈合~([1,2]),以及治疗人的囊性纤维化疾病~([3]).但是近来的研究结果显示,许多肿瘤也可能起源于MSCs,或MSCs本身就是许多肿瘤的靶细胞.     

Notch信号通路调控缺血性疾病过程的研究进展

心、肾及脑等组织的缺血可引起体内血管受损等一系列病理生理过程,缺血损伤后的血管修复与功能重建一直是缺血性疾病治疗上尚末解决的难题.Notch信号通路是进化中高度保守的信号转导通路,其调控细胞增殖、分化和凋亡的功能几乎涉及所有组织和器官.近年来研究表明Notch信号通路与血管新生以及缺血性疾病的调控有着密切的联系,且有报...     

神经干细胞——神经系统的种子细胞

神经干细胞(neural stem cell,NSC)既具有增殖能力,又具有向多细胞系(神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞等)分化的能力,在神经移植中既可作为替代治疗的种子细胞,又可作为基因治疗的载体细胞,具有很大的应用价值。在过去相当长时间里人们认为,NSC只存在于胚胎脑组织中,1992年Reynolds和Weiss首次从成年小鼠纹状体分离得到了NSC。近年来不但完善了从胚胎和成体脑组织培养NSC的方法,而且建立了从胚胎干细胞培养NSC的方法,并发现骨髓基质细胞(bone marrow stromal cell)具有发育成NSC的能力。本文就几个来源的NSC进行综述。     

神经干细胞的自发永生化

目的 观察培养达24个月的神经干细胞(NSC)是否会发生永生化和恶变.方法 培养流产胎儿皮层来源的NSC.对培养超过24个月的NSC,分析其核型,检测其自我更新、增殖、衰老以及移植后的致瘤性等.检测其Bmi-1-p16INK4a/p14ARF基因通路的改变.结果 体外培养超过24个月的NSC自我更新旺盛,克隆形成率(14.89±4.75)%,显著高于正常培养8周NSC的(8.04±2.07)%;生长速度快,表现为传代1周后的新生神经球的直径为(85.98±30.24)μm,显著高于体外培养8周NSC的(15.97±9.97)μm.此外,培养超过24个月的NSC衰老细胞为(5.96±2.81)%,远低于正常培养8周NSC的(78.14±8.99)%;而且染色体数目异常,这些结果可以确定其发生了永生化.裸鼠移植未发现致瘤性,所以该细胞未发生恶变.此2株细胞中Bmi-1、p16INK4a、p14ARF基因均缺失.结论 体外长期培养的人类皮层神经干细胞能够自发永生化,表现为不进入衰老状态并不断增殖.其增殖不依赖于Bmi-1基因,而其不衰老状态可能和p16INK4a、p14ARF基因缺失有关.     

脊髓神经干细胞的研究进展及应用前景

上世纪末,Reynolds等[1]从成年小鼠纹状体中分离出能够在体外不断分裂增殖的具有多分化潜能的细胞群,提出了神经干细胞(neuralstemcell,NSC)的概念。1997年Mckay[2]在Science上指出神经干细胞是指能自我更新、具有分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞能力的细胞,它具有多分化潜能、自我更新能力和干细胞基本生物学特性。Gage[3]也提出神经干细胞是被用来描述那些能产生神经组织或来源于神经系统、有一定的自我更新能力、能通过不对称分裂产生除它本身以外的细胞。神经干细胞的出现彻底改变了中枢神经系统(CNS)神经元不能再生…     

中枢性疼痛的治疗

中枢性疼痛(central pain)是指中枢神经系统(包括脑、脑干、脊髓)的损伤或功能障碍引起的疼痛,属于神经病理件疼痛.国际疼痛协会(IASP)特别强调其原因是中枢神经系统内的原发过程.外周引发的疼痛如患肢痛和臂丛神经撕脱痛,即使伴有中枢机制,也不能视为中枢性疼痛.     

神经干细胞的分离培养及体外分化

目前 ,脊髓损伤的修复和治疗 ,仍然是一个难以解决的世界性难题。虽然在动物实验中已取得了一些令人鼓舞的进展 ,但至今未找到一种能用于临床的有效方法。神经干细胞(neuralstemcells ,NSCs)的发现为中枢神经系统 (centralner voussystem ,CNS)损伤修复及某些疾病的治疗带来了新的希望。因其具有很强的分裂、增殖和自我更新能力 ,人们把它视为中枢神经系统移植和替代治疗的理想材料。近年来神经干细胞的研究作为生命科学界的热点受到广泛关注。本文就神经干细胞的分离、培养及其体外分化作一综述 ,重点在于人神经干细胞的研究。1　啮齿动…     

肿瘤干细胞的研究进展

近来的研究表明,肿瘤是一种干细胞疾病。肿瘤干细胞(tumorstemcell,TSC)具有无限增殖、自我更新及分化的能力,可增殖分化形成肿瘤。TSC的存在已经在造血系统肿瘤中得到证实,并在部分实体肿瘤如乳腺癌、神经系统肿瘤、前列腺癌、肺癌及皮肤癌中初步分离出TSC。肿瘤干细胞的分离、纯化及其成功鉴定将为肿瘤临床诊断、治疗、预后及其基础研究带来新的理念。     

胶质瘤干细胞趋化神经干细胞迁移及其机制研究

目的 观察神经干细胞( NSC)向胶质瘤干细胞(GSC)及其分化细胞的迁移能力,探讨其趋化机制。方法 干细胞条件培养U251和3例原代胶质瘤干细胞,以流式细胞术和Western blot对其鉴定;Transwell小室法检测GSC和其分化细胞条件培养液(CM)对NSC迁移的趋化能力;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测CM中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的分泌水平,并以表皮生长因子(EGF)、bFGF为对照分析CM对NSC的化学趋化作用;进一步以Dio和Dil分别标记NSC和GSC,体外混合培养观察NSC向GSC的迁移、以及对肿瘤干细胞球生长的影响。结果 干细胞培养条件下的胶质瘤干细胞球,高表达干细胞标志物Nestin和/或CD133( 11.02％～ 33.55％);分化后干细胞标志物表达下降,分化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达增加(P＜0.05);GSC与其分化细胞比较,分泌高水平的趋化因子VEGF和bFGF(P ＜0.05),并对NSC有高度趋化能力;体外混合接触培养也显示NSC向肿瘤干细胞球的迁移和包绕,并且能够显著抑制肿瘤干细胞球的生长(P＜0.05)。结论 GSC体外可趋化NSC向其迁移,其趋化作用较分化的肿瘤细胞更为显著,并且与其分泌高水平的生长因子有关;向肿瘤干细胞球迁移的NSC可抑制其体外生长。     

周围神经缺血再灌注损伤

再灌注损伤是指机体的组织或器官在血液灌注停止或不良,即经历缺血、缺氧后,循环重新建立,血供恢复后给机体带来的损伤。现已在多种器官如小肠、脑、脊髓、肾、胰、骨骼肌等发现再灌注损伤的存在。在神经系统中,中枢神经系统特别是关于脑的缺血再灌注损伤的机制和防治...     

微血管环境影响中枢神经再生的研究进展

神经干细胞(NSCs),特别是成体神经干细胞的发现为哺乳动物中枢神经系统(CNS)的再生修复带来了新的希望[1].目前研究结果显示NSCs的增殖、迁移、分化过程受到其周围复杂微环境信号的调控,而其中由多种成分组成的微血管环境信号系统发挥了重要作用[2].     

神经干细胞向神经元分化过程中EphrinB2基因的表达

神经干细胞(NSC)的分化调控使其向神经元分化,是将神经干细胞应用于中枢神经系统移植和替代治疗的关键。EphrinB2基因主要在神经细胞间相互作用、神经轴突导向和神经发育等方面具有重要的作用[1] 。本实验旨在研究EphrinB2基因在全反式维甲酸(ATRA)诱导人胚胎神经干细胞向神经元分化过程中的表达和所起的作用。一、材料和方法Hoechst3 3 3 42、ATRA、DMEM、F12细胞培养基和N2添加剂、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF ,美国Sigma公司)。表皮生长因子(EGF ,美国Invitrogen公司) ,小鼠抗人Nestin抗体(美国Bdbio science公司) ,小鼠抗…     

神经干细胞的研究及其应用

神经干细胞是具有自我更新和多向分化潜能的一类细胞,在适当条件下可以分化为神经元细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞,开拓了中枢神经系统疾病治疗的新视野,在生命科学研究领域中倍受重视,本文就神经干细胞的概念、生物学特性、来源和分布、增殖分化的影响因素及临床应用等方面进行综述。     

缺氧诱导小鼠神经干细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的　探讨缺氧对小鼠神经干细胞 (NSC)中诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)表达的诱导作用。方法　用含表皮生长因子的培养基原代培养NSC ;用免疫组织化学法检测在急性缺氧诱导下iNOS的表达 ;在每张免疫组织化学图像中随机选取 10个细胞 ,用图像分析系统分析经不同缺氧时间处理后平均灰度级变化 ,其灰度级均数间接反映酶表达强度的改变。结果　原代培养的细胞能连续增殖并分化为神经元及神经胶质细胞样细胞 ;行免疫组织化学检测 ,在一般培养条件下 ,NSC及分化细胞中iNOS呈阴性表达 ;经缺氧处理后呈阳性表达。图像分析缺氧诱导 10、3 0min与非缺氧组灰度级均数分别为 :15 8.7± 5 .95、12 8.4± 5 .73、2 0 0 .3± 5 .5 5。结论　用缺氧方法能诱导NSC表达iNOS ,其表达强度与缺氧时间呈正相关。第四军医大学西京医院全军神经外科研究所     

肝性脑病患者血清S100B和神经元特异性烯醇酶的应用研究

肝性脑病是指严重肝脏疾病所致的代谢紊乱,影响中枢神经系统功能,出现以精神、神经症状为主的一种肝脑综合征.S100B蛋白和神经元特异性烯醇酶（neuron specific enolase,NSE）主要分布于中枢神经系统,脑组织损伤后进入脑脊髓液,经血脑屏障入血液循环.S100B蛋白和NSE检测已经被作为脑损伤标记物用于判断疾病是否累及神经系统、神经元损伤的严重程度以及用于评价治疗效果,但用于肝性脑病的诊断鲜见报道.本研究旨在探讨血清S100B蛋白和NSE检测对重型病毒性肝炎患者肝性脑病的诊断价值.     

Notch信号通路在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中的作用

MSC(Mesenchymal stem cell)具有多向分化潜能和自我增殖能力.在不同调节因子的作用下分化为多种细胞,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、成肌细胞、神经细胞和血管内皮细胞等[1-3].MSC向Osteoblast(OB)分化的过程受到多种通路的调控和影响,如Notch、Wnt、MAPK等信号通路.本文结合最新研究进展,重点综述了Notch信号通路在MSC向OB分化过程中的调节作用.