热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜氧自由基的作用

目的:观察热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜氧自由基及热休克蛋白(HSP)70表达的影响,探讨氧自由基在大鼠烫伤后急性胃黏膜损伤中的作用及热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜的保护作用机制。方法:将96只Wistar大鼠随机分为烫伤组(B组,n=48,其中8只大鼠作为正常对照)及热休克预处理后烫伤组(HB组,n=48,其中8只大鼠作为实验对照),观察各时相点两组大鼠胃黏膜损伤指数(UI)、胃黏膜丙二醛(MDA)及胃黏膜细胞SOD活性变化。应用免疫组化染色分析胃黏膜细胞中HSP 70表达变化。结果:大鼠严重烫伤后胃黏膜细胞SOD大量消耗,MDA显著增加,胃黏膜损害明显;热休克预处理能显著减轻大鼠严重烫伤后急性胃黏膜损害。HB组较B组大鼠胃黏膜HSP 70表达水平显著升高(P<0.05),热休克预处理能显著降低胃黏膜细胞SOD的消耗,减少MDA的产生。胃黏膜损伤指数(UI)与MDA呈显著正相关(r=0.695,P<0.01),与HSP 70呈显著负相关(r=-0.794,P<0.01);胃黏膜SOD与MDA呈显著负相关(r=-0.823,P<0.01),而与HSP 70呈显著正相关(r=0.527,P<0.05)。结论:严重烫伤大鼠胃黏膜存在氧自由基损伤;热休克预处理可显著减轻烫伤大鼠胃黏膜氧自由基损伤,保护机制与HSP 70保护抗氧化酶SOD活性密切相关。     

大鼠烧伤感染模型肺组织热应激蛋白70的表达及意义

目的:了解实验大鼠热应激蛋白70(Heatstressproteins,HSP70)的表达与烧伤脓毒症的关系,探讨其作用机制。方法:将36只雄性Wistar大鼠随机数字表法分成6组,每组6只。其中4组以92℃水,18s烫伤(烫伤面积20%),腹腔注射乳酸林格氏液休克复苏,48h后尾静脉注射绿脓杆菌PA103悬液0.5mL(菌量1.5×109CFU/mL)制成大鼠烧伤感染模型,分别对成模后0,4,24,48h时相点进行检测;另以正常组及烧伤48h组作为对照。以免疫组化法及WesternBlot检测各组肺组织HSP70的表达,同时以偶氮显色法检测各组血浆内毒素水平,并对大鼠肺组织进行大体及镜下观察。结果:Wistar大鼠在尾静脉注射绿脓杆菌PA103悬液后,其血浆内毒素水平迅速上升。与正常对照组相比,烧伤感染组大鼠的血浆内毒素水平明显升高(t=2.2281,P<0.05)。正常大鼠肺组织HSP70表达较弱,表达部位在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质。在烧伤感染条件下,大鼠肺组织HSP70表达逐渐增强,至成模后24h,HSP70表达累积量达到最高峰,并呈现较明显的核表达。成模后48h,HSP70表达逐渐减弱,核表达逐渐消失,主要在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质表达。结论:HSP70与烧伤感染后的应激反应有密切关系,其表达规律与热应激反应相似。在烧伤感染的早期(24h内),热应激蛋白表达水平与血浆内     

大鼠烧伤感染模型肺组织热应激蛋白70的表达及意义

目的：了解实验大鼠热应激蛋白70（Heat stress proteins,HSP70)的表达与烧伤脓毒症的关系，探讨其作用机制。方法：将36只雄性Wistar大鼠随机数字表法分成6组，每组6只。其中4组以92℃水，18s烫伤(烫伤面积20％)，腹腔注射乳酸林格氏液休克复苏，48h后尾静脉注射绿脓杆菌：PA103悬液0．5mL(菌量1．5&;#215;10^9CFU／mL)制成大鼠烧伤感染模型，分别对成模后0，4,24，48h时相点进行检测；另以正常组及烧伤48h组作为对照。以免疫组化法及Western Blot检测各组肺组织HSP70的表达，同时以偶氮显色法检测各组血浆内毒素水平，并对大鼠肺组织进行大体及镜下观察。结果：Wistar大鼠在尾静脉注射绿脓杆菌PA103悬液后，其血浆内毒素水平迅速上升。与正常对照组相比，烧伤感染组大鼠的血浆内毒素水平明显升高(t=2．2281，P&;lt;0．05)。正常大鼠肺组织HSP70表达较弱，表达部位在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质。在烧伤感染条件下。大鼠肺组织HSP70表达逐渐增强，至成模后24h，HSP70表达累积量达到最高峰，并呈现较明显的核表达。成模后48h，HSP70表达逐渐减弱，核表达逐渐消失，主要在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质表达。结论：HSP70与烧伤感染后的应激反应有密切关系，其表达规律与热应激反应相似。在烧伤感染的早期(24h内)，热应激蛋白表达水平与血浆内毒素水平有一定的相关性。     

川芎嗪对烧伤大鼠心肌损伤保护作用的实验研究

目的 探讨川芎嗪对烧伤大鼠心肌损伤的保护作用及可能机制。方法 采用30％体表面积Ⅲ度烫伤大鼠模型，64只Wistar大鼠随机分为烧伤组和川芎嗪组。另取8只大鼠作为伤前对照。于致伤前及伤后3、6、12和24h检测血清心肌钙蛋白T（cTnT）、心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）含量变化；Westernblot检测心肌组织热休克蛋白70（HSP70）的表达。结果 大鼠严重烧伤后3h和12h心肌组织中HSP70蛋白的表达显著升高，血清cTnT含量显著升高，心肌组织中SOD活性显著降低（P〈0．01）。与烧伤组相比，川芎嗪组心肌组织中HSP70蛋白的表达明显升高，血清cTnT含量显著降低，而心肌组织中SOD活性显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论川芎嗪对大鼠严重烧伤后早期心肌损伤具有一定的保护作用，其保护机制可能与HSP70诱导表达增强有关。     

热休克蛋白70对严重创伤休克后肝脏的作用

目的 探讨热休克蛋白70（HSP70）对严重创伤休克后肝脏作用.方法 成年Wistar大鼠,采用双侧股骨骨折伴失血性休克致严重创伤模型,动态观察伤后8 h大鼠肝组织HSP70、血清肝功能生化指标、肝脏病理等变化.HSP70表达测定采用免疫印迹法,并进行计算机图像分析.结果 伤后HSP70在肝组织中表达迅速增加,6 h达到峰值,伤后8 h仍维持较高水平;创伤合并休克后,HSP70表达高峰提前至伤后4 h,持续表达至伤后6 h后逐渐下降,死亡前在肝组织中仍有少量表达.创伤休克后血清ALT、TB伤后4 h开始明显增高（P＜0.01）,白蛋白下降（P＜0.01）.肝脏镜下创伤休克后6 h肝窦内出现较多炎性细胞浸润.结论 在创伤休克早期,HSP70可能参与了肝组织细胞抗损伤机制的启动,但随着休克时间的延长,HSP70的过高持续表达,则可能对肝脏造成损害.HSP70在创伤休克后肝保护与肝损害过程中可能发挥双重作用.     

热休克蛋白70与严重多发伤后早期继发性肝脏损害

目的 :探讨热休克蛋白 70 (HSP70 )在严重多发伤后肝脏继发性损害中的作用。方法 :成年雄性 Wistar大鼠 ,采用严重胸部撞击伤伴单侧股骨骨折多发伤模型。动态观察致伤后 2 4 h及用糖皮质激素受体阻断剂米非司酮后大鼠肝组织 HSP70、肝功能指标及致伤 2 4 h死亡率等变化。HSP70表达测定采用免疫印迹法 ,并进行计算机图像分析。结果 :伤后 HSP70在肝组织中表达伤后迅速增加 ,8h达到峰值 ,2 4 h仍维持在较高水平 ;但血清丙氨酸转氨酶 (AL T)、总胆红素 (TB)及白蛋白的改变无显著差异。使用糖皮质激素受体阻断剂米非司酮能使肝组织 HSP70表达明显增多 ;血清 AL T及 TB在伤后早期即有明显升高 (P均 <0 .0 1) ,白蛋白明显下降(P<0 .0 1) ;伤后 2 4 h动物死亡率明显增加 (P<0 .0 1)。结论 :HSP70可能参与了肝组织细胞抗损伤机制的启动 ,但 HSP70过高表达则可能对肝脏造成损害。 HSP70可作为创伤后肝损伤与抗损伤机制的一个重要指标。     

热休克蛋白70大鼠脑弥漫性轴索损伤后神经元保护及修复作用研究

目的探讨大鼠脑弥漫性轴索损伤(diffuseaxonalinjuries,DAI)后不同时期脑皮层组织中热休克蛋白(heatshockproteins,HSP)70的表达,为临床治疗脑损伤寻求有效手段。方法制作大鼠DAI模型,分别在伤后6、24、48、72h,7d以免疫组织化学方法检测大鼠脑皮层成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达,分析其含量变化特点。结果DAI后24hHSP表达增加,48h达高峰,7d后仍维持较高水平。结论bFGF在各时间点表达有明显差异,提示其参与脑损伤后神经元保护及修复过程。     

大黄多糖对脑损伤后大鼠脑皮层热休克蛋白70表达的影响

目的：观察大黄多糖（Tanguticum Maxim polysaccharides,TMP)对大鼠脑损伤后不同时间热休克蛋白（heat shock protein,HSP)70表达的影响，探讨大黄多糖的脑保护作用机制，为其用于临床治疗脑损伤寻求依据。方法；复制大鼠脑挫裂伤模型，分别在伤后6，24，48h以免疫组织化学方法检测大脑皮层表达HSP70的神经细胞，以Western-blot蛋白印迹方法检测脑皮层HSP70表达变化。结果：大黄多糖治疗组6h HSP 70表达高于损伤组，24，48h均低于治疗组.结论：大黄多糖能促进HSP 70的表达，这可能是其脑保护作用的机制之一。     

糖皮质激素受体和热休克蛋白70在大鼠创伤失血性休克肝组织中的变化及其意义

目的从组织细胞受体水平探讨糖皮质激素受体（GR）和热休克蛋白70（HSP70）在创伤失血性休克后肝脏中的变化及其作用。方法采用双侧股骨骨折伴失血性休克致严重创伤模型，动态观察伤后8h大鼠肝组织GR、HSP70、血清肝功能生化指标、肝脏病理等变化。采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）测定肝组织GR、HSP70含量，并进行计算机图像分析。结果单纯股骨骨折伤后，肝组织GR含量于伤后1h即开始下降，6h降至最低，8h仍显著低于正常对照组；创伤合并休克后，GR下降更加明显。HSP70在单纯股骨骨折伤后迅速增加，6h达到峰值，8h仍持续在较高水平；创伤合并休克后，HSP70升高更加显著。单纯股骨骨折伤后，血清丙氨酸转氨酶（ALT）、总胆红素（TB）和白蛋白与正常对照组比较，差异均无显著性。但创伤合并休克后4h和2h血清ALT和TB分别开始明显增高（P均d〈0．01），白蛋白则均下降（P均〈0．01）。创伤合并休克后6h肝脏镜下肝窦内即出现较多炎性细胞浸润。结论GR不足在严重创伤失血性休克后肝脏继发性损害过程中起重要作用，HSP70可能参与了肝组织细胞抗损伤机制的启动。     

大黄多糖对脑损伤后大鼠脑皮层热休克蛋白70表达的影响

目的观察大黄多糖(TanguticumMaximpolysaccharides,TMP)对大鼠脑损伤后不同时间热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70表达的影响,探讨大黄多糖的脑保护作用机制,为其用于临床治疗脑损伤寻求依据。方法复制大鼠脑挫裂伤模型,分别在伤后6,24,48h以免疫组织化学方法检测大脑皮层表达HSP70的神经细胞,以Western-blot蛋白印迹方法检测脑皮层HSP70表达变化。结果大黄多糖治疗组6hHSP70表达高于损伤组,24,48h均低于治疗组。结论大黄多糖能促进HSP70的表达,这可能是其脑保护作用的机制之一。     

严重烧伤休克期切痂对肠粘膜损伤的影响

目的：探讨严重烧伤休克期切痂对肠粘膜损伤的影响。方法：采用４０％总体表面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ度烫伤犬模型,随机分为切痂组（Ｅ组）和非切痂组（Ｃ组）,伤后１小时按Ｐａｒｋｌａｎｄ公式补给平衡盐溶液,Ｅ组动物伤后３小时切痂。分别于伤前、伤后３０分钟及３、６、１２、２４和４８小时测定血浆二胺氧化酶（ＤＡＯ）、乳酸、内毒素（ＬＰＳ）含量,伤后４８小时检测肠组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量。结果：２组动物伤后血浆ＤＡＯ、乳酸、ＬＰＳ含量明显增加。切痂后能明显降低血浆中ＤＡＯ、ＬＰＳ和乳酸含量,肠组织中ＭＤＡ含量也明显减少。结论：严重烧伤休克期切痂有利于保护肠粘膜屏障功能。     

Protective role of heat stress in burn trauma

OBJECTIVE: This study was designed to determine whether cutaneous burn injury up-regulated expression of myocardial heat shock protein (HSP)70 and to determine a potential cardioprotective role of inducible HSP70 (iHSP70) in postburn myocardial contractile function. DESIGN: Experimental study. SETTING: Research laboratory. SUBJECTS: Adult Hartley guinea pigs. INTERVENTIONS: The first set of studies determined whether heat stress (increasing body temperature to 42 degrees C for 20 mins) in adult Hartley guinea pigs would increase expression of myocardial iHSP70. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Our model of heat stress increased expression of inducible HSP in the myocardium (Western blot), and this response persisted 1, 2, 4, and 24 hrs after the initial heat stress. We then determined whether burn trauma over 40% total body surface area (TBSA) increased myocardial expression of iHSP70. Time-matched sham and burned guinea pigs were killed 1, 2, 4, 12, 18, or 24 hrs postburn, and hearts were used either to examine myocardial iHSP70 expression by Western blot or to determine myocardial contractile function (Langendorff). Burn trauma produced a two-fold increase in myocardial iHSP70 that was evident as early as 1 hr postburn and persisted 24 hrs postburn; increased iHSP70 expression occurred despite only a modest and transient increase in body temperature after burn trauma. We then determined whether heat shock stress before burn trauma provided a protective or detrimental effect on cardiac function. Body temperature was increased to 42 degrees C for 20 mins, animals were allowed to recover, and body temperature returned to baseline; burn trauma was then produced (40% TBSA) either 1, 2, 4, or 24 hrs after the initial heat stress. Myocardial contraction and relaxation deficits were evident after burn trauma alone; however, heat stress 1 hr before burn trauma improved left ventricular developed pressure and positive or negative maximum change in pressure in time and shifted left ventricular function curves upward and leftward from those calculated for burn in the absence of heat stress, indicating improved ventricular performance. Increasing the time between the initial heat stress and burn injury decreased the cardioprotective effects of heat stress. Thus, organ protection was evident only when the time period between the initial heat stress and the second insult was brief (1 hr). CONCLUSIONS: Our finding that the amount of myocardial iHSP70 remained constantly elevated after heat stress while the cardio-protective effect afforded by a prior heat stress declined with time suggested that the initial heat stress evoked several compensatory/adaptive mechanisms that may include modulation of autonomic nervous system responses, changes in metabolic function, modulation of pro/anti-inflammatory cytokine responses, and heat stress-related alterations in antioxidant capacity.     

HSP70基因转染对缺氧-再复氧肠上皮细胞生长能力影响的研究

目的 :研究重组腺病毒介导的热休克蛋白 70转染对缺氧再复氧损伤后肠上皮细胞生长能力的影响。方法 :将重组含人全长 HSP70基因的腺病毒转染体外培养的肠上皮细胞株 IEC 6 ,检测转染细胞 HSP70的 m RNA表达水平。 IEC 6细胞经缺氧再复氧处理后 ,对未转染组 ,转染 2 4 h、4 8h及 72 h组细胞的细胞活力、生长曲线、增殖能力进行检测分析。结果 :腺病毒转染组细胞 HSP70 m RNA表达呈阳性。经缺氧再复氧处理后 ,IEC 6转染细胞活力较未转染组活力明显增强 (P<0 .0 1) ,生长能力提高 (P<0 .0 5 ) ,分裂指数增高(P<0 .0 5 )。结论 :重组腺病毒介导的 HSP70转染可增强肠上皮细胞生长及增殖能力 ,从而保护其抵抗缺氧再复氧损伤。     

热休克预处理对肠上皮细胞缺氧-再给氧损伤的保护作用及其机制

目的 :观察热休克预处理对肠上皮细胞 (IEC 6 )缺氧再给氧损伤的影响 ,并探讨热休克蛋白 70(HSP70 )的细胞保护作用。方法 :体外培养 IEC 6细胞 ,分为正常对照组、单纯缺氧再给氧组及热休克预处理组 ,观察缺氧再给氧后各组细胞 HSP70及 Bcl 2表达及细胞活力、乳酸脱氢酶 (L DH)漏出情况 ;用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 :热休克预处理可诱导 HSP70产生 (P <0 .0 1) ,显著增加缺氧再给氧处理后IEC 6细胞活力 (P<0 .0 5 ) ,使 L DH漏出减少 (P<0 .0 5 ) ,凋亡相关基因 Bcl 2表达明显增加 (P<0 .0 1) ,细胞凋亡率明显降低 (P<0 .0 1)。结论 :热休克预处理可能通过诱导 HSP70表达来减轻肠上皮细胞缺氧再给氧损伤 ;增加细胞 Bcl 2基因表达并抑制肠上皮细胞缺氧再给氧后细胞凋亡可能是其保护作用机制之一。     

双歧杆菌对烫伤大鼠肠道黏膜机械及生物屏障的改善作用

目的 :探讨严重烫伤后补充外源性双歧杆菌对肠黏膜机械及生物屏障的保护作用及其对肠道细菌或内毒素移位的影响。方法 :70只 Wistar大鼠按随机数字表法分为烫伤对照组 ( BC)、烫伤治疗组 ( BT)和假伤对照组 ( NC)。BT组伤后灌饲双歧杆菌悬液 ( 5× 10 1 2 CFU/ L) 1.5 ml,2次 / d。观察细菌或内毒素移位、肠黏膜菌群和肠黏膜损伤情况等。结果 :1伤后 3 d,BC、BT组细菌移位率分别为 42 %和 16 % ( P=0 .0 0 40 ) ,5 d分别为30 %和 6 % ( P=0 .0 0 2 0 ) ;伤后 1d,BC组内毒素水平显著高于 BT组。 2 BC组回盲部黏膜菌群中双歧杆菌量仅为 NC组的 1/ 10～ 1/ 6 0 ,BT组双歧杆菌量明显增多 ;BC组大肠杆菌量在 1、3 d增加约 2 0～ 30倍 ,但 3 d后BT组大肠杆菌量显著减少并接近正常水平。 3回肠黏膜损伤以 1、3d最为明显 ,BC组伤后 5 d损伤评分仍明显高于 NC组 ( P<0 .0 5 ) ;BT组 3d时已明显修复 ,5 d已与 NC组无明显差异。结论 :补充外源性双歧杆菌能促进烫伤后受损肠黏膜屏障和生物屏障修复 ,有效防治肠道细菌或内毒素移位。     

水乐维他对严重烧伤患者休克期应激反应及白细胞功能的干预作用

目的探讨水乐维他对严重烧伤患者休克期应激反应的调节作用及白细胞趋向性和吞噬功能的影响。方法选择严重烧伤患者87例，随机分为水乐维他治疗组和对照组。水乐维他治疗组于伤后立即输注水乐维他，每日2支，连续14d；对照组给予平衡盐溶液500ml静脉输入，其他治疗两组保持一致。分别于伤后2～4、6～8、10～12、14～16、18～20、22～24、36和48h抽取静脉血，分别采用放射免疫分析法和硫代巴比妥荧光法检测血清皮质醇和丙二醛含量；于伤后7d和14d抽取静脉血，提取白细胞进行趋向性及吞噬率测定。结果水乐维他治疗组和对照组严重烧伤患者在伤后2～4h血清皮质醇含量均开始升高；水乐维他治疗组在伤后10～12h开始维持在相对平稳的较高水平；而对照组则表现为不稳定的持续升高，且在10～48h时，血清皮质醇升高幅度显著高于水乐维他治疗组，两组比较差异均有显著性（P均〈0．05）。烧伤早期两组血清丙二醛含量均增高，但水乐维他治疗后14～48h丙二醛含量增高幅度显著低于对照组（P均〈0．05）；而水乐维他治疗组白细胞趋向游走能力在伤后7d和14d均明显增强（P〈0．05和P〈0．01），但白细胞的吞噬率在两组间比较差异均无显著性（P均〉0．05）。结论水乐维他对严重烧伤患者休克期应激反应和脂质过氧化损害等方面有一定的缓冲作用，同时能增强白细胞的趋向游走能力，对增强机体免疫力有一定作用。     

热休克转录因子-1 mRNA及热休克蛋白在正常结肠黏膜和腺瘤及结肠癌中差异性表达的研究

目的检测热休克转录因子-1（HSF1）mRNA、热休克蛋白（HSP）27、HSP70及HSP90α在结肠癌演进过程中组织原位的表达。方法应用组织芯片技术,通过免疫组织化学及原位杂交的手段,对结肠癌演进过程中应急通路的基因表达进行核酸和蛋白水平的检测。结果 HSF1mRNA、HSP27、HSP70及HSP90α在正常结肠黏膜、腺瘤及结肠癌中的阳性表达分别为21.43%、66.00%、85.71%,35.70%、68.00%、42.90%,28.57%、46.00%、67.35%,21.40%、54.00%、73.50%。其中,HSF1mRNA与HSP90α在腺瘤与结肠癌中的表达明显高于正常结肠组织,HSP27在腺瘤中的表达水平高于正常结肠组织及结肠癌组织,HSP70在结肠癌组织中的表达明显高于腺瘤和正常结肠组织。结论 HSF1mRNA、HSP27、HSP70及HSP90α的阳性表达与结肠癌的演进过程密切相关,其所代表的应急通路在结肠的演进过程中具有重要作用。