结直肠癌中RIP2的表达与侵袭性相关性研究

目的通过检测结直肠癌(CRC)组织中受体相互作用蛋白2(RIP2)的表达水平,并观察调高RIP2水平后肿瘤细胞的侵袭迁移能力,以探讨RIP2在肿瘤细胞侵袭与迁移中的作用。方法采用免疫组织化学法检测CRC组织(48份)及癌旁黏膜组织(56份)中RIP2的表达水平,并应用JetPRIME试剂将pEGFP-RIP2质粒转染入SW480结肠癌细胞株,上调其RIP2表达水平后,观察肿瘤细胞侵袭迁移能力的变化。结果 CRC组织中RIP2表达显著低于癌旁黏膜组织,且差异具有统计意义(P0.05);上调RIP2后,SW480细胞迁移能力减弱,且差异具有统计意义(P0.05)。结论 RIP2在CRC组织中表达下降,并与肿瘤细胞侵袭转移相关。     

受体相互作用蛋白-3分子功能及其在神经疾病中的研究进展

细胞死亡一直以来被简单分为凋亡和坏死两种主要形式,其中坏死被公认为是组织细胞受到损害因素下发生的被动、不可逆、非调控性的死亡过程。然而最新的研究证实,在某些特定条件下坏死仍可受到调控并具有被逆转的可能,这种新型细胞死亡方式被称为程序性坏死。程序性坏死途径参与了生物体的生长发育、衰老和死亡等生理学进程,尤其在多种神经系统疾病(颅脑创伤、感染、神经退行性病变)的发生、发展中扮演了重要角色。受体相互作用蛋白-3(RIP3)作为细胞凋亡和坏死之间相互转换的关键性分子,在介导神经细胞损伤的程序性坏死、NF-κB通路激活以及诱发线粒体活性氧自由基(ROS)的生成等机制中发挥着重要作用。本文就RIP3的分子功能及其与神经疾病的关系进展予以综述。     

三阴乳腺癌细胞受体相互作用蛋白140的表达与癌细胞生长和增殖的相关性

目的探讨受体相互作用蛋白140(RIP140)在三阴乳腺癌组织中的表达及其对癌细胞生长和增殖的影响。方法选取2005年2月至2008年2月该院行乳腺癌改良根治手术的患者179例,均能电话随访且术前均未行放射治疗或者化疗。其中,术后诊断三阴乳腺癌41例,非三阴乳腺癌138例,各取癌旁组织10例。采用免疫组织化学法和Western Blot检测3种组织的RIP140表达;慢病毒介导MDA-MB-231细胞RIP140沉默,将RIP140沉默后的MDA-MB-231细胞作为实验组,未沉默的MDA-MB-231细胞作为空白组,分别注入30只裸鼠皮下,以后每周每组各处死10只裸鼠,取皮下肿瘤测量其体积并做石蜡切片,核增殖抗原Ki-67的免疫组织化学法检测皮下肿瘤癌细胞增殖情况。结果 RIP140在三阴乳腺癌组织中的表达明显高于非三阴乳腺癌组织,且均高于癌旁乳腺组织(P0.05)。RIP140强阳性患者的总生存率低于RIP140表达相对较低的患者(P0.05)。沉默MDA-MB-231细胞RIP140后,抑制三阴乳腺癌裸鼠皮下肿瘤的生长和增殖。结论 RIP140在三阴乳腺癌组织的高表达与三阴乳腺癌患者预后较差密切相关。沉默三阴乳腺癌细胞RIP140可抑制乳腺癌细胞的生长和增殖。下调三阴乳腺癌细胞RIP140的表达,可抑制三阴乳腺癌的发生和发展。     

阻断RIP2对小鼠巨噬细胞及内毒素血症的影响

目的:阻断RIP2对巨噬细胞产生炎症细胞因子及内毒素血症小鼠的影响。方法:构建小鼠RIP2基因的siRNA质粒,转染细胞后用RT-PCR和Western blot方法检测细胞RIP2的表达;LPS刺激后,用ELISA法测定细胞TNF-α,半定量West- ern blot测定HMGB1的水平。RIP2 siRNA质粒转染小鼠后,予LPS刺激小鼠,观察小鼠死亡率,用Western blot方法检测肝组织RIP2和HMGB1的表达,ELISA法测定血清TNF-α的水平。结果:RIP2 siRNAⅢ号质粒可阻断RIP2的mRNA和蛋白表达。LPS刺激后,阻断RIP2的细胞产生TNF-α、HMGB1减少;体内转染后,阻断RIP2的小鼠生存率较其它组高,肝组织中HMGB1的表达较其他组减少,血清TNF-α水平较其它组低。结论:RIP2 siRNAⅢ号质粒可阻断RIP2的表达,从而减少TNF-α、HMGB1等炎症细胞因子的产生,降低小鼠内毒素血症的死亡率。     

酵母双杂交系统筛选和验证与RARα-V相互作用的蛋白

目的 利用酵母双杂交技术筛选与RARα-V相互作用的蛋白,研究RARα-V的作用靶点及其生物学功能.方法 构建诱饵质粒pGBKT7-RARα-V,利用酵母双杂交技术从K562细胞cDNA文库中筛选与RARα-V相互作用蛋白的基因序列,并通过酵母回转试验与GST pull-down技术进行验证.结果 成功构建诱饵质粒,且没有毒性、渗漏和自激活现象;利用酵母双杂交技术筛选到16个能与RARα-V相互作用的蛋白质;经酵母回转试验得到8个阳性克隆;并经GST pull-down技术在体外验证了RARα-V与JTV-1蛋白的相互作用.结论 在细胞内RARα-V与多种蛋白有相互作用,白血病的发病机制可能与这些蛋白相互作用所致的生物学功能改变有关.     

肺曲菌病患者外周血中NLRP3-RIP2-NF-?资B信号通路的 表达及意义

目的：研究NLRP3-RIP2-NF-?资B信号通路在肺曲菌病患者外周血中的表达水平,及其介导炎症反应的作用机制。方法：选取2016年5月~2019年10月收治的肺曲菌病患者62例为研究对象,分为侵袭性肺曲霉菌病组（IPA组）24例和非侵袭性肺曲霉菌病组（NIPA组）38例,并选取同期20例非真菌感染者作为对照组。采用RT-PCR法检测三组NLRP3、RIP2、NF-?资B mRNA表达水平;Western Blot法检测NLRP3、RIP2、NF-?资B蛋白水平;ELISA法检测炎症介质hs-CRP、IL-6水平,对三组上述指标进行比较,并采用Spearman相关性分析分析NLRP3 mRNA与RIP2、NF-?资B、IL-6、hs-CRP之间的相关性。结果：（1）IPA组、NIPA组NLRP3、RIP2、NF-?资B mRNA表达水平均高于对照组,且IPA组高于NIPA组（P＜0.05）。（2）IPA组、NIPA组NLRP3、RIP2、NF-?资B蛋白表达水平均高于对照组,且IPA组高于NIPA组（P＜0.05）。（3）IPA组、NIPA组IL-6、hs-CRP水平均高于对照组,且IPA组高于NIPA组（P＜0.05）。（4）相关性分析发现外周血中NLRP3 mRNA水平与下游基因RIP2、NF-?资B mRNA水平呈正相关（相关指数r=0.676,P＜0.001;r=0.513,P＜0.001）;与炎症介质IL-6、hs-CRP及NLRP3水平呈正相关（相关指数r=0.467,P＜0.001;r=0.621,P＜0.001）。结论：肺曲菌病患者外周血中NLRP3、RIP2、NF-?资B mRNA和蛋白表达均升高,NLRP3可能通过RIP2依赖的NF-?资B信号通道介导肺曲菌病患者致炎过程。     

NOD相关蛋白在烟曲霉感染小鼠肺组织中的表达

目的:研究核苷酸结合寡聚化结构域(nucleotide-binding oligomerization domain,NOD)相关蛋白在烟曲霉(Af)感染小鼠肺组织中的表达。方法:通过经鼻气道滴人Af孢子的方法建立小鼠感染Af的模型,对照组小鼠经鼻气道内滴人等量的生理盐水。分别在不同时间点观察肺部Af负荷及病理学改变,采用RT-PCR方法检测各时间点的NOD1、NOD2及受体相互作用蛋白2(receptor- interacting protein 2,RIP2)mRNA在肺组织中的表达。结果:1)感染组小鼠肺部Af负荷24h达最高峰,48h迅速下降。2)两组小鼠均表现为支气管周围炎症为主的病理改变,感染组小鼠24 h炎症细胞浸润最显著,48 h炎症细胞浸润减轻。对照组小鼠病理损害明显轻于感染组。3)NOD1、NOD2、RIP2 mRNA表达在接种Af后12 h、24 h、48 h显著升高(P<0．05)。对照组各时间点NOD1、 NOD2、RIP2 mRNA表达无显著差异。结论:NOD蛋白可能为Af的胞浆内模式识别受体(pattern。recognition receptors,PRRs),在抗 Af肺部感染的免疫反应中发挥一定作用。     

肺曲菌病患者外周血中NLRP3-RIP2-NF-κB信号通路的表达及意义

目的:研究NLRP3-RIP2-NF-κB信号通路在肺曲菌病患者外周血中的表达水平,及其介导炎症反应的作用机制。方法:选取2016年5月～2019年10月收治的肺曲菌病患者62例为研究对象,分为侵袭性肺曲霉菌病组(IPA组)24例和非侵袭性肺曲霉菌病组(NIPA组)38例,并选取同期20例非真菌感染者作为对照组。采用RT-PCR法检测三组NLRP3、RIP2、NF-KB mRNA表达水平;Western Blot法检测NLRP3、RIP2、NF-KB蛋白水平;ELISA法检测炎症介质hs-CRP、IL-6水平,对三组上述指标进行比较,并采用Spearman相关性分析分析NLRP3 mRNA与RIP2、NF-κB、IL-6、hs-CRP之间的相关性。结果:(1)IPA组、NIPA组NLRP3、RIP2、NF-κB mRNA表达水平均高于对照组,且IPA组高于NIPA组(P0.05)。(2)IPA组、NIPA组NLRP3、RIP2、NF-κB蛋白表达水平均高于对照组,且IPA组高于NIPA组(P0.05)。(3)IPA组、NIPA组IL-6、hs-CRP水平均高于对照组,且IPA组高于NIPA组(P0.05)。(4)相关性分析发现外周血中NLRP3 mRNA水平与下游基因RIP2、NF-κB mRNA水平呈正相关(相关指数r=0.676,P0.001;r=0.513,P0.001);与炎症介质IL-6、hs-CRP及NLRP3水平呈正相关(相关指数r=0.467,P0.001;r=0.621,P0.001)。结论:肺曲菌病患者外周血中NLRP3、RIP2、NF-κB mRNA和蛋白表达均升高,NLRP3可能通过RIP2依赖的NF-κB信号通道介导肺曲菌病患者致炎过程。     

Hic-5/ARA55蛋白的研究进展

Hic-5/ARA55基因最早是作为转化生长因子β1诱导基因(TGF-β1)和过氧化氢诱导的克隆从小鼠成骨细胞MC3T3中分离出来,属于LIM结构域蛋白家族,与桩蛋白具有高度同源性.Hic-5/ARA55蛋白主要位于细胞黏着斑,可以穿梭于细胞质和细胞核的蛋白质,在黏着斑作为调节分子与多种蛋白质相互作用,在细胞核作为一个辅助调节因子,选择性与核受体和靶基因启动子相互作用.Hic-5/ARA55在多种组织中表达,是细胞骨架蛋白的关键调节蛋白之一和整合素信号通路中关键分子.     

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白与2型糖尿病动脉硬化的关系

SPARC(secreted protein,acidic and rich in cysteine)即富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白,由于它最先发现是骨基质中的一种主要的非胶质蛋白,因此又被称作骨连接素(Osteonectin)、基底膜40蛋白(BM40)。SPARC是由多种细胞分泌的小分子钙结合糖蛋白,通过与胞外基质蛋白相互作用而表现出多种生物活性,与胚胎发育、血管形成、组织重塑及修复、细胞更新等均密切相关[1]。近年来临     

内皮蛋白C受体及其病理与临床意义

内皮蛋白C受体(EPCR)是新近发现的相对分子质量为46kDa的型跨膜蛋白,与抗凝、炎症等关系密切。它在多种细胞上均有表达,可使蛋白C活化效率提高5～20倍,EPCR介导活化蛋白C发挥多种抗炎效应。深入研究EPCR的表达调控及相互作用的蛋白,对认识抗凝-炎症间内在本质的联系具有重要意义,为临床应用活化C治疗多种疾病提供理论根据。     

硫酸软骨素蛋白多糖与中枢神经系统损伤后修复

中枢神经系统细胞基质中存在着多种对神经元分化、再生过程既有促进作用,又有抑制作用的蛋白多糖。其中具有神经特异性的有神经黏蛋白和磷酸黏蛋白。这两种蛋白多糖分布于中枢神经系统的不同部位,其mRNA的表达受发育过程的调节。神经黏蛋白和磷酸黏蛋白以蛋白－蛋白或蛋白－多糖的方式与多种细胞表面或细胞基质分子相互作用,影响细胞粘附、调节轴突生长。在中枢神经系统损伤后的修复过程中这两种蛋白多糖也起着重要作用。     

2-DG增强TRAIL诱导白血病细胞HL-60凋亡的作用

本研究旨在探讨2-脱氧葡萄糖(2-DG)增强HL-60细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性的作用及其可能机制。采用MTT法检测不同浓度2-DG、TRAIL对HL-60细胞增殖的影响。选择低于半数抑制浓度(IC50)的10 mmol/L的2-DG和100 ng/ml的TRAIL单独或联合处理细胞,用PI单染流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测RIP1、GRP78、PARP蛋白的表达,试剂盒检测caspase-3的活性变化。结果表明,2-DG(10mmol/L)与TRAIL(100 ng/ml)联合作用于HL-60细胞48 h的凋亡率为(45.1±4.3)%,较单用2-DG、TRAIL的凋亡率明显提高(P<0.01),同时二者联合应用能增强GRP78蛋白的表达及caspase-3的活性,下调RIP1蛋白的表达。结论:2-DG能增强TRAIL诱导HL-60细胞的凋亡的敏感性,其机制可能是通过引起过度的内质网应激反应、下调RIP1蛋白的表达以及增加caspase-3的活性。     

硫酸软骨素蛋白多糖与中枢神经系统损伤后修复

中枢神经系统细胞基质中存在着多种对神经元分化,再生过程既有促进作用,又有抑制作用的蛋白多糖。其中具有神经特异性的有神经黏蛋白和磷酸黏蛋白,这两种蛋白多糖分布于中枢神经系统的不同部位,其mRNA的表达受发育过程的调节,神经黏蛋白和磷酸黏蛋白以蛋白-蛋白－多糖的方式与多种细胞表面或细胞基质分子相互作用,影响细胞粘附,调节轴突生长,在中枢神经系统损伤后的修复过程中这两种蛋白多糖也起着重要作用。     

特异性小干扰RNA靶向沉默RIP1基因表达对人大肠癌Lovo细胞生物学行为的影响

目的探讨RNA干扰沉默RIP1基因表达对人大肠癌Lovo细胞生物学行为的影响。方法将人大肠癌【刖。细胞常规分为空白对照、阴性对照组和实验转染组。体外化学合成RIP1基因序列特异性小干扰RNA（siRNA）,Hegene介导转染人大肠癌细胞株Lovo细胞;采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测特异性siRNA对RIP1基因在mRNA水平上沉默效果;转染后采用噻唑蓝（MrI’r）比色法检测siRNA对细胞增殖的影响;流式细胞周期法检测siRNA对细胞周期的影响;Transwell试验体外检测细胞迁移和侵袭能力。结果成功转染RIP1siRNA的大肠癌Lovo细胞,RT-PCR显示RIP1mRNA和蛋白表达在相应的癌细胞中明显下降;与阴性对照组比较,细胞增殖明显抑制（P〈0．05）;GO～G1期细胞[（54．68±1．54）％]明显多于阴性对照组[（48．48±1．96）％]和空白对照组[（43．92±1．68）％];RNA干扰明显抑制Lovo细胞迁移力和侵袭力（21±2．731掷．43±2．064）。结论RIP1siRNA可有效抑制大肠癌Lovo细胞RIP1基因的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖。促进细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭,RIP1siRNA能有效调控Lovo细胞恶性生物学行为。     

RIP2在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及预后意义

目的:研究RIP2在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达及其预后意义。方法:通过免疫组织化学染色检测RIP2在GCB型和non-GCB型DLBCL中的表达,同时检测BCL-2和C-MYC的表达情况,结合相关临床病理资料分析RIP2在DLBCL发生发展过程中的作用。结果:RIP2表达与IPI评分为中高危组、Am Arbor分期为Ⅲ+Ⅳ期以及结内病变相关,其差异有统计学意义(P0.05)。单因素生存分析提示,GCB型DLBCL累计生存率高于non-GCB型(P0.05)。RIP2+组DLBCL累计生存率低于RIP2-组(P0.05)。RIP2+DLBCL患者接受R-CHOP治疗者累计生存率高于接受CHOP治疗者(P0.01)。RIP2在DLBCL细胞株中表达量高于正常人外周血单个核细胞(P0.01),且在不同亚型中有差异性表达(P0.01)。结论:RIP2的表达可能与DLBCL不良预后以及特殊类型相关。     

Smad4蛋白与肿瘤发生发展关系的研究进展

国内外大量研究发现Smad4蛋白对肿瘤的发生发展有着重要作用。其参与细胞信号通路传导,并起中心分子作用;Smad4蛋白还与多种细胞因子相互作用,一起参与肿瘤的发生发展。对Smad4蛋白的研究有助于在肿瘤的治疗方面寻找新的突破口。现对Smad4蛋白在肿瘤的发生发展中的作用机制作一简要综述。     

Homer蛋白在钙通道调控中作用研究进展

Homer蛋白是一种支架蛋白,包括Homer1、Homer2和Homer3 3种受体蛋白及其剪接体。Homer蛋白参与调节一系列Ca~(2+)调控蛋白,包括代谢性谷氨酸受体、三磷酸肌醇受体、瞬时受体电位通道、兰尼碱受体、基质相互作用分子1及Orial。Homer蛋白调控细胞内多种钙通道的开关。Ca~(2+)作为细胞内主要信使,参与多种细胞和组织生理活动,包括细胞吞噬、凋亡及基因调节,而细胞内Ca~(2+)稳态的维持需多种钙通道参与,阐明Homer对细胞内钙通道调控的作用有一定意义。本文就Homer蛋白在钙通道调控中作用的研究进展作一综述。     

中枢神经系统损伤疾病的坏死性凋亡机制研究进展

坏死性凋亡是新近发现的一种程序性坏死途径,在死亡受体信号激活后由RIP1和RIP3调控,并可被化合物necrostatin-1特异性抑制。目前研究证实坏死性凋亡涉及多种中枢神经系统损伤疾病的发生机制,并且通过干预坏死性凋亡信号通路,对诸多因素引起的中枢神经系统损伤具有一定的保护作用。深入研究坏死性凋亡的分子调控机制,有望为中枢神经系统损伤疾病治疗提供更多的潜在新靶点。     

CD47在恶性血液病中的作用

CD47分子是一种广泛表达于多种细胞表面的跨膜糖蛋白,其与整合素配体、信号调节蛋白α（SIRP-α）、凝血酶敏感蛋白（TSP-1）相结合,在炎症反应、免疫应答、肿瘤免疫等方面发挥重要的作用。近年来研究发现,CD47与巨噬细胞表面受体SIRP-α相互作用,传递抑制性调节信号,参与多种恶性血液病的发病,且在临床治疗上具有一定的指导作用。本文就CD47的结构及免疫调节功能、CD47在肿瘤治疗中的机制、CD47与恶性血液病以及CD47与造血干细胞移植进行综述。