侵袭性烟曲霉菌病大鼠模型的建立及分析

目的:建立侵袭性肺烟曲霉菌病大鼠模型,并对模型研究价值进行相关分析,为侵袭性肺曲霉菌病的实验研究提供参考.方法:腹腔注射环磷酰胺,动态观察大鼠血常规变化,建立免疫抑制大鼠模型.自制气管插管接种烟曲霉菌孢子悬液引起侵袭性肺烟曲霉菌病,分别于接种后1、3、5、7 d处死大鼠后取肺组织进行病理切片观察及组织匀浆培养.结果:分次不同剂量环磷酰胺腹腔注射后大鼠表现为精神萎靡、体重减轻,血常规示白细胞及分类细胞数量明显减少,中性粒细胞、淋巴细胞不能分类.病理切片可见免疫抑制大鼠感染烟曲霉菌后随着时间延长肺组织病变逐渐加重.肺组织出血、纤维素渗出;烟曲霉菌孢子聚集并长出菌丝,引起肺泡结构破坏、弥漫性肺水肿.结论:成功建立了免疫抑制大鼠侵袭性肺烟曲霉菌病动物模型,为研究免疫抑制宿主侵袭性肺曲霉菌病的发病机制、病理生理、药物疗效提供参照.     

烟曲霉致病性与免疫系统相互作用的研究进展

由腐生性丝状真菌烟曲霉(Aspergillus fumigatus)引起的侵袭性曲霉病(Invasive Aspergillosis,IA),是免疫受损患者致死性并发症之一,更是临床诊疗的难点。通常侵袭性曲霉病是由吸入真菌孢子引发,健康个体可及时清除吸入的孢子,而免疫受损人群吸入的孢子可在体内萌发、繁殖,导致肺曲霉病。一旦孢子进入血液循环,则可造成全身多系统感染。本文总结了烟曲霉的致病力与机体免疫系统各组成间相互作用的研究进展。烟曲霉的致病力受多因素调节,如:烟曲霉的耐热性、细胞壁成分、信号转导途径等。曲霉菌感染引起的机体免疫反应可因菌株变异产生不同致病力及宿主的不同免疫状态而出现差异,表现出高低不等的感染性。研究烟曲霉与免疫系统的作用机制,可为研发烟曲霉感染的诊断治疗方法提供新思路。     

侵袭性肺曲霉菌病小鼠动物模型建立的实验研究

目的建立免疫抑制小鼠侵袭性肺曲霉菌病(IPA)动物模型,为阐明IPA的发病机制和临床治疗提供基础研究。方法用环磷酰胺造成小鼠免疫抑制,双侧鼻孔滴入烟曲霉菌孢子,分别于24 h、48 h、72 h、96 h不同时间点处死小鼠,通过肺组织病理、肺组织真菌培养确定侵袭性肺曲霉菌病模型是否构建成功。结果 IPA模型组的组织培养可见烟曲霉菌,病理切片模型组小鼠72 h时可见较严重的出血和充血;96 h时肺内有菌丝,肺泡间隔增宽,组织坏死。正常状态感染烟曲霉小鼠72 h可见充血,肺泡弹性纤维被破坏;96 h仅表现为炎症和出血,未见菌丝。结论成功建立了小鼠IPA动物模型,为研究侵袭性曲霉菌病的发病机制、早期诊断和防治奠定了基础。     

荧光定量PCR法检测烟曲霉DNA

目的 建立检测烟曲霉DNA的荧光定量PCR方法,评价其在小鼠侵袭性烟曲霉肺部感染诊断中的意义.方法 根据烟曲霉ITSI区域基因组序列,设计合成引物和荧光标记探针,优化荧光定量PCR条件,从特异性、扩增效率、灵敏度及重复性方面进行评价.建立小鼠烟曲霉肺部感染模型,用荧光定量PCR对36只实验小鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液(...     

检测抗烟曲霉分泌蛋白抗体的ELISA法及其诊断价值

目的建立检测人血清中抗烟曲霉特异性抗体的ELISA法,评估该法在侵袭性烟曲霉病(IA)诊断中的价值。方法用沙氏液体培养基震荡培养烟曲霉,TCA/丙酮沉淀法分离菌体蛋白和培养上清中的分泌蛋白。用烟曲霉播散感染的家兔血清及确诊IA患者血清,分别与菌体蛋白和分泌蛋白进行免疫印迹分析,选择反应强的分泌蛋白作为包被抗原,建立测定抗烟曲霉特异抗体的ELISA,并对方法的精密度和特异性进行考察、确定cut off值。对实验动物模型血清以及5例确诊、24例临床诊断为IA的患者血清样本进行测定,并与血清半乳甘露聚糖(GM)测定结果进行比较。结果免疫印迹结果显示培养获得的烟曲霉分泌蛋白与感染动物和病人血清均呈现强反应,以其作为包被抗原建立的ELISA法精密度良好,批内CV=12.0%,批间CV=8.1%;阻断试验证实此法对烟曲霉抗体具特异性。依据200份健康人血清测定结果,取吸光度(A)值1.03作为cut-off值。健康人抗体阳性率为2.0%(4/200),IA患者阳性率41.4%(12/29),二者差异显著(P<0.01)。2例临床诊断病人血清GM试验阴性,但抗体阳性,占8.3%(2/24)。实验感染的家兔均在感染后1周内测...     

8种深部真菌DNA微阵列鉴定方法的建立及应用

目的 建立一种能快速鉴定临床常见8种深部真菌的DNA微阵列.方法 选取临床常见的8种真菌,包括白色假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、土曲霉、黄曲霉、烟曲霉和米根霉.利用通用引物扩增真菌ITS区,生物素标记目的基因.针对扩增靶序列的可变区段设计探针,以尼龙膜为载体,建立DNA微阵列.采用所建立的DNA微阵列对45株临床真菌分离株进行检测.结果 应用DNA微阵列技术成功地对8种临床常见真菌菌种进行了检测,检测时间可缩短至8 h.白色假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、米根霉、黄曲霉以及土曲霉的探针的检测特异度高,无非特异性反应;烟曲霉的检测探针与黄曲霉之间有微弱非特异性反应,但是不影响鉴定结果.45例临床真菌分离株的DNA微阵列鉴定结果与临床检出结果完全一致.结论 该研究建立的DNA微阵列技术可在8 h内快速、准确地检测临床常见深部感染真菌菌种,具备应用于临床辅助诊断的前景.     

改进的多重PCR技术鉴定白色念珠菌、新生隐球菌及烟曲霉的实验研究

[目的]建立一种快速而简便的鉴定白色念珠菌、新生隐球菌及烟曲霉的分子生物学方法。[方法]应用通用引物ITS1与ITS4，PCR扩增真菌的内转录间隔区（包含5．8SrDNA），然后将白色念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉的单条种特异性异物与引物ITS1结合，对通用引物的扩增产物进行多重PCR扩增，达到鉴定上述菌株的目的。[结果]实验所采用的所有致病真菌，经通用引物的PCR扩增均能扩增出特异性的条带，而非真菌菌株扩增为阴性；白色念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉的3种种特异性引物与ITS1结合进行的多重PCR扩增，只对目的菌株进行了有效扩增，其他菌株扩增为阴性。应用此方法对临床分离的菌株，白色念珠菌，新生隐球菌，烟曲霉进行鉴定，也得到特异性扩增条带。[结论]改进的多重PCR技术，更加经济，简单，快速，为致病真菌菌种的鉴定提供了有效手段。     

藻酸盐对家兔肺组织的免疫损伤作用

目的：建立藻酸盐免疫性肺炎动物模型，研究藻酸盐对肺组织的致病作用；以探讨细菌生物被膜对呼吸系统的致病机制。方法：本实验用乙醇沉淀法提取细菌藻酸盐；A组用生理盐水作对照，B组、C组分别用海藻藻酸盐、细菌藻酸盐免疫家兔。比较三组家兔的体温、血象及血循环免疫复合物(CIC)水平；比较支气管肺泡灌洗液(BALF)细菌计数；观察肺组织的病理改变。结果：两种藻酸盐免疫组家兔的血CIC水平皆较处理前及生理盐水对照组显著增高，BALF培养无细菌生长。经两种藻酸盐免疫后皆出现细支气管旁淋巴细胞浸润、淋巴小结形成及细支气管管腔狭窄等病理改变。结论：海藻藻酸盐和细菌藻酸盐都能导致家兔肺组织非感染性免疫损伤，其主要病理改变为细支气管旁淋巴细胞浸润及淋巴小结形成；这种免疫损伤是呼吸道生物被膜病的致病机制之一。     

阿萨希丝孢酵母菌导致的泌尿系统感染临床分析

目的阿萨希丝孢酵母菌是能在免疫宿主引发白色毛结节病和甲真菌病的一类酵母样真菌,能引起局部或深部侵袭性感染,泌尿系统感染较为罕见。分析致病机制及药敏结果对泌尿系统感染治疗的临床指导意义。方法该院2014年共在尿液标本中培养出2株阿萨希丝孢酵母菌,通过对病例和药敏试验的回顾性调查,分析该菌引起感染的危险因素和抗真菌治疗分析的临床意义。结果 2例阿萨希丝孢酵母菌鉴定及药敏试验分析后治疗效果明显,尿液培养转阴。结论阿萨希丝孢酵母菌致病原理的了解及药敏试验的分析应用对诊断和治疗有一定的临床价值。     

侵袭性真菌感染的正确诊断和合理治疗是当前值得重视的问题

侵袭性真菌感染(invasive fungal infection, IFI)属深部真菌病(deep mycoses),是真菌入侵人体导致血流感染、各脏器感染或全身播散的严重感染。主要由念珠菌属、曲霉属、隐球菌属等机会致病真菌(或称条件致病真菌)引起,也可由组织胞浆菌、皮炎芽生菌、孢子丝菌等地方流行性致病真菌所致。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护理干预对提高中风患者生活质量的效果观察

目的探讨提高中风患者生活质量的护理方法。方法将50例中风患者随机分为对照组23例和实验组27例,对照组给予针灸内科常规护理,实验组在此基础上给予心理护理和康复训练。结果两组患者治疗护理后日常生活活动(ADL)能力和贝克抑郁量表(BDI)评分均有好转,但实验组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论实施针对性心理护理和康复训练可明显提高中风患者的治疗效果。     

胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据

目的评价胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据,以及纳入系统评价的临床随机对照试验（RCT）的方法学质量。方法检索Cochrane Library数据库（2009年第4期）中有关胰腺癌治疗的系统评价,并运用RewMan5.0.21对所纳入研究的偏倚进行评估。结果共检索到胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的系统评价、放化疗治疗不能手术的进展期胰腺癌的系统评价共2篇系统评价,共纳入79个RCT。依照Cochrane协作网推荐的质量评价方法,对所纳入RCT的偏倚进行评估,表明均存在不同程度的偏倚,方法学质量普遍较低。结论 Cochrane系统评价是公认的最高质量的研究证据,但目前缺少足够强度的证据来支持胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的疗效。其他治疗手段的疗效如胰腺癌围手术期的营养支持治疗等还需要通过进一步的完成系统评价来评估。建议推行临床试验透明化,实施临床试验注册制度以及按照CONSORT声明严格规范RCT的报告,以便于总结胰腺癌治疗的临床证据。