活络健骨胶对大鼠佐剂性关节炎的抗炎免疫效应

目的：观察活络健骨胶囊对大鼠佐剂性关节炎的抗炎免疫作用。 方法：实验于2005—12—25／2006-01-23在湖南环境生物学院医学部药理实验室完成。①将48只wistar大鼠采用随机数字法分成6组，正常对照组和模型组：均给予等量蒸馏水；阳性对照组：给予雷公藤多甙7mg／kg；活络健骨胶囊高、中、低剂量组：剂量分别为15，10，5g／kg。活络健骨胶囊为老中医祖传经验方（由制川乌、赤芍、桂枝10多味中草药组成，原料药购于衡阳药材公司，鉴定为合格品，实验药液由本实验制备）。造模前3d开始给药，造模后连续给药25d。给药途径为灌胃，给药体积为等容15mL/kg。②建立大鼠后右足佐剂性关节炎模型。③造模后第2，5，10，15，20，25d分别测各鼠右后足容积，计算各组大鼠右后足在不同时间的肿胀度。④每周观察大鼠体质量增长率及造模后26d计算脾、肾上腺指数。增长率=（给药后体质量-给药前体质量）／给药前体质量&;#215;100％；器官指数=器官湿重／大鼠体质量&;#215;100。⑤观察大鼠佐剂性关节炎渗出液中白细胞介素2，白细胞介素6及前列腺素E2含量。 结果：48只大鼠全部进入分析。①活络健骨胶囊对大鼠体质量及脾、肾上腺素的影响：活络健骨胶囊高、中剂量组能抑制造模鼠体质量的减轻（P〈0．01）；对肾上腺指数有促进作用（P〈0．05）。②活络健骨胶囊对大鼠佐剂性关节炎足跖肿胀的影响：活络健骨胶囊各剂量组对造模足跖有抑制作用，而中、高剂量组的抑制作用更显著（P〈0．01）。③活络健骨胶囊对佐剂性关节炎渗出液中白细胞介素2，白细胞介素6及前列腺素E2含量的影响：活络健骨胶囊各剂量组对大鼠佐剂性关节炎中白细胞介素6及前列腺素E2的生成均有显著抑制作用（P〈0．01），而对白细胞介素2的含量无明显影响。 结论：活络健骨胶囊具有良好的抗炎免疫效果，其作用机制之一可能是与抑制单核吞噬细胞的激活、分化及介导有关。     

不同剂量臭牡丹根对大鼠佐剂性关节炎不同时点的干预效应与氢化可的松相比较

目的观察弗氏完全佐剂所致的大鼠关节肿胀度,及给予不同剂量臭牡丹根提取液后不同时点佐剂性关节炎大鼠足爪肿胀度情况,并与金标准氢化可的松的干预效果比较.方法实验于2004-03/06在赣南医学院药理实验室完成.选择雄性Wistar大鼠36只,体质量(170±20)g,随机分为4组,每组9只.致炎前3 d开始腹腔注射给药,臭牡丹高、低剂量组分别给予臭牡丹提取液10,5 g/kg,氢化可的松组给予氢化可的松12 mg/kg,模型组给予等量的生理盐水,1次/d,连续给药24 d.于每只大鼠右后足跖皮内注射0.1 mL弗氏完全佐剂致炎,用排水法测定大鼠致炎后3,5,7,24,72 h右后足肿胀度及第9,11,15,20,23天非致炎足的肿胀度,分别观察药物对佐剂性关节炎大鼠原发及继发病变的影响.结果36只实验动物全部进入结果分析.①原发性足肿胀程度臭牡丹低剂量组致炎5 h后较模型组减轻(t=2.436～2.583,P＜0.05).臭牡丹高剂量组和氢化可的松组大鼠在致炎后3～72 h均较模型组显著减轻(P＜0.01).②大鼠佐剂性关节炎继发性关节炎足肿胀程度臭牡丹低、高剂量组与氢化可的松组大鼠在致炎后9～23 d与模型组比较显著被抑制(P＜0.01).结论臭牡丹根与氢化可的松对大鼠佐剂性关节炎原发性足肿胀均有明显的抑制作用,说明臭牡丹根有确切的抗炎作用.实验采用致炎前3 d给药方式,结果提示对继发性足肿胀程度亦有抑制作用,说明臭牡丹根具有对抗迟发性超敏反应和细胞免疫的抑制作用.     

佐剂性关节炎大鼠细胞因子和淋巴细胞亚群变化与可铁宁的影响

目的:观察吸烟者体内尼古丁代替主要产物可铁宁在佐剂性关节炎动物模型抗炎和调节免疫方面的作用。方法:实验于2005-10/2006-09在南方医科大学南方医院检验科及实验动物中心完成。实验动物:SD大鼠50只。实验分组和给药:随机选取SD大鼠40只注射完全弗氏佐剂,致炎建立佐剂性关节炎模型,剩余的10只SD大鼠为正常组。将40只佐剂性关节炎大鼠随机分为炎症组10只,可铁宁低、中、高剂量组各10只,可铁宁各组于佐剂注射后1周开始灌胃给药,分别给0.5,1.5,4.5g/kg体质量剂量药物,连续7d。实验评估:致炎后28d开始进行运用ELISA及流式细胞术,检测用药后对白细胞介素1β、白细胞介素2,T细胞增殖等指标(CD4 ,CD8 ,CD4 /CD8 )的影响。结果:50只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠血清中白细胞介素1β、白细胞介素2含量:与炎症组相比,可铁宁高、中、低剂量各组白细胞介素1β含量明显下降[(101.4±11.24),(53.40±8.23),(60.34±5.97),(72.31±8.06)ng/L,P<0.05],白细胞介素2含量明显升高[(121.3±21.2),(195.9±51.6),(174.3±40.3),(169.7±53.2)ng/L,P<0.05],且作用有一定的剂量依赖性。②各组大鼠淋巴细胞亚群CD4 ,CD8 ,CD4 /CD8 变化:造模第28天,与正常组相比,炎症组的CD4 增加,CD8 明显降低(P<0.05),CD4 与CD8 的比值显著增加(P<0.05);与炎症组相比较,可铁宁高剂量组的CD4 显著降低(P<0.05);可铁宁各组的CD8 明显增加(P<0.05),CD4 与CD8 比值显著下降,呈剂量依赖性。结论:可铁宁可调节大鼠血清中异常的白细胞介素1及白细胞介素2含量,可铁宁在试验动物水平有抗炎和免疫调节的作用。     

不同剂量臭牡丹根对大鼠佐剂性关节炎不同时点的干预效应：与氢化可的松相比较

目的：观察弗氏完全佐剂所致的大鼠关节肿胀度。及给予不同剂量臭牡丹根提取液后不同时点佐剂性关节炎大鼠足爪肿胀度情况，并与金标准氢化可的松的干预效果比较。方法：实验于2004—03／06在赣南医学院药理实验室完成。选择雄性Wistar大鼠36只，体质量(170&;#177;20)g，随机分为4组，每组9只。致炎前3d开始腹腔注射给药，臭牡丹高、低剂量组分别给予臭牡丹提取液10，5g／kg，氢化可的松组给予氢化可的松12mg／kg，模型组给予等量的生理盐水，1次／d，连续给药24d。于每只大鼠右后足跖皮内注射0．1mL弗氏完全佐剂致炎，用排水法测定大鼠致炎后3，5，7，24，72h右后足肿胀度及第9，11，15，20，23天非致炎足的肿胀度，分别观察药物对佐剂性关节炎大鼠原发及继发病变的影响。结果：36只实验动物全部进入结果分析。①原发性足肿胀程度：臭牡丹低剂量组致炎5h后较模型组减轻(t=2．436．2．583．P&;lt;0．05)。臭牡丹高剂量组和氢化可的松组大鼠在致炎后3．72h均较模型组显著减轻(P&;lt;0．01)。②大鼠佐剂性关节炎继发性关节炎足肿胀程度：臭牡丹低、高剂量组与氢化可的松组大鼠在致炎后9．23d与模型组比较显著被抑制(P&;lt;0．01)。结论：臭牡丹根与氢化可的松对大鼠佐剂性关节炎原发性足肿胀均有明显的抑制作用，说明臭牡丹根有确切的抗炎作用。实验采用致炎前3d给药方式，结果提示对继发性足肿胀程度亦有抑制作用，说明臭牡丹根具有对抗迟发性超敏反应和细胞免疫的抑制作用。     

黄蜀葵花总黄酮对大鼠佐剂性关节炎的防治作用

目的:观察从黄蜀葵花中提取的有效成分—黄蜀葵花总黄酮对大鼠佐剂性关节炎的防治作用,并分析其作用途径。方法:实验于2004-03/07在安徽医科大学基础医学院药理教研室完成。选择SD雄性大鼠60只,按随机数字表法分为6组,即正常对照组、佐剂性关节炎模型组、黄蜀葵花总黄酮25,50,100mg/kg组(黄蜀葵花总黄酮由安徽省医学研究所提供,为棕黄色粉末)和雷公藤多苷40mg/kg组,每组10只。除正常对照组外,各组大鼠均于左后足趾皮内注射0.1mL弗氏完全佐剂诱发大鼠佐剂性关节炎模型,足容积法测原发侧及继发侧足肿胀度(致炎后容积-致炎前容积),并进行多发性关节炎评分(5级评分:0分无红肿;4分包括踝关节在内的全部足爪红肿。根据未注射佐剂的其余3个肢体的病变程度累计积分,最高为12分)。应用苏木精-伊红染色检测非致炎侧踝关节的病理改变;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应以及大鼠腹腔巨噬细胞产生白细胞介素1水平,放射免疫法测定腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子α和前列腺素E2含量,硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮含量。结果:60只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠原发性足肿胀度的比较:佐剂性关节炎模型组大鼠致炎后不同时段足肿胀度均显著高于正常对照组(P<0.01),黄蜀葵花总黄酮25,50,100mg/kg组大鼠的在不同时段的原发性足肿胀度均显著低于模型组(P<0.05～0.01)。②各组大鼠继发性足肿胀度及多发性关节炎指数比较:黄蜀葵花总黄酮25,50,100mg/kg组大鼠的继发性足肿胀度和多发性关节炎评分均显著低于佐剂性关节炎模型组(P<0.05～0.01),以黄蜀葵花总黄酮100mg/kg组作用最为显著。③各组大鼠非致炎侧踝关节病理改变比较:不同剂量的黄蜀葵花总黄酮对佐剂性关节炎大鼠关节组织的上述病理改变有不同程度的改善作用,黄蜀葵花总黄酮100mg/kg组作用最明显。④各组大鼠的脾细胞增殖情况比较:黄蜀葵花总黄酮50,100mg/kg组可明显促进佐剂性关节炎大鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应(P<0.05)。⑤各组大鼠腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素1、前列腺素E2、肿瘤坏死因子α和血清一氧化氮含量比较:佐剂性关节炎模型组大鼠腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素1、前列腺素E2、肿瘤坏死因子α及血清一氧化氮含量均显著高于正常对照组(P<0.01);黄蜀葵花总黄酮各剂量组均显著低于模型组(P<0.05～0.01)。结论:黄蜀葵花总黄酮各剂量组能减轻佐剂性关节炎大鼠的原发性、继发性关节肿胀和多发性关节炎程度,以黄蜀葵花总黄酮100mg/kg组作用最为显著,其作用途径可能与其调节机体的异常免疫有关。     

佐剂性关节炎大鼠细胞因子和皮质醇水平与茜草总蒽醌的干预作用

目的:观察茜草总蒽醌对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用及其与细胞因子和皮质醇关系,并与地塞米松进行阳性对照。方法:实验于2001-10-01/12-15在潍坊医学院药理实验室完成。①取成年SD大鼠35只,随机分为5组(n=7):对照组,模型组,地塞米松组,总蒽醌60,120mg/(kg·d)组。后4组大鼠于右足垫皮内注射弗氏完全佐剂0.05mL制备佐剂性关节炎大鼠模型。②造模后第17天开始,地塞米松组腹腔注射地塞米松2.5mg/(kg·d),总蒽醌60,120mg/(kg·d)组分别灌胃茜草总蒽醌60,120mg/(kg·d),对照组和模型组灌胃等容积的生理盐水,连用10d。③观察大鼠给药前后左足爪的肿胀度和全身病变评分,并用放射免疫法测定给药后血清中白细胞介素1,2,6及肿瘤坏死因子和皮质醇的水平。结果:35只大鼠进入结果分析。①地塞米松组,总蒽醌60,120mg/(kg·d)组大鼠给药后左足爪的肿胀度、全身病变评分均低于模型组(P<0.01),地塞米松组效果优于其他两组(P<0.01)。②地塞米松组,总蒽醌60,120mg/(kg·d)组大鼠血清中白细胞介素1,2,6和肿瘤坏死因子水平均低于模型组(P<0.01),地塞米松组作用最明显,总蒽醌60mg/(kg·d)组作用最弱。各组皮质醇水平比较无差异(P>0.05)。结论:①茜草总蒽醌能显著减轻佐剂性关节炎大鼠的炎症反应,其作用可能与降低血清中白细胞介素1,2,6,和肿瘤坏死因子水平有关,而与垂体-肾上腺皮质轴无关。②茜草总蒽醌的效果比地塞米松弱。     

电针夹脊穴的抗炎镇痛和免疫调节作用

背景:临床观察证实,针灸具有确切的抗炎和免疫调节的作用,这是针灸防治各类免疫失调和急慢性炎症的基础。目的:观察电针夹脊(对佐剂性关节炎大鼠的抗炎镇痛作用及对其T细胞亚群的影响。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:山东中医药大学针灸基础实验室。材料:选用纯种Wistar大鼠30只。适应性饲养5d后,随机将大鼠分为3组:正常对照组,模型组,电针夹脊(组,每组10只。方法:①实验于2005-01/2005-05在山东中医药大学针灸基础实验室完成。模型组和电针夹脊(组用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎模型。于造模当天,电针夹脊(组针刺双侧第3,5腰椎夹脊(,用28号0.5寸(约1.65cm)不锈钢毫针在大鼠第3,5腰椎棘突下旁开约0.3cm直刺进针,接G6805-2A型多功能电针治疗仪给予疏密波(频率约4Hz,密波频率约60Hz),强度约为1mA,30min/次,1次/d,连续治疗7d。正常对照组及模型组以相同的方式捆绑固定(用粗布绳将大鼠捆绑固定于大鼠固定器)7d。②于造模前,造模后1,7d进行痛阈测定:采用热痛刺激仪的强光照射大鼠足垫部,将大鼠的缩爪潜伏期作为痛阈值。③造模前,造模后1,7d采用鼠足容积测定器测定大鼠右后爪足容积(容积排水法),计算肿胀率(%)=(造模后鼠足容积-造模前鼠足容积)/造模前鼠足容积×100%。④于造模后8d,采用FACSCalibur流式细胞仪检测血清CD4 ,CD8 细胞表达率并计算CD4 /CD8 。⑤多个样本均数比较采用单因素方差分析和t检验。主要观察指标:电针夹脊(对佐剂性关节炎大鼠痛阈、足肿胀率及血清T细胞亚群的影响。结果:大鼠30只均进入结果分析。①造模后1d,模型组、电针夹脊(组大鼠右后足足容积明显高于正常对照组和造模前(P<0.01);肿胀率明显高于正常对照组(P<0.01)。造模后7d,模型组右后足容积及足爪肿胀率明显高于正常对照组(P<0.01),足容积明显高于造模前(P<0.01);电针夹脊(组右后足足容积和肿胀率明显低于模型组(P<0.05)。②正常大鼠造模前双后足痛阈无明显差异,造模后1d模型组和电针夹脊(组大鼠致炎侧足痛阈较致炎前显著降低(P<0.01),明显低于正常对照组(P<0.01);造模后7d模型组大鼠致炎侧足痛阈仍明显底于致炎前(P<0.05);电针夹脊(组痛阈明显高于模型组(P<0.05)。③模型组大鼠CD4 T淋巴细胞及CD8 T淋巴细胞百分率明显低于正常对照组显著降低(P<0.01),CD4 /CD8 的比值明显高于正常对照组(P<0.05)。电针夹脊(组CD4 细胞百分率高于模型组,但差异不明显,CD8 细胞百分率明显高于模型组(P<0.01),CD4 与CD8 比值明显低于模型组(P<0.05)。结论:电针夹脊(有明显的抗炎镇痛作用,并能调整佐剂性关节炎大鼠的细胞免疫。     

自拟通痹汤对Ⅱ型胶原性关节炎关节软骨的作用

背景：自拟通痹汤是喻建平教授临床观察多年的临床经验方,适用于类风湿关节炎湿热痹阻证。目的：验证自拟通痹汤对Ⅱ型胶原性关节炎大鼠的足肿胀的抑制作用,以及对自身抗体IgG、T细胞亚群、细胞因子白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的调节作用及对踝关节局部病理损伤的治疗作用。方法：Wistar大鼠分为6组。除正常组外,以Ⅱ型胶原建立大鼠Ⅱ型胶原性关节炎动物模型。模型组：给予给药大剂量组等体积的蒸馏水;对照组：给予泼尼松5.0mg/kg;自拟通痹汤大、中、小剂量组,剂量分别为11.6,5.8和2.9g/kg。正常对照组大鼠右后足趾皮下注射生理盐水0.1mL。1周后以相同剂量于每只大鼠尾部加强注射1次。造模2周后开始给药,均为灌胃给药,1次/d,连续2周。结果与结论：结果表明,自拟通痹汤对Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎关节肿胀有明显的抑制作用;对大鼠血清IgG水平升高有明显的抑制作用;对大鼠胸腺CD4＋和CD8＋T淋巴细胞的异常有明显的免疫调节作用;对大鼠血清肿瘤坏死因子α有明显的抑制作用。自拟通痹汤各剂量组大鼠滑膜水肿、炎性细胞浸润、滑膜增生、血管翳生成、软骨破坏等病理损害均得到改善。     

辛夷挥发油对佐剂性关节炎大鼠足肿胀及关节组织中前列腺素E2的影响

背景进一步验证辛夷挥发油所具有抗非特异性炎症的作用,为此实验的起因.目的探讨辛夷挥发油对大鼠佐剂性关节炎的作用.设计分层抽样,随机分组对照,量效分析.单位成都中医药大学药学院药理教研室.材料实验于1999-02/04在成都中医药大学药理实验室完成.选用Wistar大鼠120只,按体质量分层后随机分组.方法Wistar大鼠分成4组模型对照组,辛夷挥发油0.28 mL/kg及0.14mL/kg组,地塞米松25 mg/kg组.各组动物均在足跖部皮内注射完全弗氏佐剂(0.1 mL/只)致敏,以诱发多发关节炎.依给药方案不同,实验分3批次进行,各个批次每组大鼠10只.第1批次在致敏前3 d开始给动物灌药,连续给药3 d,观测药物对佐剂引起的急性非特异性炎症的作用;第2批次在致敏后第8天开始给动物灌药,连续给药7 d,观测药物对继发病变的预防作用;第3批次在致敏后第19天开始给动物灌药,连续给药7 d,观测药物对继发病变的治疗作用,.测量大鼠足肿胀程度及距小腿(踝)关节组织中前列腺素E2含量.主要观察指标①辛夷挥发油对佐剂引起的急性非特异性炎症的作用.②对佐剂性关节炎的预防作用.③对佐剂性关节炎的治疗作用.结果①辛夷挥发油能极显著抑制原发性足肿胀.②预防给药时辛夷挥发油0.28 mL/kg,0.14 mL/kg组均能极显著地抑制继发性关节肿胀[(0.231±0.065)mL,(0.206±0.082)mL],减少肿胀组织中前列腺素E2含量[(0.133 2±0.057 2),(0.138 5±0.042 6)A 278nm].③治疗性给药时,辛夷挥发油0.14 mL/kg组对继发性关节炎性肿胀无明显作用,但能显著减少肿胀组织中前列腺素E2含量;辛夷挥发油0.28 mL/kg组对上述参数有极显著或显著作用.结论辛夷挥发油对完全弗氏佐剂引起的原发性足肿胀和继发性关节炎都有抑制作用,预防作用优于治疗作用,治疗作用时大剂量组效果较好.     

逆灸对随后佐剂性关节炎大鼠早期及继发期炎性细胞因子和局部足肿胀的影响

目的:观察逆灸对随后佐剂性关节炎大鼠早期、继发期关节局部肿胀和炎症因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的影响。方法:实验于2004-08/12在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室进行。以随机数字表法将48只Wistar大鼠分6组:正常组、模型早期组、逆灸早期组、模型继发组、逆灸继发组和逆灸正常组各8只。正常组:不造模,不预灸;模型早期组:大鼠右后足掌皮下注射福氏完全佐剂0.1mL造成佐剂性关节炎模型,造模第3天取材;逆灸早期组:于造模前进行艾灸,大椎穴处施灸,每次1壮,隔日灸1次,共灸8次,并于灸结束后造模,造模第3天取材;模型继发组:造模,造模第16天取材;逆灸继发组:于造模前进行艾灸,并于灸结束后造模,造模第16天取材;逆灸正常组:正常大鼠进行艾灸,灸结束后取材。采用放射免疫、鼠足容积测量法,观察逆灸对随后佐剂性关节炎大鼠早期和继发期足肿胀率及血清的白细胞介素1β,肿瘤坏死因子α的影响。结果:48只大鼠均进入结果分析。①足肿胀率:模型组和逆灸组右足早期肿胀率均高于正常组(2.128±0.262)%,(1.301±0.250)%,(0.011±0.018)%,F=26.001,P<0.01,且逆灸组肿胀较正常组明显减轻(P<0.05);模型组和逆灸组右足继发期肿胀率均高于正常组(1.736±0.165)%,(1.156±0.230)%,(0.009±0.018)%,P<0.01,且逆灸