吉林省致泻大肠埃希氏菌分子分型与耐药性研究

目的了解吉林省食源性疾病患者中致泻大肠埃希氏菌的毒力基因分布、流行特征、耐药情况、以及PFGE分子分型特征,为致泻大肠埃希氏菌的监测、爆发预警、耐药抗生素规避使用提供依据。方法对2016年从吉林省食源性疾病患者粪便中获得的26株致泻大肠埃希氏菌进行生化鉴定、多重PCR检测毒力基因、MIC微量肉汤稀释法药敏实验以及PFGE脉冲场凝胶电泳分子分型。结果26株致泻大肠埃希氏菌中13株(50%)为EAEC;7株(26.92%)为EPEC;4株(15.38%)为ETEC;2株(7.69%)为EHEC;对四环素、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、环丙沙星耐药极为严重,分别高达92.30%、88.46%和84.62%;XbaI酶切后进行PFGE脉冲场凝胶电泳分为23个型别。结论吉林省腹泻患者中致泻大肠埃希氏菌感染类型以EAEC为主,存在混合感染情况;耐药、多重耐药情况较为严重应加强规范抗生素的使用;在DNA水平上呈现出多态性。     

2016年福建省永安及南平监测点五种致泻性大肠埃希菌监测分析

目的 对福建永安及南平两个检测哨点2016年的281份腹泻病例进行5种致泻性大肠埃希菌病原检测,为病例的确诊及致泻性大肠埃希菌流行病学的提供实验数据.方法 收集281份其他感染性腹泻病例(排除霍乱、菌痢、伤寒副伤寒)的粪便标本,接种麦康凯平板,选取初步生化符合大肠杆菌的菌落,然后用致泻性大肠埃希菌多重PCR和单重PCR检测方法确定其致病型别.结果 281份腹泻病例粪便标本共检出致泻性大肠埃希菌17株,检出率6.05%,其中aEPEC 4株,ETEC 6株,EAEC 7株,其他型别未检出.结论 福建地区致泻性大肠埃希菌致病型别以aEPEC,ETEC,EAEC为主,多重PCR检测方法能有效的对致泻性大肠埃希菌病进行确诊及了解菌株的毒力基因携带情况,并为我省的致泻性大肠埃希菌的流行病学资料的积累及疾病防控提供快速客观的依据.     

2015年北京市昌平区致泻性大肠埃希菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究

目的 了解2015年北京市昌平区致泻性大肠埃希菌耐药状况并对其进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型研究。方法 药敏实验按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）推荐的K-B纸片法进行24种抗生素的敏感性分析;PFGE实验参照PulseNet PFGE实验方法。结果 药敏结果显示,致泻性大肠埃希菌对头孢比肟、亚胺培南完全敏感;对阿米卡星、妥布霉素、米诺环素耐药率极高,分别为94.6%、97.3%和97.3%。耐药谱分析显示,致泻性大肠埃希菌同时耐受抗生素种类为2～7种。PFGE分析发现,33株致泻性大肠埃希菌具有31种PFGE带型,菌株之间的相似系数为68.0%～100.0%,其中2株ETEC和2株EPEC有一致的PFGE带型。结论 昌平区引起腹泻的致泻性大肠埃希菌耐受抗生素的种类多、多重耐药严重且PFGE带型呈高度多态性。     

儿童肠道感染中致泻性大肠埃希菌的检测

目的了解儿童肠道感染中致泻性大肠埃希菌的感染情况。方法对95份腹泻患儿粪标本中分离出的大肠埃希菌,用荧光聚合酶链反应（PCR）的方法检测毒力基因,鉴定致泻性大肠埃希菌。结果检测出15株阳性菌株,阳性率为15．8％,其中肠聚集性大肠埃希菌（EAEC）6株、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）4株、弥散聚集性大肠埃希菌（DAEC）4株和肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）1株。结论致泻性大肠埃希菌是引起儿童腹泻的主要致病菌,临床实验室应加强对致泻性大肠埃希菌的检测。     

2013－2019年北京市顺义区腹泻病例分离致泻性大肠埃希菌耐药特征分析

  目的  对2013 — 2019年北京市顺义区2家哨点腹泻病例分离的致泻性大肠埃希菌（DEC）进行耐药特征分析。  方法  收集2013 — 2019年北京市顺义区2家哨点医院腹泻病例粪便标本,进行DEC分离培养、生化鉴定与分型鉴定,抗菌药敏感性试验使用微量肉汤法,耐药特征分析包括耐药率、非敏感率、多重耐药率和耐药谱分析。  结果  腹泻病例DEC检出率为9.53%（232/2434）、肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）占56.47%（131/232）、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）占27.16%（63/232）、肠聚集性大肠埃希菌（EAEC）占16.38%（38/232）。 DEC多重耐药率为33.19%（77/232）,共有90种耐药谱型;ETEC多重耐药率为17.56%（23/131）,共有36种耐药谱型;EPEC多重耐药率为58.73%（37/63）,共有42种耐药谱型;EAEC多重耐药率为44.74%（17/38）,共有23种耐药谱型。 耐药率≥30%的抗菌药ETEC有萘啶酸（NAL）、氨苄西林（AMP）, EPEC有AMP、四环素（TET）、复方新诺明（SXT）、磺胺异恶唑（Sul）、NAL,EAEC有NAL、AMP、SXT、Sul、TET。 2013 — 2016年与2017 — 2019年两个时间组试验抗菌药差异性比较发现:ETEC对AMP、头孢唑啉（CFZ)、TET、头孢吡肟（FEP）、氨曲南（AZM）、氨苄西林/舒巴坦（AMS）耐药水平上升,对Sul耐药水平下降;EPEC对庆大霉素（GEN）耐药水平下降;EAEC对头孢噻肟（CTX）、GEN、多西环素（DOX）耐药水平下降。  结论  北京市顺义区腹泻病例中,DEC具有较高的流行强度,ETEC、EPEC和EAEC的流行与耐药均具有较为独立的特征,耐药形势依然严峻;值得应引起公共卫生和临床部门的广泛关注。     

北京某医院感染性腹泻患者致泻性大肠埃希菌毒力和耐药特征分析

目的 明确本院感染性腹泻患者致泻性大肠埃希菌毒力和耐药特征。方法 采用VITEK MS微生物质谱检测系统初步鉴定,多重实时荧光PCR检测毒力基因,对本院感染性腹泻患者临床分离的致泻性大肠埃希菌(Diarrheagenic Escherichia coli, DEC)进行5种型别鉴定。微量肉汤稀释法和E-test法药敏试验检测DEC菌株的耐药表型特征。二代测序及生物信息学分析其耐药分子特征。采用Fisher确切概率法进行统计学分析。结果 本院DEC检出率为11.9%,其中EAEC占比37.5%,非典型EPEC占比34.38%,ETEC占比25.0%,EIEC占比3.12%,未检出EHEC菌株。32株DEC对氨苄西林、四环素、甲氨苄啶/磺胺异恶唑耐药率最高,分别为53.12%、43.75%和37.5%。ESBLs(+)株占比18.75%,其多重耐药菌株检出率为83.83%,显著高于ESBLs(-)菌株,差异有统计学意义(P=0.042)。32株DEC共有25个ST型,优势基因型为ST10共4株(12.5%),ST28、ST31和ST3153各2株(各占比6.25%),其他21个型别各1株菌...     

长沙市食品从业人员致泻大肠埃希菌实时荧光多重PCR检测结果分析

目的了解长沙市食品从业人员致泻大肠埃希菌感染、分布及毒力基因携带情况。方法抽取长沙市9个单位258例食品从业人员为研究对象,采用实时荧光多重聚合酶链反应(PCR)检测致泻大肠埃希菌。结果致泻大肠埃希菌感染率为15.5%(40/258),其中肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)占10.9%(28/258),肠致病性大肠埃希菌(EPEC)占3.1%(8/258),肠出血性大肠埃希菌(EHEC)占1.6%(4/258),未检出肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)和肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)。28株EAEC携带uidA基因26株,aggR+pic基因13株,astA基因27株,携带率分别为92.9%、46.4%、96.4%;8株EPEC全部携带eae和uidA基因;4株EHEC中3株携带eae基因,且都携带stx1+stx2基因。结论建立持续监测致泻大肠埃希菌的机制和深入研究其分子流行病学理论,除了为监管部门制订和评价公共卫生措施提供基础数据,对评价食品安全状况,有效控制传染源、保护人民群众健康具有重要意义。     

安徽省马鞍山市2014-2018年腹泻患者中致泻性大肠埃希菌病原学及流行特征分析

目的了解安徽省马鞍山市腹泻患者中致泻性大肠埃希菌（DEC）的感染情况、毒力基因、耐药性以及分子分型,为DEC的防治提供依据。方法2014 — 2018年,对马鞍山市三家哨点医院门诊急性腹泻患者粪便标本进行DEC的分离、鉴定与毒力基因检测,并对阳性菌株进行药敏试验及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型。结果1 711份腹泻粪便标本中有120份检出阳性,共分离得到123株DEC,标本检出阳性率为7.01%。 DEC阳性病例年龄分布以0～5岁的婴幼儿及20～39岁青壮年为主;病例集中在夏季（6 — 8月）。 DEC分型中以肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）和肠致病性大肠埃希菌（EPEC）为主,分别占58.54%和31.71%。 123株DEC菌株的药敏试验结果显示,超广谱β-内酰胺酶（ESBL）阳性菌株耐药严重,所有菌株耐≥6种药物。 PFGE分子分型产生119种带型,带型相对分散,相似度为49.7%～97.7%。结论2014 — 2018年马鞍山市腹泻患者DEC的感染类型以ETEC和EPEC为主,存在年龄及季节分布特征,本地分离DEC菌株的耐药程度较为严重,PFGE带型分散,应控制抗生素的滥用,重点关注ETEC或EPEC的流行风险。     

北京市朝阳区腹泻患者致泻性大肠埃希菌流行特征及毒力基因携带情况分析

目的分析北京市朝阳区感染性腹泻样本中致泻性大肠埃希菌（DEC）流行特征及毒力基因携带情况。方法收集2014 — 2017年北京市朝阳区哨点医院感染性腹泻样本,分离培养后应用real-time PCR方法检测DEC的主要毒力基因。 其中利用eae、stx1、stx2、lt、st、aggR和ipaH 7种毒力基因进行DEC的分型鉴定,此外,检测并分析bfpA、astA、escV、pic、perA、ehxA、pet和ipaBCD等重要的毒力基因分布情况。结果从1 977份腹泻样本中共分离出94株DEC,检出率为4.75%。 DEC的检出率具有随年龄增加而升高的趋势。 0 ~ 5岁年龄组肠聚集性大肠埃希菌（EAEC）和肠致病性大肠埃希菌（EPEC）构成比分别是59.62%、23.08%。 5岁以上年龄组肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）构成比是59.52%。 81.25%EPEC（13/16）未携带bfpA,为非典型EPEC（aEPEC）。 38株EAEC中astA、pic和pet的携带率分别为39.47%、68.42%和92.11%。 30株ETEC的st、lt和astA携带率分别是46.67%、56.67%和53.33%;仅1株（3.33%）ETEC同时含有st和lt。 4株EHEC全部携带 eae、escV和ehxA。 6株肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）中ipaBCD、astA携带率为16.67%和33.33%。结论北京市朝阳区流行的DEC以EAEC、ETEC和EPEC为主,其中EPEC主要为aEPEC。 婴幼儿主要感染EAEC,成年人主要感染ETEC。 DEC中存在多种毒力基因,其中astA广泛存在于多种DEC中。     

弥散黏附性大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立及其在感染性腹泻患者中的流行情况

目的 建立一种快速检测弥散黏附性大肠埃希菌（DAEC）的普通多重PCR方法,了解DAEC在腹泻患者中的流行情况。方法 根据DAEC黏附基因afaB、afaC、afaD、daaE及16S rRNA基因rrs,建立4重PCR反应体系,对PCR引物、反应体系和反应条件进行优化,评价敏感性和特异性,并应用于389份腹泻患者粪便标本的筛查。结果 4重PCR反应可以特异性扩增DAEC菌株afaB/C、afaD、daaE基因片段,除2株肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）外,检测引物对其他致泻性大肠埃希菌及常见肠道病原菌均无特异性扩增,此多重PCR方法的检测下限可达3.20 101 CFU/反应（8.01 103 CFU/ml）。利用本研究建立的多重PCR方法对腹泻患者粪便标本进行检测,发现DAEC菌株分离率为6.2%（24/389）。结论 本研究建立的多重PCR方法可用于DAEC菌株的快速鉴别,也可用于人粪便标本DAEC的初步筛查。     

2013-2020年北京市海淀区成年人致泻大肠埃希菌流行特征和分型研究

目的 掌握北京市海淀区成年人致泻大肠埃希菌(DEC)流行特征和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型特点.方法 对2013-2020年在3家哨点医院就诊的1961例成年人腹泻患者粪便或肛拭子标本进行DEC检测,对其中66株DEC菌株进行PFGE分型试验.结果 成年人DEC检出率为9.54％(187/1961),产肠毒素大肠埃希...     

多器官功能障碍综合征多重耐药菌病原学分析

目的 探讨多器官功能障碍综合征（MODS）患者发生多重耐药菌感染的病原学分布及耐药情况.方法 回顾性分析149例MODS患者的临床资料.对临床送检标本中多重耐药菌的病原菌分布、常见多重耐药菌菌株的耐药情况进行统计和分析.结果 在149例患者中分离出226株细菌,其中多重耐药菌117株,在多重耐药菌株中排名前5位依次是：鲍曼不动杆菌（33.71％）、铜绿假单胞菌（15.73％）、肺炎克雷伯杆菌（13.48％）、大肠埃希氏菌（7.87％）、金黄色葡萄球菌（6.84％）.结论 MODS患者中多重耐药菌所占比例较高,对多种抗生素呈广泛的不同程度的耐药.     

2007-2011年浙江萧山地区尿路感染患者大肠埃希菌的分离及产超广谱-内酰胺酶和耐药性分析

目的 调查和分析浙江萧山医院尿路感染患者中大肠埃希菌的临床分布、产超广谱-内酰胺酶(extended spectrum -lactamase,ESBLs)和耐药特性,为临床合理利用抗菌药物提供依据。 方法 调查2007-2011年尿培养检出的大肠埃希菌, 对其临床分布进行分析;使用VITEK-60全自动微生物分析仪作细菌鉴定;采用K-B琼脂扩散法检测耐药情况。 结果 共分离出771株大肠埃希菌,其中52.5%(405/771)产ESBLs,主要来源于泌尿外科、内科和肾病科等科室,超过总分离菌株的60.0%,产ESBLs大肠埃希菌检出率从2007年的44.2%增高到2011年的61.2%(P0.01),且2007-2011年大肠埃希菌对多种抗菌药物的耐药率都有增高趋势,尤以对三、四代头孢菌素的增幅更为明显。ESBLs阳性株对氨苄西林、头孢唑啉、头孢他啶等16种药物的耐药率均高于ESBLs阴性株,差异有统计学意义(P0.01)。 结论 尿路感染大肠埃希菌对头孢类药物耐药率逐年升高,产ESBLs菌株检出率也呈逐年增高趋势,且表现为多重耐药,临床应合理使用抗生素。     

多重耐药大肠埃希菌产β-内酰胺酶及耐药表型分析

目的分析多重耐药大肠埃希菌产β-内酰胺酶与β-内酰胺类抗生素耐药表型的关系,为临床合理使用抗生素提供实验依据。方法用碘淀粉测定法、三维试验、协同法、纸片扩散(K-B)确证试验分别检测青霉素酶、头孢菌素酶、金属β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);并用K-B法进行药敏试验。结果分离的125株多重耐药大肠埃希菌对头孢类抗生素如头孢噻吩、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和头孢西丁的耐药率分别为84.8%、72.0%、56.0%、71.2%、60.8%和28.0%,对氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低,分别为12.8%和15.2%,对氨苄西林、哌拉西林、替卡西林的耐药率较高,分别为94.4%、90.4%和91.2%,对亚胺培南和美洛培南耐药率仅3.2%。检出产ESBLs细菌63株,检出率50.4%。产ESBLs大肠埃希菌对多种抗生素耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论多重耐药大肠埃希菌、4种产酶类菌株对除亚胺培南和美洛培南以外的其他抗生素均已高度耐药;头孢菌素类耐药率较高,除非药敏试验结果支持,一般不宜作为一线用药。     

老年人尿路感染常见病原菌耐药性分析

目的研究老年人尿路感染的常见病原菌及其对常用抗生素的耐药性，以指导临床用药。方法采用Vitek-Ams System和Kirby-Bauer法对267例尿路感染的老年患者标本进行细菌培养并检测其对多种抗生素的耐药性。结果共检出病原菌310株，其中革兰阴性杆菌201株（66．1％），主要为大肠埃希菌137株（45．1％）、铜绿假单胞菌25株（8．2％）、肺炎克雷伯菌19株（6．3％）、变形杆菌13株（4．3％）。革兰阴性杆菌对第3代头孢菌素的耐药率较高，可能与产超广谱B内酰胺酶菌株的增多有关，亚胺培南是治疗革兰阴性杆菌感染最有效的药物。革兰阳性球菌76株（23．0％），层析万古霉素仍然是治疗革兰阳性球菌感染最有效的药物。真菌33株（10．9％），对两性霉素B耐药率为0。结论老年人尿路感染病原菌耐药性严重，持续耐药监测对抗生素的合理应用，提高疗效，减缓耐药菌株的发生与发展有重要意义。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分布及耐药性分析

目的调查分析院内产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌临床分布及耐药情况。方法收集浏阳市中医医院2007年1月至2010年1月临床分离到的大肠埃希菌401株和肺炎克雷伯菌319株,采用纸片扩散法(K-B)对分离株进行抗菌药物敏感试验和ESBLs筛选和确证试验,并对其临床分布及耐药情况进行统计分析。结果 720株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,产超广谱β-内酰胺酶阳性率为37.9%;其中大肠埃希菌阳性率为42.1%;肺炎克雷伯菌阳性率为32.6%。产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均对第3代头孢菌素和单环β-酰胺类抗菌药物呈现高度耐药性,对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗菌药物也存在较高耐药性,但是对亚胺培南敏感。结论该院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率高并呈多重耐药性,这些产ESBLs菌分布在不同病区的各种标本中,临床应及时掌握它们的临床分布及耐药特点,合理的应用抗菌药物、控制ESBLs菌株的传播和流行。     

发热患者血培养阳性的病原菌分布和耐药性研究

目的回顾性分析本院3年来血培养阳性中分离的病原菌的阳性率、分布及耐药情况,为临床合理使用抗生素提供科学根据。方法采用法国梅里埃公司的双相培养瓶和API细菌鉴定分析系统进行血培养和微生物鉴定,用ATB自动细菌鉴定及药敏分析仪和K-B法进行药敏试验。结果 596例血培养中共检出阳性菌株61株(10.23%),其中革兰阳性菌27株(44.3%)、革兰阴性菌34株(55.7%),感染率最高的是大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿莫西林、替卡西林高度耐药,分别为87.5%和100%;葡萄球菌对青霉素耐药率为85.71%。结论大肠埃希菌可能是本院院内感染的主要细菌,检出的细菌抗生素耐药率高,临床应加强对发热疑为败(菌)血症患者的进行血标本培养检测,以便尽早、准确、合理的应用抗生素,从而减少细菌耐药性产生,提高临床治疗效果。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌药敏分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分离率及其耐药情况,为临床治疗提供依据.方法 收集2007年1月至2009年12月临床送检患者标本分离出的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,采用常规生化方法和梅里埃API20E系统鉴定、纸片扩散确证试验检测ESBLs,药敏试验采用纸片扩散法.结果 281株大肠埃希菌和174株肺炎克雷伯菌确证试验产ESBLs阳性率分别为36.2%和40.9%,产ESBLs菌对β-内酰胺类抗菌药高度耐药,对阿米卡星、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸耐药性在5.4%～25.6%,对环丙沙星、复方新诺明和庆大霉素耐药率较高,为65.1%～88.9%,未发现耐亚胺培南产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌.结论 产ESBLs菌的问题日益严重,临床及时了解它们的耐药特点和变化趋势,对合理应用抗菌药物、延缓细菌耐药性的产生,控制播散菌株的流行具有十分重要的意义.