冰冻-解冻-去甘油过程红细胞形态变化与损伤相关性的探讨

目的探讨冰冻-解冻-去甘油过程中红细胞形态变化与其损伤的相关性。方法依据配对设计原理,采用冻存前保留红细胞外多余甘油溶液(方法1)和冻存前离心去除红细胞外多余甘油溶液(方法2)的两种常规方法,制备冰冻解冻去甘油红细胞,对冰冻-解冻-去甘油过程各关键制备节点留取的样本,进行血常规及上清游离血红蛋白(FHb)含量的检测,分析红细胞形态变化及其与损伤的关联。结果 (1)冰冻-解冻-去甘油过程红细胞因甘油化而体积增大,后因去甘油化而复原,方法2较之方法1甘油化红细胞(冻存前)和冰冻解冻去甘油红细胞的平均体积(MCV)增高(P0.01,P0.05);(2)冰冻-解冻-去甘油过程中红细胞损伤分布依次为:去甘油化过程(63.20±10.99)%、甘油化过程(30.78±10.47)%、冰冻解冻过程(6.02±4.11)%,两种制备方法间差异无统计学意义;(3)红细胞破坏与甘油化过程红细胞体积变化率呈中度负相关;(4)随着贮存时间的延长,冰冻解冻去甘油红细胞上清游离血红蛋白含量逐渐增加,0.9%氯化钠悬浮冰冻解冻去甘油红细胞储存12 h、24 h,MAP悬浮冰冻解冻去甘油红细胞储存21 d、28 d,两种制备方法间差异有统计学意义(P0.05)。结论冰冻-解冻-去甘油过程中红细胞损伤与其变形能力呈负相关,且损伤主要发生在去甘油化过程,冻存前离心去除红细胞外多余甘油溶液导致红细胞膜骨架因剪切力作用而受损,进而对冰冻解冻去甘油红细胞贮存质量产生不利影响。     

甘氨酸溶液应用于冰冻解冻去甘油红细胞制备的研究

目的 探讨甘氨酸溶液对冰冻红细胞解冻过程的保护作用。方法 选择采集日期在6 d内的去白细胞悬浮红细胞1 U共20袋进行研究。每2袋悬浮红细胞混匀后均分成2袋，分为两组；每组10袋，每袋均为1 U,进行冰冻保存。其中一组使用氯化钠溶液进行去甘油处理(对照组),一组使用甘氨酸溶液进行去甘油处理(实验组)。检测两组解冻去甘油红细胞的血红蛋白、游离血红蛋白、甘油残留量、红细胞内甘油总量、三磷酸腺苷(ATP)和2, 3-二磷酸甘油酸(2, 3-DPG)。结果 与对照组游离血红蛋白含量(0.90±0.05)g/L、甘油残留量(1.17±0.08)g/L相比，实验组终产品红细胞上清游离血红蛋白含量(0.77±0.15g/L)、甘油残留量(0.79±0.33)g/L含量下降，差异有统计学意义(P<0.05);与对照组ATP含量(4.03±0.38)μmol/gHb和2, 3-DPG含量(485.65±78.08)μg/L相比，实验组ATP含量(4.41±0.35)μmol/gHb和2, 3-DPG含量(656.28±116.68)μg/L明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 使...     

ACP215处理机制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工制备的对比研究

目的观察ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工洗涤制备的效果,并对其检测结果进行初步分析。方法采用48袋Rh（D）阴性全血,先甘油化冰冻保存,后解冻将其随机等分成2组,实验组采用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞,对照组采用手工开放式洗涤法进行制备。按照相关标准分别对实验组和对照组的红细胞回收率、游离血红蛋白含量、甘油含量、残留白细胞、体外溶血试验进行检测分析。结果实验组的红细胞回收率明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）,实验组的甘油含量、残留白细胞均低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。但是两种方法制备产品中游离血红蛋白含量、体外溶血试验的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞操作简单易行,安全可靠,省时、省力,且产品质量均符合国家标准,有实际应用价值,值得推广。     

冰冻解冻去甘油红细胞制备过程质量控制方法简

目的 探讨冰冻解冻去甘油红细胞制备过程的质量控制方法.方法 将40袋血液随机分为实验组和对照组,分别监测相关变量对产品质量的影响.结果 两种方法白细胞残留量、甘油残留量和容量合格率均为100％,血红蛋白含量和游离血红蛋白含量的差异有统计学意义（x2和P值分别为5.625,0.044和10.157,0.030）.结论 血红蛋白含量和游离血红蛋白含量合格率与甘油化及去甘油化过程中的诸多因素有关.     

冻存前滤除白细胞对解冻红细胞质量影响的研究分析

目的探讨冻存前滤除白细胞对冰冻解冻去甘油红细胞的血液质量和生化指标的影响。方法随机采集20名无偿健康献血者全血400mL×20袋,常规分离血浆制备成悬浮红细胞2μ×20袋。根据配对设计方法,将血液等量分成两份1μ×20袋,其中20袋在2~4℃静置2~4h后用一次性白细胞滤器滤除白细胞为滤白组,另20袋不做其他处理为非滤白组。两组红细胞经40%甘油化后冻结,保存在低于-65℃的超低温冰箱至少30d,解冻后红细胞复悬于MAP红细胞保存液中,4℃保存。分别在0、7、14、21d检测解冻红细胞的血液学和生化学指标。结果滤白组冰冻解冻去甘油红细胞较非滤白组冰冻解冻去甘油红细胞的溶血率低、氨浓度低及ATP浓度高,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。滤白组可见LDH水平明显抑制,钾浓度增加速度相对较缓。结论滤白组解冻红细胞长期生存能力较非滤白组解冻红细胞强。     

不足量血MAP悬浮红细胞的研制

目的 建立利用ACD-B抗凝的不足量血制备MAP悬浮红细胞的技术标准和工艺路线,临床评价该血液制剂的安全性和有效性.方法 将34份实际采血量≥66％标示量的不足量血,按采血后不同储存时间分成3组,分别制备MAP(含氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇-磷酸盐的红细胞添加液)悬浮红细胞,在35 d的保存期内检测相关理化指标;临床观察56例不足量血制剂的疗效和有无输血不良反应.结果 在35 d的保存期内,采血后不同的储存时间对于相关制剂的K+浓度、血浆游离血红蛋白(FHb)和游离红细胞膜蛋白(EMP)含量比较差异均有统计学意义(P值分别为0.041、0.007和0.002).在14 d的保存时间内4h组较正常的重要理化指标,除了K+在第14 d显著降低外,pH、Na+、FHb、2,3-二磷酸甘油(2,3-PPG)和EMP等指标的差异,均无统计学意义(P＞0.05);保存期超过21 d的不足量血制剂的K+、FHb和EMP与正常对照组相比,4h组与正常对照组的差异最小.结论 利用实际采血量≥66％标示量的不足量血,在采血后4h内制备的悬浮红细胞,其35 d保存期末的红细胞理化和功能指标与足量全血制备的悬浮红细胞的差异是可以接受的;临床研究资料表明,输注采血后4h内制备、储存7d内的该血液制品是安全和有效的.     

冰冻红细胞制备过程中若干问题探讨

目的　为简化冰冻红细胞的制备程序 ,保证临床及时用血。方法　比较不同条件制备的成品冰冻红细胞的红细胞回收率、溶血率、上清游离血红蛋白及体外溶血试验。结果　红细胞冰冻前在 4℃贮存 1～ 6d与 7～1 2d、甘油化红细胞先冰冻待解冻后再去甘油与先去甘油再冰冻、洗涤时加不同量的 9%氯化钠溶液所制备的成品冰冻红细胞的红细胞回收率、溶血率、上清游离血红蛋白及体外溶血试验均无显著性差异 ,缓慢匀速加甘油与快速加甘油中间静置平衡使红细胞甘油化后甘油中血红蛋白含量有显著性差异 ,前者高于后者。结论　上述条件的改变可简化冰冻红细胞的制备程序且不影响冰冻红细胞的质量     

快速去除冰冻红细胞甘油的方法改进研究

目的 建立冰冻红细胞快速去甘油的方法。方法 采用三步法快速去除冰冻红细胞中的甘油。通过控制制备时盐水的浓度、作用时间及离心次数,用高浓度盐水大量稀释冰冻红细胞后,离心去除盐水,加入相应体积的生理盐水重悬,来达到快速去除甘油的目的。分别对比了常规法和改良法制备的冰冻解冻去甘油红细胞的血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、甘油残留量、白细胞残留量及血细胞比容5个方面的指标。结果 传统去甘油的方法大约需要1 h,三步法去甘油大约需要15 min,极大地缩短了时间,提高了效率。对去甘油红细胞进行相关检测,甘油残留量和白细胞残留量符合《全血与成分血质量要求(2012版)》的规定,血红蛋白含量略低于规定。结论 快速解冰冻去甘油方法具有时间短、效率高的优点,但仍需进一步改进和优化以使产品质量全面达到国家标准。     

甘油对冰冻解冻红细胞质量的影响探讨

目的比较两种方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量差异。方法随机取2~6℃保存6d内的RH阴性去白细胞悬浮红细胞60袋,应用ACP215全自动血细胞处理仪制备甘油化红细胞,-80℃冰箱保存1~24个月,其中30袋去甘油冰冻保存,30袋不去甘油冰冻保存,然后取出于37~40℃水浴快速融化后,选择ACP215全自动血细胞处理仪去甘油程序进行去甘油洗涤处理,检测冰冻解冻去甘油红细胞的质量指标,并与国家标准进行比较。结果两种方法制备的冰冻解冻去甘油红细胞其血红蛋白水平、游离血红蛋白浓度、甘油残余量和细菌培养试验均满足《全血及成分血质量要求(GB18469-2012)》。结论两种方法均可制备符合国家标准的冰冻解冻去甘油红细胞。但从临床抢救角度看,采用冰冻前去甘油的方法,可以为临床抢救争取约30min的时间。     

趋势分析在调整血液成分制备工序中的应用

目的探讨质量趋势分析应用于调整血液成分制备工序,以提高血液产品质量。方法收集本站2014-2015年机洗法制备冰冻解冻去甘油红细胞每月时间顺序质控指标数据,利用Excel 2007数据统计功能,对质控指标数据制成折线图,并设置警戒线,作出指数趋势线并分析。结果 2014年冰冻解冻去甘油红细胞质控数据折线图显示,该年度所有质控指标均符合国家《全血及成分血质量要求》,Hb含量呈稳中略显趋升趋势,但同时FHb、甘油残留量也呈持续升高趋势,已近设置警戒值。经原因分析,纠正了制备工序过程存在的缺陷,同时增加了离心加洗工序;2015年质控数据折线图显示,Hb、FHb、甘油残留量3个关键质控数据趋于稳定。结论制作趋势分析图和采用适宜的指数趋势线方法,可以分析发现血液成分制备工序中存在的缺陷,并应用于调整血液成分制备工序的确认,有助于确保血液成分制备质量稳定性。     

四氢嘧啶对人冰冻红细胞质量影响的初步研究

目的通过在红细胞深低温冰冻的冻存液中添加渗透压调节物-四氢嘧啶(ectoine),检测红细胞冰冻前后的质量,探讨ectoine用于深低温冰冻红细胞的可能性,为ectoine可用于红细胞深低温冰冻的研究提供实验依据。方法取悬浮红细胞样品8袋,每袋分为对照组(复方甘油组、甘油组)和实验组(1.5%ectoine甘油组、3%ectoine甘油组和4.5%ectoine甘油组)共5组。实验组:ectoine起始浓度为1.5%、3%与4.5%(W/V)(加红细胞后终浓度为1.05%、2.10%与3.15%)。将5组(2组对照组与3组实验组)冻存液分别加入红细胞,红细胞冰冻后解冻并洗涤。测定冰冻前(未加冻存液)及解冻洗涤后红细胞数、血红蛋白量、红细胞变形性、渗透脆性,并用电镜扫描,观察红细胞显微形态。结果与2组对照组相比,3%ectoine甘油组红细胞回收率最高(89.26±2.60)%(P0.05);3%ectoine甘油组解冻洗涤的红细胞与冰冻前红细胞,在50~(-1)、100~(-1)、200~(-1)和1 000~(-1)的剪切率值上相比P0.05,差异无统计学意义;1.5%ectoine甘油组解冻洗涤的红细胞,50%溶血率时氯化钠浓度为(4.57±0.08)g/L,3%ectoine甘油组(4.80±0.17)g/L,2组分别与复方甘油组(4.98±0.26)g/L相比P0.05,差异具有统计学意义;电镜扫描显示3组实验组红细胞与复方甘油组红细胞解冻洗涤后,均无棘状和球形红细胞,甘油组可见破膜、皱缩的红细胞。结论3%Ectoine作为渗透压调节物用于冰冻红细胞,可用于高浓度甘油冰冻红细胞时作为渗透压调节物,相对于3%乳酸钠的复方甘油(商品化复方甘油),可提高解冻洗涤的红细胞回收率,改善解冻洗涤的红细胞质量,具有在深低温冰冻红细胞的潜力。     

甘油化震荡频率对冰冻解冻去甘油红细胞质量的影响

目的对本站制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法进行探索并对其质量进行评价。方法随机抽取本站40 U相似文献   

悬浮红细胞储存时间对制备的洗涤红细胞钾离子和游离血红蛋白影响

[目的]探讨悬浮红细胞储存时间对制备的洗涤红细胞的钾离子(K+)浓度和游离血红蛋白(FHb)含量的影响.[方法]采用全自动离心制备法将储存0～7 d(0～7 d组,n=10)、8～15 d(8～15 d组,n=10)、16～23 d(16～23 d组,n=10),24～31 d(24～31 d组,n=9)的悬浮红细胞制备成洗涤红细胞,分别于制备前、制备后0、12、24 h取样测定其K+浓度和FHb含量,比较不同储存时间的洗涤红细胞的K+浓度和FHb含量.[结果]制备前,不同储存时间的悬浮红细胞的K+和FHb含量相比较差异均有显著性(P＜0.05),储存时间越长,K+和FHb含量越高.制备后24 h,0～7 d组、8～15 d组、16～23 d组、24～31 d组制备的洗涤红细胞的K+浓度分别为(3.23±0.52)、(3.31±0.87)、(2.98±0.63)和(3.21±0.86) mmol/L,均低于人体正常K+参考值上限.制备后12 h、24 h,各组FHb含量相比较差异均有显著性(P均＜0.05),储存时间越长,FHb含量越高.制备后24 h,四组FHb含量分别为(0.26±0.11)、(0.41±0.20)、(0.72±0.37)、(1.05±0.37)g/L,24～31 d组明显高于其他三组(P均＜0.05).[结论]悬浮红细胞的储存时间对制备的洗涤红细胞的K+浓度影响不大,在制备后24 h的保存期内K+浓度均低于人体正常参考值上限,但对FHb的影响较大,建议避免使用接近储存期末的悬浮红细胞进行洗涤红细胞的制备.     

不同滤器制得的去白细胞悬浮红细胞在不同保存期的相关指标比较

目的探讨不同生产厂家滤器制得的去白细胞悬浮红细胞在不同保存时间时相关指标优劣。方法随机使用4个厂家带白细胞滤器的一次性采血袋采集200、300、400mL全血,然后分别制备为1U、1.5U及2U的去白细胞悬浮红细胞共240袋,分别按照不同规格保存于(4±2)℃储血专用冰箱。使用无菌接驳器分别取同一规格、不同厂家的保存期为0、7、14、21、28和35d的悬浮去白细胞悬浮红细胞标本共计240份,测定其血容量、血细胞比容、白细胞残留量、血浆游离血红蛋白(FHb)水平、血红蛋白水平、并计算其储存期末溶血率。结果同一厂家滤器制备不同规格悬浮去白细胞红细胞效果差异无统计学意义(P0.05);不同厂家滤器制备的同一规格悬浮去白细胞红细胞在血容量、血浆FHb水平方面比较,差异有统计学意义(P0.05);同一厂家滤器制备的悬浮去白细胞红细胞在不同储存期的FHb、保存期末溶血率差异有统计学意义(P0.05)。结论应从血细胞比容、FHb水平、溶血率等指标综合考虑,选择带白细胞滤器的一次性采血袋,以确保去白细胞效果及红细胞输注的安全性和有效性。     

深低温保存Rh阴性血液的质量控制

目的　确保深低温保存Rh阴性红细胞解冻后的质量。方法取ACD抗凝 ,4℃保存 6d内Rh阴性红细胞悬液或全血离心除去添加剂或血浆的浓缩红细胞 ,将红细胞经 (4 0 % )浓度甘油处理后 ,置 - 80℃冰冻保存。临床需要时 37℃水浴解冻复苏红细胞 ,依次用 9%NaCl羟乙基淀粉溶液 ,0 .9%NaCl羟乙基淀粉溶液 ,0 .9%NaCl各洗涤 1次。用生理盐水羟乙基淀粉溶液悬浮红细胞。结果 35袋冰冻解冻红细胞去甘油后红细胞回收率为(81 .1 7± 1 8.5 ) % ,游离血红蛋白为 (0 .6 3± 0 .1 6 ) g/L ,甘油残留量平均为 5 .3g/L ,体外溶血试验血红蛋白增加率为2 5 .1 9%。结论冰冻解冻去甘油红细胞各项指标均达到了国家规定的质量标准 ,临床输用效果良好     

冰冻解冻去甘油红细胞制备中去白膜预处理的必要性研究

目的了解非去除白膜层和去除白膜层方法制备的冰冻解冻去甘油红细胞中红细胞回收率和白细胞残留量,探寻简单并符合国家标准质控指标的制备方法。方法取33份红细胞悬液,分成2组,A组为非去除白膜层预处理共11份,B组为去除白膜层预处理共22份,-50℃速冻后置入-65℃冰箱保存,10-20d后取出解冻,均采用ACP215自动去甘油制成冰冻解冻去甘油红细胞。检测未处理红细胞悬液、解冻后去甘油前和去甘油红细胞成品中的红细胞回收率及白细胞残留量。结果A组成品红细胞回收率明显高于B组[分别为(84.27±3.21)%和(80.64±4.70)%],白细胞残留量略>B组,但仍在国标允许范围之内(0.75±0.14%)。结论ACP215制备冰冻解冻去甘油红细胞可采用非去除白膜层的预处理方法,制品质量符合国家标准,而且操作自动简便。     

MAP洗涤红细胞再冰冻的实验研究

目的对红细胞洗涤后冰冻保存的安全性探讨。方法选择20袋(2u/袋)悬浮红细胞,每袋分成2份(1u/份)为实验组和对照组,实验组制备成M AP洗涤红细胞后再冰冻保存;对照组直接制备成冰冻红细胞,一周后实验组和对照组用同等方法进行去甘油解冻,并计算红细胞的回收率及其相关质控指标。结果实验组和对照组冰冻红细胞回收率,甘油残余量,上清液游离血红蛋白含量及体外溶血率比较无显著性差异(P>0.05),两组成品无菌试验均阴性。结论M AP洗涤红细胞制备成冰冻红细胞,各项质量指标符合国家标准,能应用于临床,因而有效解决临床备用洗涤红细胞剩余而造成的血液浪费。     

2组洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞的效果比较

目的观察2组洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞的结果,比较洗涤溶液组合中是否加入羟乙基淀粉20氯化钠溶液对洗涤结果的影响。方法取44份全血,应用ACP215血液处理仪制备成冰冻红细胞,分A组:9%NaCl溶液、羟乙基淀粉20氯化钠注射液、0.9%NaCl溶液;B组:9%NaCl溶液、0.9%NaCl溶液2种洗涤溶液进行解冻去甘油。对2组红细胞回收率、残留白细胞、残留血小板、甘油含量、游离血红蛋白含量、体外溶血等指标进行检测分析。结果 A组解冻红细胞的红细胞回收率(86.0±3.4)%、残留白细胞(0.57±0.18)%、残留血小板0、甘油含量(3.4±0.8)g/L、游离血红蛋白含量(0.55±0.14)g/L、体外溶血试验(12±5)%均符合国家标准,B组红细胞回收率(87.0±2.3)%、残留白细胞(0.51±0.24)%、残留血小板0、甘油含量(3.5±0.7)g/L、游离血红蛋白含量(0.47±0.10)g/L、体外溶血试验(10±4)%也符合国家标准,2组解冻红细胞制品也均符合AABB标准和欧洲标准中对于红细胞回收率的要求,2组结果差异无统计学意义,P>0.05。结论羟乙基淀粉20氯化钠注射液对使用ACP215血液处理仪制备冰冻解冻去甘油红细胞的洗涤效果无影响,但洗涤液中不加入羟乙基淀粉20氯化钠溶液,其制品质量符合国家标准、AABB标准和欧洲标准,更加经济、省时。     

公路运输对血液保存的影响

目的研究公路运输对血液保存的影响。方法依据"可靠性试验道路(引用标准GB/T12534)",在强化路(C级)、山路(D级)和越野路运输全血和悬浮红细胞4 h。运输前用无菌方式留取实验前血样5 ml,运输期间每间隔60、120、240 min以相同方式留取血样5 ml,保存期内每间隔7 d以无菌接驳方式留取血样5 ml,检测血K+、Na+、pH、游离血红蛋白(FHb)、红细胞ATP和红细胞渗透脆性。结果全血及悬浮红细胞各项指标均在质量标准允许范围。全血保存期内K+、Na+与对照组比较差异无显著性统计学意义,保存d7 FHb在质量标准允许范围内增高、d28红细胞脆性增加。与对照组比较,悬浮红细胞保存期内Na+差异无显著性统计学意义,保存d21 FHb在质量标准允许范围内增高;第1组保存35 d K+增高(P<0.01),第2、3组保存d 28 K+增高(P<0.01)、红细胞脆性增加。全血和悬浮红细胞保存35 d红细胞ATP>1.5 mol/gHb。结论经过C级、D级公路和越野路连续运输4h对全血保存无明显影响,悬浮红细胞在保存d 35时血K+含量与对照组比较差异有显著性统计学意义。     

两种制备去白细胞悬浮红细胞方法的比较

目的探索使用全血及悬浮红细胞过滤白细胞对血液质量的影响。方法使用带有软壳的白细胞滤器、ACDB方抗凝剂四联采血袋采集全血60袋,随机分为各30袋的甲、乙两组,采血后18-24h内过滤白细胞,甲组为全血过滤,乙组为悬浮红细胞过滤。白细胞过滤后24h内测定血红蛋白含量和白细胞残留量,于采血后第1周、第2周、第3周、第4周、储存期末测定红细胞溶血率。结果两组血红蛋白含量和白细胞残留量相比差异无统计学意义（P〉0.05）;两组血液储存第一周红细胞溶血率相比较无显著差异（P〉0.05）,而在第2周、第3周、第4周及储存期末红细胞溶血率差异有统计学意义（P〈0.05）,乙组红细胞溶血率显著增加。结论使用全血或悬浮红细胞过滤白细胞制备的去白细胞悬浮红细胞,血红蛋白含量及白细胞残留量均无差异,但是使用悬浮红细胞制备的去白细胞悬浮红细胞,在储存第2周之后红细胞溶血现象较为显著,所以在发往医疗机构时,应优先发出使用悬浮红细胞过滤白细胞制备的去白细胞悬浮红细胞。