何首乌提取物改善小鼠记忆及对海马c-Jun表达的干预

目的:观察何首乌提取物改善小鼠记忆的功效并分析其可能作用途径。方法:实验于2003-03/08在广东省中医院动物实验室完成。选择清洁级NIH小鼠和昆明种小鼠各60只,分别进行2项实验:①对老龄小鼠学习记忆功能(水迷宫法)及脑海马CA1区c-Jun基因表达的影响:12月龄NIH小鼠50只按随机数字表法分为5组:何首乌3个提取部位组(乙醚提取液组、乙酸乙酯提取液组、水提液组),分别给予相应何首乌提取液0.012mL/(g·d);老龄空白组给予等量生理盐水;脑复康组给予脑复康0.7g/(kg·d);另设2月龄NIH小鼠对照组(10只)给予等量生理盐水。灌胃2次/d,连续给药10d。给药同时,采用水迷宫法反映学习记忆能力,测试小鼠到达平台所需时间和误入盲端次数。并采用免疫组化方法检测小鼠海马区c-Jun蛋白表达水平。②对东莨菪碱造成记忆获得障碍的影响(跳台法):2月龄昆明小鼠60只按随机数字表法分6组:何首乌3个提取部位组、东莨菪碱模型组、脑复康组及正常对照组。何首乌3个提取部位组、脑复康组给药同上,正常对照组给药同老龄空白组。末次给药1h后,除正常对照组外,其余5组均腹腔注射东莨菪碱1mg/kg,15min后跳台法训练,以36～40V的电压为刺激源,24h后测试从铜栅跳至平台的潜伏期及错误次数。结果120只小鼠均进入结果分析,无脱失。①老龄小鼠学习记忆实验中,何首乌乙酸乙酯提取液、水提取液组小鼠到达平台时间较老龄空白组短[(30.50±7.84,30.75±11.68,43.50±12.11)s(P<0.05)]。②记忆获得障碍实验中,何首乌乙酸乙酯提取、水提取液组小鼠跳台实验潜伏期较东莨菪碱模型组明显延长,错误次数减少(P<0.01～0.05)。③何首乌乙酸乙酯提取液组、乙醚提取液组、水提液组NIH小鼠脑海马CA1区c-Jun基因表达水平显著高于老龄空白组(P<0.05)。结论:何首乌不同提取部位的提取物能减少小鼠到达平台时间,延长跳台实验潜伏期,影响脑海马区c-Jun蛋白表达可能是其改善记忆的作用途径之一。     

二苯乙烯苷对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的改善作用

背景：中药何首乌能够提高小鼠学习记忆和抗脑缺血能力，而二苯乙烯苷是何首乌的主要有效成份，具有较强的抗氧化与延缓衰老等脑保护作用。 目的：观察由东莨菪碱所致学习记忆障碍的小鼠给予二苯乙烯苷后，其学习记忆障碍的改善。 设计：随机对照实验。 单位：首都医科大学宣武医院药理研究室。材料：实验于2000—02／05在首都医科大学宣武医院药物研究中心完成。选取雄性昆明小鼠50只，随机分为5组：即正常组、模型组、阳性对照组、二苯乙烯苷0．03g／kg组、二苯乙烯苷0．1g／kg组。二苯乙烯苷为首都医科大学宣武医院药理室从中药何首乌中提取的有效成分，阳性对照药为吡拉西坦，Morris水迷宫和避暗反射箱由中国医学科学院药物研究所研制。 方法：实验前5d开始给药，正常组及模型组分别给予自来水灌胃，阳性对照组给予吡拉西坦0．7g／（kg&;#183;d），二苯乙烯苷0．03g／kg组给予二苯乙烯苷0．03g／（kg&;#183;d），二苯乙烯苷0．1g／kg组给予二苯乙烯苷0．1g／（kg&;#183;d），连续5d。第6天各组灌胃给药30min后开始造模（正常组腹腔注射等量生理盐水，其余各组均腹腔注射东莨菪碱1mg／kg），20min后进行Morris水迷宫和避暗测试。Morris水迷宫造模注射剂量为1mg／kg，避暗测试造模注射剂量为10mg／kg。 主要观察指标：①各组小鼠在Morris水迷宫中的搜索距离和时间。②各组小鼠在避暗实验中的潜伏期和电击次数。 结果：实验纳入50只小鼠，49只进入结果分析，模型组腹腔注射东莨菪碱时因腹腔出血死亡1只。①Morris水迷宫测试结果：二苯乙烯苷0．1g／kg组小鼠搜索时间及搜索距离较模型组均显著缩短[（77．814&;#177;46．492），（99．319&;#177;38．104）s；（1370．914&;#177;917．40），（1808．77&;#177;86936）cm：P均〈0．05]。②避暗反应测试结果：二苯乙烯苷0．03g/kg与0．1g/kg组小鼠的电击次数较模型组均明显减少[（0．00&;#177;0．00），（0．00&;#177;0．00），（0．8571&;#177;2.267）次，P〈0．01]，且潜伏期有延长的趋势[（300&;#177;0．00），（300&;#177;0．00），（269．71&;#177;80．128）S]。 结论：对东莨菪碱所致学习记忆障碍模型小鼠，给予二苯乙烯苷后可缩短其在Morris水迷宫中的搜索时间和搜索距离，减少避暗的错误次数，对学习记忆障碍有一定的改善作用。     

针药结合改善痴呆模型大鼠学习记忆能力的机制研究

背景：胆碱能系统与行为学研究相结合，已被广泛应用于包括中医药在内的益智和治疗老年性痴呆的研究。目的：探讨针药结合改善大鼠学习记忆能力的中枢胆碱能机制。设计：随机对照的试验研究。单位：江苏省中医院检验科，南京中医药大学第二临床医学院。材料：实验于2000-10／2001-02在南京中医药大学实验动物中心完成．50只健康9个月龄SD雄性大鼠，体质量(300&;#177;10)g。方法：将大鼠随机分为5组：空白组、模型组、尼莫地平组、针刺组及针药组。测定鼠大脑皮质乙酰胆碱酯酶活性(AchE)和乙酰胆碱(Ach)含量及跳台回避能力。主要观察指标：①跳台测试结果。②大鼠皮质的AchE活性和Ach含量。结果：东莨菪碱造模大鼠中枢胆碱能功能降低，学习、记忆错误次数增加，学习和测试错误次数空白组为1．70&;#177;0．34，0．50&;#177;0．17，模型组为3．90&;#177;0．48，2．20&;#177;0．70。针刺、针药结合可拮抗东莨菪碱诱发的学习记忆障碍(错误次数分别为2．00&;#177;0．21，0．80&;#177;0．25；1．80&;#177;0．63，0．60&;#177;0．84)，提高乙酰胆碱的含量，降低AchE和Ach两者在脑组织中的比例(AchE／Ach)，且针药结合作用更优。结论：针药结合改善学习记忆能力的机制可能与中枢胆碱能有关。     

佛甲草抗疲劳作用的动物实验

目的：观察佛甲草提取液对小鼠综合体能及其小鼠血清、肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶的影响，从而探讨该提取液的抗疲劳作用。方法：①实验于2005—04／05在赣南医学院机能实验室完成。选用昆明种小鼠100只，雌雄不拘，体质量（20&;#177;2）g。②观察佛甲草提取液（由佛甲草提取所得）对小鼠耐寒能力的影响：取雄性小鼠20只，随机分成2组：空白对照组和佛甲草实验组，每组10只。空白对照组腹腔注射生理盐水10mL／kg；佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g／kg。给药后1h，将小鼠置于-20℃低温冰箱中，记录小鼠存活时间。（④观察佛甲草提取液对小鼠耐热能力的影响：取雌性小鼠20只，随机分为2组，每组10只。空白对照组腹腔注射空白对照10mL／kg；佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g／kg。给药后1h，将小鼠置于50℃恒温箱中，记录小鼠存活时间。④观察佛甲草提取液对小鼠负重游泳时间的影响：取雄性小鼠20只，随机分为2组：空白对照组和佛甲草组，每组lO只。空白对照组腹腔注射空白对照10mL／kg；佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液5g／kg。给药后1h，小鼠按体质量的5％尾根铜丝负重，置25℃恒温水箱中，记录小鼠从入水至沉入水中不再浮出水面为止所需时间，即为小鼠游泳时间。⑤观察佛甲草提取液对小鼠血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性的影响：将其余40只小鼠随机分为4组：空白对照对照组、维生素E对照组，佛甲草低剂量组和佛甲草高剂量组，每组10只。空白对照组小鼠灌胃空白对照10mL／（kg&;#183;d）；维生素E对照组灌胃维生素E2．5g/（kg&;#183;d）；佛甲草低剂量组：灌胃佛甲草提取液5g/（kg&;#183;d）；佛甲草高剂量组：灌胃佛甲草提取液10g／（kg&;#183;d），连续14d。末次给药后2h，将各组小鼠断头取血，1500r／min，离心5min，取血清；取适量肝组织，用冰冷空白对照在冰浴中制成10％组织匀浆，4℃，3500r／min，离心10min，取上清液。均采用硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化酶法分别测定血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶的活性。⑥组间计量资料差异比较采用双侧t检验。结果：小鼠100只均进入结果分析。①耐寒存活时间：佛甲草组明显长于空白对照组【（58．30&;#177;6．88），（48．40&;#177;7．93）min，t=2．9819，P〈0．Ol】。②耐热存活时间：佛甲草组明显长于空白对照组[（35．60&;#177;6．38），（22．80&;#177;6．30）min，t=4．507，P〈0．011。③负重游泳时间：佛甲草组明显长于空白对照组【（74．10&;#177;15．47），（43．60&;#177;13．62）min，t=4．6779，P〈0．Ol】。④血清、肝组织丙二醛含量：佛甲草提取液低剂量和高剂量组明显低于空白对照组【血清：（8．41&;#177;1．45），（7．65&;#177;1．32），（10．05&;#177;1．59）μmol／L；肝组织：（334．12a&;#177;58．48），（315．13a&;#177;55．65）。（407．82&;#177;60．29）nmol／g．t=2．41,3．6923，2．7748，3．5719，P〈0．05-0．011；与维生素E的作用效果基本一致。⑤血清、肝组织超氧化物歧化酶活性：佛甲草提取液低剂量和高剂量组明显高于空白对照组【血清：（287．63&;#177;23．33），（300．86&;#177;26．35），（262．52&;#177;29．47）kNU／L；肝组织：（783．59&;#177;27．07），（810．30&;#177;38．72），（741．04&;#177;45．92）kNU／g，t=2．112，3．0672，2．5237，3．6472，P〈0．05～0．011；与维生素E的作用效果基本一致。结论：佛甲草提取液具有增强机体活力和适应能力及对抗机体疲劳的作用。     

酸性肽对血管性痴呆模型小鼠的治疗效应

背景：应用酸性肽对血管型痴呆(vascular dementia，VD)小鼠模型进行治疗研究，是否可以发现酸性肽的治疗效果。目的：研究酸性肽对血管型模型痴呆小鼠学习记忆能力和它们脑中蛋白质和一氧化氮含量的变化并与正常小鼠相比较。设计：随机对照的实验研究。单位：郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室。对象：实验于2002-10／2003-02在郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室的第一研究室和动物房进行。取昆明种小鼠84只，跳台实验低于正常小鼠平均反应时间的1只动物被排除。随机分为7组：正常组，模型组，盐水组，脑复康组，酸性肽高浓度组，酸性肽中浓度组，酸性肽低浓度组。方法：除12只正常组小鼠外，其余的动物一直用高脂乳剂0.5mL／d灌胃共10d，按照高维娟等的方法建立VD动物模型。模型组不作任何治疗，盐水组用生理盐，脑复康组应用脑复康，酸性肽高、中、低组应用不同浓度酸性肽治疗，口服给药治疗15d。之后用跳台试验进行学习记忆功能的变化测试，随后处死小鼠，测定脑中蛋白质和一氧化氮水平。主要观察指标：各组小鼠学习记忆功能和脑中蛋白质和一氧化氮水平。结果：①跳台试验的结果表明酸性肽能明显地减少痴呆小鼠跳台试验的错误次数，能显著地增加痴呆小鼠的学习记忆能力。②生化分析结果表明，模型组小鼠因脑缺血而使脑中蛋白质的含量[3．5309&;#177;0．3278)g／L]较正常组[4．0283&;#177;0．3783)g／L]减少。用酸性肽治疗痴呆小鼠后，其脑中的蛋白质含量[高，中、低浓度组分别为：(4．9083&;#177;0．5153)，(4．7525&;#177;0．4717)，(4．3767&;#177;0．3707)g／L]比模型组和生理盐水治疗组均显著增加。说明酸性肽能促进脑内蛋白合成。这有利于受损脑细胞的修复和功能恢复。③酸性肽可显著地抑制NO的合成。这将会减少一氧化氮对脑细胞的毒性作用。结论：酸性肽能显著增强VD小鼠的学习记忆能力，有利于受损脑细胞的修复和功能恢复。     

针刺预处理脑组织提取液对小鼠缺氧存活时间的影响

目的：探讨针刺预处理脑组织提取液的抗缺氧损伤作用，为针刺效应物质的探讨提供初步的实验依据。方法：大鼠肾俞、百会穴针刺后不同时间段断脑提取脑组织液，行小鼠腹腔注射，广口瓶密闭缺氧，记录小鼠缺氧存活时间。结果：生理盐水腹腔注射对小鼠标准缺氧存活时间没有影响(F=1．93，P&;gt;0．05)；大鼠正常脑组织提取液使小鼠标准缺氧存活时间[(12．0633&;#177;2．6964)min]缩短(F=143.25，P&;lt;0．05)；针刺预处理后不同时间段[预处理即时：(38．2697&;#177;3．0043）min，针刺预处理后0．5h：(49．2961&;#177;4．9740)min，针刺预处理后1h：（31．0870&;#177;3．7730）min：针刺预处理后2h：(26．4465&;#177;3．4972）min]脑组织提取液均可使小鼠标准缺氧存活时间明显延长(F=143．25，P&;lt;0.05)，且呈现明显的时间变化规律，针刺预处理后0．5h脑组织提取液效果最好，使小鼠标准缺氧存活时间延长至(49．2961&;#177;4．9740)min(是空白组的2．3倍）。结论：针刺预处理脑组织提取液可提高机体的缺氧耐受能力，具有抗缺氧损伤作用。     

马齿苋乙醇提取物对小鼠常压耐缺氧能力的影响

目的：观察码齿苋乙醇提取物对小鼠常压耐缺氧作用的影响，分析马齿苋的药用价值。 方法：实验于2005-11/12在延边大学基础医学院机能学实验中心完成。①马齿苋乙醇提取物制备：称取马齿苋干草600g粉碎，用何种分数为0.8的乙醇在水浴中回流提取2次，各用10倍量与8倍量乙醇提取2h和1h,过滤，合并滤液浓缩，干燥成粉末，临用前配制成所需浓度。②取43只健康雌雄昆明种小鼠按随机表法分为5组：空白对照组9只，0.5g/kg组9只，1g/kg组8只），分别灌胃给予蒸馏水、地奥心血康（0.19g/kg）和马齿苋乙醇提取物0.25，0.5，1g/kg。1次/d，连续给药10d。③观察小鼠的缺氧惊厥时间、缺氧存活时间及耗氧量的变化。结果：43只小鼠进入结果分析。①各组小鼠缺氧惊厥时间和存活时间：与空白组比较，马齿苋 0．5g/kg组能明显延长小鼠缺氧惊厥时间（13．03&;#177;2．04）．（15．30&;#177;1．55）min．P＜0.05）；与空白组比较，阳性对照药组和马齿苋0．5、1g／kg组．能明显延长小鼠缺氧存活时间（13．85&;#177;1．89）．（15．77&;#177;1．75）．（16．05&;#177;1．65）．（15．77．&;#177;l75）min．P＜0．05），②各组小鼠死亡时的总耗氧量及不同时间的小鼠仔活率：与空白组比较，阳性对照药组和马齿苋乙醇提取物0．25，0．5，1g/kg组能增加缺氧小鼠在15min时的存活率（33％，63％，44％，67％，75％）；阳性对照药纽和不同剂量马齿苋组乙醇提取物组小阻存活期总耗氧鼙均无明显改变。③各组小鼠各时间段耗氧量及不同时间的累计耗氧量：与空白组比较，阳性对照组和马齿苋乙醇提取物组0．5g／kg组能明显降低前5min小鼠的耗氧量（10．16&;#177;0．75），（9．09&;#177;0．92），（9．30&;#177;0．67）mL．P＜0．05），而对10min和15rain的累计耗量无明显影响。阳性组和马齿苋乙醇提取物组0．5g／kg组能明显降低0～5min时间段的耗氧量，而5～10min和10～15min时间段的耗氧量则高于空白组。 结论：马齿苋乙醇提取物可以明显提高小鼠的常压耐缺氧能力。     

祁州漏芦乙醇提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响

背景：脂质过氧化损害可导致学习记忆障碍，而漏芦能抑制脂质过氧化，具有提高细胞免疫功能、抗自由基过氧化等作用。目的：通过脑组织中过氧化脂质及脂褐质含量的变化，探讨漏芦乙醇提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响。设计：随机对照实验。单位：沈阳药科大学药学院药理教研室，中凶医科大学第一临床学院中医教研室，沈阳药科大学中药学院天然药化教研室。材料：实验于1994-02／10在沈阳药科大学药学院药理教研室完成。选取清洁级昆明种小鼠185只，随机分成7组：漏芦乙醇提取物3．125g／（kg&;#183;d）组30只、漏芦乙醇提取物1．56g／（kg&;#183;d）组30只、漏芦乙醇提取物0．78g／（kg&;#183;d）组30只、漏芦乙醇提取物0．39g／（kg&;#183;d）组15只、吡拉西坦组15只、空白对照组30只、模型组35只、方法：漏芦乙醇提取物3．125，1．56，0．78，0.39g／（kg&;#183;d）组分别灌服漏芦乙醇提取物3．125，1．56，0．78，0．39g／（kg&;#183;d），吡拉西坦组灌服吡拉西坦0．2g/（kg&;#183;d），空白对照组和模型组分别灌服同容积蒸馏水.除空白对照组外，其余各组小鼠每天均皮下注射50g／1．D-半乳糖0．5mL／只，连续40d，建立小鼠衰老模型：40d后，采用跳台法及避暗法测定各组小鼠的学习记忆能力。主要观察指标：①各组小鼠在跳台法检测中的错误次数。②各组小鼠在避暗法检测中的错误次数及潜伏期的变化。③各组小鼠脑组织过氧化脂质及脂褐质含量生成的比较：结果：实验纳入小鼠185只，共169只进入结果分析。①各组小鼠在跳台法检测中的错误次数：与模型组比较，漏芦乙醇提取物3125，1．56，0．78g／（kg&;#183;d）组均明显减少[（1．68&;#177;125），（0．92&;#177;0．73），（0．78&;#177;0．79），（0．97&;#177;0．67）次，P〈0．01，P〈0．001，P〈0．01]．②各组小鼠在避暗法检测中的错误次数及潜伏期的变化：与模型组比较，漏芦乙醇提取物3．125，1．56，0．78g／（kg&;#183;d）组均明显减少（P〈0．05或0．01）；H潜伏期均有所延长（P〈0．05或0．01）。⑧各组小鼠腩组织过氧化脂质及脂褐质含量生成的比较：与模型组比较，漏芦乙醇提取物3．125，1．56，0．78g／（kg&;#183;d）组均明显减少（P〈0．05或0．01）结论：漏芦乙醇提取物具有抗衰益智作用，其抗自由基过氧化，减少脑组织中过氧化脂质及脂褐质生成可能与其改善记忆障碍作用有关。     

苯妥英钠对脑缺血再灌注小鼠学习记忆功能的保护作用

目的 探讨苯妥英钠对脑缺血再灌注小鼠学习记功能保护作用的作用机制，为苯妥英钠用于脑缺血缺氧的治疗提供理论依据。方法 采用清醒小鼠脑缺血再灌注手术方法，应用跳台法和避暗法，脑海马CA1区神经细胞计数等方法研究苯妥英钠对小鼠脑缺血再灌注行为学、脑病理形态学的影响。结果 脑缺血再灌注组（模型组）小鼠错误次数明显增多：3.2&;#177;1.1（跳台）、8.4&;#177;3.2（避暗）；逃避潜伏期（EL）延长；（37.5&;#177;15.0）s，出现明显的学习记忆功能障碍并使脑海马CA1区神经细胞数明显减少70&;#177;6神经细胞数（个/2mm^2）；苯妥英钠可较好地改善脑缺血再灌注致学习记忆障碍小鼠的学习记忆功能，错误次数减少：1.0&;#177;0.5(跳台），2.5&;#177;1.7（避暗）；EL缩短：（6.7&;#177;1.9)s且使脑海马CA1区神经细胞数明显增加：76&;#177;6神经细胞数（个/2mm^2）。结论 苯妥英钠对脑缺血再灌注小鼠的学习记忆障碍有明显的改善作用，其作用机制可能与保护小鼠脑海马CA1区神经细胞有关。     

何首乌提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察何首乌提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注后超氧化物歧化酶活性、丙二醛及一氧化氮含量的影响，探讨其对脑损伤的保护作用。方法：实验于2003—04／05在山东大学医学院实验室完成。40只Wistar雄性大鼠随机分为4组：假手术组、缺血组、20mg／kg何首乌组和40mg／kg何首乌组，每组10只。制造人鼠火脑中动脉缺血再灌沌模型。20mg／kg何首乌组和40mg／kg何首乌组于缺血前30min及缺血后1h分别给予何首乌提取物20mg／kg、40mg／kg腹腔内注射。各组大鼠于再灌注后24h检测脑缺血组织超氧化物歧化酶活件、丙二醛和一氧化氮含量。结果：40只大鼠均进入结果分析。①超氧化物歧化酶活性：20mg／kg何首乌组、40mg／kg何首乌组明显高于缺血组[（85．1&;#177;10．2），（103．2&;#177;12、9），（62．8&;#177;8．7）NU／mg，P〈0．01]，高剂量组高于低剂量组（P〈0．05）。②丙二醛和一氧化氮含量：20mg／kg何首乌组、40mg／kg何首乌组明显低于缺血组[丙二醛含量：（6．58&;#177;0．62），（5．41&;#177;0．58），（9．24&;#177;0．88）μmol／g，P〈0．01；一氧化氮含量：（5183&;#177;0．77），（4．71&;#177;0．59），（7．65&;#177;0．86）mmol／g，P〈0．011，高剂量组高于低剂量组（P〈0．05）。结论：①何首乌提取物可抑制脑缺血再灌注损伤后超氧化物歧化酶活性的下降及丙二醛、一氧化氮含量的升高，表明何首乌提取物可以清除体内过多的氧自由基，对脑缺血再灌注损伤起保护作用。②何首乌提取物的疗效与剂昔有关．高剂量的疗效明显好于低剂量．     

血管内皮细胞生长因子基因体外转染小鼠NIH3T3细胞的生物活性

目的：用基因工程方法改造成纤维细胞，使其分泌血管内皮细胞生长因子，观察成纤维细胞作为基因转染的靶细胞的可行性。 方法：实验于2005-11在解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所完成。PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒的扩增、提取、纯化和鉴定后，将培养14d细胞融合约80％的小鼠NIH3T3细胞在24孔板中进行转染，细胞随机分为3组，每组10孔，分别为PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染组．空质粒转染组和不转染质粒组。采用免疫组织化学化学检测血管内皮细胞生长因子表达。ELISA方法检测血管内皮细胞生长因子外分泌。四甲基偶氮唑盐法检测小鼠NIH3T3细胞对PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染的敏感性。 结果：①PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒的基因测序结果显示序列正确。②免疫组织化学染色显示：小鼠NIH3T3细胞转染4d后胞浆内可观察到阳性表达产物，对照组呈阴性结果。③ELISA检测结果：小鼠NIH3T3细胞转染14d后，PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染组、空质粒转染组和不转染质粒组3组培养上清中血管内皮细胞生长因子浓度分别346&;#177;23，0，0ng／L（P〈0．05）。④四甲基偶氮唑盐法检测结果：PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染组、空质粒转染组和不转染质粒组所测的490nm的A值比较差异均无显著性（依次为0．96&;#177;0.11，0．91&;#177;0．10，0．98&;#177;0．16，P〉0．05）。PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染对小鼠NIH3T3细胞增殖无影响。 结论：小鼠NIH3T3细胞可作为血管内皮细胞生长因子基因转染的靶细胞，用于基因治疗。     

羊睾丸提取液对小鼠受损睾丸支持细胞一氧化氮合酶活性的影响

背景：大量研究证明，一氧化氮合酶／一氧化氮不仅对维持睾丸支持细胞正常功能起重要作用，而且影响精子的发生、活动及受精能力。目的：观察羊睾丸提取液对重金属铅致损小鼠睾丸支持细胞一氧化氮合酶活性的影响。设计：随机对照动物实验。单位：吉林医药学院组织胚胎学教研室。材料：实验于2004—03／2005—08在吉林医药学院组织胚胎学实验室（解放军总后勤部重点实验室）完成。选用健康昆明种雄性小鼠30只，按随机数字表法分为3组，即对照组、睾丸损伤模型组和羊睾丸提取液组，每组10只。方法：睾丸损伤模型组和羊睾丸提取液组小鼠给予100g／L醋酸铅0．2mL／（只&;#183;d），5次／周，连续2周，停药1周。羊睾丸提取液组同时腹部皮下注射羊睾丸提取液0．5mL／（只&;#183;d）。对照组给予与实验组溶剂等量的重蒸馏水。染毒期满禁食12h后，称体质量后断头处死，解剖取出双侧睾丸，立即称质量，甲醛固定后切片，应用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸一黄递酶组织化学方法结合显微图像分析，观察各组小鼠睾丸支持细胞的一氧化氮合酶活性变化。主要观察指标：染毒期满后各组小鼠的体质量、双侧睾丸质量及睾丸支持细胞一氧化氮合酶吸光度值。结果：30只小鼠全部进入结果分析，无脱失。（D染毒期满后羊睾丸提取液组小鼠的体质量、双侧睾丸质量及一氧化氮合酶A值均显著高于睾丸损伤模型组[（22.47&;#177;3．49）g，（0．113&;#177;0．021）g，0.236&;#177;0．020；（19．13&;#177;3.46）g，（0．089&;#177;0．017）g，0．146&;#177;0．023（t=2．151～3．314，P〈0．05～0．01）]。②睾丸损伤模型组睾丸一氧化氮合酶阳性支持细胞肿胀变性；羊睾丸提取液组的一氧化氮合酶阳性支持细胞形态接近对照组。结论：羊睾丸提取液可以提高重金属铅致损小鼠睾丸支持细胞的一氧化氮合酶活性，对睾丸损伤有一定的修复和保护作用，可为临床治疗男性不育提供新思路。     

扶正排毒片对氢化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能的调节

目的：观察扶正排毒片对氢化可的松所致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响，探讨扶正排毒片的益气滋阴，清热解毒的功效。 方法：实验于2005-02／10在河南中医学院动物实验中心完成。实验分为3批，每批选用小鼠60只，随机数字表法分为6组，每组10只，其中5组皮下注射氢化可的松制备免疫抑制小鼠模型。于造模第1天，高、中、低剂量扶正排毒片组分别灌服0．15，0．10，0．05g／mL扶正排毒片（主要由西洋参64．0g，黄芪160．0g，连翘106．7g，白花蛇舌草160．0g，甘草64．0g等药组成，河南中医学院第三附属医院）混悬液（200mL／kg），香菇多糖片组灌服5g/L香菇多糖片混悬液（200mL／kg），模型组灌服同体积的生理盐水。另有一组为空白对照组，每鼠仅灌服同体积的生理盐水。每天给药1次，连续给药7d。①实验1：第1批小鼠于第7天早上每鼠均腹腔注射5％鸡红细胞液0．5mL，于给鸡红细胞2h后给药，给药后2h，即给鸡红细胞后4h处死小鼠，脱颈椎处死小鼠。观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬情况。（④实验2：第2批小鼠于给药第l天每鼠腹腔注射5％鸡红细胞液0．2mL，于最后一次给药后2h，小鼠眼眶取血，分离血清。取上清液于UV-2000型分光光度计540nm处比色。处死小鼠后，取脾细胞混悬液，取上清液于UV-2000型分光光度计413nm处比色。观察溶血素形成和空斑形成细胞情况。③实验3：第3批小鼠于给药第1，2，3天每鼠加肌注0．8g／L植物血凝素（8mg／kg），于最后一次给药后2h，小鼠剪尾取血，推片，瑞氏染色，油镜观察，计算外周血淋巴细胞转化百分率。 结果：纳入小鼠180只，均进入结果分析。①实验1：高、中、低剂量扶正排毒片组和香菇多糖片组腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数高于模型组[分别为（52．8&;#177;7．6）％，（55．6&;#177;7．2）％，（45．9&;#177;7．1）％，（48．7&;#177;8．3）％，（35．3&;#177;7．1）％，P＜0．01：0．82&;#177;0．08，0．84&;#177;0．07，0．66&;#177;0．10，0．67&;#177;0．11，0．55&;#177;0．10，P＜0．05，0．011。②实验2：高、中、低剂量扶正排毒片组和香菇多糖片组小鼠溶血素形成和空斑形成细胞（A）高于模型组（分别为0．120&;#177;0．015．0．131&;#177;0．019，0．101&;#177;0．017，0．104&;#177;0．018，0．063&;#177;0．020；0．446&;#177;0．047．0．498&;#177;0．016，0．383&;#177;0．060，0．387&;#177;0．064，0．221&;#177;0．061，p＜0．01）。③实验3：高、中、低剂量扶正排毒片组和香菇多糖片组小鼠外周血淋巴细胞转化率高于模型组[分别为（60．9&;#177;5．0）％，（54.8&;#177;6．7）％，（49．3&;#177;5．9）％，（51．9&;#177;10．4）％，（32．5&;#177;4．5）％，P＜0．011。 结论：扶正排毒片可显著促进氢化可的松所致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，显著促进溶血素形成和空斑形成细胞，显著促进外周血淋巴细胞转化。     

天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能的影响

背景：药物治疗早、中期阿尔茨海默病患者已证实有一定的疗效，可延缓其进展。 目的：观察天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能的影响。 设计：随机对照实验。 单位：深圳市中西医结合研究所。 材料：实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成。实验动物为昆明种小鼠。 方法：从21个月龄昆明种小鼠筛选出自发阿尔茨海默病（记忆障碍）鼠52只，随机分为4组即老年痴呆组、西药对照组、天泰1号6．80g/kg组、天泰1号20．41g／kg组，另设13只老年学习记忆正常鼠为老年正常组。西药对照组给以Hydergine 0．6mg/kg，天泰1号6．80g/kg，20．41g／kg组分别予正交优化的天泰1号方6．80g／kg及20．41g／kg，以上均研配成0．5mL液体灌胃给药，连续60d，老年正常组和老年痴呆组均灌以等量双蒸水。用跳台实验检测学习记忆成绩，比较各组的学习错误次数、记忆错误次数、学习训练逃避潜伏期和记忆测试安全平台潜伏期。 主要观察指标：天泰1号对自发性老年痴呆鼠学习记忆的改善作用。 结果：实验过程中实验动物无脱失，均进入结果分析。天泰1号6．80g/kg组，20．41g/kg组的学习、记忆错误次数均小于老年痴呆组（5．08&;#177;2．18，3．77&;#177;1．48，931&;#177;3．65；1．85&;#177;1.221，1.54&;#177;0．88，4.27&;#177;9.58），且天泰1号6．80g/kg组的学习、记忆错误次数多于天泰1号20．41g/kg组；天泰1号6．80g/kg组，20．41g／kg组的学习训练逃避潜伏期小于老年痴呆组，记忆测试安全平台潜伏期大于老年痴呆组[（18．9&;#177;7．5），（19．9&;#177;5．9），（33．7&;#177;9．3）s；（91．7&;#177;32．0），（101．5&;#177;40．9），（43．6&;#177;20．7）s]，且天泰1号6．80g/kg组的学习、记忆测试安全平台潜伏期小于天泰1号20．41g/kg组。 结论：自发阿尔茨海默病模型小鼠有明显的智能行为障碍，天泰1号可显著改善其学习记忆障碍，其作用呈现一定的量效相美美系．     

D-半乳糖拟衰老模型大鼠的神经递质受体机制

目的：探讨神经递质受体在D-半乳糖拟衰老模型大鼠发生中的作用。 方法：选取3月龄Wistar大鼠40只，随机分为对照组20只、D-半乳糖组20只，每组动物雌雄各半。同期选取18～36月龄雌性非洲爪蟾（购自中国科学院发育所）20只为自然衰老组。对照组大鼠每日于颈背部皮下注射生理盐水，D-半乳糖组每日颈背部皮下注射D-半乳糖50mg／（kg&;#183;d），两组给药体积均为10mL／kg，连续给药6周。采用Morris水迷宫方法检测每只大鼠到安全岛的平均时间。各组大鼠Morris迷宫测定后快速断头取全脑，提取RNA。采用显微注射法，将所提取的RNA注射于成熟的爪蟾卵母细胞中，采用电压钳位方法记录表达到非洲爪蟾卵母细胞膜上的神经递质受体通道电流。 结果：①脑组织总RNA含量：D-半乳糖组、自然衰老组和正常对照组比较差异无显著性意义（650．1&;#177;51．7，632．0&;#177;45．1，640．5&;#177;49．3，P〉0．05）。②Morris迷宫检测：D-半乳糖组和自然衰老组的潜伏期明显比正常对照组延长[（23．1&;#177;6．4）S，（20．7&;#177;6．8）S，（15．4&;#177;5．3）S，P〈0．01]。③脑神经递质受体峰电流检测：D-半乳糖和自然衰老组的乙酰胆碱明显低于正常对照组[（106．0&;#177;23．9），（90．9&;#177;14．1），（138．0&;#177;29．0）nA，P〈0．011；D-半乳糖和自然衰老组的5-羟色胺明显低于正常对照组[（113．6&;#177;29．6，91．4&;#177;14．2，172．5&;#177;23．5）nA。P〈0．05）。 结论：D-半乳糖拟衰老大鼠和老龄组大鼠脑功能的衰退与其脑神经递质受体功能障碍有关。     

L-苹果酸对急性铝中毒小鼠脑组织形态及记忆功能的保护作用

目的：建立小鼠急性铝中毒模型并观察L-苹果酸对记忆功能及脑组织形态的保护作用。方法：采用脑室注射氯化铝(AlCl3)的方法造成小鼠急性铝中毒模型，学习记忆功能的检测采用跳台法，病理切片检查海马组织的损伤。结果：与对照组(0．50&;#177;0．92)次相比，模型组小鼠跳台训练的错误次数(6．50&;#177;7．76)次明显增加(t=2．979，P&;lt;0．05)，海马组织有大量的神经元细胞发生水变性，核固缩，并可见神经元的坏死和噬神经细胞现象，呈筛孔状。与模型组(6．50&;#177;7．76)次比较；L-苹果酸低剂量组错误次数(1．25&;#177;2．09)次明显减少(t=2．266，P&;lt;0．05)，海马组织多见正常神经元。结论：小鼠脑室注射AlCl3可造成明显的记忆功能损害及海马组织的神经元损伤；而L-苹果酸对急性铝中毒小鼠脑组织形态及记忆功能均有明显的保护作用。     

益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆获得障碍大鼠的干预效应

目的：观察益智仁水提取物对东莨菪碱所致大鼠记忆获得障碍的改善效果。方法：实验于2005—03／04在大连大学医学院动物室和神经科学实验室完成。选择健康成年Sprague—Dawley纯种大鼠50只，在温度为（22&;#177;3）℃的环境中适应两天后，随机数字表法分成对照组、模型组、益智仁低剂量组（120mg／kg）、益智仁中剂量组（240mg／kg）、益智仁高剂量组（480mg／kg）．每组10只，雌雄各半。益智仁低、中、高剂量组，每天分别灌胃120mg／kg、240mg／kg、480mg／kg益智仁水提取物，对照组和模型组灌胃等量的生理盐水，连续给药21d。末次给药后1h采用Y迷宫进行学习记忆行为训练，训练前15min模型组及益智仁低、中、高剂量组腹腔注射东莨菪碱1mg／kg，对照组腹腔注射等体积生理盐水，每只动物每天训练20次，连续训练7d，以正确反应率达到90％作为学会的标准，并记录各组的训练次数（达到学会标准所需的次数）。行为实验结束后，立即麻醉后断头处死大鼠，在冰块上快速分离双侧海马，准确称重，按重量体积比加9倍生理盐水制成10％脑组织匀浆，2000r／min离心10min，采用乙酰胆碱酯酶测定试剂盒测定乙酰胆碱酯酶活性，采用双缩脲蛋白测定试剂盒测定海马脑蛋白含量，主要观察Y迷宫行为实验各组大鼠达标所需的训练次数、海马乙酰胆碱酯酶活力及海马脑蛋白含量。数据以x^-&;#177;s表示，组间比较采用t检验。结果：各实验组大鼠全部进入结果分析。①益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠学习记忆能力的影响：益智仁低、中、高剂量组达标所需训练次数显著低于模型组[（58．6&;#177;15．0，55．0&;#177;13．8，67．6&;#177;8．7）次，（136．3&;#177;16．8）次，（P〈0．01）]，模型组大鼠达标所需训练次数显著高于对照组（P〈0．01）。②益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马乙酰胆碱酯酶活力的影响：益智仁低剂量组和中剂量组海马乙酰胆碱酯酶活力显著低于模型组[（28．5&;#177;9.3，22．2&;#177;7．2）μkat／g，（47．2&;#177;18．8）μkat／g，（P〈0．05）]；模型组海马乙酰胆碱酯酶活力显著高于对照组（P〈0．05）。③益智仁水提取物对东莨菪碱所致记忆障碍大鼠海马脑蛋白含量的影响：与模型组相比，益智仁低剂量组、中剂量组脑蛋白含量显著增高（P〈0．05）；与对照组相比，模型组大鼠海马脑蛋白含量显著降低（P〈0．05）。结论：益智仁水提取物抑制乙酰胆碱酯酶活性，减少乙酰胆碱分解，提高海马脑蛋白含量，对东莨菪碱所致记忆获得障碍具有显著的改善作用。     

额叶损伤对意识及无意识记忆的影响

目的：采用Jacoby提出的加工分离程序为实验方法，以具体图形和抽象图形为实验材料，分析额叶损伤对意识、无意识记忆的影响。 方法：于2004-06／2005-12在济宁医学院附属医院、济宁医学院第一教学医院和山东大学第二附属医院选取16例额叶损伤患者（额叶损伤组）和20例正常人（正常组）进行对照研究，采用Jacoby的加工分离程序，对意识性提取成绩和无意识提取成绩进行分离，同时选用两种图形材料（具体图形和抽象图形）对知觉启动和语义启动进行分离。 结果：16例额叶损伤患者和20例正常人均进入结果分析。（1）两种实验材料（具体图形和抽象图形）的实验结果均显示，额叶损伤组的意识性提取成绩明显低于正常组（具体图形：0．531&;#177;0．175，0.825&;#177;0．130；抽象图形：0．288&;#177;0．201，0．590&;#177;0．185）。差异有统计学意义（P=0．001和P=0．004）。（2）额叶损伤组的知觉启动成绩也明显低于正常组（0．325&;#177;0．140，0．544&;#177;0．121），差异有统计学意义（P=0．003）；而额叶损伤组的语义启动成绩与正常组比较，差异无统计学意义（0．740&;#177;0.116，0．850&;#177;0．188，P=0．167）。 结论：额叶损伤易导致意识记忆损伤和无意识记忆的知觉启动损伤，而对无意识记忆的语义启动无影响。语义启动的存在可以帮助额叶损伤患者部分填补其由于意识记忆和知觉启动丧失所造成的记忆功能的损害，这一发现对记忆康复工作具有良好的促进作用。     

枸杞多糖对染铅小鼠学习记忆的影响

目的：探讨染铅小鼠灌服枸杞多糖后学习记忆的变化。方法：实验于2004—02／05在暨南大学药学院实验技术中心完成。选择健康6周龄昆明种小鼠50只，分为5组，即空白对照组，染铅模型组及枸杞多糖3．6g／kg，1．8g／kg，0．9g／kg组，每组10只。将醋酸铅溶于蒸馏水中按40mg／kg腹腔注射于染铅模型组及枸杞多糖组。枸杞多糖3个剂量组分别灌胃3．6，1．8，及0．9g／kg的枸杞多糖，其余两组灌服等量生理盐水，连续给药6周。笫7周采用Morris水迷宫（RB-100B圆型水迷宫）实验观察动物学习记忆变化情况，以连续8次训练中7次未超过15s找到避难台为训练达标。于训练1h后和1周后分别进行5次测试，记录每次到达避难台所需时间。第8周取小鼠血和股骨测血铅和骨铅含量。结果：50只小鼠全部进入结果分析。①小鼠血铅含量：模型对照组显著高于空白对照组[（1．70&;#177;0．01）mg／kg，（0．06&;#177;0．01）mg／kg，（t=366．7，P〈0．01）1。枸杞多糖1．8g,／kg，3．6g／kg组显著低于模型对照组[（0．30&;#177;0.23）mg/kg，（0．09&;#177;0．15）mg／kg，（t=19．32，33，87，P〈0．05）]。②小鼠骨铅含量：模型对照组显著高于空白对照组[（175．7&;#177;98．9）mg／kg，（1．4&;#177;0．9）mg／kg，（担19．06，P〈0．01）]。枸杞多糖0．9g／kg，1．8g／kg，3．6g／kg组均显著低于模型对照组[（153.5&;#177;993）mg／kg，（132．9&;#177;28．5）mg／kg，（122．8&;#177;19．6）mg／kg，（t=1．71—3．33，P〈0．05）1。③小鼠到避难台的时间：枸杞多糖不同剂量组均较模型对照组缩短，其中3．6g／kg组小鼠1h后到避难台的时间显著短于模型对照组[（28．2&;#177;13．6）s，（39．1&;#177;18．2）8，（t=1．80，P〈0．05）]。结论：枸杞多糖能有效促进染铅小鼠体内铅排除，改善铅对小鼠学习记忆的损害作用。可推测其改善记忆作用与枸杞多糖降低小鼠体内铅含量有关。     

骨质疏松症大鼠白细胞介素6、骨钙素和骨碱性磷酸酶的表达特征

背景：白细胞介素6、骨钙素和骨碱性磷酸酶均参与骨代谢过程，其与骨质疏松的发生有相关性。 目的：观察白细胞介素6、骨钙素和骨碱性磷酸酶在骨质疏松大鼠中的表达特征。 设计：随机分组观察对比实验。 单位：深圳市人民医院（暨南大学医学院第二附属医院）骨科。 材料：实验于2002—01／2003-01在深圳市人民医院动物实验室及中心实验室完成。6月龄雌性SD大鼠60只，平均体质量250g，随机分为3组：去势组，对照组，空白组，每组20只。方法：去势组手术切除大鼠双侧卵巢建立骨质疏松动物模型；对照组开腹后将卵巢提出腹腔后还纳关腹；空白组不行任何处理。分别于术后2，3，4，5，6个月后每组随机抽出大鼠4只，进行骨密度、骨钙素、白细胞介素6及碱性磷酸酶检测。 主要观察指标：大鼠全身骨密度、血清骨钙素、血清白细胞介素6及血清骨碱性磷酸酶变化。 结果：60只大鼠均进入结果分析。①大鼠骨密度测量结果：4，5，6个月去势组骨密度较对照组和空白组明显下降[4个月：（0．1395&;#177;0．0078），（0．147&;#177;0．0008），（0．1459&;#177;0．0029）g／cm^2．5个月：（0．1379&;#177;0．0009）．（0．1456&;#177;0．0008），（0．1447&;#177;0．0005）g／cm^2，6个月：（0．1226&;#177;0．0004）．（0．1450&;#177;0．0021），（0．1440&;#177;0．0009）g／cm^2，P〈0．05或〈0．011。②大鼠血清骨钙素测量结果：4个月后去势组骨钙素显著高于对照组与空白组（P〉0．05）。③大鼠白细胞介素6检测结果：各时间点去势组白细胞介素6均显著高对照组与空白组（P〉0．05）④大鼠血清骨碱性磷酸酶：4，5，6个月去势组骨碱性磷酸酶显著高于对照组与空白组[（2026&;#177;4）比（1247&;#177;12），（1291&;#177;7）nkat／L，（2342&;#177;9）比（1273&;#177;18），（1342&;#177;12）nkat／L．（2633&;#177;15）比（1340&;#177;9），（1357&;#177;8）nkat／L，P〈0．05] 结论：在骨质疏松症大鼠中骨密度显著降低，白细胞介素6、骨钙素和骨碱性磷酸酶在骨质疏松症大鼠中有显著表达，可作为骨质疏松症的诊断及筛查指标。