hTERT基因沉默对乳腺癌细胞生物学特性及COX-2表达的影响

目的本研究探讨hTERT基因沉默后对乳腺癌细胞生物学特性及环氧化酶-2(COX-2)的影响。方法设计合成特异性针对hTERT mRNA的siRNA,电转染入乳腺癌细胞,以致目的基因沉默。应用RT-PCR及Western blot法检测沉默hTERT基因后乳腺癌MCF-7细胞的mRNA及蛋白的表达状况;应用流式细胞仪检测细胞周期;并通过CCK-8增殖实验检测沉默hTERT基因后乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力;经小室侵袭实验检测沉默hTERT基因后乳腺癌MCF-7细胞的侵袭能力。利用免疫组织化学法检测COX-2蛋白的表达。结果 hTERT基因沉默48h后,hTERT转染组在沉默hTERT基因后乳腺癌MCF-7细胞的mRNA及蛋白表达呈现明显降低(P0.05);细胞周期检测结果示乳腺癌MCF-7肿瘤干细胞停滞在G0/G1周期,S期的细胞数目减低,三组比较统计学差异明显(P0.05);CCK-8增殖实验结果表明乳腺癌MCF-7肿瘤干细胞在hTERT转染组的增殖得到显著抑制(P0.05);小室侵袭实验结果表明,hTERT转染组穿过滤膜的细胞数量明显减少(P0.05);免疫组织化学法检测结果显示,COX-2蛋白在hTERT转染组的表达明显降低,并与hTERT基因的表达相关联。结论 hTERT基因沉默后对乳腺癌细胞的增值和迁移能力均有影响,并能降低COX-2蛋白的表达,从而改善乳腺癌患者预后。     

敲除成纤维细胞生长因子2基因抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移侵袭并促进细胞凋亡

目的 探索成纤维细胞生长因子2(FGF2)敲除对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法 将FGF2-sgRNA基因序列转入载体lenticrispv2构建CRISPR-cas9-FGF2稳转细胞系，Western blot检测CRISPR-cas9-FGF2稳转细胞系FGF2的蛋白敲除情况及相关凋亡蛋白指标和周期蛋白指标，将MCF-7细胞分为CRISPR-cas9-NC组（对照组）和CRISPR-cas9-FGF2组（FGF2基因敲除组），使用CCK-8实验和细胞集落形成实验检测细胞增殖能力，细胞划痕实验和transwell实验检测细胞迁移侵袭能力，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 （1）设计的三条FGF2-sgRNA序列均与载体lenticrispv2连接成功。（2）用Western blot检测表明FGF2-sgRNA1敲除作用更明显（P <0.000 1）。（3）与对照组细胞相比，FGF2基因敲除组细胞的增殖、迁移侵袭能力明显降低（P <0.01）；周期蛋白CDK2和cyclinA蛋白表达显著降低（P <0.001）,Bax促凋亡蛋...     

RhoE小干扰RNA对乳腺癌细胞恶性表型的影响

目的　观察下调 Ras 同源类似物 E (RhoE) 表达对人乳腺癌细胞 231 生物学行为的影响。 方法　Western blot 技术检测小干扰 RNA（siRNA）转染前后 RhoE 在乳腺癌细胞 231 中的表达;RhoE siRNA 的细胞转染用 lipofectamine 2000 脂质体法;Cell Counting Kit-8 检测转染细胞及对照细胞的增殖变化;损伤刮擦试验和体外侵袭实验（Transwell 小室）分别检测转染细胞及对照细胞的迁移与侵袭能力。 结果　RhoE 在乳腺癌细胞 231 中的表达较高;成功转染 RhoE siRNA 的乳腺癌细胞,Western blot 显示 RhoE 的表达被明显的抑制;RhoE 的表达被抑制后对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭有着明显的促进作用。 结论　下调 RhoE 表达能够明显促进乳腺癌细胞的增殖﹑迁移和侵袭,提示 RhoE 可能在乳腺癌的发生发展中起着重要作用。     

Hsa-miR-145对人三阴性乳腺癌细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨Hsa-miR-145对人三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并初步分析其影响三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的可能机制.方法 运用脂质体介导的转染方法将miR-145阻遏物(miR-145 inhibitors)转染人三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,以inhibitor negative control(inhibitor NC)作为阴性对照,通过MTT法和Transwell侵袭实验检测细胞的增殖能力和侵袭力;采用Transwell迁移实验及划痕试验检测细胞的迁移能力;利用生物信息学方法预测miR-145的靶基因,并对其靶基因进行基因功能分析.结果 (1)miR-145 inhibitors组细胞增殖活性明显高于inhibitor NC组(P<0.05);(2)划痕后miR-145 inhibitors组细胞迁移能力比inhibitor NC组明显增强(P<0.05);(3)Transwell侵袭及迁移实验均显示转染miR-145 inhibitors后,MDA-MB-231细胞的侵袭及迁移能力明显增强(P<0.01,P<0.05);(4)生物信息学方法预测miR-145的靶基因中,部分发挥了促进细胞增殖、侵袭及迁移的生物学功能.结论 (1)miR-145对人三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力可能存在负性调控作用;(2)miR-145可能通过多种靶基因发挥其对肿瘤的调控作用.     

沉默环磷腺苷效应元件结合蛋白1对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的：探究环磷腺苷效应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein, CREB1）基因沉默对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法：针对人CREB1的基因序列设计并构建2条短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA），采用慢病毒转染shRNA至人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞系抑制其CREB1的表达。将实验组分为shCREB1#1组和shCREB1#2组，同时将shSCR空载质粒转染至上述细胞系作为阴性对照组。采用实时定量PCR和Western-blot法检测转染效率；CCK-8法检测细胞的增殖能力；集落形成实验检测细胞的集落形成能力；流式细胞术检测细胞周期和凋亡率；细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力；Western-blot法检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果： 在MCF-7和MDA-MB-231细胞中，相较于shSCR组，shCREB1#1和shCREB1#2组中CREB1基因的mRNA和蛋白表达水平均下降（P＜0.001）。沉默CREB1后，MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖能力、集落形成能力、迁移和侵袭能力减弱且细胞的凋亡率升高（P＜0.05）。此外，沉默CREB1可使细胞周期蛋白CDK2、CDK4、CDK6、Cyclin D1以及抗凋亡蛋白Bcl-2、Survivin的表达水平下调而促凋亡蛋白Caspase 3和Bax的表达水平上调。 结论：沉默CREB1可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力并诱导细胞凋亡。     

Ras同源类似物小干扰RNA对乳腺癌细胞恶性表型的影响

目的观察下调Ras同源类似物E(RhoE)表达对人乳腺癌细胞231生物学行为的影响。方法蛋白质印迹技术检测小干扰RNA(siRNA)转染前后RhoE在乳腺癌细胞231中的表达;RhoE siRNA的细胞转染用lipofectamine 2000脂质体法;Cell Counting Kit-8检测转染细胞及对照细胞的增殖变化;损伤刮擦试验和体外侵袭实验(Transwell小室)分别检测转染细胞及对照细胞的迁移与侵袭能力。结果 RhoE在乳腺癌细胞231中的表达较高;成功转染RhoE siRNA的乳腺癌细胞,蛋白质印迹显示RhoE的表达被明显的抑制;RhoE的表达被抑制后对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭有着明显的促进作用。结论下调RhoE表达能够明显促进乳腺癌细胞的增殖﹑迁移和侵袭,RhoE可能在乳腺癌的发生发展中起着重要作用。     

RNA干扰pygo2基因对人脑胶质母细胞瘤U251生物学行为及wnt通路的影响

目的研究pygo2在胶质瘤细胞系U251中的表达、功能及作用机制。方法利用反义pygo2转染U251,下调pygo2的表达,应用流式细胞术和MTT法,评价细胞生长、增殖、凋亡及周期变化;细胞克隆形成试验和transwell侵袭试验分析细胞的克隆形成能力和侵袭能力,采用Western印迹法检测通路蛋白的表达变化。结果转染反义pygo2后,pygo2表达降低,MTT结果显示转染反义pygo2后细胞生长受到抑制且凋亡细胞增加;流式细胞术提示G1期到S期阻滞,细胞克隆形成能力下降,侵袭能力均受到抑制,Western结果表明wnt通路相关蛋白c-myc和Cyclin D1在抑制pygo2表达后下降。结论 pygo2可促进人脑胶质瘤细胞生长、增殖,可能是胶质瘤治疗的有效靶点,其发挥作用可能与wnt通路密切相关。     

过表达FOXB2对肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨叉头框蛋白B2（FOXB2）对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 采用定量PCR检测正常肝细胞LO2细胞和肝癌细胞系Hep3B、Huh7细胞FOXB2 mRNA的表达,构建过表达FOXB2的细胞模型,逆转录实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测过表达效率,细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测FOXB2对Huh7细胞增殖能力的影响;平板克隆实验检测FOXB2对Huh7细胞克隆形成能力的影响;Transwell实验检测FOXB2对Huh7细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 FOXB2在肝癌细胞系Huh7和Hep3B细胞中的表达水平低于正常肝细胞LO2（P<0.001）;过表达FOXB2抑制了Huh7细胞的增殖（P=0.005）和克隆形成（P<0.001）;FOXB2过表达肝癌细胞的迁移（P<0.001）和侵袭（P=0.002）能力低于Vector对照细胞。结论 FOXB2在肝癌细胞中低表达,FOXB2过表达抑制了肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

对MCF-7中不同亚群细胞体外培养的观察

目的：了解人乳腺癌细胞系MCF-7中的不同亚群细胞的体外增殖特性。方法：采用流式细胞技术从MCF-7细胞中分选出不同的细胞亚群,并测定它们在体外的增殖、克隆能力。结果：和CD44＋CD24＋细胞相比,MCF-7中的CD44＋CD24-细胞具有更强的体外克隆能力,而两者的体外增殖能力相近。结论：MCF7中存在乳腺癌干细胞,而CD44＋CD24＋细胞可能是乳腺癌祖细胞。     

PDGF-D稳定沉默后对乳腺癌细胞SK-BR-3生物学功能的影响

目的通过慢病毒载体沉默乳腺癌细胞系SK-BR-3中血小板衍生生长因子D(PDGF-D)基因的表达,探讨PDGF-D基因沉默后对乳腺癌细胞增殖、凋亡及迁移的调控作用。方法应用RT-PCR及蛋白质印迹方法检测5种乳腺癌细胞系中PDGF-D的表达状况;设计人PDGF-D基因的shRNA慢病毒载体,在293T细胞中包装病毒并感染PDGF-D高表达的乳腺癌细胞系,运用蛋白质免疫印迹的方法鉴定其对PDGF-D基因的沉默效果;PDGF-D基因沉默后通过细胞增殖实验和软琼脂克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响,并应用流式细胞技术检测细胞凋亡;运用Transwell迁移实验检测细胞的体外侵袭迁移能力。结果 PDGF-D在5种细胞系中存在差异性表达,其中具有低转移潜能的HT-29和SK-BR-3细胞与具有高转移潜能的LOVO、RKO和SW620细胞相比,具有更高的PDGFD表达水平(t=3.880,P0.05)。选取低转移细胞株中PDGF-D表达相对较高的SK-BR-3作为研究对象,构建PDGF-D shRNA慢病毒载体沉默SK-BR-3细胞中PDGF-D的表达,蛋白质免疫印迹结果提示,PDGF-D稳定沉默的SK-BR-3细胞系构建成功;在稳定沉默PDGF-D基因后,MTT细胞增殖实验和软琼脂克隆形成实验表明SK-BR-3细胞增殖能力增强(F=75.23,P0.001);流式细胞技术检测显示PDGF-D基因沉默后可抑制SK-BR-3细胞凋亡(F=84.44,P0.001);细胞小室实验结果显示,PDGF-D沉默后SK-BR-3迁移能力增强(F=155.9,P0.001)。结论 PDGF-D基因可能与乳腺癌的细胞增殖、凋亡与转移有关,进而参与了乳腺癌的发生、发展。     

TMPRSS4通过上皮间质转化促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移

目的通过检测Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4（TMPRSS4）在乳腺癌细胞中的表达情况,分析其在乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移过程中的作用及其与上皮间质转化（EMT）的关系。 方法采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot法检测5种不同乳腺癌细胞系中TMPRSS4 mRNA和蛋白水平的表达情况。将过表达质粒转染至乳腺癌细胞中,采用qRT-PCR方法检测转染效率,并通过MTS和EdU细胞增殖实验、Transwell和Matrigel细胞迁移和侵袭实验,研究过表达TMPRSS4对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用。采用qRT-PCR和Western blot法检测过表达TMPRSS4后细胞EMT相关基因E-cadherin、Vimentin、Claudin-1、Slug、ZEB1的表达变化。 结果TMPRSS4在乳腺癌MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞系中高表达。MTS实验显示TMPRSS4过表达组乳腺癌细胞MDA-MB-468和MDA-MB-231的增殖能力与阴性对照组相比明显增加,差异具有统计学意义（P=0.039和0.038）,EdU实验进一步证实过表达TMPRSS4促进乳腺癌细胞的增殖,MDA-MB-468细胞和MDA-MB-231细胞的增殖率与阴性对照组比较差异具有统计学意义（P=0.001和0.008）。Transwell实验显示,TMPRSS4过表达组MDA-MB-468细胞和MDA-MB-231细胞的迁移能力与阴性对照组比较明显提高,差异具有统计学意义（p均=0.001）。Matrigel实验显示,TMPRSS4过表达组MDA-MB-468细胞和MDA-MB-231细胞的侵袭浸润能力与阴性对照组比较明显提高,差异具有统计学意义（P=0.012和0.000）。与阴性对照组比较,过表达TMPRSS4后,EMT相关基因包括上皮性标记E-cadherin和Claudin-1的表达均显著下降,而间质标记Vimentin和Slug的表达均明显提高,差异具有统计学意义（P分别=0.024,0.003,0.002和0.012）。 结论TMPRSS4参与了乳腺癌EMT的发生过程,并通过EMT促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。     

高侵袭力人膀胱癌细胞亚系的建立及鉴定

目的建立人膀胱癌细胞BIU-87的高侵袭力亚系,并对侵袭过程进行观察。方法通过构建侵袭小室,以穿透人工基底膜、聚碳酸脂膜能力为依据筛选具有体外高侵袭能力的膀胱癌细胞亚系。运用扫描电镜观察细胞侵袭的过程,通过生长曲线、细胞周期、体外侵袭力对母代与子代细胞体外增殖及侵袭能力进行对比。结果通过扫描电镜观察到了细胞的侵袭运动。筛选后的各子代细胞,经16代以上传代后,细胞形态与母代无明显变化,细胞增殖速度较母代有明显加快(P0.05),体外侵袭能力较母系明显提高(P0.01)。结论运用改良的侵袭实验筛选膀胱癌细胞系的高侵袭力亚系的方法是可靠的,建立的高侵袭力亚系细胞为今后对膀胱癌侵袭及转移的研究提供了较为可靠的细胞模型。     

LncRNA PTPRG-AS1通过靶向miR-5590-3p调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨LncRNA PTPRG-AS1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制.方法 以正常乳腺上皮细胞MCF-10A为对照,qRT-PCR法检测乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和BT549)中LncRNA PTPRG-AS1和miR-5590-3p表达.分别转染si-LncRNA PTPRG-AS1、miR...     

沉默SETD8基因表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用

目的探究siRNA下调含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶) 8(SETD8)基因表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的机制。方法采用脂质体法将特异性针对SETD8基因的siRNA转入骨肉瘤MG-63细胞中,得到关于SETD8基因沉默表达的MG-63稳定的细胞系即实验组,将杂序siRNA用脂质体法同时转染骨肉瘤MG-63细胞,得到关于Control siRNA的MG-63细胞系即对照组,未经转染的骨肉瘤MG-63的稳定的细胞系即空白组。以上三组细胞系通过应用细胞毒性活性检测法(CCK-8法)、平板克隆法同时检测被SETD8基因沉默后骨肉瘤MG-63细胞的增殖能力,侵袭迁移小室即(Transwell小室)法检测骨肉瘤MG-63细胞的侵袭和迁移能力,实时荧光定量法即(PCR法)以及蛋白质印迹法即(Western Blot法)检测SETD8基因沉默表达效果及细胞内SETD8,β-catenin,cyclin D1,vimentin、MMP3的mRNA和相应蛋白的表达水平。结果 SETD8 siRNA转染后,骨肉瘤MG-63细胞的增殖能力显著低于对照组(control siRNA转染MG-63细胞)和空白组(未经转染的MG-63细胞)(P 0. 05); Transwell小室结果显示,沉默SETD8基因组的侵袭和迁移能力明显下降;实验组(SETD8 siRNA转染MG-63细胞)中SETD8、β-catenin、cyclin D1、vimentin、MMP3的mRNA及蛋白表达水平显著低于阴性对照组和空白对照组(P 0. 05)。结论 siRNA下调SETD8基因表达可以抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖、侵袭和迁移能力,Wnt/β-catenin信号通路可能参与并调控这一过程。     

丙泊酚对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移及相关标志物表达的影响

目的 探讨不同浓度丙泊酚对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及对程序性死亡配体1(PD-L1)、细胞增殖核抗原(Ki-67)等相关标志物的影响。方法 体外培养人乳腺癌雌激素受体阳性细胞系MCF-7,随机将MCF-7分为3组，对每一组加入不同浓度的丙泊酚，即P₀组(空白对照组)、P₂₅组(25μg/ml丙泊酚组)和P₅₀组(50μg/ml丙泊酚组)。对三组细胞分别进行克隆形成实验、Transwell细胞迁移实验、侵袭实验、划痕愈合实验以研究各组细胞的增殖、以及细胞的迁移、侵袭变化差异。使用Western blot检测不同浓度丙泊酚做用下对人乳腺癌相关蛋白表达改变情况。结果 与P₀组及P₂₅组相比，P₅₀组乳腺癌MCF-7细胞增殖及细胞迁移、侵袭能力显著升高(P<0.05)。通过Western blot实验发现：P₅₀组的PD-L1、Ki-67蛋白表达显著高于P₀组(P<0.05),其中PD...     

siRNA干扰LUNX对NSCLC细胞系A549增殖和侵袭的影响

【目的】探讨siRNA干扰肺特异性X蛋白（LUNX）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系A549增殖和侵袭的影响。【方法】采用脂质体LipofectamineTM 2000介导LUNX siRNA转染人NSCLC细胞系A549,转染48 h后分别用 qRT‐PCR和 Western blot方法评价干扰效果;MTT法检测LUNX siRNA转染对细胞增殖的影响;Transwell法检测LUNX siRNA转染对细胞侵袭能力的影响;并用 qRT‐PCR 和 Western blot方法检测p‐AKT的表达。【结果】转染后NSCLC细胞系A549内LUNX的表达显著降低;LUNX表达降低使NSCLC细胞系A549的增殖减慢及侵袭能力降低,且LUNX表达降低后p‐AKT的mRNA和蛋白表达均显著降低。【结论】siRNA干扰后LUNX表达、NSCLC细胞系的增殖和侵袭能力降低,可能与其表达降低后p‐AKT表达减少相关。     

microRNA-19对肝癌细胞系迁移与侵袭能力的影响

目的 比较不同转移潜能肝癌细胞系中microRNA-19（mir-19）表达变化,探讨mir-19对不同转移潜能肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 应用TaqMan MGB探针法定量分析mir-19在高转移潜能肝癌细胞系（MHCC97H、LM3）和低转移潜能肝癌细胞系（HepG2、7402）的表达差异.利用转染试剂将人工合成的mir-19的前体转染高转移潜能细胞系,人工合成的mir-19抑制剂转染低转移潜能细胞系.采用细胞计数试剂盒-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）检测mir-19对细胞增殖的影响,Transwell小室检测mir-19对细胞的迁移和侵袭能力的影响.结果 在不同转移潜能的细胞系中,mir-19表达水平在高转移潜能细胞系较低转移潜能细胞系表达下调（P〈0.05）.功能实验显示mir-19可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖（P〈0.05）,利用生物信息学预测mir-19的靶基因发现,许多癌基因3＇UTR包含与mir-19的互补序列.结论 mir-19可能部分通过调节CREB3L4、PDE4A、JAM2、RUNX2等的表达来抑制肝癌细胞的增殖和侵袭转移.     

新的肿瘤转移抑制基因LASS2在不同侵袭潜能的膀胱癌细胞中表达的体外研究

目的探讨新发现的肿瘤转移抑制基因人源性长寿保障基因Ⅱ型（homo sapiens longevity assurance homologue2,LASS2）与人膀胱癌细胞侵袭潜能的关系。方法通过细胞生长曲线和体外侵袭实验,确定膀胱癌BIU-87、EJ、T24和EJ-M3细胞的增殖和侵袭能力;运用实时定量PCR法和Western blot法检测4株细胞中LASS2基因的表达。结果 4株膀胱癌细胞中,EJ-M3的增殖和侵袭能力最强;增殖和侵袭能力高的细胞系EJ-M3和BIU-87的LASS2mRNA表达降低（P〈0.001）,而在低转移能力的人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中则相对较高表达。结论 LASS2基因表达的降低,可能与膀胱癌细胞的增殖和侵袭有关。     

环状RNA hsa_ _circ_ 0003056 在肝癌细胞系中的表达及功能

摘要:目的探讨 环状RNA hsa_ eirc_ 0003056 在肝癌细胞系中的表达及功能。方法分别采用过表达 质粒和敲减质粒转染HepG2和sk-hep-1肝癌细胞系,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell试验检测细胞迁移及侵袭细胞数,流式细胞仪检测细胞 周期和凋亡水平。结果与 对照组相比，hsa_ _circ_ 0003056 过表达组细胞增殖倍数显著升高,迁移及侵袭数明显增多,G,期细胞比率及凋亡率明显降低;而敲减组细胞增殖倍数及侵袭数均显著降低,G,期细胞比率及凋亡率显著升高。结论 hsa_eirc.0003056可促进肝癌细胞系的迁移和侵袭，同时可以加快细胞周期进程,促进细胞增殖降低细胞凋亡。     

PTEN基因对人膀胱癌细胞系BIU-87化疗敏感性的影响

目的研究抑癌基因PTEN转染对人膀胱癌细胞系BIU-87化疗敏感性的影响。方法将携有PTEN基因的重组真核表达质粒pBp-PTEN转化大肠杆菌DH5α并扩增,抽提纯化质粒并进行酶切鉴定;pBp-PTEN体外转染BIU-87细胞（pBp-PTEN-BIU87）,筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pBp的BIU87细胞（pBp-BIU87）和正常BIU-87细胞为对照,用RT-PCR检测PTEN的表达情况,应用MTT法分别研究转染前、后膀胱癌细胞对不同浓度抗癌药物丝裂霉素（MMC）、羟基喜树碱和吡柔比星的敏感性变化。结果RT-PCR证实PTEN在转染的BIU-87细胞中能稳定表达。PTEN转染后,BIU-87细胞对MMC的药物敏感性明显提高,对吡柔比星和羟基喜树碱的药物敏感性无明显变化。结论PTEN基因转染能提高人膀胱癌细胞系BIU-87对抗癌药物MMC的敏感性。