3种设门方法在多发性骨髓瘤免疫表型分析中的应用比较

目的探讨CD45/SSC、CD38/SSC及CD45/CD38 3种设门方法在多发性骨髓瘤(MM)免疫表型分析中的应用价值,并分析不同免疫表型与反映MM疾病进展的实验室指标的相关性。方法采用CD45/SSC、CD38/SSC、CD45/CD38 3种设门方法的多色流式细胞术,对20例初诊MM患者浆细胞表面CD138、CD56、CD117、CD13、CD19等的表达情况进行检测,比较不同检测方法间的差异。另仅使用CD38/SSC设门术,对44例初诊MM患者及12例对照组患者浆细胞进行免疫表型检测,分析浆细胞表面各CD抗原表达与反映MM疾病进展指标血红蛋白(Hb)、清蛋白(Alb)、肌酐(Cr)、β2-微球蛋白(β2-MG)、C-反应蛋白(CRP)及乳酸脱氢酶(LDH)的相关性。结果 CD38/SSC、CD38/CD45设门组CD56、CD138表达率均明显高于CD45/SSC组(P0.05),CD38/SSC与CD38/CD45设门间各CD抗原表达率差异无统计学意义(P0.05)。CD138阳性率在CD45/SSC设门组明显低于CD38/SSC及CD45/CD38组(P0.05),余各组间CD抗原阳性率差异无统计学意义(P0.05)。使用CD38/SSC设门术时,MM组与对照组CD56阳性率(70.5%和8.3%)及CD19阳性率(13.6%和100%)间差异有统计学意义(P均0.01)。MM浆细胞典型免疫表型为CD38++CD138+CD56+CD19-,而正常浆细胞为CD38++CD138+CD56-CD19+。CD56+MM患者清蛋白降低的发生率明显高于CD56-MM患者(71.0%vs 38.5%,P0.05),CD13+MM患者比CD13-患者更易出现LDH异常增高(50.0%vs 13.9%,P0.05)。Spearman相关性分析显示,MM患者CD56表达率与Cr水平呈负相关(r=-0.353,P0.05),CD13表达率与LDH水平呈正相关(r=0.359,P0.05),其他CD抗原表达与Hb、Alb、Cr、β2-MG、CRP及LDH水平无明显相关性(P0.05)。结论流式细胞术中采用不同设门方法圈定浆细胞的有效性不同,CD38/SSC及CD45/CD38设门明显优于CD45/SSC设门,常规临床检测可使用CD38/SSC设门技术。MM具有独特的免疫表型特征,选用恰当方法进行免疫表型分析对MM的辅助诊断及预后判断有重要价值。     

多发性骨髓瘤患者骨髓中BAFF的含量及B细胞表面BAFF受体表达的研究

本研究旨在分析多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓中B细胞活化因子(BAFF)、增殖诱导配体(APRIL)的含量,B细胞、初始B细胞和记忆B细胞表面BAFF受体的表达,以探讨MM骨髓中B细胞的特点。采用流式细胞术检测19例初治MM(初治组)、17例平台期MM(平台期组)、10例对照组骨髓中B细胞(CD19+)、初始B细胞(CD19+IgD+)、记忆B细胞(CD19+CD27+)的表面BAFF受体(BAFF-R、TACI)的表达,ELISA法测定各组骨髓上清中BAFF、APRIL的含量。分析各组结果数据的差异及它们之间的相互关系。结果表明,初治组患者CD19+细胞表面BAFF-R受体表达明显高于平台期组和对照组;初治组患者CD19+IgD+细胞表面BAFF-R受体表达与平台期组无差别,但明显高于对照组;初治组患者CD19+CD27+细胞表面BAFF-R受体表达明显高于平台期组和对照组;各种B细胞表面BAFF-R受体表达在平台期组与对照组之间无差别;TACI受体表达总体水平低,初治组患者与平台期组、对照组比较,CD19+细胞、CD19+IgD+细胞、CD19+CD27+细胞表面TACI受体表达均无明显差异;初治组骨髓上清中BAFF含量明显高于平台期组和对照组,但平台期组与对照组间无明显差异;各组骨髓中APRIL的含量均无明显差异。结论:MM患者骨髓中BAFF含量增高,CD19+细胞、CD19+IgD+细胞和CD19+CD27+细胞表面BAFF受体的表达均增加,这可能有助于促进B细胞的增殖,因而可能与MM发病机制有关。     

CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞异常表达与多发性骨髓瘤的关联性分析

目的 检测多发性骨髓瘤(MM)患者和良性单克隆丙种球蛋白血症(MGUS)患者外周血及骨髓组织中CD4+CD25+CD127low/-调节性T(Treg)细胞表达水平,初探MM中调节性T细胞免疫功能状态以及与疾病发生、发展的关联性.方法 采用流式细胞术分别检测33例MM患者、44例MGUS患者和30例健康者外周血以及6例MM患者骨髓CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞水平.分别采用溴甲酚绿法、免疫散射比浊法检测MM患者血清清蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)水平.结果 MM组外周血中CD4+CD25+CD127low/-细胞表达高于MGUS组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MM中稳定期患者组外周血细胞水平较初诊患者组和复发、难治患者组升高,差异有统计学意义(P<0.05);但不同ISS分期的MM患者外周血细胞表达差异无统计学意义(P>0.05);而进展期MM患者中,CD4+CD25+CD127low/-T细胞表达在Ⅲ期高于Ⅰ期+Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05);进一步研究发现,同一初诊MM患者骨髓CD4+CD25+CD127low/-T细胞水平低于其外周血T细胞水平,差异有统计学意义(P<0.05).结论 外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞表达异常可辅助鉴别良、恶性单克隆丙种球蛋白血症;监测MM的进展以及疾病的活跃程度,并为进展期MM患者及时进行临床干预提供实验依据.     

多发性骨髓瘤流式细胞术免疫表型及微量残留病研究

目的 探讨MM细胞免疫表型特征及MRD检测的临床意义.方法 应用多参数流式细胞术检测16名健康对照者和172例MM患者的免疫表型.32例MM患者缓解后作MRD分析,同时进行跟踪随访,分析MRD阳性和阴性对MM患者的复发率和无病生存时间是否存在影响.结果 流式细胞术检测结果显示,16名健康对照者正常浆细胞CD38、CD 138、CD19、CD45均阳性,172例MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型为CD+38 172例(100.0%)、CD+138172例(100.0%)、CD-19 167例(97.1%)、CD+56 152例(88.4%)、CD-45 166例(96.5%),骨髓瘤细胞具有显著的特征性表型,即CD+38、CD+138、CD+56、CD-19、CD-45.32例MM患者缓解后进行MRD检测,其中14例MRD阴性,18例MRD阳性.随访2～16个月后,MRD阴性组4例复发(28.6%),MRD阳性组13例复发(72.2%),两组复发率比较,差异有统计学意义(χ2=6.03,P＜0.05).MRD阴性组累积无病生存时间中位数16.23(10.37～21.62)个月,明显长于MRD阳性组的10.07(3.79～16.20)个月,两组比较差异有统计学意义(χ2=7.53,P＜0.05).结论 MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型特征是CD+38、CD+138、CD1-19、CD-45、CD+56.多发性骨髓瘤MRD检测可以作为临床预后的参考指标.

Abstract：

Objective To investigate the characteristics of immunophenotyping and clinical significance of MRD analysis in MM patients. Methods Multi-parameter flow cytometry was applied to analyze the immunophenotyping of malignant plasma cells from 172 MM patients, and normal plasma cells from 16 healthy individuals. MRD was analyzed in 32 MM patients with remission. Meanwhile, the effects of MRD status on the disease relapse and patient disease free survival ( DFS ) time was evaluated by following up patients. Results The immunophenotyping of normal plasma cells were CD38, CD138, CD19 and CD45 positive, while the predominant phenotype of MM cells were CD+38( 100.0% ), CD+138( 100.0% ), CD-19 ( 167/172, 97. 1% ), CD+56( 152/172, 88.4% ) and CD-45( 166/172, 96. 5% ). The characteristic markers for MM cells were CD+38, CD-138, CD-19, CD-45 and CD+56. MRD analysis revealed that, among 32 MM patients with remission, 14 patients were MRD negative and 18 patients were MRD positive. During follow-up of 2 to 16 months, the relapse rate in MRD negative patients was significantly lower ( 4/14, 28.6% ) than that of MRD positive patients ( 13/18, 72. 2% ;χ2 =6. 03, P ＜0. 05 ). Furthermore, the DFS time was significantly longer in MRD negative patients[ 16. 23( 10. 37-21.62 )months ] than that of the MRD positive patients [ 10. 07( 3. 79-16. 20 )months,χ2 =7. 53,P ＜0. 05 ]. Conclusions CD+38, CD+138, CD-19, CD-45 and CD+56 are the characteristic markers of MM cells compared to those of the normal plasma cells. MRD analysis is a valuable prognostic factor for MM patients.     

流式细胞术在多发性骨髓瘤诊断中的应用

目的探讨流式细胞术免疫分型在多发性骨髓瘤（MM）诊断中的价值。方法应用多参数流式细胞仪检测35例MM和10例继发性单克隆免疫球蛋白血症骨髓细胞免疫表型。结果 35例MM患者表达CD38、CD138强阳性,平均荧光强度（MFI）分别为695.2±120.69、56.23±436.2。CD45阴性或弱阳性。33例MM患者CD19阴性。32例MM患者表达CD56强阳性,MFI为779.9±241.0。10例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者表达CD38、CD138强阳性,MFI分别为621.3±82.8、549.6±132.7。CD45表达均阳性。8例患者CD19阳性。CD56均阴性,MFI为24.61±13.1。MM患者CD44表达荧光强度明显高于继发性单克隆免疫球蛋白血症（P〈0.01）。结论应用多参数流式细胞仪检测细胞表面CD38、CD138、CD19、CD56、CD45、CD44抗原表达情况,可方便区分骨髓瘤和良性浆细胞,是MM的重要诊断依据。     

不同预后分层的多发性骨髓瘤患者免疫表型特征分析

本研究探讨不同预后分层的初诊多发性骨髓瘤患者的免疫表型特点。采用流式细胞仪多参数直接免疫荧光技术,CD45/SSC和CD38/SSC联合设门,对62例初诊的多发性骨髓瘤患者骨髓标本标记CD45、CD38、CD138、CD56、CD19、CD117、CD13、CD20、CD22、CD34、Kappa和Lambda进行检测,并通过ISS分期及细胞遗传学特征进行预后分层,分析和比较不同预后分组患者的免疫表型特点。结果显示：异常浆细胞均表达CD138（100%）及CD38（100%）,而CD19^＋（6.5%）,CD45^＋（22.6%）,CD56^＋（59.6%）及单克隆轻链抗原表达（82%）相对常见,其他CD117^＋（27.4%）,CD13^＋（17.7%）,CD20^＋（16.1%）存在个体差异;经预后分层后显示,标高、高危组CD56表达率低于低危组（P=0.02）,而CD117表达率高于低危组（P=0.011）。结论：多发性骨髓瘤免疫表型具有异质性,在初诊的中、高危患者中CD56表达较低,而CD117表达较高,这可能与不良预后相关。     

CD200和调节性T细胞的相关性在多发性骨髓瘤预后分层中的意义

目的:观察多发性骨髓瘤(MM)患者CD200和调节性T细胞(Treg)表达的相关性,探讨其在MM预后分层中的意义。方法:应用流式细胞术检测78例MM初诊患者骨髓血中CD200和其它免疫表型(CD38,CD138,CD56,CD19,CD20,CD117,胞浆轻链Kappa和Lambda)表达,以及外周血Treg的比例;分别检测患者血清血红蛋白(Hb)、血清β2微球蛋白(β2-MG)和乳酸脱氢酶(LDH)的浓度;通过国际分期系统(ISS)和细胞遗传学特征进行预后分层;分析MM患者表达CD200与Treg细胞的相关性,比较不同表达相关性患者的预后差异。结果:78例初诊患者表达CD200~+率为71.79%(56/78),在年龄和性别分布上CD200阳性组和阴性组之间的差异无明显统计学意义。在其他抗原表达上,CD200~+组CD117的表达显著高于CD200~-组(P=0.032),CD20、CD56和CD19的表达两组间无明显统计学差别。CD200~+组Hb量明显低于CD200-组(P=0.035),血清β2-MG水平显著高于CD200~-组(P=0.013),血清LDH水平两组间差异无明显统计学意义。CD200~+组中ISS分期Ⅰ期患者占58.62%(17/29),Ⅱ期患者占75%(30/40),Ⅲ期占100%(9/9),随着CD200表达强度增加,预后分层危险度上升(P=0),CD200表达越强,预后越差;Treg细胞CD200~+组显著高于CD200~-组(P=0.043),Treg含量与CD200表达程度呈正相关(r=0.743,P=0.044)。CD200-组患者总生存率(OS)显著高于CD200~+组(P=0.036),疾病无进展生存率(PFS)稍高于CD200~+组,但两组间差异无统计学意义。结论:MM患者CD200表达和Treg含量之间有显著正相关性,是MM预后不良的重要因素以及临床判断疗效的可靠指标。     

MM患者外周血CAR、NLR、T细胞亚群及NK细胞水平及与预后关系的分析

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血C反应蛋白(CRP)与白蛋白(Alb)比值(CAR)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、T细胞亚群及NK细胞水平及临床意义。方法采用回顾性研究方法,选取2016年1月至2022年1月在大连市中心医院治疗的MM患者76例。随访期间死亡患者20例,存活患者56例。分析不同临床特征及预后患者外周血CAR、NLR、T细胞亚群及NK细胞水平差异。结果不同性别、年龄MM患者外周血CAR、NLR、T细胞亚群及NK细胞水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);ISS分期Ⅲ期患者外周血CAR、NLR和CD8^(+)分别为0.75±0.13、2.84±0.63和(53.69±4.17)%,均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者[0.55±0.14、2.49±0.58、(46.29±4.06)%],CD3^(+)、CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)分别为(56.00±5.81)%、(25.98±3.91)%和0.49±0.14,均明显低于Ⅰ~Ⅱ期患者[(64.42±5.90)%、(32.18±3.80)%、0.70±0.17],差异均有统计学意义(P<0.05);ISS分期Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ期患者NK细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05)。死亡患者ISS分期Ⅲ期比例为60.00%,明显高于存活患者(25.00%),外周血CAR和NLR分别为0.69±0.17和3.01±0.65,明显高于存活患者(0.60±0.14、2.47±0.60),而卡氏评分和CD4^(+)/CD8^(+)为(60.25±6.14)分和0.57±0.10,均明显低于存活患者[(67.30±7.11)分、0.64±0.12],差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示:ISS分期、CAR、NLR和CD4^(+)/CD8^(+)是MM患者死亡的影响因素(P<0.05)。外周血CAR、NLR和CD4^(+)/CD8^(+)预测死亡的ROC曲线下面积分别为0.756、0.686和0.649,可见外周血CAR预测价值中等(P<0.05)。结论外周血CAR、NLR、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)和CD8^(+)与患者ISS分期及预后有关,其中CAR在预测MM患者预后方面有一定应用价值。     

CD40/CD40L在MM患者中的表达及其对预后的意义

目的:探讨CD40/CD40L在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其对预后的影响。方法:选取2016年5月-2017年6月于沧州市人民医院接受治疗的MM患者30例,作为MM组,同期选取在本院体检的健康人30例为正常组,采用流式细胞术检测两组人员血清中化疗前后CD40/CD40L的水平,分析其与MM患者淋巴细胞群、病理分级及预后的相关性。结果:MM组患者血清中CD40表达水平显著高于正常组(P<0.05);MM组患者血清中CD40L表达水平与正常组比较无统计学意义(P>0.05);MM组患者化疗前后的CD40、CD40L水平比较无统计学差异(P>0.05);Ts细胞及NK细胞水平在MM组患者中的表达低于正常组(P<0.05),总B淋巴细胞、Th细胞、Th/Ts占比两组比较无统计学意义(P>0.05);CD40水平与MM组患者血清总B淋巴细胞水平存在相关性(r=0.877,P=0.005),CD40L与MM患者血清中Th细胞存在相关性(r=-0.783,P=0.035);Ⅲ-Ⅳ期MM患者血清CD40表达高于Ⅰ-Ⅱ期MM患者,不同时期MM组患者血清CD40L水平比较无统计学意义(P>0.05);CD40高表达MM患者生存率低于CD40低表达的MM患者(χ^2=1.639,P=0.201)。CD40水平高表达为MM患者预后的主要影响因素(95%CI:1.156-4.125)。结论:MM血清中CD40水平升高与患者病理分级有关,接受化疗能够降低CD40水平,CD40升高是MM患者预后较差的重要因素,CD40L水平与MM治疗及预后无意义。     

CD269和CD317在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

目的 通过研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓细胞中CD269和CD317的抗原表达情况,分析其与反映MM疾病进展实验室指标的相关性,并评估其在临床诊疗中的价值。方法 采用病例对照性研究,选取63例初诊MM患者作为研究组,35例缺铁性贫血(IDA)患者作为对照组,应用流式细胞术检测两组患者骨髓血中CD269和CD317表达率以及63例MM患者骨髓血中其他抗原(CD19,CD20,CD56,CD117)的表达率; 分别检测MM患者血清血红蛋白(Hb)、血清β2微球蛋白(β2-MG)和乳酸脱氢酶(LDH)的浓度; 统计学分析CD269和CD317的表达水平并比较与其他实验室相关指标检测水平的相关性。结果 研究组和对照组的CD269阳性率分别为(86.6±2.35)%vs(4.33±1.69)%,差异具有统计学意义(t=4.256,P<0.05); CD317阳性率分别为(71.42±0.62)% vs(8.32±3.89)%,差异具有统计学意义(t=3.102,P<0.05); 在其他抗原表达上,CD269和CD317阳性组CD56的表达水平显著高于阴性组(t=4.032,P<0.05),而CD117的表达水平阳性组显著低于阴性组(t=2.832,P<0.05),CD19,CD20的表达两组间差异无统计学意义(P>0.05); MM患者CD269和CD317表达水平与CD56表达水平呈正相关(r=0.392,P<0.05),与CD117表达水平呈负相关(r=-0.210,P<0.05)。Hb含量阳性组明显低于阴性组(t=3.012,P<0.05),血清β2-MG 水平阳性组低于阴性组(t=2.024,P<0.05),血清LDH水平两组间差异无统计学意义(P>0.05); MM患者CD269和CD317表达水平与血清Hb含量呈负相关(r=-0.212,P<0.05),与血清β2-MG水平呈负相关(r=-0.312,P<0.05)。结论 MM患者骨髓细胞高表达CD269和CD317; MM的病情进展与患者CD56升高或CD117降低有关; 与血清Hb含量和β2-MG水平降低有关,有助于判断病情严重程度及评估预后。     

多发性骨髓瘤细胞的免疫表型特点

为了解多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM)细胞的免疫表型特点，采用三角免疫荧光直接标记法和流式细胞术对20例MM患的骨髓标本进行了免疫分型检测。研究结果发现，每例病人骨髓细胞中均可见一群异常的细胞；CD45／SSC值较有核红细胞大；CD45阴性或弱阳性；CD38强阳性；CD19均为阴性；多数标本CD56阳性；少数标本胞浆k(ck)或胞浆λ（cλ）阳性及CD20阳性。检测的所有标本除三分之一为CD56^-外，均无正常浆细胞的表型（CD19阳性，CD56阴性）。结论：流式细胞术是确定MM细胞的有用的方法，对MM患骨髓细胞进行免疫表型分析有助于MM的准确诊断及治疗的监测。     

多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞生物学特性分析

为了研究多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）病人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）的病理生物学特性，以探讨MSC在MM骨损伤发生中的作用，取11例初治MM病人和5例正常人骨髓，用贴壁法体外分离培养MSC。应用流式细胞术分析MM骨髓MSC表型，MTT法检测MSC增殖能力，组织化学染色测定细胞向成骨细胞和脂肪细胞分化能力。应用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定细胞培养上清液中白介素-6（interleukin-6，IL-6）和干细胞生长因子（stem cell factor，SCF）浓度。收集MSC培养上清作为条件培养液，按梯度浓度加入人SKO007骨髓瘤细胞系培养体系中，MTT法测定细胞增殖能力差异。结果表明：与正常人骨髓MSC比较，MM患者骨髓MSC的表型无改变，均一表达CD29、CD73、CD166和HLA-ABC，不表达CD45和CD31；MM患者骨髓MSC增殖和分化能力正常，且具有相似的成骨和成脂肪分化功能；MM骨髓MSC分泌IL-6和SCF的水平均明显高于正常；MM来源的MSC培养上清显著促进SKO007细胞的增殖。结论：MM患者骨髓MSC的增殖分化功能正常，MM时骨损伤可能与MSC分化功能无关，而IL-6和SCF高表达为骨髓瘤细胞提供了必要的生存信号。     

多发性骨髓瘤免疫表型及胞浆轻链检测的临床意义

目的研究多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）细胞的免疫表型特点及胞浆内轻链的表达。方法采用四色流式细胞仪,用CD45-APC/SSC及CD38/CD56联合设门,对45例MM患者的骨髓标本进行CD38、CD56、CD19、CD138、CD45、轻链（κ链、λ链）及胞浆内轻链（cκ链、cλ链）的检测。结果 45例骨髓瘤患者中分泌型为37例（其中IgG型为27例,IgA型为10例）,轻链型为5例（λ链型4例,κ链型1例）,不分泌型3例,其免疫表型出现的频率为：其中表型为CD38＋CD56＋CD19-CD45-：分泌型为37/37（100%）,轻链型2/5（40%）,不分泌型0/3（0%）,表型为CD38＋CD56-CD19-CD45-：轻链型3/5（60%）,不分泌型3/3（100%）,CD138＋：45/45（100%）,膜表面轻链（κ链、λ链）：0/45（0%）,胞浆轻链（cκ链、cλ链）：45/45（100%）,其中分泌型：cκ链10/37（27%）;cλ链：27/37（73%）;轻链型：cκ链1/5（20%）;cλ链：4/5（80%）;不分泌型：cκ链1/3（33%）;cλ链：2/3（67%）。结论用流式细胞术分析多发性骨髓瘤的细胞免疫表型及胞浆轻链的表达对骨髓瘤的临床诊断有很大的帮助,特别是对不分泌型的骨髓瘤诊断的临床价值更大。     

多参数流式细胞术测定多发性骨髓瘤细胞免疫标记的研究

本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)的免疫表型特征及其意义。采用多参数流式细胞术直接免疫荧光技术,CD38/SSC设门,对33例MM患者及12例浆细胞反应性增多症患者的骨髓标本进行免疫分型检测,并辅以瘤细胞的形态学检查。结果表明:形态学检查观察到瘤细胞比例为6.0%-76.0%;流式细胞术CD38/SSC设门后可见到一群CD38强阳性细胞,比例为0.99%-57.54%;多数MM细胞表型为CD38st+CD138+CD19-CD56+(78.8%),部分患者伴有CD20(12.1%)、CD33(15.2%)、CD117(30.3%)、HLA-DR(9.1%)抗原表达,其余抗原表达均为阴性;27例(81.8%)MM患者检测到cκ或cλ的单克隆限制性,其余cκ及cλ均为阴性。结论:利用CD38/SSC设门方法的流式细胞术对MM进行免疫分型,根据细胞表面抗原的异质性,可鉴别良性或恶性浆细胞,为判断预后及靶向治疗提供依据。     

多发性骨髓瘤免疫表型特征及其意义

本研究探讨多发性骨髓瘤细胞的免疫表型特征及其意义。采用流式细胞仪多参数直接免疫荧光技术、CD45/SSC设门,对31例多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞标记CD138、CD38、CD56、CD117、HLA-DR、CD3、CD7、CD13、CD33、CD19、CD20、CD22、CD34进行检测,并辅以瘤细胞的形态学检查。结果表明:形态学检查观察到瘤细胞比例为10%-68%,CD45/SSC设门证实可疑瘤细胞比例为9.72%-67.77%;抗原阳性表达比例分别为CD13861.29%,CD38 100%,CD56 46.15%,CD13 70.00%,CD33 29.03%,HLA-DR74.19%,CD117 33.33%,其余抗原均为阴性表达。结论:CD45/SSC设门技术可以较准确地设定需要分析的多发性骨髓瘤细胞群,与形态学分类瘤细胞的比例相接近;瘤细胞以表达CD138、CD38、CD56抗原为主,部分患者可伴有髓系抗原CD13、CD33、CD117表达,有关这些抗原表达的生物学意义尚待进一步研究。     

白细胞介素2激活骨髓抗骨髓瘤活性的研究

目的　探讨重组白细胞介素2(rIL 2)激活的骨髓(ABM)抗骨髓瘤活性的免疫学机制。方法　应用rIL 2体外分别激活多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓及正常对照骨髓,同时设未激活骨髓(NBM)为对照。用MTT比色分析法测定正常对照组的ABM对U266细胞的杀伤活性,应用流式细胞仪检测培养72h后MM组骨髓瘤残余病变标志(CD45-CD38+CD138+细胞百分率)的变化,ELISA法检测MM组及正常对照组不同时间段ABM、NBM培养液中TNF α、IFN γ的水平,并进行比较和相关性分析。结果　正常对照组NBM 72h对U266细胞的杀伤率为( 43. 20±12. 39 )%, 24h杀伤率为(26. 53±5. 48)%,ABM 72h对U266细胞的杀伤率为( 69. 70±26. 57 )%, 24h杀伤率为( 34. 25±11. 93)%, 24h及72h的ABM细胞杀伤活性均较NBM增高,其中72hABM与NBM对U266细胞杀伤率的差异有统计学意义(P<0. 05);MM患者骨髓经rIL 2激活72h后CD45-CD38+CD138+细胞的百分率明显下降[激活前为(8. 46±3. 66)%,激活后为(4. 79±1. 56)%, P<0. 05];正常骨髓及MM患者骨髓经rIL 2激活后,随着培养时间的延长,培养液中TNF α、IFN γ的含量增加,无论24h或72h,两组ABM中TNF α、IFN γ的水平均较NBM明显增高(P<0. 05);正常对照组ABM 24h及72h培养液中TNF α、IFN γ的水平分别与本组同时相的细胞杀伤     

116例多发性骨髓瘤免疫特征表型分析

目的了解多发性骨髓瘤(MM)的免疫表型特征,以及CD45、CD19与临床特征的相关性。方法采用三色流式细胞术对116例初诊MM病例进行免疫表型分析,并收集患者的实验室和临床指标。结果 116例MM均表达CD38,其他抗原CD19、CD138、CD56、CD20、CD33、CD117、CD45的阳性率分别为10.3%、96.6%、60.7%、3.4%、70.0%、25.6%、17.2%,无1例表达CD7、CD34。在116例MM中,胞浆κ轻链阳性率为34.5%,λ轻链阳性率为48.3%。CD45阳性患者分期较好,其表达缺失患者易出现骨破坏,微球蛋白、C反应蛋白水平较高;CD19表达与高分期有关,易出现贫血,微球蛋白、C反应蛋白水平较高。结论了解MM的免疫表型特点对此类疾病的诊断具有重要意义,其中CD45、CD19与分期等临床生物学特征有关,有助于判断预后。