LEOPARD综合征一例PTPN11基因突变研究

目的 对1例LEOPARD综合征（LS）家系进行PTPN11基因突变检测,以明确其致病基因。 方法 收集该LS家系的临床资料,提取外周血DNA、通过PCR扩增PTPN11基因编码区的全部外显子及其侧翼序列并测序,以表型正常家系成员及50例健康人为健康对照。 结果 发现该家系内患者存在PTPN11基因的错义突变c.836A > G,在家系中正常人及对照者未发现上述突变。 结论 错义突变PTPN11的c.836A > G为导致该家系临床表型的原因。     

中国汉族泛发性雀斑样痣一家系PTPN11致病基因突变筛查

目的搜集国内1家系泛发性雀斑样痣病例进行基因检测。方法提取3例泛发性雀斑样痣家系患者的外周血基因组DNA,针对PTPN11基因的外显子设计引物并扩增,以表型正常的家族成员和100例无亲缘关系的正常人作为对照,筛查基因突变位点。结果在患者PTPN11基因第8个外显子中检测到错义突变(c.907GA,p.D303H),家系内健康对照及无亲缘关系的100例正常对照均未发现该突变。结论 PTPN11基因错义突变(c.907GA)可能是引起该家系患者表型的原因。     

应用全外显子测序技术筛查LEOPARD综合征患者致病基因一例

目的:报道一例LEOPARD综合征(LS)患者并检测其基因突变。方法:收集患者临床资料，提取该患者及父亲外周血DNA,应用全外显子组高通量测序检测技术，筛查患者致病基因。结果:全外显子测序结果发现患者PTPN11基因12号外显子第1415位核苷酸发生c.1415C>T杂合突变，导致第472号氨基酸由Thr变为Met(p.Thr472Met)。结论:PTPN11基因12号外显子c.1415C>T (p.Thr472Met)突变为该例LEOPARD综合征的致病突变位点。     

黑斑息肉综合征一家系致病基因的新突变

【摘要】 目的 对黑斑息肉综合征一家系的STK-11基因突变进行检测。 方法 PCR扩增此家系的患者和健康人的STK-11基因的全部外显子,并测序寻找致病突变,选取100例健康人作为对照。 结果 该家系患者STK-11基因外显子9的第1251位发生G/T杂合突变 。家系中健康对照个体和健康对照中均未发现相应突变。 结论 错义突变A417S可能影响基因转录和翻译产物,是STK-11基因新的特异性突变。     

表皮松解性角化过度型鱼鳞病两家系基因突变研究

目的 探讨两个表皮松解性角化过度型鱼鳞病（EHK）家系的基因突变情况。 方法 收集两个EHK家系的临床资料,提取外周血DNA,通过PCR扩增角蛋白基因KRT1和KRT10编码区的全部外显子及其侧翼序列并测序,以表型正常家系成员及50例健康人作为对照。结果 发现两个家系中患者均存在KRT10基因突变,分别为KRT10的剪接位点突变c.1030-2A > G和错义突变c.467G > A,在家系中健康人及健康对照者未发现上述突变。结论 剪接位点突变c.1030-2A > G和错义突变c.467G > A,可能分别是导致这两个家系临床表型的原因。     

有汗性外胚层发育不良一家系基因突变

目的 探讨有汗性外胚层发育不良家系的基因突变及突变类型，为建立本病的基因诊断与遗传咨询提供依据。方法 PCR及Sanger测序技术对有汗性外胚层发育不良家系先证者GJB6基因外显子进行突变鉴定，对可疑的变异位点， Sanger测序检测家系其他成员该位点变异情况。结果 基因检测结果表明，家系先症者GJB6基因错义突变c.31G〉A，该突变导致连接蛋白-30（connexin-30, CX-30）第11位氨基酸由甘氨酸变成精氨酸（p.G11R）。家系的患者均携带此变异，而家系表型正常的个体不携带此变异。结论 GJB6基因c.31G〉A（p.G11R）突变是该有汗性外胚层发育不良家系致病基因突变。     

家族性原发性皮肤淀粉样变性两家系OSMR基因突变

目的 检测家族性原发性皮肤淀粉样变性两个家系OSMR基因突变情况并分析与临床表现的关系.方法 收集两个原发性皮肤淀粉样变性家系的临床资料,提取外周血DNA,采用PCR技术扩增两例先证者及其家属OSMR基因18个外显子及其侧翼序列并测序,并以100例健康人作为对照.结果 第1个家系先证者OSMR基因第15号外显子发生c.2081C＞T杂合突变,导致氨基酸序列出现p.P694L改变,家族中其他4例患者均带有相同突变位点.第2个家系先证者OSMR基因第11号外显子发生c.1538G＞A杂合突变,导致氨基酸序列出现p.G513D改变,其母亲也带有相同突变位点,突变位点与疾病符合共分离.两家系中健康成员及100例健康对照者均未发现相应突变.结论 OSMR基因p.P694L和p.G513D突变可能与原发性皮肤淀粉样变性有关.     

反常性痤疮一家系临床表型及基因突变研究北大核心CSCD

目的 研究1个反常性痤疮患者家系的基因突变.方法 对一确诊的反常性痤疮先证者家系进行现场调查,并采集外周血标本.PCR扩增早老素1（PSEN1）、单过性跨膜蛋白（NCSTN）和早老素增强子2（PSENEN）的所有外显子,PCR产物进行序列分析.结果 该家系共有5代67人,其中25人患病（男13例,女12例）,符合常染色体显性遗传.家系中患者皮损主要分布于颈背部、胸部和臀部,腋下很少或未被累及.家系中11例患者NCSTN基因第11号外显子存在c.1258C＞T错义突变,导致第420位由氨基酸谷氨酰胺变为终止密码子.同时检测家系中6例无反常性痤疮的正常人及与该家系无关的100名健康对照者,未发现该突变.检索美国国家生物技术信息中心（NCBI）网站单核苷酸多态性（SNP）数据库,未发现该突变.结论 该反常性痤疮家系存在一个新的错义突变,即NCSTN基因1 1号外显子c.1258C＞T,这可能是该家系患者发病的分子基础.     

遗传性对称性色素异常症2个新的致病基因突变检测

目的检测遗传性对称性色素异常症2家系中DSRAD基因的突变。方法收集陕西籍遗传性对称性色素异常症2个家系成员资料,提取外周血DNA,PCR扩增DSRAD基因的全部外显子,进行DNA测序,并以50例无关正常人作为对照。结果家系Ⅰ所有患者中8号外显子检测到一新的c.2858C>G(p.S886R)错义突变;家系Ⅱ所有患者中10号外显子检测到一新的c.3073A>G(p.H958R)错义突变。结论DSRAD基因的c.2858C>G和c.3073A>G错义突变可能为引起这两个家系患者临床表型的病因。     

表皮松解性掌跖角化病一家系KRT9基因突变检测

目的：检测一表皮松解性掌跖角化病(epidermolytic palmoplantar keratoderma,EPPK)家系中患者及其家族成员的KRT9基因突变。方法：收集该EPPK家系先证者及其家族成员临床资料,提取他们及100例无亲缘关系的健康对照外周血DNA,PCR扩增KRT9基因编码区的全部外显子及其侧翼序列,对产物直接测序,同时进行突变点的功能预测。结果：该家系所有患者的KRT9基因1号外显子第482位碱基均发生错义突变c.482A>G(p.Asn161Ser)。家系中未患病者及100名正常对照中均未发现此突变。SIFT和Polyphen-2软件预测c.482A>G(p.Asn161Ser)突变为有害变异位点。结论：KRT9基因的突变c.482A>G(p.Asn161Ser)可能是导致该家系发生表皮松解性掌跖角化病的原因。     

Familial cases of atypical clinical features genetically diagnosed as LEOPARD syndrome (multiple lentigines syndrome)

Five familial cases exhibited ephelides-like multiple lentigines, and we examined three of them, a mother and two sons. All three patients presented with small dark-brown maculae on the face and neck and electrocardiographic abnormalities. These findings sufficed to fulfill the criteria for LEOPARD syndrome (multiple lentigines syndrome), although they lacked five of seven major clinical features. However, the family members presented with a webbed neck and pectus excavatum, which are more frequently seen in Turner or Noonan syndrome. Histological examination of the lentigines revealed slightly elongated rete ridges, a hyperpigmented basal layer, and melanophages in the papillary dermis. Direct sequencing of the patients' genomic DNA revealed that all three had a consistent missense mutation [c.1403C > T (p.T468M)] in the PTPN11 gene, confirming LEOPARD syndrome with an atypical phenotype. It was suggested that LEOPARD syndrome shows a diverse phenotype but its diagnosis can be verified by mutation analysis.     

一先天性厚甲家系角蛋白基因突变鉴定

目的 探讨一个先天性厚甲家系角蛋白基因突变。方法 用PCR及Sanger测序技术对先天性厚甲家系先症者KRT17基因所有外显子和KRT6B基因编码螺旋起始和终止区域序列进行突变鉴定,针对发现的可疑位点,Sanger测序检测家系其他成员该位点的变异情况。结果 基因检测结果表明,家系患者KRT17基因错义突变c.263T 〉 C,该突变导致角蛋白17（K17）第88位氨基酸由蛋氨酸变成苏氨酸（p.M88T）,KRT6B基因未见异常。结论 KRT17基因c.263 T 〉 C（p.M88T）突变是该先天性厚甲家系致病基因突变。     

斑块型汗孔角化症一家系MVK基因突变检测

目的：检测1家系7例中国汉族斑块型汗孔角化症（PM）患者MVK基因上的突变位点。方法：收集家系成员7例患者及3名正常成员的临床资料及血液样本,提取外周血DNA,PCR技术扩增MVK全部外显子及其侧翼序列,并采用Sanger测序法对纯化后的PCR产物进行检测。并将检测结果与既往测得676例健康对照的全部外显子进行对比。结果：在7例患者中检测出突变位点（c.604G>A）,此突变曾在播散性浅表性光化性汗孔角化症（DSAP）患者中报道。正常家系成员及健康对照中未检测到此突变。结论：本家系中MVK基因突变（c.604 G>A）与PM发病有关,且为DSAP与PM的共同突变位点。     

表皮松解性掌跖角皮症一家系KRT9基因新突变

目的:检测表皮松解性掌跖角皮症一家系患者角蛋白9(KRT9)基因突变。方法:收集家系成员的临床资料和血样,提取家系中4例患者和3名正常人及50名与本家系无关的正常对照外周血DNA,采用PCR技术扩增KRT9基因所有编码区并进行测序,分别检测家系中的突变情况。结果:该家系中所有患者均存在KRT9基因错义突变(c.484TC),导致第162位密码子由TCT(丝氨酸)转变为CCT(脯氨酸)(p.S162P),家系中3名正常个体和50名健康对照均未发现上述突变。结论:KRT9基因c.484TC错义突变是导致该家系发生表皮松解性掌跖角皮症的遗传基础。     

一残毁性掌跖角化病家系GJB2基因突变研究

目的 对一个中国汉族残毁性掌跖角化病家系进行GJB2基因突变检测,以明确其致病基因。 方法 收集该家系5例患者、4例正常人和100例非该家系成员外周血和家系患者临床资料。提取基因组DNA,PCR扩增包括GJB2基因整个编码序列在内的1015 bp,扩增产物纯化后应用ABI PRISM 3730XL自动测序仪直接双向测序, Sequencher 4.10.1 Demo 软件与基因组序列进行比对分析,查找有无突变基因。结果 该家系所有患者GJB2基因均存在一个杂合错义突变196G→C,导致第一细胞外区域（E1）第66位天冬氨酸被组氨酸替代（即D66H）,而家系中4例正常人和100例非家系成员正常人对照的DNA测序结果均未发现此突变。结论 GJB2基因中D66H错义突变是中国汉族人群中残毁性掌跖角化伴耳聋的致病原因之一。     

Sjogren-Larsson综合征ALDH3A2基因突变研究

目的 检测2例以先天性鱼鳞病、智力发育迟缓及痉挛性截瘫为主要表现的Sj?觟gren-Larsson综合征患者的ALDH3A2基因突变情况。 方法　2例分别为2岁女性及1.5岁男性儿童,家族中均无类似疾病。提取2例患者及其6例相关亲属（每例患儿的父母及哥哥）外周血DNA,采用PCR扩增ALDH3A2基因编码区的全部外显子及其侧翼序列并测序。同时随机抽取100例无关健康人外周血基因组DNA作对照。结果基因检测发现,例1的ALDH3A2基因发生c.325G>A纯合突变,导致氨基酸出现p. Gly109Arg改变,其父母及其未受累的兄长为该突变的杂合携带者。例2的ALDH3A2基因发生c.1157A>G及c.1294A>T复合杂合突变,导致氨基酸出现p. Asn386Ser及p.Arg432X改变,突变分别来自父母。100例健康对照者均未见相同突变。结论 在2例Sj?觟gren-Larsson综合征患者中检测到ALDH3A2基因的p. Gly109Arg纯合突变及p. Asn386Ser与p. Arg432X复合杂合突变,该基因突变可能与患者临床表型相关。 【关键词】 Sjogren-Larsson综合征; 鱼鳞病; 突变; ALDH3A2