原位聚合酶链反应技术检测结节性红斑皮损中Ⅱ型单纯疱疹...

目的 探讨结节性红斑（ＥＮ）的发病与Ⅱ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－２）的关系。方法 用原位聚合酶链反应法（ＩＳＰＣＲ）,对３５ＮＥ皮损组织及１４例正常皮肤组织切片中的ＨＳＶ－２ＤＮＡ进行扩增,ＳＰ免疫组化染色,ＡＥＣ显色,结果 ＨＳＶ－２ＤＮＡ在ＥＮ及正常皮肤中的检出率分别为５７．１％（２０／３５）、８．３％（２／１４）,Ｐ〈０．０１,阳性信号主要位于皮损部位,以小血管为著,细胞内的分布以核内型为主,     

红斑狼疮皮损中浸润细胞免疫表型和角质形成细胞HLA-DR抗原表达的研究

应用抗ＨＬＡＤＲ、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２０的单克隆抗体和ｓｔｒｅｐｔｒａｖｉｄｉｎｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｓｔａｉｎｉｎｇ（ＳＰ）技术对１０名正常人皮肤,１６例ＳＬＥ皮损和１９例ＤＬＥ皮损进行了免疫组化研究。观察到正常人皮肤角质形成细胞未见ＨＬＡＤＲ抗原表达,而ＳＬＥ（６／１６）,ＤＬＥ（８／１９）皮损处角质形成细胞可以表达ＨＬＡＤＲ抗原。在ＳＬＥ、ＤＬＥ真皮内浸润细胞主要为Ｔ淋巴细胞（ＣＤ３＋浸润细胞）,且以ＴＨ细胞（ＣＤ４＋浸润细胞）占优势。另外,还发现在两种ＬＥ表皮角质形成细胞表达ＨＬＡＤＲ抗原处,真皮内可见ＣＤ３＋浸润细胞和激活的Ｔ淋巴细胞（ＨＬＡＤＲ＋浸润细胞）。讨论了ＬＥ皮损角质形成细胞ＨＬＡＤＲ抗原表达及其与病损内浸润细胞免疫表型的关系。ＬＥ皮损处ＨＬＡＤＲ＋角质形成细胞可能具有抗原递呈作用,而角质形成细胞异常表达ＨＬＡＤＲ抗原则可能与真皮内浸润单个核细胞或淋巴细胞释放的ＩＦＮα,ＴＮＦγ等有关。     

异位性皮炎皮损中单一核细胞CD4及TH2型细胞特征因子表达

为了探讨Ｔ细胞尤其是ＴＨ细胞在异位性皮炎（ＡＤ）免疫发病机制中的意义，采用免疫组化法检测８例ＡＤ急性期皮损单一核细胞ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ２０免疫表型和ＩＬ４，ＩＦＮγ表达。结果：ＡＤ急性期皮损单一核细胞大多数呈ＣＤ４或ＣＤ４５ＲＯ表型，少数呈ＣＤ８表型，无ＣＤ２０表型，ＩＬ４蛋白表达阳性，ＩＦＮγ蛋白表达阴性。ＡＤ急性期皮损单一核细胞大多数为ＣＤ４＋Ｔ细胞，且呈ＴＨ２细胞亚型，提示ＡＤ皮肤炎症反应可能是由ＴＨ２细胞介导的皮肤免疫炎症反应，称之为Ⅱ型迟发型超敏反应（ＤＴＨ２）。     

增列细胞核抗原,细胞周期素E及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制 …

目的 探讨细胞周期相关因子增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、细胞周期素Ｅ（ｃｙｃｌｉｎＥ）、ｐ２１（ＷＡＦ１／ＣＩＰ）、ｐ２７在ＨＰＶ６／１１相关尖锐湿疣（ＣＡ）病变中的各种变化及其意义。方法 应用原位杂交技术诊断ＨＰＶ６／１１相关ＣＡ,采用ＳＰ免疫组化染色技术检测５０例ＨＰＶ６／１１阳性ＣＡ患者皮损、２５例正常人皮肤（包 皮）中ＰＣＮＡ、ｃｙｃｌｉｎＥ及ｐ２１、ｐ２７的表达及分布。结果 ①ＣＡ皮损中Ｐ     

聚合酶链反应检测多形红斑皮损中单纯疱疹病毒DNA

为了研究多形红斑（ＥＭ）与单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）之间的关系，特别是探讨与疱疹相关的ＥＭ的临床特点及其在ＥＭ发病中所占比例，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了６０例ＥＭ的典型皮损的活检组织和３２例正常组织及疾病对照标本中的ＨＳＶＤＮＡ。结果显示：２１例（３５％）ＥＭ患者检测出ＨＳＶ特异ＤＮＡ，对照标本（１６份正常皮肤组织和１６份其它皮肤病的皮损标本）中未发现ＨＳＶＤＮＡ。根据病史提供，６０例ＥＭ中有５例是药物相关的ＥＭ，８例是病毒相关的ＥＭ，其余４７例为特发型ＥＭ。研究表明：２１例ＰＣＲＨＳＶＤＮＡ阳性的ＥＭ患者中，仅有２例发病前有口唇疱疹病史，１５／２１例（７１．４％）是复发性ＥＭ，发病高峰在冬季。尽管临床上无明显ＨＳＶ感染史，多数特发性ＥＭ也与疱疹病毒感染有关。ＰＣＲ技术是检测ＥＭ皮损中ＨＳＶ的快速、有效的方法，它可以决定病因上和ＨＳＶ感染有关的病例。     

疱疹病毒gD2基因在大肠杆菌中的高效表达

从单纯疱疹病毒２型（ＨＳＶ２）Ｓａｖ株中扩增糖蛋白Ｄ（ｇＤ）基因６４６ｂｐ片段，克隆入Ｍ１３ｍｐ１８、Ｍ１３ｍｐ１９测序载体。将经测序证明的ＨＳＶ２ｇＤ基因与ＰＷＲ４５０１表达载体进行重组，在大肠杆菌中表达了β半乳糖苷酶ｇＤ融合蛋白。ＳＤＳＰＡＧＥ分析表明，表达产物占大肠杆菌菌体总蛋白含量的５０１％。经ＤｏｔＥＬＩＳＡ及免疫印迹鉴定证实表达产物具有免疫学活性。对ｇＤ２表达产物进行了初步纯化，纯度达９０％。ｇＤ２的高效表达和纯化有助于研究其生物学功能和免疫学特性，为研制生殖器疱疹基因工程疫苗和免疫学诊断试剂提供有利条件。     

STD门诊患者血清HSV－2 IgG抗体检测报告

采用ＥＬＩＳＡ技术检测了８０例ＳＴＤ门诊患者（其中淋病１４例、非特异性泌尿生殖道感染３８例及尖锐湿疣２８例）血清单纯疱疹病毒２型（ＨＳＶ－２）ＩｇＧ抗体。结果发现ＳＴＤ患者血清ＨＳＶ－２ＩｇＧ抗体阳性率为６０．０％，远比正常人群中的２５．３％为高（Ｐ＜０．００１），说明生殖器疱疹病毒感染在我国与西方国家一样，有上升和流行趋势。     

活动性系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞白介素6信使RNA（IL－6mRNA）表达水平的研究

应用反转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测了２１例ＳＬＥ患者及１４例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白介素６信使ＲＮＡ（ＩＬ－６ｍＲＮＡ）表达水平，结果表明活动性ＳＬＥＰＢＭＣｓ中ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达明显高于非活动性患者及正常对照，而非活动期ＳＬＥ与正常组比较无显著统计学差异，提示ＩＬ－６可能参与活动性ＳＬＥ的发病机制。     

SLE患者可溶性抗原及自身抗体检测与临床意义研究

目的：探讨ＳＬＥ患者免疫发病机理及其临床意义。方法：免疫印迹技术测定ＥＮＡ抗体,免疫金标法测定ｄｓ－ＤＮＡ抗体,ＥＬＩＳＡ法测ＡＮＡ、ｓＣＤ１０６、ｓＣＤ９５、ｓＣＤ２５、ｓＣＤ５４。ＥＳＲ按临床检测常规进行。结果：活动性ＳＬＥ患者ｓＣＤ１０６、ｓＣＤ５４、ｓＣＤ２５水平均高于非活动性ＳＬＥ患者的相应值（Ｐ〈０．０５）;而后者又分别高于正常对照组的相应值（Ｐ〈０．０５）;活动期ＳＬＥ患者ｓＣＤ９５水平高于非活动期或正常对照组,后两者ｓＣＤ９５水平无差别（Ｐ〉０．０５）。相关分析表明,ｓＣＤ１０６和ｓＣＤ５３相关（ｒ＝０．５４９,Ｐ〈０．０５）,ｓＣＤ９５与ｓＣＤ２５正相关（ｒ＝０．５６８,Ｐ〈０．０５）,ＥＳＲ与ｓＣＤ１０６、ｓＣＤ５４、ｓＣＤ９５及ｓＣＤ２５均相关,ＡＮＡ只与ｓＣＤ９５相关,ｄｓ－ＤＮＡ在活动     

白癜风患者外周血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平变化的研究

采用ＡＰＡＡＰ法和双缺本夹心ＥＬＩＳＡ技术检测１５０例白癜风患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群及可溶性白介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平。结果显示：（１）寻常型白癜风外周血ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋细胞数、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值明显低于正常对照（Ｐ〈０．０１）,ｓＩＬ－２Ｒ活性显著性高于节段型白癜风和正常人（Ｐ〈０．０１）;节段型白癜风ＣＤ４＾＋、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋与正常对照组比较也显著减少（Ｐ〈０．０     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD23的表达

为了揭示Ｂ细胞中ＣＤ２３的表达与ＳＬＥ发生发展的关系及在ＳＬＥ发病机理中可能的作用，我们应用ＡＢＣ免疫组化法和斑点核酸杂交技术对ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）ＣＤ２３蛋白和ｍＲＮＡ表达进行了检测。结果显示：３０例ＳＬＥ患者ＰＢＭＣＣＤ２３蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０１），且与疾病活动呈正相关关系（ｒｓ＝０．３８１４，Ｐ＜０．０５）；具有不同ＡＮＡ、抗ｄｓＤＮＡ抗体水平，有无伴肾损、脑损的ＳＬＥ患者，ＰＢＭＣＣＤ２３表达均无显著性差异（Ｐ均＞０．０５）；单纯使用皮质类固醇激素治疗或和其它免疫抑制剂联合治疗的ＳＬＥ患者，ＰＢＭＣＣＤ２３表达亦无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。２０例ＳＬＥ患者ＰＢＭＣＣＤ２３ｍＲＮＡ表达较正常人显著增高（Ｐ＜０．０１）。经治疗病情稳定后，ＣＤ２３蛋白和ｍＲＮＡ表达均降至正常（Ｐ均＞０．０５）。提示在ＳＬＥ活动期Ｂ细胞高度激活、增殖并大量表达ＣＤ２３，且该种表达与ＡＮＡ、抗ｄｓＤＮＡ抗体产生水平无直接关系     

STD门诊患者血清HSV—2IgG抗体检测报告

采用ＥＬＩＳＡ技术检测了８０例ＳＴＤ门诊患者（其中淋病１４例、非特异性泌尿生殖道感染３８例及尖锐湿疣２８例）血清单纯疱疹病毒２型）ＨＳＶ－２）ＩｇＧ抗体。结果发现ＳＴＤ患者血清ＨＳＶ－２ＩｇＧ抗体阳性率为６０．０％，远比正常人群中的２５．３％为高（Ｐ＜０．００１），说明生死器疱疹病毒感染在我国与西方国家一样，有上和流行趋势。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞中Th1型细胞因子的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中Ｔｈ１型细胞因子表达的情况。方法 用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ表达（４１例）和γ干扰素（ＩＦＮ－γ）ｍＲＮＡ表达（３１例）的水平。结果 与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者中ＩＬ－２表达水平降低者占７８．０％,ＩＦＮ－γ表达水平降低者占８３．９％。活动期ＳＬＥ组ＰＢＭＣ中ＩＬ－２和     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞bcl-2的表达及临床意义

目的 为了探讨ｂｃｌ－２基因在系统红斑狼疮（ＳＬＥ）发病机制中的作用及临床意义。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３１例ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平和流式细胞仪双标记法分析其Ｔ、Ｂ细胞ｂｃｌ－２蛋白表达。结果 活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平明显升高,占５５．６％,且活动期ＳＬＥ患者ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ细胞亚群Ｐ     

男性非淋菌性尿道炎患者性病病原体的研究

应用培养、多聚酶链反应（ＰＣＲ）和抗原检测法对１０４６例非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）患者的前列腺液（ＥＰＳ）进行检测。结果显示：ＣＴ阳性为１２６例（１２．０４％），ＵＵ为１４９例（１２．２４％）、ＣＤ为１１２例（１０．７０％）、ＴＶ为３４例（３．２５％）、ＨＳＶ２为３２例（３．０５％）、ＭＨ为２１例（２．０％）。在１２６例ＣＴ阳性患者，混合感染７８例（５７．１４％），其中ＣＴ＋ＵＵ２８例（２２．２２％）、ＣＴ＋ＵＵ＋ＭＨ４例（３．１７％）、ＣＴ＋ＣＤ＋ＴＶ１２例（９．５２％）。本研究结果可为临床男性ＮＧＵ感染病因学诊断与治疗提供实验室依据。     

Fas抗原及Fas配体在红斑狼疮患者皮损中的表达

目的 研究Ｆａｓ抗原及Ｆａｓ配体（Ｆａｓ－Ｌ）在红斑狼疮皮损中的表达情况。方法 应用免疫组化技术检测２５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）及１４例盘状红斑狼疮（ＤＬＥ）不同病程的皮损中Ｆａｓ抗原及Ｆａｓ－Ｌ的表达。结果 ＳＬＥ及ＤＬＥ早期皮损朊细胞Ｆａｓ抗原表达强度显著高于正常皮肤（Ｐ〈０．０１）,与病程呈负相关（Ｐ〈０．０５）,且真皮中单一核细胞亦有Ｆａｓ抗原表达;红斑狼疮患者皮损及正常皮肤的角朊细胞均     

色素障碍性皮肤病

２００１１１３２白癜风患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群和ｓＩＬ－２Ｒ水平变化的研究／汪新义（山东省皮防所）…／／临床皮肤科杂志．－２０００，２９（５）．－２５８～２６０ 采用 ＡＰＡＡＰ法和双抗体夹心 ＥＬＩＳＡ法，对１５０例自癜风患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群和可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）进行了检测。结果显示寻常型白癜风ＣＤ３＋、ＣＤ４＋细胞数和ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值均显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１），ｓＩＬ－２Ｒ活性明显高于节段型白癜风和正常人（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０１）；节段型自癜风ＣＤ３…     

SLE患者外周血单个核细胞中IL—10与γ干扰素的表达

为了探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中ＴＨ２／ＴＨ１型细胞因子自然表达的趋势,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０名正常人和１５例活动期ＳＬＥ患外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素１０（ＩＬ－１０）和γ干扰素（ＩＦＮγ）ｍＲＮＡ表达的水平。结果,与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达水平增高,而ＩＦＮγｍＲＮＡ的表达水平降低（均Ｐ〈０．０１）,表明活动性ＳＬＥ     

性传播疾病

２００１１２７３人乳头瘤病毒１６型Ｅ６／Ｅ７基因对人角质形成细胞生长及ＣｙｃｌｉｎＡ，ＣｙｃｌｉｎＤ１和ｃｄｋ４的影响／马翠玲（四军大西京医院皮肤科）…／／第四军医大学学报．－２０００，２１（９）．－１１５６～１１５８ 为了研究 １６型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）Ｅ６／Ｅ７对人角质形成细胞周期素（ＣｙｃＣｌｉｎＡ，ＣｙｃｌｉｎＤ１）及细胞周期素依赖性激素（ｃｄｋ４）的影响。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ介导法将ＰＬＸＳＮ１６Ｅ６／Ｅ７质粒转染逆转录病毒包装细胞ＰＡ３１７，挑选Ｇ４１８抗性克隆，检测病毒滴…     

sIL-2R及IgE在异位性皮炎患者血清中的测定

为了探讨异位性皮炎（ＡＤ）的发病机理,了解血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ２Ｒ）在ＡＤ患者血清中的意义,对４７例ＡＤ患者作了血清ｓＩＬ２Ｒ及ＩｇＥ检测,并对１１例患者在治疗好转后予以复查。结果显示,ＡＤ患者的血清ｓＩＬ２Ｒ显著高于正常对照组（Ｐ＜０００１）,但与ＡＤ的严重程度无显著关系（Ｐ＞００５）。其中１１例患者经治疗后病情显著好转（Ｐ＜０００１）,而血清的ｓＩＬ２Ｒ仍无显著下降（Ｐ＞００５）。