混合谱系激酶结构域样假激酶在小鼠脑缺血后脑水肿组织中的表达

目的:研究混合谱系激酶结构域样假激酶(MLKL)在C57BL/6J小鼠脑缺血后脑水肿组织中的表达及作用。方法:通过向野生型(WT)和MLKL敲除(MLKL~-/~-) C57BL/6J小鼠尾静脉注射浓度为6 mg/ml玫瑰红溶液(剂量为40 mg/kg)构建缺血后脑水肿模型。一周后取组织,利用免疫荧光染色技术观察MLKL在缺血后脑水肿区的表达和分布,Western Blot检测MLKL在小鼠缺血后脑水肿区的表达水平,采用免疫电镜技术观察MLKL的亚细胞水平定位,苏木精-伊红染色(HE)观察组织缺血坏死及水肿情况。结果:免疫荧光染色结果显示正常WT小鼠大脑皮质无MLKL表达,缺血后脑损伤区的WT小鼠有大量MLKL阳性细胞,MLKL主要表达于GFAP阳性星形胶质细胞; Western Blot结果显示脑缺血后脑损伤区的MLKL表达显著增加;免疫电镜结果显示脑水肿区域血管周围的星形胶质细胞内有大量MLKL蛋白胶体金颗粒分布; HE染色结果显示MLKL敲除可显著减轻脑水肿程度。结论:脑缺血可上调WT小鼠缺血部位MLKL表达,提示MLKL可能参与缺血后的脑水肿发生。     

雌激素调控小鼠大脑皮质及海马PCSK9表达

目的:研究脂代谢负调控因子人类枯草溶菌素转化酶9(Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)在小鼠脑内的表达及雌激素对其表达的影响。方法:选取15只10周龄C57BL/6J雌性小鼠随机分为:假手术组(n=5),去势组(n=5),去势+雌激素组(n=5)。其中,去势+雌激素组小鼠在去势4 w后每周皮下注射环戊丙酸雌二醇0.001 g·kg~(-1),共三次,3 w后收集小鼠脑组织,采用HE染色、免疫组化及Western Blot法分别评价小鼠脑内PCSK9蛋白表达及定位。结果:PCSK9主要表达于小鼠海马及大脑皮质;与假手术组相比,去势后小鼠脑内海马及皮质区的PCSK9蛋白的表达量均有显著增加(P0.05),去势后补充雌激素能明显减少上述脑区PCSK9表达(P0.001)。结论:PCSK9在小鼠海马及大脑皮质表达,其表达可受到雌激素调控。     

CPZ介导急性脱髓鞘小鼠海马中nestin的表达

目的:探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)介导急性脱髓鞘小鼠海马中nestin的表达。方法:用掺入0.2%CPZ的普通饲料饲养C57BL/6小鼠6周,制备脱髓鞘模型,然后使用免疫荧光染色、q RT-PCR、Western Blot方法,检测小鼠脑内髓鞘脱失后海马中nestin的表达变化。结果:(1)体重称量结果显示:CPZ组体重明显低于对照组(P0.01);(2)免疫荧光结果显示:CPZ组海马CA区和DG区颗粒细胞层中nestin阳性细胞明显低于对照组分别为:P0.05,P0.01;(3)Western Blot和q RT-PCR实验结果显示:CPZ组海马中nestin蛋白和m RNA含量均明显低于对照组(P0.05)。结论:CPZ介导小鼠急性脱髓鞘后海马内nestin表达降低,提示髓鞘脱失可能会抑制nestin表达。     

低频脉冲超声对小鼠海马区小胶质细胞的影响

目的研究低频脉冲超声(LIPUS)对小鼠海马区的影响及其产生的可能机制。方法取成年清洁级C57/BL6小鼠32只,随机分为Sham组和LIPUS组。Sham组(16只)为假处理组;LIPUS组(16只)使用低频脉冲超声(平均功率强度为150 mW/cm~2)经颅处理小鼠头部。7 d后,采用免疫组织化学(IHC)及蛋白质免疫印迹法(WB)测定小鼠大脑海马区双皮质素(DCX)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合接头分子(Iba1)的表达,并通过旷场实验观察小鼠行为学改变。结果低频强度脉冲超声处理7 d后,IHC结果可见LIPUS组小鼠大脑海马区小胶质细胞个数较Sham组显著增多,差异具有统计学意义(P0.05);WB提示LIPUS组海马区Iba1蛋白表达较Sham组显著增高,差异具有统计学意义(P0.05),同时LIPUS组在旷场实验中得分也明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论低频脉冲超声经颅刺激小鼠大脑可导致海马区小胶质细胞数量增加,同时降低小鼠的焦虑状态。     

RACK1在苯环利定致精神分裂症模型小鼠脑中的分布特点

目的:建立苯环利定(Phencyclidine,PCP)诱导精神分裂症小鼠模型,考察活化的蛋白激酶C受体1(Receptor for activated C kinase 1,RACK1)在脑内的表达变化。方法:将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和精神分裂症模型组(n=24)。模型组小鼠皮下注射PCP1.5 mg?kg^-1,对照组皮下注射等体积生理盐水,连续注射7d后进行刻板行为实验,记录刻板行为评分,并采用免疫荧光染色测定全脑RACK1的表达情况。结果:与对照组相比,PCP皮下注射导致小鼠反复摇头、转圈等刻板行为明显增加(P<0.05),且小鼠脑内小胶质细胞明显增生活化。免疫荧光检测结果显示,PCP小鼠海马RACK1表达明显增强,主要表达于神经元,未见与小胶质细胞的共定位。结论:精神分裂症小鼠的刻板行为可能与海马神经元RACK1高表达相关。     

炎症反应通过上调CD36表达促进小鼠肾脏损伤

目的:探讨慢性炎症对小鼠肾脏CD36表达的影响及其在小鼠肾脏损伤中的作用。方法:将8周龄雄性C57BL/6J小鼠和CD36基因敲除(CD36KO)小鼠随机分为C57BL/6J生理盐水注射组、C57BL/6J酪蛋白注射组和CD36KO酪蛋白注射组,每组8只。高脂喂养处理14周后,收集小鼠血清、24 h尿液和肾组织样本。ELISA试剂盒检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,全自动生化仪测定血、尿肾功能指标,HE染色和Masson染色分析肾脏病理改变,real-time PCR和Western blot检测肾脏组织中CD36及炎症/趋化因子(MCP-1、IL-6和TNF-α)m RNA和蛋白的表达,试剂盒测定组织内过氧化氢含量,免疫组化染色测定肾组织Nrf2和TGF-β1的蛋白表达。结果:与生理盐水注射组相比,酪蛋白注射能增强C57BL/6J小鼠血清TNF-α含量和肾组织中TNF-α的蛋白表达(P 0. 05),提示酪蛋白注射能成功诱导小鼠全身和肾脏局部的慢性炎症。同时酪蛋白注射显著促进了小鼠肾组织的CD36和TGF-β1蛋白表达,引起肾小球硬化、蛋白尿和血清肌酐含量显著增加,组织过氧化氢含量明显增加,Nrf2含量和抗氧化能力明显降低(P 0. 05)。而酪蛋白处理的CD36基因敲除小鼠肾组织病理学改变不明显,血、尿肾功能指标和尿量较酪蛋白处理的C57BL/6J小鼠明显降低,且肾组织过氧化氢含量低于酪蛋白处理的C57BL/6J小鼠(P 0. 05)。结论:炎症应激通过促进小鼠肾组织CD36表达,促进氧化应激,导致小鼠肾损伤。     

γ射线对C57BL/6J和C3H/HeN小鼠肺成纤维细胞生物学行为影响的比较研究

目的比较C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠肺成纤维细胞以不同剂量的60Coγ射线照射后生物学行为的异同。方法原代分离培养C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠肺成纤维细胞(LF),应用2、4、6和8Gy的60Coγ射线照射后,通过MTT比色法、流式细胞术、AgNOR染色和免疫荧光细胞化学染色法,检测照射后两种LF的增殖活力、细胞周期以及a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的变化。结果以2~8Gy照射后,C57BL/6J和C3H/HeN小鼠的LF增殖活力与正常对照组相比较未见明显增强。照射后,C57BL/6J小鼠的LF非整倍体增多,a-SMA高表达,MMP-1的表达呈弱阳性,TIMP-1的表达呈增强趋势。照射后,C3H/HeN小鼠的LF出现G2-M期阻滞,a-SMA的表达减弱至消失,MMP-1和TIMP-1的表达均呈增强趋势。结论以60Coγ射线照射后,C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠的LF生物学行为不同,C57BL/6J小鼠的LF呈“活化”状态,为该种小鼠易发生肺纤维化的细胞学基础提供了实验依据。     

TLR4信号缺失对MPTP帕金森小鼠模型黑质Beta-catenin信号的表达影响

目的观察帕金森小鼠模型中TLR4通路对Beta-catenin信号的表达影响。方法 C57BL小鼠和TLR4敲除(TLR4knock out,TLR4 KO)小鼠各36只,分别注射生理盐水和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)。采用RT-PCR、Westernblot检测4组之间的Beta-catenin的m RNA和蛋白表达变化,进一步采用免疫荧光的方法检测黑质区星形胶质细胞中Beta-catenin的共表达变化。结果 RT-PCR及Western blot结果显示,与生理盐水注射组小鼠相比,C57BL、TLR4KO小鼠在MPTP注射后,mRNA和蛋白表达明显升高(P0.01);并且,与C57BL小鼠MPTP注射组相比,TLR4KO小鼠MPTP注射组Beta-catenin的mRNA和蛋白表达明显升高(P0.01)。进一步的免疫荧光结果显示,与C57BL小鼠MPTP注射组相比,TLR4KO小鼠MPTP注射组星形胶质细胞(GFAP)中表达的beta-catenin明显升高。结论 TLR4通路在亚急性帕金森MPTP模型中,对黑质beta-catenin蛋白的表达起重要调控作用,Toll样信号与Beta-catenin信号这种互动关系可能在帕金森发病机制中起着重要的作用。     

滴鼻感染甲型流感病毒对BALB / c 和C57BL / 6J 小鼠自发行为学 的比较研究

目的:比较滴鼻感染甲型流感病毒PR8的C57BL/6J和BALB/c两种品系小鼠旷场自发行为表现的差异,探讨流感病毒感染对两种品系小鼠抑郁焦虑情绪的影响。方法:健康C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠各20只,随机分为甲型流感病毒PR8感染组(PR8组)和生理盐水对照组(CON组),每组10只。记录每组小鼠1周内的体质量、在旷场行为箱体内的行走总路程、周边区域运动路程、平均运动速度及粪便排泄情况,并检测感染后的第7天小鼠脑组织炎症因子(TNF-α、IL-1β、CXCL10、BDNF)转录水平。结果:滴鼻感染PR8后均引起小鼠体质量显著下降,且BALB/c小鼠较C57BL/6J小鼠体质量下降更明显。BALB/c小鼠较C57BL/6J小鼠在旷场试验中行走总路程、周边区域运动路程减少更明显。感染后第7天BALB/c小鼠中枢神经系统(CNS)炎症因子表达显著上调。结论:滴鼻感染PR8可引起小鼠体质量下降,活动性降低,出现一定程度的抑郁焦虑情绪,并伴随CNS炎症因子显著上调。且BALB/c小鼠对PR8的敏感度较C57BL/6J小鼠明显,更适宜做PR8感染的模型小鼠。本研究为研究流感病毒外周感染诱导小鼠空间记忆、学习认知、情绪等调控奠定基础,为进一步探究流感相关脑病的病理机制提供依据。     

帕金森病MPTP模型小鼠海马内星形胶质细胞活化和p-CREB的表达下降

目的:通过检测帕金森病(Parkinson's disease,PD)MPTP模型小鼠海马内GFAP和p-CREB的表达,探讨PD认知障碍发生的原因。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和PD模型组,每组12只。PD模型组经腹腔注射MPTP和丙磺舒,3.5 d注射1次,共10次,持续5周,对照组小鼠注射等量生理盐水。在第6周,旷场试验和爬杆试验评价运动功能。免疫组化检测黑质、纹状体TH的表达及海马GFAP和p-CREB的表达;Western Blot检测p-CREB的表达。结果:旷场实验和爬杆实验结果显示PD模型组小鼠运动能力明显低于对照组(P0.001)。免疫组化显示PD模型组黑质TH阳性神经元和纹状体TH阳性神经纤维均明显低于对照组(P0.001),海马的GFAP阳性细胞的面积明显多于对照组。而Western Blot和免疫组化染色均显示PD模型组海马p-CREB的表达明显少于对照组(P0.001)。结论:慢性PD模型小鼠海马内星形胶质细胞激活和p-CREB表达降低,可能参与了PD认知损害的病理过程。     

规律运动影响AD模型小鼠脑内单羧酸转运蛋白表达并改善认知功能

目的:通过对不同月龄段的AD模型小鼠进行长时间的规律有氧运动训练,来进一步阐述单羧酸转运蛋白(MCTs)在中枢的表达改变与AD模型小鼠认知功能的关系。方法:选择2、6、10月龄的AD模型小鼠(APP/PS1双转基因小鼠)和WT小鼠(C57BL/6J),给予8周的游泳训练至4、8、12月龄作为实验组。同时选择未进行游泳训练的4、8、12月龄AD模型小鼠和WT小鼠做为对照组。采用Morris水迷宫进行行为学检测(隐蔽平台实验和空间探索实验),采用Western Blot检测脑组织匀浆中MCT1、MCT2、MCT4蛋白表达水平,采用免疫组织化学染色方法观察其大脑皮层和海马区MCT1、MCT2、MCT4的表达情况。结果:(1)Morris水迷宫结果显示:在隐蔽平台实验中,经过8周游泳训练后的小鼠在前两天内较对照组相比平均逃避潜伏期和逃避路程明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。在空间探索实验中,实验组小鼠60 s内在目标象限停留的时间明显高于对照组小鼠(P0.05)。(2)Western Blot检测8月龄实验组和对照组小鼠脑组织匀浆MCTs的表达量,结果显示:游泳训练后实验组AD模型小鼠和WT小鼠MCTs表达量较未训练小鼠相比显著增加(P0.05)。(3)脑组织免疫组织化学染色结果显示:实验组中MCT1、MCT4在大脑皮层及海马区的表达较对照组升高(P0.05);而MCT2表达水平在两组中没有显著性差异(P0.05)。结论:长期的规律有氧运动增加了AD模型小鼠脑内不同亚型单羧酸转运蛋白的表达量,改善了中枢神经系统能量代谢状态,提高了认知功能。     

FOXO3a蛋白在缺氧小鼠脑组织中的表达

目的:探讨叉头框蛋白O3a(FOXO3a)在缺氧小鼠大脑组织中的表达。方法:16只SPF级3月龄C57小鼠随机分为对照组(control)和缺氧组(hypoxia)。两组小鼠分别接受常氧浓度环境及低氧环境处理1 h,应用Western Blot法定量检测FOXO3a蛋白的表达水平;应用免疫荧光染色技术检测FOXO3a蛋白在脑组织中的表达分布。结果:与control组比较,应用Western Blot检测,发现缺氧后小鼠脑组织FOXO3a蛋白表达水平上调;免疫荧光检测显示缺氧小鼠的脑皮层、海马区中FOXO3a蛋白表达水平明显升高(P<0.01),其中神经元及星形胶质细胞的FOXO3a表达均明显升高(P<0.01)。结论:缺氧可导致小鼠脑皮层、海马区神经元及星形胶质细胞FOXO3a蛋白表达上调。     

饥饿、糖尿病和肥胖状态对小鼠肝脏SOCS2基因表达的影响

目的确定小鼠肝脏SOCS2基因在饥饿、糖尿病和肥胖状态下的表达水平,并初步研究SOCS2对糖异生的影响。方法动物分3组:C57BL/6J小鼠、对照组(饱食)和实验组(饥饿24 h);糖尿病模型小鼠db/db及对照小鼠db/m饱食;肥胖模型小鼠ob/ob及其对照C57BL/6J小鼠(饱食)。处死小鼠后提取肝脏RNA做反转录PCR,荧光实时定量PCR检测小鼠肝脏SOCS2及糖异生相关基因在3组小鼠中的表达水平;使用腺病毒表达系统在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,Western blot检测SOCS2蛋白的表达,葡萄糖生成实验检测糖输出。结果饥饿使C57BL/6J小鼠肝脏中SOCS2 mRNA水平下调,db/db和ob/ob小鼠肝脏SOCS2基因表达比其对照小鼠均明显下降(P0.05),调节糖异生的关键基因PGC-1α、PEPCK和G6Pase的mRNA水平均上升。在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,得到大小为Mr 23 000的蛋白,糖输出受到明显抑制。结论初步认定SOCS2可抑制C57BL/6J小鼠原代肝细胞糖异生,可能是治疗糖尿病的一个新靶点。     

B 细胞衔接蛋白BANK 在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用

目的:探讨B 细胞特异性衔接蛋白BANK(B cell adoptor protein with ankyrin repeats)在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)中的作用。方法:MOG35-55 多肽免疫C57BL/6 鼠和BANK 缺陷(BANK-deficient,BANK-/ - )鼠制备EAE 模型,观察实验动物临床症状及中枢神经系统的病理学变化;提取小鼠脑组织及脾脏,经流式细胞术检测中枢神经系统及外周免疫器官中的CD4+ T 细胞、CD8+ T 细胞及调节性T 细胞的变化。结果:BANK-/ - 鼠EAE 临床症状评分明显高于C57BL/6 鼠,且体重减轻明显(P<0.05);HE 染色结果显示,BANK-/ - 鼠较C57BL/6 鼠炎症感染灶明显增多。流式细胞术结果显示,相对于C57BL/6 鼠BANK-/ -鼠中枢神经系统中CD8+ T 细胞百分比明显增多,而脾脏中调节性T 细胞百分比明显减少,CD4/ CD8 比值倒置(P<0.05)。结论:B 细胞衔接蛋白BANK 的表达抑制EAE 炎症反应。     

肝X受体激动剂GW3965对应激小鼠海马小胶质细胞活化的影响

目的:研究肝X受体（LXRs）激动剂GW3965对慢性不可预知性应激（CUS）抑郁模型小鼠海马CA1、CA2/3和DG区内小胶质细胞密度和神经炎症的作用。方法:选取4～6周龄的雄性C57BL/6J小鼠，适应性喂养1周后，随机分为对照组（control）、对照+GW组（GW）、抑郁模型组（CUS）以及抑郁模型+GW组（CUS+GW）。对CUS组和CUS+GW组小鼠进行10周的CUS干预；从第7周起，对GW组和CUS+GW组小鼠进行4周的GW3965给药。第10周末进行行为学测试后运用免疫荧光方法评估小鼠海马各亚区内小胶质细胞的密度，并采用Western Blot检测海马炎症因子的水平。结果:10周的CUS干预显著减少C57小鼠的体重以及糖水偏好实验结果，并显著增加强迫游泳实验中小鼠的不动时间；4周的GW3965治疗可以逆转以上结果。CUS干预显著增加小鼠海马CA1区、CA2/3区和DG区内Iba1⁺小胶质细胞密度，以及海马炎症因子IL-1β、TNF-α和转录因子NF-κB的蛋白表达水平，显著降低抗炎介质CD206的蛋白表达水平；而GW3965治疗可逆转上述变化。结论...     

肺炎衣原体对C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞泡沫化的影响

目的:探讨肺炎衣原体在C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞泡沫化过程中的作用。方法:将肺炎衣原体与C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞培养72h后用油红O方法染色观察细胞的形态变化并测定细胞内胆固醇的含量。结果:肺炎衣原体能使C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞胞浆内脂质颗粒增多,胆固醇酯占总胆固醇的比例增加。结论:肺炎衣原体能促进C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞泡沫化。     

激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病

目的检测α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)对M2型小胶质细胞的影响,探索其减轻脓毒症脑病(SAE)的机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)于2月龄雄性C57BL/6小鼠构建SAE模型,比较两组小鼠学习记忆能力的改变。采用Western blot法检测海马组织中α7nAchR的表达变化。给予腹腔注射α7nAchR的激动剂二甲氧基苯亚胺基假木贼碱(GTS-21),观察给予激动剂后海马组织中α7nAchR的表达变化,同时探索GTS-21是否能减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。通过免疫荧光细胞化学染色法检测精氨酸酶1(ARG1)、离子钙结合接头蛋白1(Iba-1)的表达确定SAE小鼠M2型小胶质细胞数量的变化,以及GTS-21对M2型小胶质细胞数量的影响。结果 SAE小鼠的新物体识别及恐惧记忆能力显著下降,小鼠海马组织中α7nAchR表达显著降低。GTS-21可改善SAE小鼠的学习记忆障碍,增加脑组织中α7nAchR的表达。同时,脓毒症小鼠海马组织中M2型小胶质细胞显著减少,而GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞的数量。结论 SAE小鼠海马组织中α7nAchR表达降低,使抑制炎症反应的M2型小胶质细胞减少, GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞数量,减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。     

射频辐射诱导小鼠焦虑样行为的机制探讨

目的:探讨1. 8 GHz射频辐射诱导小鼠产生焦虑样行为的机制。方法:我们前期研究发现,1. 8 GHz射频辐射可诱导小鼠产生焦虑样行为,同时伴有脑内γ-氨基丁酸(GABA)水平的下降,为进一步探讨其分子机制,30只雄性C57BL/6小鼠被随机分为射频辐照(RF)组和假辐照(Sham)组,然后用1. 8 GHz射频辐照源辐照小鼠,每天辐照6 h,连续辐照28 d(脑SAR:2. 2 W/kg)。辐照结束后,采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS)检测小鼠海马及大脑皮层内单胺类神经递质含量;免疫荧光染色法观察海马及杏仁核内星形胶质细胞和小胶质细胞的形态、分布及细胞数量; Western Blot检测海马及大脑皮层内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙接头蛋白抗原(Iba-1)、γ-氨基丁酸B类受体1亚型(GABA-BR1)、γ-氨基丁酸B类受体2亚型(GABA-BR2)蛋白表达水平。结果:与Sham组相比,RF组小鼠海马及大脑皮层内三种单胺类神经递质(多巴胺、去甲肾上腺素、5-羟色胺)含量无明显改变; RF组小鼠海马和杏仁核内星形胶质细胞和小胶质细胞的形态、分布及细胞数量与Sham组相比无显著差异;并且RF组小鼠大脑皮层及海马组织内GFAP和Iba-1蛋白表达水平与Sham组相比无明显差异。RF组小鼠大脑皮层及海马组织内GABA-BR1和GABA-BR2蛋白表达水平与Sham组相比明显下降,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:小鼠发生焦虑样行为可能与GABA水平下降及GABA-B型受体表达下调有关。     

碱性成纤维细胞生长因子对小鼠创伤性脑损伤后神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对小鼠脑损伤后伤侧皮质和海马神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响. 方法 36只小鼠随机分为对照组、生理盐水组、bFGF组,每组各12只.采用自由落体打击装置建立脑损伤模型,分别于建模后3d和7d取脑(每时相点6只),应用免疫荧光双标和免疫印迹法检测大脑皮质、海马神经细胞凋亡因子caspase-3的变化,以及大脑皮质中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达. 结果 bFGF组皮质和海马中caspase-3的表达比生理盐水组和对照组减少(P<0.05);bFGF组皮质中GFAP表达比生理盐水组和对照组增加(P<0.05);生理盐水组与对照组的caspase-3及GFAP表达差异无统计学意义(P>0.05). 结论 bFGF能降低小鼠脑损伤后大脑皮质和海马caspase-3表达并增高大脑皮质GFAP表达,从而促进大脑皮质星形胶质细胞活化和抑制神经细胞凋亡.     

探讨抑制NF-κB信号通路对TREM2表达的影响

目的通过抑制NF-κB信号通路,探讨其对原代培养小胶质细胞TREM2表达的影响。方法取新生C57BL/6小鼠大脑皮质和海马,进行原代培养,将培养至10 d的混合胶质细胞分离,纯化出小胶质细胞,将其分为空白组和1、2、4、6、8、10μmol/L NF-κB抑制剂(PDTC)组。继续培养24 h后,CCK8法检测小胶质细胞存活率筛选适宜PDTC浓度,Western blotting法检测小胶质细胞TREM2的表达。结果与空白组相比,给予NF-κB抑制剂后,原代培养的小胶质细胞表达TREM2的量显著增加(P0.01)。结论抑制NF-κB信号通路增加小胶质细胞TREM2的表达,进而可能有助于中枢神经系统中炎症的调控。