木犀草素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的神经保护作用

目的：探究木犀草素（Lut）对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠是否具有神经保护作用及其作用机制。方法：将7日龄新生大鼠分为假手术组、模型组（HIBD组）和Lut治疗组（HIBD+Lut组）。用Rice-Vannucci法建立新生大鼠HIBD模型。HIBD+Lut组在造模后即刻通过腹腔注射给予50 mg/kg Lut,连续3 d,模型组和假手术组同时腹腔注射等体积生理盐水。3 d后,用氯化三苯基四氮唑（TTC）染色评估脑梗死范围;用干/湿重脑含水量法评估缺血脑半球的脑水肿情况;用苏木精-伊红（HE）染色以及原位末端转移酶标记（TUNEL）和神经元核抗原（NeuN）荧光双标共定位法观察缺血脑半球海马和皮质中神经元损伤情况;用商用试剂盒检测缺血脑半球中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）水平;用Western blot法检测缺血脑半球的海马和皮质中核因子E2相关因子2(NRF-2)和血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白表达水平。取35日龄大鼠,用水迷宫实验评估大鼠的认知功能情况。结果：与假手术组比较,HIBD组大鼠脑梗死、脑...     

亚硝酸盐暴露致雄性小鼠生殖毒性的探讨

目的 探讨亚硝酸盐暴露对雄性小鼠生殖毒性的分子机制。 方法 36只2月龄健康雄性小鼠,随机分为对照组(生理盐水）、低剂量组（60 mg/kg）和高剂量组（120 mg/kg）,每组12只进行亚硝酸盐灌胃3个月,观察小鼠的生长状况,HE染色法观察睾丸组织病理变化,免疫荧光和Western blotting方法分析检测睾丸组织细胞增殖与凋亡情况及DNA甲基化、组蛋白去乙酰化相关酶的表达情况。 结果 亚硝酸盐暴露组小鼠较对照组小鼠体重增加缓慢,睾丸指数降低（P<0.01）,形态发生病理性改变;亚硝酸盐暴露组小鼠睾丸组织细胞增殖较对照组明显减少,细胞凋亡较对照组明显增加（P<0.01）;同时DNA甲基化和组蛋白去乙酰化水平高于对照组（P<0.01）,且均具有剂量依赖性。 结论 亚硝酸盐暴露通过抑制雄性小鼠生长发育及睾丸生精细胞增殖,诱导睾丸生精细胞凋亡,造成雄性生殖毒性;DNA甲基化及组蛋白去乙酰化水平升高,提示表观遗传学可能参与了亚硝酸盐暴露对雄性生殖系统的损伤过程及调控机制。     

正畸治疗过程中发生牙龈炎的临床分析

目的探讨正畸治疗与牙龈炎的相关因素和防治措施。方法拟采用牙龈指数、菌斑指数及牙石指数的测定法来确定牙龈炎的多种类型。结果儿童组发病率为58.33%,成人组发病率为33.33%,儿童组牙龈炎明显多于成人组,差异有显着性。结论良好自信的口腔卫生和戴入矫治器的熟练掌握,可以减轻正畸治疗中发生牙龈炎。     

低能量氦-氖激光照射对体外培养大鼠海马神经元微管结合蛋白表达的影响

目的探讨氦-氖激光照射对体外培养神经元微管结合蛋（MAP2）表达的影响。 方法采用无血清细胞培养方法,分离并体外培养新生大鼠海马神经元,并以低能量氦-氖激光对其照射,于培养后14d神经元生长旺盛时期取出各组培养皿内盖玻片进行MAP2免疫学组织化学染色,光镜下观察,拍照计数,与其他对照组比较,观察激光照射对神经元微管结合蛋白（MAP2）表达的影响。 结果将氦-氖激光照射组与对照组比较,阳性表达细胞轮廓清晰,照射后阳性表达MAP2的培养神经元数目为（15.85±2.79）个/高倍视野,明显高于对照组［（9.23±2.56）个/高倍视野］的数量,且组间差异有统计学意义（P<0.01）。 结论氦-氖激光照射能促进体外培养新生大鼠海马神经元MAP2的表达。     

选择性脊神经后根切断刺激对大鼠脊髓腰膨大以及脑干网状结构抑制区和易化区c-Fos表达的影响

目的：将选择性脊神经后根切断作为刺激源，观察刺激后不同时间点大鼠脊髓腰膨大以及脑干网状结构抑制区和易化区兴奋神经元细胞核中c—Fos蛋白表达的差异，探讨其对神经元活性和功能的影响。方法：实验于2004—02/06在郑州大学人体解剖学教研室完成。将成年Wistar大鼠64只随机分为脊神经后根切断组（n=24），假手术组（n=24）和正常对照组（n=16）。①模型制作：取背部正中切口，在&;#215;10手术显微镜下咬除腰1和腰2椎板，分离左侧腰3-6脊神经后根，并切断2mm。假手术组只暴露脊髓，不进行脊神经后根切断。②组织切片的制备：分别于术后1，2，6和12h相应的时间点，对各组动物进行心脏灌注后，取动物脊髓的腰膨大和脑干部，连续冠状切片，按Paxinos和Watson图谱进行组织核团定位。③免疫组织化学法染色后，在光镜下进行细胞计数和摄影。④细胞计数：光镜下对各切片的免疫阳性细胞进行计数,c-Fos蛋白阳性表达判定标准为细胞核染成深棕色，胞浆未染色，神经细胞无形态轮廓显示。每只大鼠观察腰膨大6张切片，分别计数左侧脊髓灰质板层Ⅰ～Ⅵ内c-Fos蛋白阳性表达细胞核的数量；观察网状结构抑制区和易化区切片6张，计数阳性标记细胞核数量。结果：脊神经后根切断组动物在手术后有2只死亡，随即进行了补充，纳入最后分析的动物为24只；假手术组动物24只，正常对照组动物16只，全部进入统计分析。①各组大鼠左侧腰髓3-6灰质板层Ⅰ～Ⅵ c—Fos的表达：脊神经后根切断组脊髓损伤后1，2，6，12h时间点均有明显表达，主要集中在Ⅰ～Ⅲ板层；假手术组在1，2，6h有少量表达；对照组在各个时间点基本无表达。脊神经后根切断组在各个时间点的表达均高于与假手术组和对照组，差异有显著性（P〈0．05）。②各组大鼠右侧脑干网状结构c—Fos的表达：在抑制区，各组各个时间点均无明显表达。在易化区，脊神经后根切断组可见大量c-Fos蛋白阳性细胞表达，假手术组有散在细胞表达，对照组基本无表达。脊神经后根切断组在各个时间点的表达均高于与假手术组和对照组，差异有显著性（P〈0．05）。结论：本实验观察到选择性脊神经后根切断可引起大鼠同侧腰髓灰质后角和对侧脑干网状结构易化区c—Fos的大量表达，说明脊神经后根切断和网状结构易化区神经元功能的改变存在着密切的联系。结合易化区的功能，推测脊神经后根的切断改变了网状结构抑制区和易化区神经元的活性状态，从而通过网状结构的传出纤维影响各个运动核团，降低了相应核团的兴奋性，从而缓解了痉挛的过程。     

小鼠小脑片层化过程中神经元迁移及reelin的可能调节作用

目的:观察小鼠小脑皮质片层化过程细胞迁移,探讨片层化、细胞迁移和reelin蛋白之间的关系。方法:不同年龄的小鼠172只,应用免疫荧光、Nissl和HE染色法对小脑形态结构及片层化、细胞迁移情况进行观察。结果:(1)小脑片层化:E15-E16的后脑主要由神经上皮构成,P0时小脑皮质基本形成了外颗粒层、分子层、浦肯野细胞层和颗粒层,P5时浦肯野细胞层形成2~3层细胞,分子层仍有大量细胞。P20时基本形成了小脑的典型三层结构。(2)细胞迁移过程:浦肯野细胞大约在E18时开始迁移,至P7时基本完成迁移,胞体形成均一的1~2层细胞结构。同时,小年龄时NeuN阳性细胞主要见于内颗粒层和外颗粒层,P7后阳性细胞只定位在内颗粒层,迁移基本停止。(3)野生鼠(WT)和reeler小鼠比较:约P14时,WT小鼠小脑形成分子层、浦肯野细胞层及颗粒层。但是在reeler小鼠,小脑分叶不良,浦肯野细胞未迁移至目的地,排列紊乱;内颗粒层(GL)细胞分布松散、不均一。结论:在小鼠小脑的片层化形成过程中,Reelin蛋白可能参与神经细胞增殖和迁移的调控过程。     

大鼠脑巨细胞网状核和颈髓神经元纤维联系的实验研究

目的探讨网状结构与运动调控密切相关的伸肌抑制区内的重要核团-巨细胞网状核与颈段脊髓神经元的纤维联系。方法采用麦芽凝集素-辣根过氧化物酶在巨细胞网状核的微量注射，48h后用TMB显色方法检测巨细胞网状核和颈段脊髓灰质内麦芽凝集素-辣根过氧化物酶的表达情况。结果在巨细胞网状核内注射麦芽凝集素-辣根过氧化物酶，可在颈段脊髓灰质Ⅰ、Ⅱ板层发现顺行标记，在Ⅶ、Ⅷ板层发现逆行标记。结论通过对WGA-HRP示踪的检测，说明以巨细胞网状核为主的脑干网状结构抑制区和颈段脊髓神经元之间存在纤维联系。从巨细胞网状核到脊髓的投射纤维多经由颈段脊髓灰质的Ⅰ、Ⅱ板层，而颈段脊髓灰质向巨细胞网状核的投射纤维多起源于Ⅶ、Ⅷ板层。     

非酒精性脂肪肝中医体质分类及危险因素研究进展

非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是一种无过量饮酒史肝实质细胞脂肪性变和脂肪贮积为特征的临床病理综合征,病程包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎和脂肪性肝纤维化,最后可能演变成肝硬化和肝癌。近年来,我国的NAFLD发病率明显上升,已成为仅次于病毒性肝炎的第2大肝病。目前药物治疗不能从根本上解决问题,所以积极预防NAFLD至关重要。中医的优势在