1α,25-二羟基维生素D;通过TLR4信号通路抑制川崎病血清诱导的THP-1细胞炎症因子表达

目的:研究1α,25-二羟基维生素D₃[1,25-(OH)₂D₃]是否通过调控巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)信号通路的活化影响川崎病炎症反应的发生。方法:收集襄阳市第一人民医院收治的73例川崎病患儿血清,另收集急性上呼吸道感染患儿(感染组)和儿保科体检儿童(对照组)的血清各30例,利用试剂盒检测各组25-羟基维生素D₃[25-(OH)D₃]水平的变化,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,确定诊断截断点。体外细胞实验,利用采集的血清诱导THP-1巨噬细胞构建川崎病固有免疫模型,实验分组为:15%正常血清组、15%川崎病血清组及15%川崎病血清+1,25-(OH)₂D₃(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)组[1,25-(OH)2D3均于血清刺激前加入]。加入血清刺激24h后,利用RT-qPCR检测TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达水平,ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α的含量;Western blot检测TLR4和p-P65的蛋白水平;免疫荧光技术检测TLR4蛋白的表达。结果:川崎病患儿体内白细胞数、中性粒细胞数、血小板数、丙氨酸转氨酶及C-反应蛋白均较感染组显著升高(P<0.05)。与对照组及感染组相比,川崎病患儿血清25-(OH)D₃水平显著降低(P<0.01),诊断截断点为27.55μg/L,ROC曲线下面积为0.922,预测的灵敏度为93.3%,特异度为75.0%。体外细胞实验显示,与正常血清组相比,川崎病血清可显著促进巨噬细胞TLR4、IL-1β和TNF-α的mRNA表达(P<0.05),增加巨噬细胞分泌TNF-α的含量(P<0.05);1,25-(OH)2D3预保护抑制血清诱导的炎症因子产生。川崎病血清显著提高巨噬细胞TLR4和p-P65蛋白水平(P<0.05),而1,25-(OH)₂D₃可显著抑制这一作用(P<0.05)。结论:川崎病患儿体内25-(OH)D₃水平显著降低,而补充1,25-(OH)₂D₃可通过调节TLR4信号通路来抑制川崎病血清诱导的THP-1细胞炎症反应。     

系统性红斑狼疮患者血清25羟基维生素D_3水平与γ干扰素及白细胞介素6水平呈负相关

正系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者机体淋巴细胞功能失调,产生多种自身抗体,发病机制复杂[1]。维生素D属于类固醇激素,在血中主要形式是25羟基维生素D3[25(OH)VD3],在肾脏1α羟化酶作用下生成活性形式1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VD3],1,25(OH)2VD3可通过淋巴细胞影响机体免疫系统[2-3]。由于25(OH)     

肝素结合蛋白、1,25-二羟基维生素D3、白三烯B4及炎性指标与慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者肺功能的相关性研究

目的 探讨肝素结合蛋白、1,25-二羟基维生素D3、白三烯B4及炎性指标与慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者肺功能的相关性研究.方法 选取360例2016年4月至2017年5月期间到我院呼吸科诊治的COPD和AECOPD患者作为研究对象.其中COPD患者167例,作为稳定组,AECOPD患者193例,作为加重组.选取同期进行体检的健康人300例作为对照组.比较3组受试者HBP、1,25-(OH)2D3、LTB4、TNF-α、IL-8和IL-6水平.比较稳定组和加重组肺功能指标.分析HBP、1,25-(OH)2D3、LTB4、TNF-α、IL-8和IL-6与患者肺功能相关性.结果 稳定组、加重组患者HBP和LTB4水平显著高于对照组,1,25-(OH)2D3显著低于对照组,加重组患者HBP和LTB4水平显著高于稳定组,1,25-(OH)2D3显著低于稳定组(P<0.05).稳定组、加重组患者TNF-α、IL-8和IL-6水平显著高于对照组,加重组患者TNF-α、IL-8和IL-6水平显著高于稳定组(P<0.05).加重组患者各肺功能指标(FEV1% Pred、FEV1/Fvc%、MMEF% Pred、V50% Pred、V25%Pred)均显著高于稳定组(P<0.05).经过Pearson相关性分析,HBP、LTB4、TNF-α、IL-8、IL-6与患者肺功能呈负相关, 1,25-(OH)2D3与患者肺功能呈正相关.结论 HBP、1,25-(OH)2D3、LTB4及炎性指标与AECOPD患者肺功能指标密切相关,可以评估患者的病情严重程度,指导临床治疗.     

1α,25-二羟基维生素D3抑制人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性

目的探讨1α,25-二羟基维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性的影响及作用机制。方法 1,25(OH)_2D_3(100 nmol/L)干预和溶剂对照处理SW480细胞48 h;用双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性;Western blot检测1,25(OH)_2D_3干预后β-catenin在细胞核/质内的定位变化;用RT-qPCR和Western blot检测β-catenin和FOXM1 mRNA及蛋白水平。采用siRNA敲降SW480细胞中FOXM1后,检测1,25(OH)_2D_3干预后β-catenin转录活性的变化。结果 1)在SW480细胞中,1,25(OH)_2D_3能显著降低β-catenin的转录活性(P0.05),但不影响β-catenin mRNA和蛋白表达水平; 2)1,25(OH)_2D_3上调SW480细胞中FOXM1蛋白水平的表达(P0.05); 3)敲降SW480细胞中FOXM1降低1,25(OH)_2D_3对β-catenin转录活性的抑制作用(P0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3通过上调FOXM1的表达,发挥抑制β-catenin转录活性的作用。     

肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤

目的探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体4/髓样分化因子88(TLR-4/My D88)信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用。方法 30只成年SD大鼠行经口气管插管,给予40 m L/kg潮气量通气240 min,建立呼吸机相关性肺损伤模型,机械通气结束后,使用4℃PBS经气管导管缓慢注入并回收支气管肺泡灌洗液(BALF),提纯肺泡巨噬细胞。收集并培养肺泡巨噬细胞,随机分为3组:PBS刺激组(CON组);TNF-α刺激联合PBS组(STI组);TNF-α刺激联合抗TLR4单克隆抗体(m Ab)干预组(ANT组);每组8个样本。CON组细胞用PBS结合2 h后,继续用PBS培养16 h;STI组细胞用PBS结合2 h后,采用20 ng/m L TNF-α培养16 h;ANT组细胞用PBS液及TLR4 m Ab结合2 h后,用20 ng/m L TNF-α培养16 h。ELISA检测各组上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的表达;反转录PCR检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、髓样分化因子88(My D88)、核因子κB(NF-κB)的mRNA表达,Western blot法检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、My D88、NF-κB的蛋白表达。结果与CON组比较,STI组及ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显增高;STI组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、My D88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平明显增高;ANT组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、My D88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平无明显变化。与STI组比较,ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显降低;肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、My D88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平明显下调。3组TLR9 mRNA与蛋白表达水平相近。结论炎症因子刺激可调节TLR4、My D88、NF-κB分泌增加,肺泡巨噬细胞TLR4-My D88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤。     

1,25-二羟维生素D3对1型糖尿病预防效果观察

目的:1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对连续多次小剂量链脲菌素(the mu ltip le low dose streptozotoc in,MLDS)诱导的自身免疫性糖尿病小鼠的预防作用及其机制初探。方法:小鼠分为三组。正常对照组:连续5天腹腔注射与糖尿病组等容量柠檬酸盐缓冲液;糖尿病组:连续5天腹腔注射STZ(40mg.kg-1),以血糖水平持续高于16.7mmol/L为成模标准;预防组:先隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3(5μg.kg-1),共15次,然后再连续5天腹腔注射STZ(40mg.kg-1)。实验结束后各组动物处死收集血清并采集胰腺检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性及血清胰岛素水平。结果:MLDS诱发的自身免疫性糖尿病模型在第四周基本建成。MLDS使小鼠血糖、血清及胰腺iNOS活性升高,血清胰岛素水平下调;预防组小鼠注射STZ前给予1,25-(OH)2D3有明显降血糖和上调血清胰岛素水平作用,同时抑制血清及胰腺iNOS活性,与糖尿病组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:1,25-(OH)2D3可有效预防MLDS诱导的自身免疫性糖尿病的发生。该效应可能与1,25-(OH)2D3抑制iNOS活性有关。     

原发ITP患者外周血维生素D3水平与维生素D受体表达的相关性研究

目的 研究成人原发免疫性血小板减少症(ITP)患者血清中25-羟维生素D3[25-(OH)-D3]、维生素D活性指标与维生素D受体表达的相关性.方法 选择开滦总医院2017年1月至2019年12月收治的30例ITP患者作为研究对象,设为ITP组;选择同期来院体检的30例健康体检者作为对照组,抽取外周血,检测血清中25-(OH)-D3和1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2-D3)水平,并采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测外周血中维生素D受体(VDR)mRNA的表达,进行分组比较,采用Pearson分析法分析血清中25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平与VDRmRNA的相关性.结果 ITP组25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平均低于对照组[(10.36±1.86)vs(13.74±2.73)]ng/mL、[(68.25±9.80)vs(88.09±11.72)]pg/mL,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组VDRmRNA的表达量为1.051±0.148,ITP组VDRmRNA的表达量为1.593±0.185,ITP组VDRmRNA的表达量高于对照组,差异有统计学意义(t = 12.844,P＜0.001).25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平与 VDRmRNA 表达均呈负相关(r =-0.592,-0.486,P = 0.017,0.028).结论 成人ITP维生素D活性指标与维生素D受体表达水平与健康人群比较存在异常,且25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平与 VDRmRNA表达均呈负相关,提示其可能参与了 ITP的发生,维生素D可能对ITP有一定的治疗治疗效果.     

阻断TLR2结合降低β2GP1-抗β2GP1复合物刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的表达

目的探讨β2糖蛋白1(β2GP1)-抗β2GP1复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)中Toll样受体2(TLR2)的作用。方法用β2GP1-抗β2GP1复合物、TLR2激动剂Pam3CSK4及TLR4激动剂脂多糖(LPS)、TLR2阻断剂抗小鼠TLR2-Ig G(m TLR2-Ig G)及TLR4阻断剂TAK-242对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞进行体外处理。用实时荧光定量PCR检测TNF-αmRNA水平,Western blot法及免疫荧光细胞化学方法检测TNF-α蛋白表达;采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2的水平。结果β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3CSK4及LPS均能够显著增加BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-αmRNA及蛋白水平,抗m TLR2-Ig G能够抑制上述刺激物促进细胞TNF-α表达的效应,但弱于TAK-242的抑制效应,抗m TLR2-Ig G与TAK-242联合使用未显示更强的抑制效应。流式细胞术结果显示,β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3CSK4及LPS均能增加小鼠腹腔巨噬细胞TLR2的表达,而抗m TLR2-Ig G、TAK-242以及二者联合使用均未显示对TLR2表达的抑制效应。结论TLR4、TLR2都增强β2GP1-抗β2GP1复合物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的刺激作用。     

1,25（OH）2D3对甲状旁腺素诱导的肾小管上皮细胞转分化和TGF-β1的表达的影响

目的:探讨1,25(OH)2D3对甲状旁腺素(PTH)诱导的肾小管上皮细胞转分化和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)培养在含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液中。对照组:加入等体积含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液;PTH刺激组:加入终浓度为10-10 mol/L PTH的含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液;PTH+1,25(OH)2D3干预组:加入10-10 mol/L PTH,同时加入不同浓度(10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L)的1,25(OH)2D3。刺激HK-2细胞48 h。半定量RT-PCR法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1的基因表达;Western blot法检测细胞中α-SMA和TGF-β1的蛋白表达;免疫细胞化学法检测细胞中α-SMA的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1的含量。结果:半定量RT-PCR结果显示,对照组HK-2细胞中几乎无α-SMA的mRNA表达,仅有少量的TGF-β1 mRNA表达;PTH刺激组α-SMA和TGF-β1mRNA表达量与对照组比较明显增加;PTH+1,25(OH)2D3干预组表达量比PTH刺激组显著降低,且随着1,25(OH)2D3浓度的升高呈一定的剂量依赖性(P<0.05)。Western blot结果显示,对照组HK-2细胞中无α-SMA的蛋白表达,仅有少量的TGF-β1蛋白表达;10-10 mol/L的PTH能够明显诱导HK-2细胞中α-SMA的蛋白表达,增加TGF-β1的蛋白表达量;PTH+1,25(OH)2D3干预组,α-SMA和TGF-β1的蛋白表达量比PTH刺激组显著降低(P<0.05)。免疫细胞化学法结果显示,对照组几乎无α-SMA阳性表达的细胞,PTH刺激组可见大量细胞α-SMA表达阳性;PTH+1,25(OH)2D3干预组α-SMA表达阳性的细胞数明显低于PTH刺激组(P<0.05)。ELISA结果显示,对照组细胞上清液中可检测到少量的TGF-β1,PTH刺激组含量显著升高,PTH+1,25(OH)2D3干预组与PTH刺激组比较含量明显降低(P<0.05)。结论:1,25(OH)2D3能够部分拮抗PTH诱导的HK-2细胞转分化和TGF-β1的表达。     

妊娠期糖尿病孕妇血清中25-羟维生素D_3缺乏现状及影响因素分析

目的了解深圳地区妊娠期糖尿病病(gestational diabetesmellitus,GDM)孕妇血中25-羟维生素D_3[25-hydroxyvitaminD3,25-(OH)VitD_3]缺乏现状,并探讨其影响因素,为GDM孕妇是否需要补充维生素D提供理论依据。方法收集2016年2月～2018年11月来医院产前检查并确诊为GDM孕妇185例为GDM组,选择同期来院产检的正常孕妇421例为对照组,分别采用c8000全自动化学发光免疫分析系统检测血清中25-(OH)VitD_3的含量,并对检测结果进行统计分析。结果 GDM组孕妇25-(OH)-vitD_3缺乏率为55.68%(103/185),明显高于对照组孕妇的34.68%(146/421),差异有统计学意义(χ~2=3.9105,P0.05);GDM组孕妇血清中25-(OH)-vitD_3水平为39.28±9.06nmol/L,明显低于对照组的58.24±16.52nmol/L,差异有统计学意义(t=2.9250,P0.05);GDM组不同孕期血清中25-(OH)-vitD_3水平均明显低于对照组孕妇,差异有统计学意义(t=2.5069～3.8403,P0.05),且各组中晚期孕妇血清中25-(OH)-vitD_3水平高于孕早期,差异有统计学意义(t=2.0541～2.3085)。结论深圳地区GDM孕妇血清中25-羟维生素D3缺乏现象比较严重,且GDM孕妇血清中25-羟维生素D3水平明显低于正常妊娠孕妇。因此,加强GDM孕妇血清中25-羟维生素D3水平监测,对GDM孕妇能及时、准确、足量补充维生素D提供科学依据。     

深圳市宝安区变应性鼻炎患者血清中维生素D表达及其受体基因rs7975232位点多态性分析

目的了解深圳市宝安区变应性鼻炎(AR)患者血清中维生素D(VitD)表达情况,并探讨其受体(VDR)基因rs7975232位点多态性与AR之间的遗传易感性。方法选择2017年8月至2019年6月来深圳市宝安区福永人民医院就诊并确诊为AR患者286例(AR组),其中男性172例,女性114例;年龄7～69岁,平均年龄37.15岁。同时选择来医院体检的健康人群120例(对照组),其中男性74例,女性46例;年龄8～67岁,平均年龄36.07岁。采用化学发光免疫分析法检测血清中25-羟基维生素D3 [25-(OH)VitD3]水平,同时采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCRRFLP)法检测VDR基因rs7975232位点多态性。结果 AR组患者血清中25-(OH)VitD3水平为(36.01±10.27) nmol/L,明显低于对照组[(61.72±23.05) nmol/L],差异有统计学意义(t=4.096 5,P 0.05);中-重度AR患者血清中25-(OH)-VitD3水平为(27.53±7.15) nmol/L,明显低于轻度AR患者[(41.92±12.84) nmol/L],差异有统计学意义(t=3.218 2,P 0.05)。AR组VDR基因rs7975232位点的AA基因型及A等位基因检出率分别为33.21%、54.55%,明显高于对照组(19.17%、37.92%),差异有统计学意义(χ~2=3.162 4、4.098 7,P 0.05);VDR基因rs7975232位点AA基因型的AR患者血清中25-(OH)VitD3水平为(21.95±8.36) nmol/L,明显低于AC和CC基因型[(32.91±11.52) nmol/L、(45.16±13.87) nmol/L],差异有统计学意义(t=3.816 2、6.052 4,P 0.05)。结论 AR患者血清中25-(OH)VitD3水平明显低于健康人群,随着AR病情加重而降低;AR患者VDR基因rs7975232位点的AA基因型及A等位基因检出率明显升高,且携带AA基因型的AR患者血清中25-(OH)VitD3水平明显降低,可能是深圳市宝安区AR发病的危险遗传易感基因之一。     

苦参碱抑制LPS诱导巨噬细胞IL-1β、TNF-α分泌及机制研究

目的:探讨苦参碱抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞分泌炎症因子包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)对Toll样受体4(TLR4)、c-Jun表达的影响。方法:购买并培养小鼠RAW264.7巨噬细胞株,分成四组,即空白对照组、苦参碱组、LPS组、苦参碱干预组,通过浓度为100μg/L的LPS DMEM孵育1 h,之后将LPS弃去,然后加入不含血清的DMEM或125.25 mg/L苦参碱DMEM继续培养。分别收集上述四组细胞处理完毕后5、30、60、120min的细胞及培养液。通过PCR法检测小鼠RAW264.7巨噬细胞TLR4及c-Jun mRNA的表达,通过免疫细胞化学法检测小鼠RAW264.7巨噬细胞c-Jun蛋白的表达;通过ELISA法测定各组培养液中TNF-α、IL-1β的分泌。结果:苦参碱诱导组与空白对照组相比,TLR4 mRNA、c-Jun mRNA及c-Jun蛋白的表达量和TNF-α及IL-1β分泌量各项指标差异无统计学意义(P0.05);LPS组各个时间点TLR4 mRNA、c-Jun mRNA及c-Jun蛋白的表达量和TNF-α及IL-1β分泌量明显高于空白对照组,且高水平能够维持2 h以上(P0.05);苦参碱干预组能够有效的抑制LPS诱导的巨噬细胞TLR4 mRNA、c-Jun mRNA及c-Jun蛋白的表达量,降低炎症因子TNF-α、IL-1β的分泌量。结论:苦参碱可能通过抑制LPS诱导的巨噬细胞丝裂原活化的蛋白激酶信号通路上TLR4、c-Jun的过表达从而有效的降低终末炎症因子TNF-α及IL-1β的释放,进而有效的抑制炎症反应,减轻内毒素炎症反应的程度。     

HSP患儿血清25(OH)D、PTX3和IL-1β水平与疾病的关系及临床应用研究

目的 探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清25-羟维生素D[25(OH)D]、正五聚蛋白3(PTX3)和白介素-1β(IL-1β)水平与疾病的关系。方法 选取我院2019年9月至2021年9月收治的90例HSP患儿作为HSP组，另选取同期来我院健康体检的儿童90例作为对照组，比较各组血清25(OH)D、PTX3、IL-1β水平，对影响HSP患儿发生紫癜性肾炎进行单因素和多因素分析，Pearson相关系数分析血清25(OH)D、PTX3、IL-1β水平之间的相关性。结果 HSP组血清25(OH)D水平低于对照组，血清PTX3、IL-1β高于对照组(P<0.05);C组血清25(OH)D水平低于A组和B组，血清PTX3、IL-1β高于A组和B组(P<0.05),A组和B组血清25(OH)D、PTX3、IL-1β水平差异无统计学意义(P>0.05);发生紫癜性肾炎组与未发生紫癜性肾炎组的性别、年龄、体质指数、血管神经性水肿、上呼吸道感染史差异无统计学意义(P>0.05),反复皮疹、腹痛、关节痛、血清25(OH)D、PTX3、IL-1β水平差异有统计学意义(P<0.0...     

男性2型糖尿病患者维生素D营养状况及其对骨代谢指标的影响

目的 了解男性2型糖尿病患者维生素D营养状况及其对骨代谢指标的影响.方法 采用Roche E170全自动电化学发光免疫分析仪检测258例男性2型糖尿病患者血清的25羟维生素D[25(OH)D]、总Ⅰ型前胶原氨基端肽(tPINP)和Ⅰ型胶原羧基端肽(β-CTX).根据血清25 (OH)D水平分为维生素D严重缺乏(＜25nmol/L)、缺乏(≥25nmol/L且＜ 50nmol/L)、不足(≥50nmol/L且＜75 nmol/L)和充足(≥75nmol/L).结果 男性2型糖尿病患者总体25(OH)D浓度为33.80±18.43nmol/L,为维生素D缺乏水平.根据年龄将受试者分为中年组(35 ～49岁)、老年前期组(50 ～ 59岁)、老年1组(60～69岁)、老年2组(＞70岁),发现随着年龄的增长,25(0H)D的浓度呈逐渐降低趋势,老年2组的25(OH)D显著低于中年组(P=0.044),而骨标志物在各年龄组间差异均无统计学意义(P＞0.05).258例男性2型糖尿病患者中维生素D严重缺乏、缺乏、不足、充足的比例分别为36.43％ (94/258)、48.45％(125/258)、11.63％ (30/258)和3.49％ (9/258).维生素D严重缺乏组的β-CTX明显高于其他各营养状况组(均P＜0.05),而tPINP在各营养状况组间差异均无统计学意义(P＞0.05).相关分析表明,血清25(OH)D水平与β-CTX呈负相关(r=-0.197,P=0.001),与tPINP无相关性(r=-0.046,P =0.464).结论 男性2型糖尿病患者存在严重维生素D缺乏和不足状况,维生素D严重缺乏对骨吸收可能有影响.     

早产儿血清维生素D水平与智能发育的相关性研究

目的探讨早产儿维生素D(vitamin D,VitD)水平与智能发育的相关性。方法选取我院2017年1月至2018年1月收治的685例早产儿开展回顾性分析,以出生后24h内血清25-羟维生素D[25-hydroxyvitamin D,25(OH)D]水平≥所有早产儿的平均水平为高水平组,血清25(OH)D水平<所有早产儿的平均水平为低水平组,比较两组的一般临床资料、维生素D情况,评估两组的智力发育水平;依据早产儿胎龄不同分为极早早产儿组(<28周)和常规早产儿组(28~32周),比较两组的DST及BSID评分,采用Pearson相关性分析血清25(OH)D水平与智能水平之间的相关性。结果纳入685例早产儿的血清25(OH)D水平为56.59±15.43nmol/L,高水平组365例,血清25(OH)D水平为83.41±12.64nmol/L,低水平组320例,血清25(OH)D水平为38.42±13.22nmol/L;高水平组的MDI、PDI及DQ、MI评分显著高于低水平组(P<0.05);经相关性分析,血清25(OH)D水平与MDI、PDI及DQ、MI均呈正相关(P<0.05)。结论早产儿维生素D水平与其智力发育水平呈正相关,其能促进神经发育,提高智力水平。     

1,25(OH)2D3干预糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1的变化

文题释义： 1,25(OH)₂D3：维生素D3是胆固醇的衍生物,其活性形式有25-羟维生素D3[25(OH)D3]和1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)₂D3]两种,其中1,25-二羟维生素D3活性更高。体内的维生素D3无生物活性,它首先在肝脏被25-羟化酶催化为具有一定生物活性的25(OH)D3,然后在肾近端小管1α-羟化酶的催化下生成活性更高的1,25(OH)₂D3,1,25(OH)₂D3在肾脏具有促进肾小管对钙、磷的重吸收,尿钙、磷排出量减少等方面作用。MicroRNA-130b：microRNA(miRNA)是一种内源性小分子RNA,由21-25个核苷酸组成,可通过与靶基因mRNA的3’UTR或者CDS序列配对,促进mRNA的降解或抑制其翻译,从而抑制靶基因的表达,其中MicroRNA-130b与多脏器的多种病变有关,在糖尿病的进程中MicroRNA-130b与早期肾脏损伤具有一定的关系,可能成为糖尿病患者早期肾脏损害以及肾脏损害严重程度的新的生物学标志。 背景：1,25(OH)₂D3在糖尿病肾病的发展过程中发挥着重要调节作用。 目的：探索1,25(OH)₂D3对糖尿病肾病大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1表达的影响作用。 方法：实验方案经新疆医科大学动物实验中心动物实验伦理委员会批准。将25只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组、糖尿病肾病+花生油组,后2组分别给予骨化三醇(即1,25(OH)₂D3,活性维生素D3) 0.03 μg/(kg • d)治疗、花生油对照处理。37 d后采集标本,以实时聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学方法检测大鼠肾脏组织转化生长因子β1的表达;RT-PCR检测MicroRNA-130b的表达;采用苏木精-伊红及Masson染色对大鼠肾脏形态结构及纤维化程度进行分析。 结果与结论：①RT-PCR结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组及糖尿病肾病+花生油组MicroRNA-130b的表达明显低于正常对照组(P < 0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组明显高于糖尿病肾病+花生油组(P < 0.01);②RT-PCR、Western blot、免疫组织化学及病理结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组及糖尿病肾病+花生油组转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达、大鼠肾脏组织结构紊乱及纤维化程度明显高于正常对照组(P < 0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)₂D3组明显低于糖尿病肾病+花生油组(P < 0.01);③结果说明,糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b表达水平下降,转化生长因子β1 mRNA及蛋白表达水平升高,肾脏组织结构紊乱及纤维化程度严重;1,25(OH)₂D3可上调糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b的表达水平,同时还可下调糖尿病肾病大鼠肾脏转化生长因子β1的表达水平,改善肾脏组织结构紊乱及纤维化程度。ORCID: 0000-0002-5676-5016(刘玥彤) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

一种常用免疫分析系统对25(OH)D3和25(OH)D2回收率的评价研究

目的 以液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)为参考方法,评价临床常用的索灵(DiaSorin)全自动免疫分析系统对25-羟基维生素D3[25(OH)D3]和25-羟基维生素D2[25(OH)D2]的回收率是否满足临床检测的要求.方法 参考实验室定值的DEQAS 5个水平质控品,用以评价索灵检测25(OH)D的准确度.索灵自带高低值质控品每日4次重复测试,连续5d检测用以评价索灵检测高低值25(OH)D的精密度.解放军总医院健康查体剩余血清样本810例,分别由索灵及LC-MS/MS检测25(OH)D.Passing-Bablok回归、组内相关系数(intraclass correlation coefficient,ICC)分析两种检验方法的相关性和一致性.所有样本根据25(OH)D3及25(OH)D2占总25(OH)D的百分含量由低到高分别分组,计算各组检测偏差,分析索灵检测偏差随25(OH)D3、25(OH)D2百分含量增加的变化趋势.结果 索灵免疫法检测25(OH)D的精密度较好(CV<10％),检测结果与LC-MS/MS相比相关性和一致性均较好,但仍然存在一定的检测偏差.810例样本平均检测偏差为-4.65ng/mL(-16.55％).索灵检测偏差与25(OH)D3或25(OH)D2百分含量不具有线性相关关系;25(OH)D3或25(OH)D2百分含量的增加不增加索灵的检测偏差.结论 索灵全自动免疫分析系统检测维生素D与LC-MS/MS一致性较好,该免疫法对25(OH)D3和25(OH)D2回收率满足临床检测的要求.     

维生素D3对2型糖尿病急性低钠血症的作用

目的:分析维生素D3(VitD3)对2型糖尿病(T2DM)患者急性低钠血症的作用。方法:60例T2DM合并低钠血症患者,随机平分为常规治疗组和VitD3治疗组(VitD3口服,2 000U/天),两组患者均随访1年,每2月一次,检测其血[Na+]、皮质醇、25-羟基VitD3[25-(OH)VitD3]和1,25-二羟基VitD3[1,25-(OH)2VitD3]水平,观察随访1年两组患者发生低钠血症的例次和发生低钠血症时上述指标的变化,以及治疗前后两组有关指标的改善情况。结果:随访1年内共发生169例次低钠血症,VitD3治疗组明显少于常规治疗组(52例次vs 117例次),其发生率差异(30.76%vs 69.23%)有统计学意义(P0.01);且在低钠血症发生时期,VitD3治疗组[Na+]较常规治疗组明显升高(P0.05)。经过1年治疗,VitD3治疗组患者[Na+]、25-(OH)VitD3和1,25-(OH)2VitD3水平较治疗前明显提高(P0.05;P0.01);常规治疗组患者相同指标则与治疗前无明显差异(P0.05)。T2DM患者血皮质醇水平在低钠血症时期较血钠正常时期升高,VitD3治疗对血皮质醇水平无明显差异。结论:补充VitD3可以减少T2DM患者低钠血症发生频率。     

胆红素血症新生儿血清25-(OH)D3、RBP、β2-MG水平变化及临床意义

目的探讨新生儿高胆红素血症血清相关指标的检测意义。方法回顾性分析120例高胆红素血症患儿临床资料。比较不同高胆红素血症严重程度、肾损害情况患儿血清25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]、视黄醇结合蛋白(RBP)、β2-微球蛋白(β2-MG)水平差异,分析上述指标与血清总胆红素(TBIL)水平相关性,评估上述指标对高胆红素血症相关肾损害的诊断效能。结果血清25-(OH)D3水平在不同严重程度高胆红素血症患儿比较差异无统计学意义(P>0.05),且与患儿TBIL水平无显著相关性(P>0.05);而血清RBP、β2-MG水平比较重度>中度>轻度(P<0.05),且与患儿TBIL水平呈显著正相关性(r>0,P<0.05)。伴有与不伴有肾损害高胆红素血症患儿血清25-(OH)D3水平比较差异无统计学意义(P>0.05),而伴有肾损害高胆红素血症患儿血清RBP、β2-MG水平均明显高于不伴有肾损害患儿(P<0.05)。血清RBP、β2-MG诊断高胆红素血症相关肾损害的灵敏度分别为65.38%、84.62%,特异性分别为77.66%、80.85%,截断值分别为≥27.10 mg/L、≥7.35 mg/L。结论高胆红素血症新生儿血清RBP、β2-MG水平与病情密切相关,具有较高临床检测价值,而25-(OH)D3与病情关系不大,检测价值仍有待进一步论证。     

川崎病患儿血清Cav-1、PTX-3、 RBP4水平与冠状动脉损伤的关系及其预测价值

目的 探讨川崎病患儿血清陷窝蛋白-1(Cav-1)、正五聚体蛋白-3(PTX-3)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)表达水平,分析其与患儿冠状动脉损伤的关系及预测价值.方法 选取2015年1月至2019年1月我科收治的川崎病患儿80例(观察组),根据是否合并冠状动脉损伤,分为冠状动脉损伤组(n=32)和冠状动脉正常组(n=48).同期,另选取我院体检健康儿童50例(对照组).采用酶联免疫吸附法检测血清Cav-1、PTX-3、RBP4水平.采用多因素Logistic回归分析影响川崎病患儿冠状动脉损伤的危险因素.绘制ROC曲线,分析血清Cav-1、PTX-3、RBP4对川崎病患儿冠状动脉损伤的预测价值.结果 观察组血清Cav-1、PTX-3、RBP4水平与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).冠状动脉损伤组血清Cav-1、PTX-3、RBP4水平与冠状动脉正常组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).多因素Logistic回归分析显示,血清NT-proBNP、cTnI、Cav-1、PTX-3、RBP4是川崎病患儿冠状动脉损伤的重要危险因素(P＜0.05).ROC曲线显示,血清Cav-1、PTX-3、RBP4及三者联合检测预测川崎病患儿冠状动脉损伤的AUC分别为0.811、0.759、0.823和0.906.结论 血清Cav-1、PTX-3、RBP4水平变化与川崎病的发生发展有关,其可参与川崎病患儿冠状动脉损伤的病理过程,联合检测血清Cav-1、PTX-3、RBP4对评估川崎病患儿冠状动脉损伤有较高临床价值.