去卵巢骨质疏松模型大鼠小肠钙结合蛋白mRNA表达与菟丝子黄酮的干预

背景：菟丝子是旋花科植物菟丝子Cuscutachinensis Lam.的成熟种子,为温补肾阳的要药,前期研究表明,由菟丝子组成的补肾复方在抑制骨量丢失,改善骨密度方面有明显疗效。 目的：探讨菟丝子黄酮对去卵巢骨质疏松模型大鼠股骨骨密度、血清和肾脏1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)₂ D₃)含量、小肠钙结合蛋白(CaBp-D9K)mRNA表达的影响。 方法：72只SD雌性大鼠,随机数字表法均分为6组(n=12)：假手术组、模型组、维生素 D3组和菟丝子黄酮小、中、大剂量组。假手术组仅行假手术,其余5组分别行卵巢切除,1周后分别灌胃给予维生素D3 (2 mg/kg)以及小、中、大剂量菟丝子黄酮连续给药3个月。腹主动脉取血,分离血清,取出肾脏,采用酶联免疫吸附法检测 1,25(OH)₂ D₃含量。之后处死动物,取出股骨,测定骨密度;取出第2腰椎,采用实时荧光反转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)测定腰椎和肾脏组织维生素D受体mRNA表达。取出小肠,采用RT-PCR测定小肠CaBp-D9K mRNA表达。 结果与结论：与假手术组相比,模型组股骨骨密度、血清和肾脏 1,25(OH)₂ D₃、腰椎组织维生素D受体mRNA、小肠CaBp-D9K mRNA表达均下降。与模型组比较,菟丝子黄酮中、大剂量组和维生素D3组均可使股骨骨密度、血清和肾脏1,25(OH)₂ D₃、腰椎组织维生素D受体mRNA、小肠CaBp-D9K mRNA表达增加。菟丝子黄酮能够显著提高去卵巢大鼠股骨骨密度、血清和肾脏1,25(OH)₂ D₃、腰椎组织维生素D受体mRNA、小肠CaBp-D9K mRNA表达,促进肠钙吸收与成骨细胞活性,增强骨质量。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

1α,25-二羟基维生素D;通过TLR4信号通路抑制川崎病血清诱导的THP-1细胞炎症因子表达

目的:研究1α,25-二羟基维生素D₃[1,25-(OH)₂D₃]是否通过调控巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)信号通路的活化影响川崎病炎症反应的发生。方法:收集襄阳市第一人民医院收治的73例川崎病患儿血清,另收集急性上呼吸道感染患儿(感染组)和儿保科体检儿童(对照组)的血清各30例,利用试剂盒检测各组25-羟基维生素D₃[25-(OH)D₃]水平的变化,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,确定诊断截断点。体外细胞实验,利用采集的血清诱导THP-1巨噬细胞构建川崎病固有免疫模型,实验分组为:15%正常血清组、15%川崎病血清组及15%川崎病血清+1,25-(OH)₂D₃(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)组[1,25-(OH)2D3均于血清刺激前加入]。加入血清刺激24h后,利用RT-qPCR检测TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达水平,ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α的含量;Western blot检测TLR4和p-P65的蛋白水平;免疫荧光技术检测TLR4蛋白的表达。结果:川崎病患儿体内白细胞数、中性粒细胞数、血小板数、丙氨酸转氨酶及C-反应蛋白均较感染组显著升高(P<0.05)。与对照组及感染组相比,川崎病患儿血清25-(OH)D₃水平显著降低(P<0.01),诊断截断点为27.55μg/L,ROC曲线下面积为0.922,预测的灵敏度为93.3%,特异度为75.0%。体外细胞实验显示,与正常血清组相比,川崎病血清可显著促进巨噬细胞TLR4、IL-1β和TNF-α的mRNA表达(P<0.05),增加巨噬细胞分泌TNF-α的含量(P<0.05);1,25-(OH)2D3预保护抑制血清诱导的炎症因子产生。川崎病血清显著提高巨噬细胞TLR4和p-P65蛋白水平(P<0.05),而1,25-(OH)₂D₃可显著抑制这一作用(P<0.05)。结论:川崎病患儿体内25-(OH)D₃水平显著降低,而补充1,25-(OH)₂D₃可通过调节TLR4信号通路来抑制川崎病血清诱导的THP-1细胞炎症反应。     

2型糖尿病性骨质疏松与血清胰岛素样生长因子-1、骨碱性磷酸酶、1,25羟维生素D3水平的关系

目的 研究2型糖尿病性骨质疏松与血清胰岛素样生长因子-1 (IGF-I)、骨碱性磷酸酶(BAP)、1,25羟维生素D3[1,25(OH)D3]水平的关系.方法 选择2013年1月至2017年12月于我院就诊的60例2型糖尿病伴骨质疏松患者(T2DM+OP组),另选取我院同期就诊的60例2型糖尿病不伴有骨质疏松症患者(T2DM组),再选取同期我院体检的60例健康者(对照组).分析2型糖尿病性骨质疏松与IGF-1、BAP、1,25(OH) D3水平的关系.结果 与对照组比较,T2DM+ OP组和T2DM组IGF-1、l,25(OH) D3和骨密度(BMD)水平均明显降低,且T2DM+ OP组降低程度比T2DM组大,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,T2DM+ OP组和T2DM组BAP水平均明显升高,且T2DM+ OP组升高程度比T2DM组大,差异有统计学意义(P＜0.05);T2DM+ OP组患者BMD水平与IGF-1(γ=0.823,P=0.022)、1,25(OH)D3(γ =0.751,P=0.033)呈正相关,与BAP(γ=-0.721,P=0.023)呈负相关;多元逐步回归分析结果显示,IGF-1(P =0.035,OR =20.599)和1,25 (OH) D3(P=0.016,OR=30.188)是2型糖尿病骨质疏松的保护因素.而BAP(P=0.034,OR=18.362)为危险因素.结论 IGF-1、BAP、1,25(OH) D3水平变化与糖尿病性骨质疏松的发生密切相关,低水平IGF-1和1,25 (OH) D3,高水平BAP是2型糖屎病患者并发骨质疏松的危险因素.     

1,25（OH）2D3对甲状旁腺素诱导的肾小管上皮细胞转分化和TGF-β1的表达的影响

目的:探讨1,25(OH)2D3对甲状旁腺素(PTH)诱导的肾小管上皮细胞转分化和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)培养在含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液中。对照组:加入等体积含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液;PTH刺激组:加入终浓度为10-10 mol/L PTH的含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液;PTH+1,25(OH)2D3干预组:加入10-10 mol/L PTH,同时加入不同浓度(10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L)的1,25(OH)2D3。刺激HK-2细胞48 h。半定量RT-PCR法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1的基因表达;Western blot法检测细胞中α-SMA和TGF-β1的蛋白表达;免疫细胞化学法检测细胞中α-SMA的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1的含量。结果:半定量RT-PCR结果显示,对照组HK-2细胞中几乎无α-SMA的mRNA表达,仅有少量的TGF-β1 mRNA表达;PTH刺激组α-SMA和TGF-β1mRNA表达量与对照组比较明显增加;PTH+1,25(OH)2D3干预组表达量比PTH刺激组显著降低,且随着1,25(OH)2D3浓度的升高呈一定的剂量依赖性(P<0.05)。Western blot结果显示,对照组HK-2细胞中无α-SMA的蛋白表达,仅有少量的TGF-β1蛋白表达;10-10 mol/L的PTH能够明显诱导HK-2细胞中α-SMA的蛋白表达,增加TGF-β1的蛋白表达量;PTH+1,25(OH)2D3干预组,α-SMA和TGF-β1的蛋白表达量比PTH刺激组显著降低(P<0.05)。免疫细胞化学法结果显示,对照组几乎无α-SMA阳性表达的细胞,PTH刺激组可见大量细胞α-SMA表达阳性;PTH+1,25(OH)2D3干预组α-SMA表达阳性的细胞数明显低于PTH刺激组(P<0.05)。ELISA结果显示,对照组细胞上清液中可检测到少量的TGF-β1,PTH刺激组含量显著升高,PTH+1,25(OH)2D3干预组与PTH刺激组比较含量明显降低(P<0.05)。结论:1,25(OH)2D3能够部分拮抗PTH诱导的HK-2细胞转分化和TGF-β1的表达。     

葛根素抑制1，25-二羟基维生素D3促破骨细胞骨吸收功能的最佳剂量

背景：近年来国内外学者对葛根素的骨形成研究较多,但对于葛根素抑制1,25-(OH)₂D₃促破骨细胞骨吸收功能尚未见报道。 目的：观察不同浓度葛根素在体外对1,25-(OH)₂D₃促破骨细胞骨吸收功能的抑制作用。 方法：收集3周龄小鼠骨髓细胞并接种到24孔培养板中。实验组培养液为1,25-(OH)₂D₃ +α-MEM完全培养基+不同质量浓度的葛根素,对照组不加葛根素。 结果与结论：不同浓度组葛根素处理的培养体系均诱导出破骨样细胞且形态差异不明显;除100 μg/L葛根素组在第3天时碱性磷酸酶表达显著增高外,各组之间培养液上清中碱性磷酸酶水平无显著性差异(P > 0.05);10 μg/L葛根素组培养液上清Ca2+水平在第3,5,12天时较对照组显著降低(P < 0.05~0.01),50 μg/L葛根素组培养液上清Ca²⁺水平在第12天时较对照组显著降低(P < 0.01),100 μg/L葛根素组培养液上清Ca²⁺水平在所有检测点较10 μg/L葛根素组显著上升(P < 0.05)。提示葛根素最佳抑制剂量在10~50 μg/L之间。     

1,25-二羟维生素D3对1型糖尿病预防效果观察

目的:1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对连续多次小剂量链脲菌素(the mu ltip le low dose streptozotoc in,MLDS)诱导的自身免疫性糖尿病小鼠的预防作用及其机制初探。方法:小鼠分为三组。正常对照组:连续5天腹腔注射与糖尿病组等容量柠檬酸盐缓冲液;糖尿病组:连续5天腹腔注射STZ(40mg.kg-1),以血糖水平持续高于16.7mmol/L为成模标准;预防组:先隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3(5μg.kg-1),共15次,然后再连续5天腹腔注射STZ(40mg.kg-1)。实验结束后各组动物处死收集血清并采集胰腺检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性及血清胰岛素水平。结果:MLDS诱发的自身免疫性糖尿病模型在第四周基本建成。MLDS使小鼠血糖、血清及胰腺iNOS活性升高,血清胰岛素水平下调;预防组小鼠注射STZ前给予1,25-(OH)2D3有明显降血糖和上调血清胰岛素水平作用,同时抑制血清及胰腺iNOS活性,与糖尿病组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:1,25-(OH)2D3可有效预防MLDS诱导的自身免疫性糖尿病的发生。该效应可能与1,25-(OH)2D3抑制iNOS活性有关。     

1,25-(OH)_2-VD_3下调糖尿病肾病肾脏组织p38MAPK和胶原蛋白的表达

目的研究2型糖尿病肾间质纤维化中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、Ⅲ型胶原蛋白(Col3)和Ⅳ型胶原蛋白(Col4)表达,及1,25-(OH)2-VD3对其表达的影响;探讨p38MAPK与Col3和Col4表达的相关性。方法以高糖高脂饮食联合30 mg/kg链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠2型糖尿病模型。将60只大鼠随机平均分为对照组、模型组、1,25-(OH)_2-VD_3治疗组[建模后给予6 ng/(100g·d)1,25-(OH)_2-VD_3治疗]、胰岛素组(建模后给予2~3 U胰岛素治疗)。干预8周后检测4组血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h蛋白尿水平;过碘酸希夫反应(PAS)染色观察肾脏病变情况;采用Western blot及免疫组织化学染色检测大鼠肾间质p38MAPK、Col3和Col4的表达;采用Spearman法进行相关性分析。结果与模型组相比,1,25-(OH)_2-VD_3治疗组和胰岛素治疗组血清肌酐、尿素氮、24 h蛋白尿和肾间质受损面积均降低;与对照相比,模型组p38MAPK、Col3和Col4水平增加,1,25-(OH)_2-VD_3治疗组和胰岛素治疗组明显降低;相关性分析发现24 h蛋白尿与p38MAPK、Col3和Col4免疫组织化学的结果呈正相关,p38MAPK的表达与Col3和Col4表达呈正相关。结论 2型糖尿病大鼠肾间质组织p38MAPK、Col3和Col4表达上调,1,25-(OH)_2-VD_3可能通过p38MAPK下调Col3、Col4的表达改善糖尿病肾病肾组织纤维化。     

原发ITP患者外周血维生素D3水平与维生素D受体表达的相关性研究

目的 研究成人原发免疫性血小板减少症(ITP)患者血清中25-羟维生素D3[25-(OH)-D3]、维生素D活性指标与维生素D受体表达的相关性.方法 选择开滦总医院2017年1月至2019年12月收治的30例ITP患者作为研究对象,设为ITP组;选择同期来院体检的30例健康体检者作为对照组,抽取外周血,检测血清中25-(OH)-D3和1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2-D3)水平,并采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测外周血中维生素D受体(VDR)mRNA的表达,进行分组比较,采用Pearson分析法分析血清中25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平与VDRmRNA的相关性.结果 ITP组25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平均低于对照组[(10.36±1.86)vs(13.74±2.73)]ng/mL、[(68.25±9.80)vs(88.09±11.72)]pg/mL,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组VDRmRNA的表达量为1.051±0.148,ITP组VDRmRNA的表达量为1.593±0.185,ITP组VDRmRNA的表达量高于对照组,差异有统计学意义(t = 12.844,P＜0.001).25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平与 VDRmRNA 表达均呈负相关(r =-0.592,-0.486,P = 0.017,0.028).结论 成人ITP维生素D活性指标与维生素D受体表达水平与健康人群比较存在异常,且25-(OH)-D3、1,25-(OH)2-D3水平与 VDRmRNA表达均呈负相关,提示其可能参与了 ITP的发生,维生素D可能对ITP有一定的治疗治疗效果.     

中药补肾活骨方对去势骨质疏松大鼠骨代谢的影响

背景：中药补肾活骨方可有效防治骨质疏松症,但其具体的药理学机制仍不是很清楚。25-羟基维生素D3和1,25-二羟基维生素D3是调节骨吸收与骨形成的重要的偶联因子。 目的：观察补肾中药对去势骨质疏松大鼠骨密度、骨生物力学、血清及肝肾组织中25-羟基维生素D3和1,25-二羟基维生素D3水平的影响。 方法：健康雌性SD大鼠108只随机等分为假手术组、模型组和治疗组。后2组摘除双侧卵巢,导致雌激素缺失,从而诱导骨质疏松症模型。治疗组大鼠造模后以中药补肾活骨方2 mL灌胃,2次/d。 结果与结论：与模型组相比,治疗组股骨头骨密度明显提高(P < 0.05),最大应力和最大负荷指数明显增强(P < 0.05),血液、肝脏和肾脏组织中25-羟基维生素D3和1,25 二羟基维生素D3水平明显提高(P < 0.05);且接近于假手术组(P < 0.05)。提示补肾中药在雌激素缺失早期即可在分子水平上调节25-羟基维生素D3和1,25-二羟基维生素D3的表达水平,激活骨代谢提高骨密度增强骨质量达到预防骨质疏松的作用。关键词：补肾活骨方;1,25-二羟基维生素D3;骨密度;骨生物力学;骨质疏松症;骨代谢 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.006 中图分类号: R318  文献标识码: A       

1α，25-二羟基维生素D3通过TLR4信号通路抑制川崎病血清诱导的THP-1细胞炎症因子表达

目的:研究1α,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]是否通过调控巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)信号通路的活化影响川崎病炎症反应的发生。方法:收集襄阳市第一人民医院收治的73例川崎病患儿血清,另收集急性上呼吸道感染患儿(感染组)和儿保科体检儿童(对照组)的血清各30例,利用试剂盒检测各组25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]水平的变化,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,确定诊断截断点。体外细胞实验,利用采集的血清诱导THP-1巨噬细胞构建川崎病固有免疫模型,实验分组为:15%正常血清组、15%川崎病血清组及15%川崎病血清+1,25-(OH)2D3(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)组[1,25-(OH)2D3均于血清刺激前加入]。加入血清刺激24h后,利用RT-qPCR检测TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达水平,ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α的含量;Western blot检测TLR4和p-P65的蛋白水平;免疫荧光技术检测TLR4蛋白的表达。结果:川崎病患儿体内白细胞数、中性...     

系统性红斑狼疮患者血清25羟基维生素D_3水平与γ干扰素及白细胞介素6水平呈负相关

正系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者机体淋巴细胞功能失调,产生多种自身抗体,发病机制复杂[1]。维生素D属于类固醇激素,在血中主要形式是25羟基维生素D3[25(OH)VD3],在肾脏1α羟化酶作用下生成活性形式1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VD3],1,25(OH)2VD3可通过淋巴细胞影响机体免疫系统[2-3]。由于25(OH)     

1,25-二羟维生素D3负性调控被动致敏人气道平滑肌细胞中的NF-κB信号通路

 目的：探讨1,25-二羟维生素D3［1,25-(OH)2D3］对被动致敏人气道平滑肌细胞(HASMCs)中核因子κB（NF-κB）信号通路的影响。方法：原代培养HASMCs并使之被动致敏,以1,25-(OH)2D3作为干预因素。EMSA法检测NF-κB的DNA结合活性;免疫细胞化学染色技术观察NF-κB p65的核易位情况;Western blotting法检测核因子κB抑制蛋白α(IκBα)及p-IκBα蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR检测维生素D受体(VDR)、维生素D 24-羟化酶(CYP24)和IκBα mRNA的表达水平;放线菌素D处理实验检测IκBα mRNA的表达。结果：(1) 1,25-(OH)2D3显著削弱被动致敏HASMCs中NF-κB的DNA结合活性及其亚单位 p65的核易位;(2) 1,25-(OH)2D3能通过增加被动致敏HASMCs中IκBα的mRNA稳定性及减少其蛋白磷酸化水平2个途径显著上调细胞中IκBα的表达;(3) 1,25-(OH)2D3显著上调被动致敏HASMCs中VDR的mRNA表达并诱发其功能性反应。结论：1,25-(OH)2D3能通过上调被动致敏HASMCs中IκBα的表达抑制细胞NF-κB信号通路,且这一作用与VDR有关,这可能是其调控被动致敏HASMCs的重要作用机制。     

转化生长因子胞内信号蛋白Smad2/3在糖尿病大鼠肾脏表达的动态观察及意义研究

目的:动态观察大鼠糖尿病肾病发生发展过程中TGF-β1及其下游信号分子Sm ad2/3在肾脏的表达及定位变化,探讨TGF-β1-Sm ad2/3信号通路在糖尿病肾病(DN)肾纤维化发病机制中的作用。方法:链脲菌素诱导大鼠糖尿病肾病,以免疫组化、W estern b lotting及荧光实时定量PCR(RT-PCR)的方法动态观察糖尿病肾病发生发展过程中大鼠肾脏TGF-β1、Sm ad2/3蛋白及mRNA表达,并以RT-PCR方法观察结缔组织生长因子(CTGF)、胶原-3(COL-Ⅲ)、纤溶酶原激活剂抑制因子-1(PAI-1)mRNA表达。结果:TGF-β1在糖尿病肾病(DN)大鼠肾小管表达明显多于正常组(P<0.05);Sm ad2/3蛋白主要以胞浆表达阳性为主,部分呈胞核表达阳性;Sm ad2/3蛋白及mRNA从2周起表达明显多于正常对照组(P<0.05),且随着糖尿病进展有逐渐增加的趋势。16周DN组大鼠肾脏TGF-β1、Sm ad2、CTGF、COL-Ⅲ、PAI mRNA表达显著高于正常对照组(P<0.05)。结论:TGF-β1-Sm ad2/3信号转导通路参与了糖尿病肾病肾脏纤维化形成的信号转导过程,伴随着Sm ad2/3信号蛋白表达的增多及入核增加,CTGF、COL-Ⅲ、PAI-1等基因转录增加,导致肾脏细胞外基质的大量沉积,这是细胞因子TGF-β1导致糖尿病肾病肾纤维化进展可能的信号转导途径之一。     

自噬标志物LC3的节律表达破坏参与β1-AA诱导的H9c2大鼠心肌细胞死亡

目的:探讨β₁-肾上腺素受体(β₁-AR)自身抗体(β₁-AA)对大鼠心肌细胞自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)节律表达的影响及其在心肌细胞死亡中的作用。方法:实验材料为Sprague-Dawley(SD)大鼠和H9c2大鼠心肌细胞。将SD大鼠随机分为免疫组(β₁-AR组)和对照(control)组,每组6只;将H9c2细胞随机分为control组、β₁-AA组、慢病毒(LV)-NC组和LV-shPer2组(n=6);合成β₁-AR细胞外第二环抗原肽段,用于主动免疫大鼠,并使用亲和层析法从大鼠血清中提纯β₁-AA;β₁-AA处理H9c2细胞24 h后使用CCK-8法检测细胞活力;用地塞米松同步化细胞后,再给予β₁-AA处理,采用real-time PCR及Western blot法检测LC3的表达情况,采用Western blot法检测生物钟蛋白Per2的表达情况,使用JTK_CYCLE算法分析昼夜节律参数;用LV-shPer2感染H9c2细胞以破坏LC3的节律表达,进而采用CCK-8法检测细胞活力。结果:β₁-AR组大鼠血清中β₁-AA的A值与control组相比显著升高(P<0.05)。β₁-AA组H9c2细胞的活力显著低于control组(P<0.05)。β₁-AA可破坏H9c2细胞LC3和Per2的节律表达(JTK_CYCLE P<0.05)。通过LV-shPer2干扰Per2基因而破坏H9c2细胞LC3节律表达(JTK_CYCLE P<0.05)后,细胞活力显著降低(P<0.05)。结论:β₁-AA破坏H9c2大鼠心肌细胞自噬标志物LC3的节律表达,从而促进细胞死亡。     

1α,25-二羟基维生素D3抑制人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性

目的探讨1α,25-二羟基维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性的影响及作用机制。方法 1,25(OH)_2D_3(100 nmol/L)干预和溶剂对照处理SW480细胞48 h;用双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性;Western blot检测1,25(OH)_2D_3干预后β-catenin在细胞核/质内的定位变化;用RT-qPCR和Western blot检测β-catenin和FOXM1 mRNA及蛋白水平。采用siRNA敲降SW480细胞中FOXM1后,检测1,25(OH)_2D_3干预后β-catenin转录活性的变化。结果 1)在SW480细胞中,1,25(OH)_2D_3能显著降低β-catenin的转录活性(P0.05),但不影响β-catenin mRNA和蛋白表达水平; 2)1,25(OH)_2D_3上调SW480细胞中FOXM1蛋白水平的表达(P0.05); 3)敲降SW480细胞中FOXM1降低1,25(OH)_2D_3对β-catenin转录活性的抑制作用(P0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3通过上调FOXM1的表达,发挥抑制β-catenin转录活性的作用。     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节作用新进展

维生素D3(VitD3)不是内分泌细胞合成的激素,但在体内经修饰活化后可成为一种重要的激素-1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3],它与靶细胞内的核受体结合后,能够影响基因转录,发挥多种生物学效应.1,25(OH)2D3以及维生素D受体在淋巴细胞的分化发育、细胞周期的进程以及细胞因子的产生方面存在广泛的影响.本文综述了1,25(OH)2D3的主要作用机制,以及在自身免疫性疾病中的潜在作用.     

柚皮素通过抑制TGF-β1/smad信号传导通路缓解糖尿病肾病大鼠肾损伤

目的探讨柚皮素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其对TGF-β1/smad信号传导通路的影响。方法将糖尿病肾病模型大鼠随机分为糖尿病肾病组和糖尿病肾病+柚皮素组,用药治疗6周。检测大鼠24 h尿蛋白定量、肌酐清除率和肾脏指数;HE染色观察肾组织形态和检测肾小球面积;实时荧光定量PCR检测Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白、TGF-β1、Smad2和Smad7 mRNA的表达;Western blot检测Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白、TGF-β1、smad7、总smad2和磷酸化smad2蛋白。结果糖尿病肾病组大鼠24 h尿蛋白(P0.01)和肾脏指数(P0.01)显著升高,肌酐清除率明显下降(P0.01),肾小球明显肥大(P0.05),Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白的mRNA水平和蛋白表达量均升高,TGF-β1和磷酸化smad2蛋白的表达量均升高,smad7蛋白表达量降低;经柚皮素50 mg/kg治疗后能明显降低糖尿病肾病大鼠的24 h尿蛋白(P0.01)和肾脏指数(P0.05),提高肌酐清除率(P0.05),减轻肾小球肥大(P0.05),Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白的mRNA水平和蛋白表达量降低,TGF-β1和磷酸化smad2蛋白的表达量均降低,smad7蛋白表达量升高。结论柚皮素可能通过调控糖尿病肾病肾组织TGF-β1/smad信号通路表达,减轻肾脏病理损害。     

血清1,25(OH)2D3、MGO与2型糖尿病痛性神经病变的相关性研究

年来,糖尿病痛性神经病变（PDN）成为内分泌领域难以攻克的问题,中枢敏化及炎症反应是其发病的重要机制。甲基乙二醛（MGO）作为晚期糖基化终末产物（AGEs）的一种前体,能快速生成AGEs,可以通过蛋白转录后修饰致中枢敏化,提示MGO可能参与了PDN的发生发展。维生素D具有抗炎和免疫调节功能,1,25(OH)2D3是其活性形式,已有研究表明VitD3可以抑制2型糖尿病患者炎症细胞因子的表达,对预防2型糖尿病的发生发展和糖尿病并发症的改善具有很好的作用,但具体机制不明确。MGO与1,25(OH)2D3是否可能介导了糖尿病痛性神经病变的机制,两者之间是否存在一定的相关性,国内外尚鲜有相关报道。因此,本研究就MGO及1,25(OH)2D3与糖尿病痛性神经病变的相关性及两者之间关系进行综述。     

1,25-(OH)_2-D_3调控炎性机制对糖尿病鼠造影剂引起的急性肾损伤的保护作用

为探讨1,25-(OH)_2-D_3调控炎性机制对糖尿病大鼠造影剂急性肾损伤(contrast-induced acute kidney injury, CI-AKI)的保护作用,选取雄性SD大鼠120只,分为对照组(CON组)、糖尿病组(DM组)、糖尿病CI-AKI组(DCDM组)和1,25-(OH)_2-D_3干预组(DCDMVD组)。HE染色光镜观察肾脏组织病理学改变,利用自动生化分析仪检测血糖、血清肌酐(serum creatinine, Scr)水平变化,ELISA及PCR检测肾组织炎性因子各时间点水平变化情况。结果显示DCDM组Scr、肾小管损伤、肾脏肥大指数明显高于DM组(P0.05),DCDMVD组肾脏损伤指标明显改善(P0.05);与DM组相比,DCDM及DCDMVD组促炎因子(IL-17、IL-23、IFN-γ)与抑炎因子(IL-4、IL-10、TGF-β1)表达水平在各时间点有差异(P0.05),与DCDM组相比,DCDMVD组上述炎性因子表达水平在各时间点有差异(P0.05)。由此促炎与抑炎因子参与了糖尿病CI-AKI的早期病变过程,1,25-(OH)_2-D_3预干预可通过调控肾组织中炎性因子的表达发挥保护作用。     

肝素结合蛋白、1,25-二羟基维生素D3、白三烯B4及炎性指标与慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者肺功能的相关性研究

目的 探讨肝素结合蛋白、1,25-二羟基维生素D3、白三烯B4及炎性指标与慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者肺功能的相关性研究.方法 选取360例2016年4月至2017年5月期间到我院呼吸科诊治的COPD和AECOPD患者作为研究对象.其中COPD患者167例,作为稳定组,AECOPD患者193例,作为加重组.选取同期进行体检的健康人300例作为对照组.比较3组受试者HBP、1,25-(OH)2D3、LTB4、TNF-α、IL-8和IL-6水平.比较稳定组和加重组肺功能指标.分析HBP、1,25-(OH)2D3、LTB4、TNF-α、IL-8和IL-6与患者肺功能相关性.结果 稳定组、加重组患者HBP和LTB4水平显著高于对照组,1,25-(OH)2D3显著低于对照组,加重组患者HBP和LTB4水平显著高于稳定组,1,25-(OH)2D3显著低于稳定组(P<0.05).稳定组、加重组患者TNF-α、IL-8和IL-6水平显著高于对照组,加重组患者TNF-α、IL-8和IL-6水平显著高于稳定组(P<0.05).加重组患者各肺功能指标(FEV1% Pred、FEV1/Fvc%、MMEF% Pred、V50% Pred、V25%Pred)均显著高于稳定组(P<0.05).经过Pearson相关性分析,HBP、LTB4、TNF-α、IL-8、IL-6与患者肺功能呈负相关, 1,25-(OH)2D3与患者肺功能呈正相关.结论 HBP、1,25-(OH)2D3、LTB4及炎性指标与AECOPD患者肺功能指标密切相关,可以评估患者的病情严重程度,指导临床治疗.