内皮蛋白C受体的研究现状

内皮蛋白C受体 (EPCR)是近年发现的在炎症和抗凝过程中有重要意义的蛋白。它选择性表达在大血管的内皮细胞上 ,使PC活化效率提高 5倍。在炎症过程中它脱落为可溶性EPCR(sEPCR) ,能与中性粒细胞蛋白酶 - 3(PR3)结合。深入研究EPCR分子表达调控及相互作用的蛋白 ,对理解炎症、抗凝及细胞增殖修复间的关系具有重要意义 ,对活化PC(APC)治疗炎症的临床应用研究有指导作用。     

尿毒症患者透析前后血清C3、C3d和C3d-IC水平的变化

各种急慢性肾病所致的尿毒症患者,常因肾功能衰竭导致体内毒性代谢产物蓄积和免疫功能紊乱,而血液透析疗法有望使这一状况得到改善［１］。本文测定尿毒症患者血透前后血清Ｃ３、Ｃ３ｄ及荷Ｃ３ｄ免疫复合物（Ｃ３ｄ ＩＣ）的水平变化,现报告如下。１材料与方法１１...     

C1q、C1r和C1s的快速分离

建立了一种同时快速分离纯化C1q及酶原形式C1r和C1s的方法。用IgG Sepharose 4B亲和层析将C1q与C1r2 s2 分离 ,接着用DEAE Sephacel离子交换层析将C1r和C1s分离 ,用C1qMcAb Sepharose 4B亲和层析将C1q进一步纯化。在分离Clr和C1s的整个过程中加入蛋白水解抑制剂PMSF和NPGB ,并控制温度在 4℃、pH 6 1、无二价阳离子的条件下 ,得到高度纯化的C1q、C1r和C1s。     

中国人不同C4基因型时血中C4浓度的定量检测

用神经氨酸酶及羧肽酶B处理血浆,依次经C4高压琼脂糖电泳、免疫固定、薄层激光扫描等步骤,并结合血浆免疫火箭电泳定量法对我国武汉地区随机人群的血浆C4总量及C4两种同种型,主要别型,单、双QO,重复座位等时的血浆C4含量进行了检测与分析。结果发现:遗传因素明显影响血浆C4水平,因而在群体中表现宽广的C4浓度范围,特别在有C4QO与C4重复基因座位时差异特别明显。这一研究提示,不同的C4基因型,循环C4含量表现明显差异。临床上检测C4含量时应该考虑患者的C4基因型别。     

Functional identification of the stable transfection C5aR cell line Molt-4

The complement C5 anaphylatoxin receptor is a member of the seven transmembrane-spanning G protein-coupled receptor superfamily that signals through Gcxi and Gtz16. C5aR is mostly expressed on neutrophils, macrophages and endothelial cells. C5a and C5aR interaction plays an important role in numerous biological effects such as in vivo cytokine storm which results in inflammatory damage. Considering the limitation of collection of human peripheral blood neutrophils and their short half life, the stably transfected cell line for studying the biological effects of C5aR is needed. In this study, we transfected C5aR gene into Molt-4 cell line and examined the function of ectopic C5aR. Our results showed stable expression of the C5aR in Molt-4 cell line and their interaction with human C5a induced ERKI/2 phosphorylation, Ca＋＋ influx. This stable transfected cell line may provide a useful tool for studying signal pathways related to C5a and C5aR interplay and antibody development specific for C5aR. Cellular ＆ Molecular Immunology.     

HBV前C／C区基因变异与干扰素治疗的影响

ＨＢＶ慢性持续感染过程中，机体的免疫压力，干扰素抗病毒治疗等，均可诱使前Ｃ／Ｃ区基发生变异。ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ区基因变异后，废除ＨＢｅＡｇ表达，临床生化表现为ＨＢｅＡｇ转阴而抗－ＨＢｅ转阳。感染野生型株的病例，干扰素治疗的应答率高于突变型病毒。     

应用细胞模型探讨TAZ激活剂对肌萎缩的作用

目的应用糖皮质激素致C2C12细胞肌管形成萎缩模型,探讨TAZ激活剂对肌萎缩的治疗作用。方法 C2C12细胞按分化培养液中的不同处理分为对照组、地塞米松处理组和地塞米松联合不同浓度IBS008738处理组,荧光显微镜下观察分化后肌管并行免疫染色,用Image J软件测量其直径并计算融合指数。用Real time PCR及Western blot法分析肌萎缩标记基因Mu RF1及Atrogin-1的m RNA及蛋白表达水平。结果IBS008738显著地抵抗地塞米松所致肌管直径及融合指数的减低,下调萎缩相关基因的表达,且其作用有剂量依存性。结论 IBS008738对糖皮质激素肌萎缩有潜在治疗价值。     

NO抑制体外IFN-γ刺激成肌细胞/肌管NLRP3炎性小体活化

目的观察一氧化氮供体硝普钠(SNP)、一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)对体外炎性培养(IFN-γ刺激)成肌细胞/肌管NLRP3炎症小体活化的影响。方法利用IFN-γ刺激小鼠C2C12成肌细胞/肌管,q PCR和Western blot分析炎性小体(ASC、NLRP3、caspase-1)的形成及活化、ELISA检测细胞培养上清IL-1β的分泌。进一步利用L-NAME和SNP处理IFN-γ诱导的C2C12细胞/肌管,分析炎性小体的形成、活化及IL-1β的分泌。结果 IFN-γ刺激培养后,成肌细胞/肌管中NLRP3、ASC和mature-caspase-1表达水平上调(P0.01)。较之未刺激的细胞,IFN-γ诱导会显著上调成肌细胞/肌管培养基中的IL-1β浓度(P0.01)。SNP处理后6 h,分化肌管(IFN-γ刺激48 h)内炎性小体(ASC、NLRP3、caspase-1)mRNA和蛋白水平较单纯刺激细胞显著下调(P0.01),L-NAME则上调ASC、NLRP3、caspase-1表达水平(P0.05)。与上述结果一致,SNP和L-NAME处理同时分别下调或上调培养基中IL-1β浓度(P0.05)。结论在炎性条件下,成肌细胞/肌管具备合成并活化NLRP3炎性小体的能力。NO对炎性小体的形成及活化有一定的抑制作用。     

人血清中补体成分C_1~-抑制物抗原的分离

补体活性第一组份抑制物(Cinhibitor,以下称C-INH)与C大分子中的C1和C1结合后,抑制了C的酶活性,并将C1和C1从C大分子中解离下来,形成C1和Cl(C—INH)_2复合物(以下称此复合物为C—INC)。C—INC具有不被强变性剂如尿素、十二烷基磺酸钠、盐酸胍等所分离的性质。据以上事实,我们用抗人Cls亲和柱分离人血清中仍具Cls抗原性的C—INC;在制备抗C—INC亲和柱的基础上,分离血清中C-INH和Cls/Clr的混合物,然后用抗Clrs亲和柱吸收混合物中的Cls/Clr,从而获得了具补体经典通路溶血抑制活性的Ci-INH样品,并制备了兔抗人C-INH抗血清。     

冠心病患者血清超敏C反应蛋白及胱抑素C水平分析

目的:分析冠心病(CHD)患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)和胱抑素C(Cys-C)水平变化。方法:125例CHD患者分为急性心肌梗死组(AMI组,n=24)、不稳定性心绞痛组(UA组,n=73)、稳定性心绞痛组(SA组,n=28),同期因胸闷、胸痛症状经冠状动脉造影排除CHD的患者作为对照组(n=80)。采用免疫比浊法测定各组血清hs-CRP和Cys-C浓度,统计分析各组间差异及二者单检和联检对CHD的诊断效能。结果:CHD各组血清hs-CRP和Cys-C水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。血清hs-CRP和Cys-C诊断CHD的ROC曲线下面积分别为0.70(95%CI:0.63-0.77)和0.72(95%CI:0.66-0.79),二者联合检测诊断CHD的ROC曲线下面积为0.76(95%CI:0.70-0.83)。以4.23mg/L为Cut-off值,血清hs-CRP诊断CHD的灵敏度为82.40%,特异度为53.70%;以1.37mg/L为Cut-off值,血清Cys-C诊断CHD的灵敏度为77.70%,特异度为60.20%;二者联合检测的灵敏度和特异度分别为84.30%和65.40%。结论:hs-CRP和Cys-C水平与CHD的发生发展有关,二者血清水平联合检测可以提高CHD诊断的灵敏度和特异度。     

乙型肝炎病毒前C/C区基因变异检测的临床意义

目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)前C?C区基因的一级结构及其变异特点。探讨前C区1896位基因突变与血清标志物,肝功能损害的关系。方法:收集慢性乙型病毒性肝炎患者血清388份,进行前C/C区基因测序,HBV标志物、HBV-DNA、ALT、AST测定。结果:HBVA1896突变毒株158例,A1899突变毒株57例。C区变异大部分集中在第5、27、60位氨基酸的序列中。结论:A1896突变与HBeAg分泌障碍有关。A1896突变可加重肝脏损害。     

补体第四成分(C4)的基因

C4A3的基因由41个外显子与40个内含子组成。外显子1～16、16～33、33～41分别编磅码C4的β链、α链及γ链。唯一甘露糖型糖基化位点由第6外显子(207位aa)编码,三个两天线型糖基化部位分别与20(843aa)、30(1309aa)及32(1372aa)外显子有关。C4硫酯键、同种型区分部位及Rg/Ch抗原的基因集中在外显子23～30的C4d编码区。C4基因第9内含子特大,它含不含HERV-K(C4)是决定C4基因长与短的关键。C4基因的表达调控区没有TATA盒由Inr启动。     

C5a受体（C5aR,CD88）

Ｃ５ａ是一个重要的炎症介质，但其作用的机制是在对其受体Ｃ５ａＲ（ＣＤ８８）近年来有了较明确的认识后才得以阐明的。本文就Ｃ５ａＲ的结构、作用的分子机理、作用后的信号转导机制、Ｃ５ａＲ的脱敏与内移，以及Ｃ５ａＲ的基因结构及其表达调控等的一些新进展加以介绍。     

PC对CIA小鼠关节的保护作用研究

目的：研究蛋白C(PC)对胶原诱导的关节炎（CIA）的影响及其是否通过内皮细胞蛋白C受体（EPCR）通路发挥作用。方法：构建CIA小鼠模型，并随机分为CIA模型组和CIA+PC组。CIA+PC组预防性给予PC,CIA模型组不做任何处理。应用量化评分评估PC对足肿胀的缓解程度；Micro-CT、HE染色、甲苯胺蓝染色观察小鼠骨/软骨破坏情况；双重免疫荧光法检测EPCR在小鼠滑膜组织中的表达情况；应用siEPCR腺病毒载体干扰EPCR蛋白表达，观察其对PC作用的影响。结果：PC干预CIA小鼠后，小鼠的临床评分降低，足爪肿胀程度减轻，骨侵蚀缓解；在CIA小鼠和DBA1小鼠的关节滑膜组织中检测到EPCR表达，且CIA小鼠EPCR表达明显低于DBA1小鼠。PC+siEPCR腺病毒载体干预CIA小鼠后，CIA小鼠临床评分无明显降低，关节症状未得到有效缓解。结论：PC可改善CIA小鼠的关节症状，进而缓解CIA疾病进展。而siEPCR可逆转PC的这种保护作用，因此PC缓解CIA疾病进展依赖于EPCR蛋白表达。     

C反应蛋白在新生儿败血症的应用及评价

目的 探讨血清C反应蛋白(CRP)、高敏C反应蛋白(sCRP)浓度对诊断新生儿败血症的敏感性和特异性,为临床提供准确快速的诊断依据.方法 用比浊法测定新生儿败血症患者的CRP、sCRP浓度,并与WBC计数进行比较.结果 CRP、sCRP对诊断新生儿败血症的敏感性均高于WBC计数,3个指标中敏感性以sCRP最高;特异性、阳性预测值以CRP最高;阴性预测值和约登指数CRP、sCRP两者相差无几.结论 C反应蛋白浓度检测对新生儿败血症的早期诊断有一定价值.     

超敏C反应蛋白等指标在川崎病的动态变化和临床诊断价值

目的:观察川崎病(KD)患儿治疗前后全血超敏C反应蛋白(hs-CRP)、C反应蛋白(CRP)含量和白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)指标变化,并探讨它们对KD的临床诊断价值。方法:37例KD患儿(KD组)和65例健康幼儿(正常对照组)采用常规方法平行检测hs-CRP、CRP、WBC和PLT水平,并分析各指标组间差异和KD患儿治疗前后变化。通过ROC曲线分析比较各指标对KD的临床诊断价值。结果:KD组治疗前hs-CRP、CRP、WBC和PLT均较正常对照组明显升高(P0.01);治疗后hs-CRP、CRP和WBC均较治疗前降低(P0.01),而PLT在治疗后升高(P0.01)。ROC曲线分析显示hs-CRP和CRP的cut-off值分别为0.51mg/L和5.50mg/L时,两者ROC曲线下面积(AUC)分别为0.964和0.957,敏感度分别为97.30%和91.92%,特异度分别是56.87%和95.40%,临床诊断价值明显优于WBC和PLT。结论:快速检测全血hs-CRP、CRP、WBC可用于KD动态监测;hs-CRP和CRP对KD有重要临床诊断价值。     

补体裂解产物C5a的研究进展

C5a由C5裂解而来,由74个氨基酸构成,是一种潜在的前炎症因子。C5a在羧肽酶的作用下迅速变成C5adesArg,通过G蛋白受体经典的通路与C5aR结合后在天然免疫中和适应性免疫中均发挥着重要的作用,非G蛋白受体通路目前的研究还不明朗。研究发现,C5a是许多自身免疫性疾病的重要病原起始物,所以抑制C5a的释放在未来的治疗中是一个很好的策略和方向。     

23例仅C3沉积的儿童原发性肾病的临床病理特征

目的:通过回顾性分析首都医科大学附属北京儿童医院肾组织病理免疫荧光仅有C3沉积(≥2+)的肾病患儿的临床及病理特点,以加深对儿童以C3沉积为主的原发性肾病的认识.方法:选取首都医科大学附属北京儿童医院肾活检病理结果仅补体C3沉积(≥2+),不伴免疫复合物沉积或仅有少许IgM沉积的原发性肾病患儿.收集患者临床、病理信息及肾功能、补体C3,C4水平等资料.同时记录治疗及转归.结果:病理提示仅C3沉积(≥2+)的原发性肾病患儿23例,包括急性链球菌感染后肾炎7例,无明确病因的肾炎综合征6例,肾炎型肾病综合征7例,反复发作性肉眼血尿3例.其中补体C3降低者20例.23例患儿中病理表现为毛细血管内增生性肾炎11例,局灶增生性肾炎1例,新月体肾炎1例,增生硬化或硬化性肾炎6例,膜增生性肾炎4例.免疫荧光C3强度2+9例,3+14例,内皮下、上皮下、系膜区均可见沉积.随访中大部分肾功能正常,6例患儿就诊即出现严重肾功能不全者,预后不佳.结论:以C3沉积为主的肾病患儿临床与病理表现多种多样,预后与病理改变有关.     

纳西族人血清Ig(G、A、M)、C3、C4的测定

Ｉｇ是生物体的主要抗体。由于它具有对抗外来细菌、病毒等有害物质侵袭,以很多方式调控细胞介导免疫（ＣＭＩ）的重要作用,因此,检测Ｉｇ在免疫基础理论研究和临床诊断实践中很有必要。前文［１］已报道过纳西族人血清总ＩｇＥ水平,本文报导５４名该民族中青年人血清...     

剪切力对培养内皮细胞原癌基因表达的影响

内皮细胞位于血管壁的最内层,因其独特的解剖位置,内皮细胞常常暴露于血液流动所产生的血流应力的作用下。血液在流动过程中,对不同血管的内皮细胞有着不同类型、不同强度的力学作用。血管的锥度、分枝分叉等均可改变血流方式,使内皮细胞所受的切应力大不相同。在生理稳态范围内,组织（或器官）内的应力发布应使得组织（或器官）处于某种优化状态^[1]。血液流动对血管壁产生的力包括由于对血管壁面摩擦而产生的剪切力、血管周向应力和压应力。离体血流系统模型证明剪切力可调节内皮细胞结构和功能的各个方面,这些影响在一定程度上是由于对内皮细胞转录水平的调节。这里所述的主要是对原癌基因的调节。