PKC和ROCK对硝苯地平舒张血管作用的影响

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)及Rho相关激酶(ROCK)对硝苯地平舒张大鼠离体胸主动脉血管环作用的影响。方法:采用离体血管环灌流装置观察硝苯地平对基础状态血管环及去甲肾上腺素(NE,10~(-6)mol/L)或KCl(60mmol/L)预收缩血管环的张力变化,并利用PKC抑制剂和ROCK抑制剂等工具药观察对硝苯地平舒血管作用的影响并探讨可能机制。结果:系列浓度硝苯地平对基础状态血管环张力无明显影响,对NE和KCl预收缩的血管环具有浓度依赖性舒张作用(P 0. 05),去内皮组舒张作用与内皮完整组比较无明显差异。预孵PKC抑制剂星孢菌素(STA,10~(-8)mol/L)及激动剂佛波酯(PMA,10~(-7)mol/L)后,STA能增强硝苯地平对血管的舒张作用,而PMA能减弱硝苯地平对血管的舒张作用(P 0. 05);预孵ROCK抑制剂法舒地尔(fasudil,10~(-6)mol/L)及激动剂血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ,10-9mol/L)后,fasudil能增强硝苯地平对血管的舒张作用,而Ang-Ⅱ能减弱硝苯地平对血管的舒张作用(P 0. 05);钾通道阻滞剂BaCl_2(10~(-4)mol/L)、四乙胺(10~(-3)mol/L)、格列本脲(10~(-5)mol/L)和4-氨基吡啶(10~(-3)mol/L)对硝苯地平的舒张血管作用无明显影响。在无钙且含高浓度KCl的溶液中,硝苯地平可浓度依赖性地抑制累积浓度的CaCl_2对大鼠离体主动脉环的收缩作用(P 0. 05)。在无钙液中,硝苯地平对NE所引起的收缩无明显影响。结论:硝苯地平能够呈浓度依赖性地舒张大鼠主动脉,其舒张血管作用为非内皮依赖性,且与抑制细胞外钙内流密切相关,其舒张血管作用部分与抑制PKC和ROCK作用相关。     

附子水煎剂对家兔离体主动脉血管张力的影响

背景：附子为毛莨科乌头子根的加工品,具有温肾回阳,回阳救逆和温里散寒之功效。研究发现其具有明显的强心、降压、扩张血管、镇痛、抗炎及毒性等作用。目的：观察附子水煎剂对主动脉环的舒张作用及机制。方法：采用家兔离体主动脉平滑肌标本,以去甲肾上腺素(10^-6 mol/L)预收缩主动脉后给予0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 g/L附子水煎剂观察其张力变化。然后将不同浓度的附子水煎剂干预的家兔离体主动脉平滑肌加入去除血管内皮、给予一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸      (1×10^-4 mol/L)、甲烯蓝(1×10^-5 mol/L)、环氧酶抑制剂吲哚美辛(1×10^-5 mol/L)和β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔(1×10^-5 mol/L),探讨它们对血管张力变化的影响。结果与结论：附子水煎剂对血管环静息张力无明显影响,但不同剂量的附子水煎剂可使10^-6 mol/L 去甲肾上腺素预收缩血管产生明显舒张。去除血管内皮、给予左旋硝基精氨酸或给予甲烯蓝可减弱附子水煎剂对血管的舒张作用,但吲哚美辛和普萘洛尔对此无影响。另外,4 g/L附子水煎剂对无内皮细胞血管环去甲肾上腺素和KCl的量效收缩反应无明显影响。提示附子对主动脉的舒张作用是内皮依赖性,与内皮细胞释放的一氧化氮有关,而与平滑肌细胞膜上的受体依赖性Ca²⁺通道和电压依赖性Ca²⁺无关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

原花青素对离体肺动脉血管张力的影响

文章快速阅读：  文题释义：血管张力：大血管(主动脉和肺动脉等)属于多单位紧张性平滑肌,是以张力改变为主的紧张性收缩。血管张力就是一种持续性的、紧张性收缩活动的结果,其大小决定着血管的口径,而后者又影响着血流阻力和血流量。实验发现原花青素可显著舒张内皮完整的肺动脉,且呈剂量依赖性。亲和力指数(pD2)：pD2=-logK_D= log(1/K_D)。K_D是游离药物的浓度,即当药物效应达到最大效应的一半时所需的浓度(EC50),它表示受体结合激动剂的亲和力且与之成反比。但以pD2代表亲和力则成正比。 背景：原花青素是广泛存在于植物界中的一类多酚化合物,由不同数量的儿茶素或表儿茶素缩合而成,有保护血管内皮、清除自由基、抗血小板聚集、降低毛细血管通透性、起到降低血压、抗氧化活性、抗水肿、防止冠状动脉粥样硬化性心脏病和动脉粥样硬化等作用。目的：观察原花青素对肺动脉环的舒张作用及机制。方法：家兔离体肺动脉环为标本,以去甲肾上腺素(1×10^-6 mol/L)预收缩肺动脉环后给予0.625,1.25,2.5 mg/L 原花青素观察其张力变化。再将不同浓度原花青素干预的家兔离体肺动脉平滑肌去除血管内皮、给予一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸(1×10^-4 mol/L)、甲烯蓝(1×10^-5 mol/L)、环氧酶抑制剂吲哚美辛(1×10^-5 mol/L)和β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔(1×10^-5 mol/L),探讨它们对血管张力的影响。结果与结论：①原花青素对肺动脉环静息张力无明显影响,但不同剂量的原花青素可使1×10^-6 mol/L去甲肾上腺素预收缩血管产生明显舒张,并呈量效依赖性(r=0.69,P < 0.001)。②去除血管内皮、左旋硝基精氨酸和甲烯蓝均可减弱原花青素舒张血管的作用,但吲哚美辛和普萘洛尔无影响。③20 mg/L原花青素能明显压低去除内皮细胞肺动脉血管的去甲肾上腺素、KCl和CaCl₂的量效收缩反应曲线,且去甲肾上腺素、KCl和CaCl₂的亲和力指数降低(P < 0.01)。④原花青素能抑制去甲肾上腺素引起的第Ⅰ时相收缩,而对CaCl₂引起的第Ⅱ时相收缩无影响。⑤实验结果表明原花青素对肺动脉的舒张效应是内皮依赖性的,与NO/cGMP介导有关,可拮抗受体依赖性钙通道和电压依赖性钙通道而降低细胞内Ca²⁺引起血管舒张。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程 ORCID: 0000-0002-0618-3755(Niu Cai-qin)     

平滑肌BKCa通道在运动改变大鼠胸主动脉舒缩特性中的作用

背景：大电导钙激活钾通道(BK_Ca)是调节细胞兴奋性和血管张力的重要离子通道,有关大动脉平滑肌BK_Ca通道的作用机制鲜有报道。 目的：观察有氧运动对大鼠胸主动脉舒缩特性的影响,并探讨平滑肌BK_Ca通道在其中的作用。 方法：将20只Wistar大鼠随机分为安静对照组和有氧运动组,运动组进行12周跑台运动,坡度0°, 20 m/min, 60 min/d, 5 d/周。之后每组5只大鼠行股动静脉插管术。恢复1 d后,于在体、清醒状态下进行心血管功能监测。另各组5只大鼠,取胸主动脉制备去内皮血管环,进行体外血管收缩特性检测。 结果与结论：①有氧运动后静脉注射去甲肾上腺素引起的升压反应幅度下降。②静脉注射BK_Ca通道阻断剂Iberiotoxin可诱发升压反应,且运动组更显著。③ 120 mmol/L KCl在两组胸主动脉血管环均可诱发收缩,最大张力差异无显著性意义。④去甲肾上腺素(10^-9~10^-5 mol/L)诱发的血管收缩呈浓度依赖性,但运动组的最大张力显著低于安静组。⑤Iberiotoxin (3×10^-8 mol/L)预处理血管后,可增强去甲肾上腺素(10^-5 mol/L)诱发的张力增加,且运动组增加幅度显著大于安静组。⑥BKCa通道开放剂NS1619 (10^-10~10^-6 mol/L)可引起去甲肾上腺素诱发的血管收缩张力下降,且运动组对其敏感性(pD2)增加。提示,有氧运动可诱导大鼠心血管反应性和胸主动脉舒缩特性改变,其中平滑肌BKCa通道起着重要作用。     

银杏达莫注射液对高钾血症大鼠离体血管张力的影响

目的: 观察银杏达莫注射液(GD)对高钾血症大鼠离体胸主动脉的影响,并探讨其可能作用机制。方法: 复制高钾血症大鼠模型,制备离体胸主动脉环,经生物信号与采集分析系统测定主动脉环的张力变化。观察不同浓度GD(4、8、16 mg/L)预孵育的高钾血症大鼠胸主动脉血管环对去氧肾上腺素(PE)和KCl收缩张力的影响。结果: 与正常大鼠相比,高钾血症大鼠胸主动脉环对PE和KCl收缩张力明显升高(P<0.05)。不同浓度GD对基础张力无明显影响(P>0.05)。在内皮完整主动脉环上,GD预孵育后对KCl收缩张力无明显影响(P>0.05);而16 mg/L GD预孵育后对PE收缩张力有明显抑制作用(P<0.05),此作用可被一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)或鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝(MB)所抑制。在去内皮的主动脉环上,不同浓度GD预孵育后对PE收缩张力无显著作用(P>0.05)。结论: GD对高钾血症大鼠胸主动脉环具有内皮依赖性舒张作用,其机制可能与激活血管内皮细胞一氧化氮-鸟苷酸环化酶途径有关。     

异丙酚舒张离体大鼠肺内动脉的作用及机制

目的: 观察异丙酚对预收缩离体大鼠肺内动脉张力的影响及其作用机制。方法: 分离SD雄性大鼠肺内动脉, 制备血管条, 采用微血管张力测定技术, 分别测定异丙酚对离体血管高钾(60 mmol/L KCl)和血栓素A₂的类似物U46619(100 nmmol/L)诱导收缩反应的张力影响。结果: 异丙酚可以明显舒张高钾预收缩的血管环, 呈浓度依赖性(EC₅₀=41.50 μmmol/L); 异丙酚也可以浓度依赖性地舒张U46619预收缩的血管环(EC₅₀ =63.38 μmmol/L), 无明显内皮依赖性; 不同浓度异丙酚(10、30、100和300 μmmol/L)孵育后, 钙离子反应曲线明显右移; 在L-型钙通道拮抗剂硝苯地平(nifedipine,1 μmmol/L)存在的条件下, 异丙酚仍可以舒张U46619预收缩的血管(EC₅₀ =89.03 μmmol/L)。结论: 异丙酚可舒张高钾及U46619预收缩的肺内动脉, 且不依赖于内皮, 其部分机制可能与抑制电压门控性钙内流与受体操纵钙内流有关。     

大鼠尾加压素Ⅱ收缩大鼠离体肺主动脉环与MAPK相关

目的:研究大鼠尾加压素II(U-II)对大鼠离体肺主动脉环的收缩效应及与细胞信号转导通路丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的关系。方法:从雄性Sprague-Dauley大鼠中分离出肺主动脉, 切成3-4 mm的血管环, 制备大鼠U-II(0.03-30 nmol/L)的浓度-效应收缩曲线, 另外, 用大鼠U-II(30 nmol/L)预收缩血管达平台期后, 加入MAPK阻断剂PD 98059, 制备PD 98059(0.1 μmol/L-10 μmol/L) 浓度-效应舒张曲线, 最后分别计算EC₅₀和E_max。结果:大鼠U-II是大鼠离体肺主动脉环的有效血管收缩剂[EC₅₀=7.95±0.40, E_max=(14.28±6.34)%, 以60 mmol KCl的收缩幅度为100%];PD 98059呈浓度依赖性舒张大鼠U-II预收缩的动脉[EC₅₀=5.91±0.45, E_max=(81.39±13.65)%]。结论：大鼠尾加压素II是大鼠肺主动脉有效的血管收缩剂, 细胞信号转导通路MAPK的激活参与其收缩效应。     

槲皮素改善高糖损伤大鼠冠脉肌原性反应的机制研究

目的:通过大鼠冠状动脉(coronary artery,CA)张力测定和全细胞膜片钳记录CA血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的电压门控性钾通道(voltage-gated K~+channel,Kv)电流,研究槲皮素改善高糖损伤大鼠CA肌原性反应的机制。方法:从正常SD大鼠急性分离得到CA环,然后分成6组:(1)正常对照组;(2)高糖组;(3)高糖+低剂量(3μmol/L)槲皮素组;(4)高糖+中剂量(10μmol/L)槲皮素组;(5)高糖+高剂量(30μmol/L)槲皮素组;(6)高糖+蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂C6303+高剂量槲皮素组。利用血管张力测定,检测CA环对血管收缩剂(60 mmol/L KCl和0.1 mmol/L U46619)的反应,并将CA环用60 mmol/L KCl预收缩后,用乙酰胆碱(acetylcholine,ACh;10~(-9)~10~(-5)mol/L)进行舒张,计算ACh引起CA环张力下降幅度与预先收缩的百分比。急性分离得到大鼠CA的VSMC,然后记录Kv电流。结果:与正常対照组相比,高糖组CA环对60mmol/L KCl和0.1 mmol/L U46619的反应明显升高;中、高剂量槲皮素的干预可以使高糖所致CA环对血管收缩剂的反应降低,孵育PKC特异性抑制剂C6303可减弱槲皮素的作用。与正常对照组相比,高糖组大鼠离体CA环对ACh的舒张幅度明显减弱。槲皮素的干预可以改善高糖孵育的大鼠离体CA环对ACh的舒张反应,C6303可以减弱槲皮素的作用。高糖孵育明显抑制CA VSMC的Kv电流,槲皮素干预可以减弱高糖对CA VSMC Kv电流的影响,孵育C6303可减弱槲皮素的作用。结论:槲皮素对高糖损伤大鼠CA肌原性反应具有保护作用,该作用与增大VSMC的Kv电流和激活PKC有关。     

前列腺素E1对人类脂肪源性基质细胞体外增殖的影响

背景：近年来脂肪源性基质细胞成为研究与应用的热点之一,但前列腺素E1对脂肪源性基质细胞增殖的作用影响尚未见报道。 目的：观察前列腺素E1对人类脂肪源性基质细胞体外增殖的影响。 方法：从人正常脂肪组织分离培养脂肪源性基质细胞,用5种不同浓度的前列腺素E1处理培养的细胞,其中3×10^-6,6×10^-6,9×10^-6,12×10^-6 mol/L作为实验组,0×10^-6 mol/L作为对照组,观察经不同浓度前列腺素E1处理后细胞的增殖情况。 结果与结论：不同浓度实验组的细胞数量与对照组相比均显著升高,差异有显著性意义(P < 0.05),各实验组内相比,细胞数量增殖无显著性差异(P  > 0.05)。提示前列腺素E1具有促进脂肪源性基质细胞的增殖作用,且前列腺素E1的影响效果无剂量依赖性。     

羟基红花黄色素A通过激活Kv通道舒张大鼠冠状动脉

目的:研究羟基红花黄色素A (hydroxysafflor yellow A,HSYA)对离体大鼠冠状动脉(rat coronary artery,RCA)的舒张作用,并探讨该作用与电压门控性钾通道(Kv通道)的关系。方法:采用DMT离体血管环技术明确HSYA对RCA的肌源性作用及血管内皮对该作用的影响;采用全细胞膜片钳技术观察HSYA对RCA平滑肌细胞Kv电流的影响;采用Western blot技术探讨HSYA对RCA平滑肌细胞Kv1.2和Kv1.5通道蛋白表达的影响。结果:10μmol/L和30μmol/L HSYA能够舒张60 mmol/L KCl或0.1 mmol/L U46619预收缩的RCA(P<0.05),但其对预收缩的内皮完整组和去内皮组RCA舒张作用的差异无统计学显著性(P>0.05);HSYA(3μmol/L、10μmol/L和30μmol/L)可使RCA平滑肌细胞Kv电流显著增加(P<0.05);10μmol/L和30μmol/L HSYA能够增加RCA平滑肌细胞Kv1.2和Kv1.5通道蛋白的表达。结论:HSYA可舒张预收缩的RCA,该作用与血管内皮无关,其可能的机制与增强Kv通道功能和蛋白表达有关。     

数字化载银羟基磷灰石人工骨抗菌性及生物相容性

背景：载银珊瑚羟基磷灰石作为一种新型抗菌植骨材料,受到越来越多的关注,作为植入物需与人体具有良好的生物相容性。 目的：观察数字化载银珊瑚羟基磷灰石人工骨材料的抗菌性及生物相容性。 方法：将珊瑚羟基磷灰石粉末浸泡于不同浓度的硝酸银溶液,制备出不同含银量的载银羟基磷灰石,再将其与聚乳酸混合,并通过选择性激光烧结快速成形制备出具有特殊形状的数字化载银抗菌人工骨材料。 结果与结论：连续光源原子吸收光谱仪测定珊瑚羟基磷灰石浸泡于10^-2,10^-3,10^-4,10^-5 mol/L AgNO₃中制备的载银人工骨中Ag+的含量分别为2.31×10^-1%,3.18×10^-2%,6.75×10^-3%,6.05×10^-4%。体外抑菌圈实验表明浸泡10^-2 mol/L AgNO₃中制备的载银人工骨材料对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为(13.00±1.52)mm 及(12.30±1.65)mm;浸泡10^-3 mol/L AgNO₃中制备的载银人工骨材料分别为(11.50±0.73) mm及(11.00±0.46) mm。浸泡10^-4,10^-5 mol/L AgNO₃载银人工骨材料对两种细菌均无抑菌圈产生。细胞毒性试验结果表明100%浸泡10^-2,10^-3,10^-4,10^-5 mol/L AgNO₃的载银珊瑚羟基磷灰石人工骨材料的细胞毒性分别为3级、1级、0级、0级。急性全身毒性试验表明浸泡10^-3 mol/L AgNO₃中的人工骨浸提液对小鼠无明显的急性毒性反应,具有良好的安全性。结果表明浸泡10^-3 mol/L AgNO₃中的载银珊瑚羟基磷灰石人工骨在体外对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌有明显抗菌作用,且具有良好的生物相容性及安全性。     

AngⅡ/AT_1R通路下调内皮型一氧化氮合酶磷酸化的机制研究

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT_1R)通路通过激活蛋白磷酸酶2 A(protein phosphatase 2 A,PP2 A)导致大鼠肠系膜动脉中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)磷酸化水平下调的机制。方法:采用体重160~180 g成年雄性SD大鼠90只,在无菌条件下分离大鼠肠系膜动脉。首先明确AngⅡ下调大鼠肠系膜动脉中e NOS(Ser1177)磷酸化的效应,将肠系膜动脉随机分为正常对照(control)组和AngⅡ组,AngⅡ组用浓度为1×10~(-7)mol/L、1×10~(-6)mol/L和1×10~(-5)mol/L AngⅡ分别孵育离体大鼠肠系膜动脉血管6 h、12 h和24 h;然后进一步探讨AngⅡ使eNOS(Ser1177)发生磷酸化下调的分子机制,将肠系膜动脉随机分为正常对照(control)组、AngⅡ组和坎地沙坦(candesartan,CAN;AT_1R特异性抑制剂)+AngⅡ组(用1×10~(-5)mol/L CAN预处理大鼠肠系膜动脉血管1 h后,再用1×10~(-7)mol/L AngⅡ继续孵育12 h)。采用Western blot法检测肠系膜动脉中eNOS蛋白表达和eNOS(Ser1177)磷酸化水平,以及PP2Ac的蛋白表达、PP2Ac(Tyr307)磷酸化水平和PP2A内源性抑制蛋白I~2~(PP2A)的表达水平,并用PP2A活性检测试剂盒测定大鼠肠系膜动脉PP2A活性变化。结果:(1)与control组比较,AngⅡ孵育离体大鼠肠系膜动脉血管6 h、12 h和24 h后,eNOS(Ser1177)磷酸化水平均明显降低(P0.05),且12 h组和24 h组eNOS(Ser1177)磷酸化水平下降均出现明显浓度依赖性,但不同浓度组间eNOS蛋白表达水平差异均无统计学显著性;(2)与control组比较,1×10~(-7)mol/L AngⅡ孵育肠系膜动脉血管12 h后,eNOS(Ser1177)磷酸化水平降低(P0.05);CAN预处理可明显上调eNOS(Ser1177)磷酸化水平(P0.05),且各组间eNOS蛋白表达水平差异无统计学显著性;(3)与control组比较,1×10~(-7)mol/L AngⅡ孵育肠系膜动脉血管12 h后,PP2Ac(Tyr307)磷酸化水平和I_2~(PP2A)蛋白表达均降低(P0.05);CAN预处理可使PP2Ac(Tyr307)磷酸化水平和IPP2A2蛋白表达均增加(P0.05),但各组间PP2Ac蛋白表达的差异无统计学显著性;(4)与control组比较,1×10~(-7)mol/L AngⅡ孵育肠系膜动脉血管12 h后,PP2A活性增高(P0.05);CAN预处理可明显抑制AngⅡ对PP2A的激活作用(P0.05)。结论:AngⅡ可通过AT1R通路激活PP2A,从而介导大鼠肠系膜动脉eNOS(Ser1177)磷酸化水平下调,其分子机制可能与PP2Ac(Tyr307)磷酸化水平和PP2A内源性抑制蛋白I_2~(PP2A)表达降低有关。     

葛根素预处理上调内皮型一氧化氮合酶的表达减轻人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤

 目的:探讨葛根素(puerarin,PUE)预处理对缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。方法:HUVECs随机分为正常对照(control)组、H/R组、单纯PUE组和PUE+H/R组(1.0×10^-3 mol/L PUE预处理24 h后进行H/R)。采用Western blot方法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达,化学比色法检测组成型一氧化氮合酶(cNOS)的活性,TUNEL法检测细胞凋亡。此外,在PUE预处理前使用ERK蛋白激酶抑制剂U0126(1.0×10^-5 mol/L)或PI3K/Akt蛋白激酶抑制剂LY294002(5.0×10^-5mol/L)处理细胞1 h,再进行H/R。结果:与control组相比,H/R组的eNOS蛋白表达水平降低(P<0.05),PUE预处理上调eNOS蛋白的表达水平(P<0.05),该上调作用均可被U0126及LY294002抑制(P<0.05);与control组相比,H/R组的cNOS活力下降(P<0.05),PUE预处理组的cNOS活力增加(P<0.05);与control组相比,H/R组细胞凋亡指数显著增大(P<0.01),PUE预处理组的细胞凋亡指数减小(P<0.01)。结论:H/R可使HUVECs受损伤,eNOS蛋白表达及活性降低,细胞凋亡增加。PUE预处理可通过ERK1/2信号通路和PI3K/Akt信号通路上调HUVECs的eNOS蛋白表达,增强eNOS活性,减少细胞凋亡,发挥内皮细胞保护作用。     

成骨生长肽促进钛表面大鼠成骨细胞的增殖分化

背景：成骨生长肽具有促进多种基质细胞增殖活性,成骨活性,免疫原性低,自身调节极其敏感,提取制作工艺简单等众多优点。 目的：体外观察成骨生长肽对大鼠颅盖骨来源成骨细胞在钛金属表面增殖分化的影响。 方法：将体外培养的新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞以5×10⁷ L^-1细胞浓度接种于6孔板中的纯钛试件表面,分别加入0(空白对照),10^-10,10^-9,10^-8,10^-7 mol/L的成骨生长肽,干预1,3,5,7,9 d后应用MTT法检测纯钛试件表面成骨细胞的增殖活性,应用酶联免疫法检测成骨细胞内碱性磷酸酶活性。 结果与结论：与空白对照组比较,各浓度成骨生长肽组纯钛试件表面成骨细胞增殖活跃(P < 0.05),且最佳作用浓度为10^-9 mol/L(P < 0.05);各浓度成骨生长肽组细胞内碱性磷酸酶活性增强(P < 0.05),且最佳作用浓度为10^-8 mol/L (P < 0.05)。表明成骨生长肽可促进钛片表面成骨细胞的增殖活性,增强细胞内碱性磷酸酶活性。     

双氢睾酮对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素表达的影响

目的 探讨双氢睾酮（DHT）对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素（AMH）表达的影响。方法 从95只21 d SD雌性大鼠中提取颗粒细胞原代培养48 h后,先用HE染色检测细胞形态,卵泡刺激素受体（FSHR）细胞免疫荧光检测细胞纯度;然后根据干预方法和实验的不同,随机将细胞分为对照组（无药物干预）、10^-8mol/L DHT组、10^-5mol/L DHT组,2×10^-5mol/ L蛋白激酶B(Akt)抑制剂（MK-2206 2Hcl）组和10^-8mol/L DHT+2×10^-5mol/L MK-2206 2Hcl组,分别使用相应浓度的试剂干预细胞3 h。干预完成后,细胞免疫荧光染色观察AMH表达的部位和变化;Western blotting测定不同组的AMH、Akt、p-Akt蛋白表达量。结果 大鼠原代卵泡颗粒细胞的纯度为93.33%±3.09%,AMH表达在大鼠原代卵泡颗粒细胞膜和细胞质中;与对照组相比,10-8 mol/L DHT和10-5 mol/L DHT均可使颗粒细胞AMH表达增加（P<0.05）,但这两个浓度的DHT对颗粒细胞AMH的表达影响差异无显著性（P>0.05）;与对照组相比,10^-8 mol/L DHT可以使p-Akt、AMH表达升高,2×10^-5 MK-2206 2Hcl使AMH表达降低（P<0.05）;与2×10^-5MK-2206 2Hcl相比,10^-8mol/L DHT+2×10^-5 MK-2206 2Hcl处理组AMH表达升高（P<0.05）。结论 DHT可以上调大鼠原代卵泡颗粒细胞AMH的表达,这种作用可能与Akt信号通路有关。     

5-羟色胺诱导冠状动脉收缩的机制研究

目的:探讨5-羟色胺(5-HT)诱导冠状动脉收缩的机制。方法:取雄性Wistar成年大鼠,制备离体冠状动脉环,经血管张力测定仪测定动脉环的张力变化,并探讨给予不同信号通路抑制剂对5-HT诱导的冠状动脉收缩的影响。结果:首先发现给予5-HT_(2A)受体阻断剂沙格雷酯(sarpogrelate,1μmol/L)可完全消除5-HT引起的冠状动脉浓度依赖性收缩;磷脂酶C_β(PLC_β)抑制剂U73122(10μmol/L和50μmol/L)、Rho相关蛋白激酶抑制剂Y-27632(3μmol/L和10μmol/L)和蛋白激酶Cδ亚基(PKCδ)抑制剂rottlerin(3μmol/L和10μmol/L)孵育后,均可明显抑制5-HT引起的冠状动脉环收缩(P0.05);此外,L-型钙通道(Cav1.2)阻断剂硝苯地平(1μmol/L)及细胞内钙池操纵性钙内流(SOCE)抑制剂SKF96365(10μmol/L和30μmol/L)和2-氨基乙氧基苯硼酸(2-APB,50μmol/L和100μmol/L)孵育后,5-HT诱导的血管收缩张力较未处理组明显下降(P0.05);另外,在含硝苯地平(1μmol/L)的无钙Kerbs-Henseleit(K-H)液中,发现5-HT仍可诱导血管收缩。结论:5-HT通过激活5-HT_(2A)受体诱导冠状动脉收缩,其机制可能与PKC和Rho激酶信号通路,以及钙调控有关。