中枢氧化应激对心绞痛模型大鼠心功能的影响

目的 观察心绞痛大鼠中枢氧化应激水平的变化,并运用NADPH氧化酶抑制剂APO减少超氧化物的生成进而降低中枢氧化应激水平以改善心绞痛时心功能.方法 采用冠脉结扎术制作心绞痛动物模型,假手术组仅进行手术而不造成缺血状态,干预组通过侧脑室插管给予APO (60 μg/3 min),对照组给予人工脑脊液.雄性Sprage-Dawley大鼠随机分为心绞痛干预组(Angina+APO)、心绞痛对照组(Angina +VEH)、假手术干预组(SHAM+APO)和假手术对照组(SHAM+VEH).2 h后各组大鼠分别进行血流动力学、右心室/体重比值、肺/体重比值的测量.免疫组化方法检测下丘脑室旁核NADPH亚基gp91 phox的表达.结果 心绞痛对照组与假手术对照组相比,下丘脑室旁核NADPH亚基gp91 phox表达增加,左心室舒张末压明显升高,左心室内压最大上升速率和最大下降速率明显降低(P<0.05),右心室/体重比值、肺/体重比值均增加(P<0.05).心绞痛干预组与心绞痛对照组相比,中枢NADPH亚基gp91 phox表达减少,右心室/体重比值、肺/体重比值均减小.结论 心绞痛大鼠中枢氧化应激水平升高,降低中枢氧化应激可在一定程度上改善心绞痛大鼠心功能.     

奥美沙坦酯对心肌梗死小鼠NADPH氧化酶的作用

目的探讨奥美沙坦酯（OLM）对心肌梗死（MI）小鼠NADPH氧化酶的作用。方法健康C57小鼠分为假手术组（SHAM组）、MI组和OLM组。建立小鼠MI模型,OLM组以10 mg/kg剂量每日胃饲,4周时观察各组小鼠病死率及一般状况;AZAN染色观察小鼠心脏纤维化情况,TBA法检测心内丙二醛（MDA）含量;Real-time PCR法检测心肌gp91phox、p22phox和p47phox的表达情况。结果 SHAM组和OLM组术后均存活,MI组病死率为20%。与SHAM组比较,MI组心脏AZAN染色阳性区域增大,OLM组较MI组显著降低。与SHAM组比较,MI组心脏MDA水平增高,gp91phox、p22phox和p47phox表达增高（P〈0.05）,OLM组心脏MDA水平,gp91phox、p22phox和p47phox表达较MI组降低（P〈0.05）。结论 MI可激活心内NADPH氧化酶,参与心肌纤维化过程,OLM通过抑制NADPH氧化酶活性起到保护作用。     

NADPH氧化酶对门静脉海绵样变大鼠体内氧化应激的影响

目的: 考察NADPH氧化酶对门静脉海绵样变(cavernous transformation of portal vein, CTPV)大鼠体内氧化应激的影响.方法: 将大鼠按随机抓取的方式分为假手术组、CTPV(门静脉海绵样变性)模型组. 采用门脉部分结扎法复制CTPV大鼠动物模型;测定门静脉内血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)、门静脉组织一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的含量;采用实时荧光定量RT-PCR法测定门静脉组织NADPH氧化酶p22phox以及gp91phox亚基的mRNA表达.结果: 与S h am组大鼠相比, CT PV组大鼠SOD、GSH-Px活性(酶活力单位)降低(93.79±8.87 μU/L vs 103.05±8.07 μU/L, 157.44±26.46 vs 709.09+83.21, 均P<0.05), 而MDA含量增加(5.33±0.35 μmol/L vs 3.59±0.44μmol/L, P<0.01);实时荧光定量RT-PCR显示门静脉NADPH氧化酶亚基gp91phox以及p22phox的mRNA表达增强(16.77±3.27 vs1.31±0.95, 11.64±7.34 vs 1.93±0.86, 均P<0.01);门静脉组织NO含量及eNOS活性均降低(2.33±0.82 μmol/L vs 85.00±3.16μmol/L, 0.24±0.11 U/mg prot vs 1.76±0.78U/mg prot, 均P<0.01).结论: C T P V大鼠体内氧化应激状态与NADPH氧化酶亚基gp91phox以及p22phoxmRNA过表达有关;NADPH氧化酶依赖的氧化应激可能与CTPV大鼠门静脉内皮功能障碍的发生发展密切相关.     

罗格列酮对糖尿病兔动脉粥样硬化形成和氧化应激的影响

应用罗格列酮干预糖尿病兔动脉粥样硬化,干预后主动脉内/中膜厚度比、斑块截面面积及NADPH氧化酶亚基p22phox、gp91phox表达均降低,血清总抗氧化力升高(均P<0.05).与治疗组比较,罗格列酮预防组使血清超氧化物歧化酶升高和血清丙二醛降低(均P<0.05).提示罗格列酮可通过抗氧化应激减缓动脉粥样硬化的形成和发展.     

白藜三醇对快速刺激离体兔心房氧化应激的影响

目的观察白藜三醇(RES)对快速刺激离体兔右房自由基代谢的影响,探讨其心脏保护作用的可能机制。方法 32只家兔建立离体心脏Langendorff灌流模型,电极放置右心耳处,利用BL-420S生物机能系统以电压4.0 V,频率600次/分进行刺激,随机分为对照组(不起搏),快速起搏组(RAP组),还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(NADPH)抑制剂夹竹桃麻素组(APO组),RES组,每组8只。对照组离体灌流70 min,不起搏;RAP组离体灌流30 min,快速起搏心房40 min;APO、RES组分别离体药物处理30 min,快速起搏心房40 min。灌流结束后,留存心房肌组织。比色法测定超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、体内活性氧(ROS)、NADPH活性,HE染色检测病理变化,免疫组化半定量分析calpain1的表达,用western blot方法检测calpain1、cTnT和gp91phox蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应方法检测calapin1、p22phox和gp91phox的mRNA表达。结果①与对照组比较,RAP、APO、RES组MDA、ROS和NADPH的表达均增加,SOD含量减少;与RAP组比较,APO、RES组MDA、ROS和NADPH表达均降低,SOD含量增加(P均0.05);而APO组与RES组比较,相关氧化应激指标无差异;②对照组心肌细胞排列整齐;RAP组心肌细胞排列紊乱、稀疏,组织结构破坏;APO组心肌细胞排列较紧凑;RES组心肌细胞较APO组排列稍紊乱、稀疏;③与对照组比较,RAP、APO、RES组calpain1、gp91phox蛋白及mRNA表达和p22phox的mRNA表达均增加,cTnT蛋白表达降低(P0.05);与RAP组比较,RES、APO组calpain1、gp91phox蛋白及mRNA表达和p22phox的mRNA表达均减低,cTnT蛋白表达增加(P0.05);但与APO组比较,RES组相关蛋白及mRNA表达无差异。结论 RES可能通过部分抑制NADPH氧化酶活性,从而减少氧自由基的生成,进而减轻快速起搏右房导致的氧化应激损伤。     

慢性间歇低氧大鼠的血压变化及其颈动脉体中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的表达

目的 探讨慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)大鼠的血压变化及其颈动脉体中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的表达情况,以明确CIH致血压升高的可能机制.方法 清洁级雄性SD大鼠30只按随机数字表法分为CIH组、慢性持续缺氧组及对照组.尾袖法测量大鼠尾动脉收缩压,采用RT-PCR法检测大鼠颈动脉体中NADPH氧化酶各亚基gp91 phox、p22phox及p47phox mRNA的表达,对颈动脉体行免疫组织化学染色,并对p22phox的表达情况行半定量分析.结果 CIH组大鼠的尾动脉收缩压为[(145±11)mm Hg,1 mm Hg=0.133kPa],较CIH组(129±9)mm Hg及对照组(124±7)mm Hg显著升高(F值为19.895,P＜0.01),CIH组gp91phox、p22phox及p47phox mRNA的表达(分别为2.82±0.51、2.74±0.45和2.88±0.47)较慢性持续缺氧组(分别为2.35±0.42、2.25±0.38和2.41±0.43)及对照组(分别为2.23±0.35、2.16±0.30和2.30±0.36)显著升高(F值分别为5.794、6.854和7.163,P＜0.01)免疫组织化学检查结果显示CIH组p22phox蛋白相对表达量(99±12)较其他两组(分别为38±7和34±8)增多.结论 CIH可刺激大鼠颈动脉体中NADPH氧化酶的表达上调并使血压升高,NADPH氧化酶在颈动脉体中的过度表达可能与OSAHS患者发生高血压病存在相关联系.

Abstract：

Objective Chronic intermittent hypoxia (CIH) occurs in patients with obstructive sleep apnea-hyponea syndrome (OSAHS) and has adverse effects on multiple physiological functions. Previous studies have shown that reflexes arising from carotid bodies mediate CIH evoked circulation-respiratory responses, and reactive oxygen species (ROS) play important roles in eliciting systemic responses to CIH.But very little is known about the molecular mechanisms underlying CIH. NADPH oxidase is the most important sources of ROS. In the present study we examined changes of blood pressure and expression of NADPH oxidase in carotid body in rats exposed to intermittent hypoxia. Methods Thirty healthy male SD rats were randomly divided into 3 groups, a CIH group, a chronic continuous hypoxia group and a control group. The systolic blood pressure (SBP) was measured with tail-cuff method. RT-PCR was used to examine mRNA expressions of NADPH oxidase subunit gp91phox, p22phox, p47phox. Immunohistochemistry and semiquantitative analysis of NADPH oxidase subunits p22phox were done in the carotid body sections of all rats. Results Compared with normal group [ ( 124 ± 7 ) mm Hg, 1 mm Hg = 0. 133 kPa ] and chronic continuous hvpoxia group[ (129 ± 9) mm Hg], the SBP in CIH group [( 145 ± 11 ) mm Hg] was significantly higher( F = 19. 895, P ＜0. 01 ＝, and the expression of NADPH oxidase subunits gp91phox,p22phox,p47phox mRNA in CIH group ( 2. 82 ± 0. 51, 2. 74 ± 0. 45, 2. 88 ± 0. 47, respectively ) were significantly higher than those in chronic continuous hypoxia group ( 2. 35 ± 0. 42, 2. 25 ± 0. 38, 2. 41 ±0. 43, respectively)and normal group(2. 23 ±0. 35, 2. 16 ±0. 30, 2. 30 ±0. 36, respectively) ( F =5.794,6. 854, 7. 163, respectively, P ＜ 0. 01 ). The Immunohistochemistry and semiquantitative analysis showed that the expression of NADPH oxidase subunit p22phox in the carotid body in CIH group ( 99 ± 12 ) were more than those in chronic continuous hypoxia and control groups ( 38 ± 7 and 34 ± 8, P ＜ 0. 05 ).Conclusion CIH upregulates the expression of NADPH oxidase in rat carotid body and elevates the rat SBP. These results indicate that NADPH oxidase up-expression is closely associated with OSAHS patients with hypertension.     

硫辛酸对db/db小鼠胰岛内NADPH氧化酶表达的影响

目的 探讨硫辛酸对db/db小鼠胰岛内NADPH氧化酶表达水平的影响.方法 将20只8周龄db/db小鼠随机分为硫辛酸组和db/db对照组,每组10只,分别给予硫辛酸60 mg/(kg·d)和安慰剂灌胃.另设10只同周龄db/m小鼠,给予安慰剂灌胃作为非糖尿病对照组(db/m对照组).每周监测体重、血糖,6周后取胰腺行免疫组化,分析NADPH氧化酶表达情况.结果 与db/db组相比,硫辛酸组小鼠的血糖降低,胰岛内NADPH氧化酶gp91phox、p22phox亚基的表达水平亦显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 硫辛酸降低胰岛内NADPH氧化酶的表达,减少氧化应激,从而保护胰岛β细胞.     

下丘脑室旁核微量注射谷氨酸对心力衰竭大鼠心功能的影响及机制

目的 探讨下丘脑室旁核(PVN)微量注射谷氨酸(Glu)对心力衰竭(HF)大鼠心功能的影响及机制研究。方法 清洁级SD大鼠随机分为假手术(Sham)+人工脑脊液(ACSF)组、HF+ACSF组、HF+Glu组,麻醉状态下用细线结扎左冠状动脉前降支成功建立HF动物模型后下丘脑PVN微量灌注Glu,灌流4 w检测心功能、血浆利钠肽(BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和下丘脑PVN miR-132的表达。结果 HF+Glu组、HF+ACSF组心功能各项指标除心率(HR)外,心肌肥厚指标与Sham+ACSF组相比差异明显(均P<0.05),HF+Glu组HR与HF+ACSF组比较有显著差异(P<0.05)。结论 下丘脑PVN Glu可通过影响下丘脑PVN miR-132的表达加速心功能损害和HF进程。     

下丘脑室旁核miR-132对心力衰竭大鼠外周交感神经兴奋性的影响

目的 观察下丘脑室旁核(PVN)灌注miR-132特异抑制剂对心力衰竭(HF)大鼠外周交感神经兴奋性、下丘脑谷氨酸(Glu)含量及心脏功能的影响。方法 雄性SD大鼠随机分为正常对照(Ctrl)+人工脑脊液(ACSF)组、HF+ACSF组、HF+miR-132抑制剂组。结扎心脏左冠状动脉前降支制造HF动物模型，HF+miR-132抑制剂组侧脑室插管向PVN内灌注miR-132特异抑制剂，Ctrl+ACSF组和HF+ACSF组灌注等量ACSF,灌注后4 w进行心脏功能指标检测；镜下观察心肌结构变化；检测肾脏交感神经放电(RSNA)、HF标志物脑钠肽(BNP)和外周交感神经兴奋标志物去甲肾上腺素(NE)在血浆中的含量；检测Glu在下丘脑PVN的含量。结果 与Ctrl+ACSF组相比，HF+ACSF组心功能指标恶化、外周交感神经兴奋性增强、下丘脑PVN Glu含量升高、心肌组织病理改变明显(P<0.05);HF+miR-132抑制剂组与HF+ACSF组比较，HF大鼠上述检测指标均显著改善(P<0.05)。结论 下丘脑PVN miR-132可影响HF大鼠的外周交感神经兴奋性和心脏功能...     

晚期糖基化终产物对大鼠血管外膜成纤维细胞中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亚基及活性氧表达的影响

目的:探讨晚期糖基化终产物(AGE)对大鼠血管外膜成纤维细胞(AF)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p22phox亚基及活性氧表达的影响。方法:用组织贴块法培养SD大鼠的血管外膜成纤维细胞,用逆转录—聚合酶链反应、蛋白质印迹检测不同浓度的糖基化人血清白蛋白(AGE-HSA,分为对照组、100μg/ml AGE-HSA组,200μg/ml AGE-HSA组、300μg/ml AGE-HSA组)对NADPH氧化酶p22phox亚基信使核糖核酸(mRNA)及蛋白的表达的影响,并观察不同干预因素[分为对照组1、200μg/ml AGE-HSA组(200μg/ml处理组1)、200μg/ml AGE-HSA+50μg/ml抗RAGE中和抗体组(抗RAGE中和抗体组1)及200μg/ml AGE-HSA+30 nmol/L坎地沙坦组(坎地沙坦组1)对AGE-HSA上调NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA和蛋白表达的影响。用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐检测不同干预因素[空白对照组、AGE-HSA 200μg/ml组(200μg/ml处理组2)、200μg/ml AGE-HSA+50μg/ml抗RAGE中和抗体组(抗RAGE中和抗体组2)、200μg/ml AGE-HSA+30μmol/L夹竹桃素组(夹竹桃组),200μg/ml AGE-HSA+30 nmol/L坎地沙坦组(坎地沙坦组2)对血管外膜成纤维细胞内活性氧表达的影响。结果:3个浓度(100μg/ml、200μg/ml和300μg/ml)的AGE-HSA组均与对照组比较,血管外膜成纤维细胞NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA及蛋白的表达随AGE-HSA增加呈浓度依赖性上调;抗RAGE中和抗体组1、坎地沙坦组1比200μg/ml处理组1的p22phox mRNA及蛋白表达降低;抗RAGE中和抗体组2、夹竹桃素组2及坎地沙坦组2比200μg/mlAGE-HSA处理组2血管外膜成纤维细胞内活性氧相对荧光强度降低,上述比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:AGE-HSA经由RAGE影响活性氧与NADPH氧化酶p22phox亚基的表达上调,活性氧的上调与NADPH氧化酶p22phox亚基表达相关。NADPH氧化酶抑制剂及坎地沙坦可通过下调NADPH氧化酶p22phox亚基的表达减少血管外膜成纤维细胞内活性氧的产生。     

内源性过氧化氢诱导上调自发性高血压大鼠肾脏一氧化氮合成酶的表达

目的 探讨SHR大鼠肾脏NOS表达与氧化压力之间的关系.方法 SHR和WKY大鼠,随机分成对照组、apocynin、tempol组.测定大鼠的收缩压(SBP)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、过氧化氢(H2O2)含量、NO体内代谢总产物(NOx)和组织样本的蛋白含量、NADPH氧化酶活性.免疫印迹法测定肾脏皮质,髓质外层,髓质内层及大动脉的eNOS和nNOS的蛋白表达量.结果 SHR对照组的SBP,血浆及尿液的H2O2和NOx含量都明显高于WKY对照组(P＜0.01);但两组间的Scr和BUN含量,以及肌酐清除率没有明显的差异.SHR apocynin和tempol都明显降低了收缩压;其中,tempol组比SHR对照组的Scr明显减少,肌酐清除率明显增加,而apocynin组和SHR对照组相比没有变化;apocynin显著降低血浆及尿液H2O2和NOx的含量,而tempol则与其相反.WKY大鼠中,无论apocynin还是tempol对SBP及血浆、尿液的生化指标都没有显著影响.SHR对照组较WKY对照组,肾脏皮质及髓质外层的NADPH氧化酶活性都有显著增加(P＜0.01).SHR大鼠中,apocynin和tempol都分别显著降低了肾脏皮质(72％和56％)及外髓质(71％和55％)的NADPH氧化酶活性水平.WKY大鼠中,只有apocynin显著降低了肾脏皮质(48％)及外髓质(43％)的水平.SHR对照组和WKY对照组相比较,NOS、nNOS、硝基酪氨酸在肾脏皮质、髓质外层、髓质内层、大动脉的表达都显著升高.apocynin显著降低SHR肾组织的eNOS和nNOS表达,而tempol显著提高.对于WKY大鼠,apocynin和tempol都没有明显的作用.SHR中,apocynin和tempol都显著降低肾脏皮质、髓质外层、髓质内层、大动脉硝基酪氨酸的表达;在WKY大鼠中,apocynin显著降低其表达.结论 氧化压力可上调SHR肾脏NO合成酶的表达,内源性过氧化氢作为媒介物介导了这一上调表达过程.     

还原型辅酶Ⅱ氧化酶抑制剂对慢性间歇缺氧大鼠血压的影响及相关机制

目的 探讨还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶抑制剂罗布麻宁对慢性间歇缺氧(CIH)模型大鼠血压可能的影响及相关作用机制.方法 使用随机数字表法将30只雄性SD大鼠分为健康对照组、CIH组及罗布麻宁治疗组,每组10只.采用气囊加压法测定大鼠尾动脉收缩压,应用实时PCR检测外周血单核细胞NADPH氧化酶亚基p22phox的mRNA表达,并用Western blot检测胸主动脉组织匀浆中p22phox蛋白的表达,采用比色法测定胸主动脉组织匀浆中一氧化氮及超氧阴离子含量,采用化学比色法测定大鼠外周血丙二醛及超氧化物歧化酶(SOD)水平.各组均数之间比较采用单因素方差分析,组内两两比较采用SNK-q检验.结果 CIH组p22phox mRNA(2.85±0.47)及其蛋白(0.63±0.15)的表达明显高于健康对照组(2.26±0.48,0.27 ±0.13,q值分别为3.202、6.522,均P＜0.05),罗布麻宁治疗组p22phox mRNA(2.75±0.50)及其蛋白(0.57±0.16)的表达与CIH组比较两组无明显差异,但治疗后可显著逆转由慢性间歇缺氧导致的丙二醛、超氧阴离子及尾动脉收缩压的升高以及SOD和一氧化氮水平的降低.结论 NADPH氧化酶亚基p22phox的过度表达在慢性间歇缺氧导致的高血压发生过程中起重要作用,这可能是OSAHS患者并发高血压的病理生理基础之一;抑制NADPH氧化酶的活性可能对OSAHS合并高血压的治疗有一定积极的意义.     

辛伐他汀对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌氧化负荷和心室重构的影响

目的了解辛伐他汀对急性心肌梗死（AMI）后心衰大鼠心室重构和心功能的影响,并研究NADPH氧化酶亚基p47phox的变化以研究辛伐他汀在CHF中可能的作用机制。方法随机选取雄性Sprague Dawly,通过结扎大鼠左冠状动脉前降支制作大鼠AMI模型致CHF,并随机选取大鼠做假手术对照。AMI术后大鼠被随机分为大剂量辛伐他汀组[hSIM,4mg/（kg·d）],小剂量辛伐他汀组[lSIM,0.4mg/（c）]与单纯模型组。干预12周后测体质量（BM）,左室质量（LVM）等,并行血流动力学测定。选取左室非梗死区心肌检测p47phox mRNA相对表达率及蛋白含量。结果单纯模型组、hSIM和lSIM组LVM均较假手术组增加;hSIM和lSIM组平均最大左室压力变化（m±dp/dtmax）均较单纯模型组升高,p47phox mRNA表达、p47phox含量均降低;p47phox含量hSIM和lSIM组组有显著性差异。结论在AMI后CHF大鼠,大体检查和血流动力学检测可证实辛伐他汀减轻CHF的发展。其机制与NADPH氧化酶亚单位p47phox介导产生的反应性氧簇有关。     

软脂酸通过上调还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶表达促进血管内皮细胞凋亡

目的探讨软脂酸(PA)诱导的血管内皮细胞凋亡中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的作用。方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)贴壁培养后分为对照组;PA(200、400、800μmol/L)浓度组(分别为PA200组、PA400组、PA800组);NADPH氧化酶抑制剂apocynin(50、100、200 mol/L)干预组(分别为apo50+PA400组、apo100+PA400组、apo200+PA400组)。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;提取细胞蛋白,采用Westernblot技术检测NADPH氧化酶亚基p47phox蛋白表达的水平。倒置共聚焦荧光显微镜检测活性氧的产生。结果 PA呈浓度依赖性诱导HUVEC凋亡;与对照组比较,PA400、PA800组HUVEC凋亡率明显升高,P47phox蛋白表达明显增强(P<0.05),PA400组活性氧产生明显升高(P<0.05);与PA400组比较,apo100+PA400组、apo200+PA400组HUVEC凋亡率明显降低,p47phox蛋白表达明显减弱,活性氧产生明显降低(P<0.05)。结论 PA呈浓度依赖性诱导HUVEC凋亡,apocynin能部分抑制PA的上述作用,其机制与下调NADPH氧化酶亚基p47phox蛋白表达及活性氧产生有关。     

枳黄方对急性酒精性肝损伤大鼠肝脂质过氧化水平的影响及其机制研究

目的:观察枳黄方对急性酒精性肝损伤大鼠肝脂质过氧化水平的影响,并探讨其机制。方法:通过酒精灌胃法制造急性酒精性肝损伤大鼠模型,采用HE染色观察肝病理变化;羟胺法检测肝脏SOD活力;TBA法检测肝脏MDA含量;采用RT-PCR技术检测肝脏NADPH氧化酶gp-91phox mRNA的表达量。结果:枳黄方能改善急性酒精性肝损伤之肝脏病理变化;下调肝脏NADPH氧化酶gp-91phox mRNA的表达;显著降低肝脏MDA含量(P<0.05);显著提高肝脏SOD活力(P<0.01)。结论:枳黄方能对抗酒精性肝损伤大鼠肝脏脂质过氧化,这可能与其能降低肝脏NADPH氧化酶gp-91phox mRNA的表达有关。     

辛伐他汀对高糖损伤乳鼠心肌细胞NADPH氧化酶亚基基因表达的影响

取原代培养的SD雄性乳鼠心肌细胞在高糖刺激下加入10-7、10-6和10-5mol/L辛伐他汀作用72 h.结果显示,与对照组比较,高糖组心肌细胞活力明显降低(P＜0.01),乳酸脱氢酶(LDH)活性显著增加(P＜0.01),NADPH氧化酶亚基p22phox、p47phox mRNA表达和活性氧簇(ROS)水平明显增高(均P＜0.05);与高糖组比较,辛伐他汀各组心肌细胞活力明显增加(P＜0.05),LDH活性显著降低(P＜0.05),p22phox、p47phox mRNA表达和ROS水平明显降低,且辛伐他汀浓度对心肌细胞活力的影响呈剂量依赖效应.这些结果提示辛伐他汀能够抑制NADPH氧化酶亚基的基因表达,减轻高糖引起的心肌损伤.     

鸢尾素通过抑制氧化应激减轻高糖/高脂诱导的人脐静脉内皮细胞损伤

目的 研究鸢尾素（irisin）是否通过抑制氧化应激减轻高糖/高脂所致心肌细胞损伤。方法 将培养的人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）分为3组:正常对照组、高糖/高脂组及高糖/高脂+irisin组。各组培养24 h后检测细胞存活率、凋亡率、ROS产量、NADPH氧化酶gp91phox表达水平。结果 与正常对照组相比,高糖/高脂组细胞存活率显著下降,ROS产量、NADPH氧化酶gp91phox表达水平、细胞凋亡率显著升高(均P<0.05),irisin处理可以逆转上述改变（均P<0.05）。结论 高糖/高脂能够增加人脐静脉内皮细胞氧化应激,促进细胞凋亡;irisin可通过减轻氧化应激而发挥内皮保护作用。     

白藜芦醇改善年龄相关自发性高血压大鼠血管功能的研究

目的：观测白藜芦醇对年龄相关自发性高血压大鼠动脉舒张功能的改善效果及年龄对动脉功能与疗效的影响。方法：雄性年轻期（8～10周龄）、中老年期（9～10月龄）的自发性高血压大鼠及健康对照大鼠,其中高血压大鼠随机分为白藜芦醇干预组和非干预组,干预组给予白藜芦醇10mg／（kg·d）灌胃,记录大鼠血压、心率,检测胸主动脉与肠系膜动脉对乙酰胆碱的舒张特性,检测肠系膜动脉中总一氧化氮（NO）及gp91phox的表达。结果：（1）与年轻期高血压大鼠相比,中老年高血压大鼠的动脉舒张功能减弱,白藜芦醇治疗后舒张功能增强。（2）白藜芦醇治疗能够增加年轻与中老年高血压大鼠的肠系膜动脉总NO量,减少gp91phox蛋白表达。结论：高血压大鼠动脉内皮依赖的舒张功能较正常大鼠减弱且存在年龄差异,摄入白藜芦醇可以通过减少gp91phox表达,增加NO量来保护血管舒张功能,该保护作用在年轻期与中老年期大鼠中均存在。     

高游离脂肪酸血症致血管内皮功能紊乱与NADPH氧化酶表达增强有关

目的研究高游离脂肪酸（HFFA）血症致血管内皮细胞功能紊乱是否与全身氧化应激增强以及血管局部烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶p47-phox亚基表达增强有关。方法正常6周龄雄性SD大鼠分为对照组（NC组,静脉输注生理盐水）,HFFA组（输注脂肪乳及肝素）,以及还原型谷胱甘肽（GSH）干预组（HFFA＋GSH组,同时输注脂肪乳、肝素及GSH）。输液前后测血浆FFA水平及GSH／GSSG比值。输液后行超声多普勒检测股动脉内皮依赖性血管舒张功能（EDV）与非内皮依赖性血管舒张（NEDV）功能,实时荧光定量RT-PCR检测胸主动脉NADPH氧化酶p-47phox的mRNA水平,Western blot检测内皮细胞及平滑肌细胞p-47phox蛋白的表达。结果与NC组相比,HFFA组血浆FFA水平明显增高（P〈0．05）,GSH／GSSG比值下降（P〈0．05）,EDV明显降低（P〈0．01）;HF—FA＋GSH组血浆GSH／GSSG比值介于HFFA组与NC组之问,EDV较HFFA组明显改善（P〈0．05）;NADPH氧化酶p-47phox mRNA及蛋白水平HFFA组较NC组明显增加,该增加趋势在HFFA＋GSH组中受到明显抑制;p-47phox mRNA和蛋白水平与血浆GSH／GSSG比值呈正相关关系。结论外源性升高血浆FFA水平能诱导机体氧化应激,促进血管局部NADPH氧化酶p-47phox亚基基因的转录与翻译,加重血管局部氧化应激损伤。阻断HFFA血症导致的氧化应激能抑制主动脉NADPH氧化酶表达,部分恢复EDV,提示HFFA血症致血管内皮细胞功能受损与全身及血管局部氧化应激增强有关。     

枳黄方对急性乙醇性肝损伤大鼠肝脂质过氧化水平的影响及机制

目的探讨枳棋子、大黄水提液（枳黄方）对急性乙醇性肝损伤大鼠（ALD）的保护作用。方法将30只大鼠随机分为A、B、C三组每组10只，其中A组予枳黄方6．0ml／kg灌胃，B、C组予6．0ml／kg生理盐水灌胃；间隔45min后A、B组予56。白酒14ml／kg灌胃，C组予50％葡萄糖14mL／kg灌胃，均为1次／d，连续10d。最后1次灌胃后禁食14h，以2％戊巴比妥钠40mg／kg腹腔注射麻醉大鼠，采集肝组织。羟胺法检测肝脏超氧化物歧化酶（SOD）活力，TBA法检测肝脏丙二醛（MDA）水平；采用RT—PCR技术检测肝脏NADPH氧化酶gp-91phox mRNA及p22phox mRNA表达。结果与B组比较，A组SOD活性显著升高，MDA水平及gp-91phox、p22phoxmRNA表达显著降低。结论枳黄方能对抗ALD大鼠肝脏脂质过氧化，可能机制为降低肝脏NADPH氧化酶gp-91phox mRNA及p22phox mRNA表达。