UW液对冠状动脉功能影响的实验研究

目的 :探讨UniversityofWisconsin液 (UW液 )对猪冠状动脉功能的影响。方法 :取新鲜猪心外膜下冠状动脉前降支切成 3段 ,长 3mm ,共 2 8条血管环 ,随机分 4组 ,每组 7条。常温下 ,对照Ⅰ组 :在 37℃有氧的器官槽中用重碳酸盐缓冲液 (KH液 )保存 4h ;AⅠ组 :同等条件下用UW液保存 4h。低温下 ,对照Ⅱ组 :在 4℃无氧的冰箱中用KH液保存 4h ;AⅡ组 :同等条件下用UW液保存 4h。采用器官槽法 ,持续监测在 37℃保存过程中血管环张力的变化 ,及在环加氧酶阻断剂消炎痛 (7μmol L)和一氧化氮合成酶阻断剂N 硝基 L 精氨酸 (30 0 μmol L)作用下 ,前列腺素F2α(30nmol L)及非受体介导钙离子载体引发的收缩舒张反应。结果 :与对照Ⅰ组相比 ,AⅠ组血管末张力明显降低 ,AⅠ组预收缩反应程度明显降低。与对照Ⅰ组、对照Ⅱ组相比 ,非受体介导钙离子载体引发的舒张反应 ,AⅠ组、AⅡ组明显下降。结论 :在 37℃条件下UW液对冠状动脉张力的影响主要以舒张为主 ;低温有利于UW液对冠状动脉的收缩功能的保护 ;冠状动脉经UW液保存 4h后 ,内皮源性超极化因子介导血管舒张功能降低     

Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存效果的实验研究

目的应用Langendorff灌注模型低温灌注离体鼠心6h,检验器官保存液Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存的效果.方法实验分为3组,每组8只Wistar大白鼠.麻醉并抗凝后,快速取下鼠心并悬挂在Langendorff灌注模型上灌注,测定血流动力学基础值.分别用三种器官保存液灌注离体鼠心,在4℃下低温浸泡保存6h.重新复温、复灌,再次测定血流动力学值和冠状动脉流量,留取标本分别测定心肌水含量、心肌酶漏出量、心肌细胞ATP和CP含量和观察心肌细胞超微结构变化.结果①血流动力学恢复率,Celsior液和HTK液组均优于UW液组.②心肌酶漏出量,Celsior液和HTK液组明显低于UW液组.③ATP和CP含量,Celsior液和HTK液组高于UW液组.④超微结构变化,Celsior液组和HTK液组心肌损害最轻,UW液组心肌损害较重.结论Celsior液、HTK液和UW液对心脏保护的效果均较好,均为较合适的心肌保存液.Celsior液和HTK液对心脏保存的效果无显著差异,但均优于UW液.     

左旋泊尼汀对离体大鼠心脏保存效果的影响

将25只成年雄性Wistar大鼠（体重350～400g）随机分为A组（对照组）及B、C、D、E组，每组5只，经麻醉和抗凝后，快速取下心脏。A组心脏悬挂在Langendorff灌注模型上K-H液恒压灌注，37℃下测定血流动力学指标；B、C、D、E组分别经主动脉灌注4℃ HTK液、UW液、HTK液＋左旋泊尼汀、UW液＋左旋泊尼汀心肌保存液，置于4℃相应的心肌保存液中保存6h；重新复温复灌。再次测定血流动力学指标，留取标本分别测定心肌含水量、心肌酶漏出量、ATP含量变化。结果 D组及E组平均左室发展压（LVDP）与B、C组比较显著升高，磷酸肌酸激酶同工酶（CK—MB）漏出量明显减少，心肌ATP含量明显增多。认为HTK液和UW液中加入左旋泊尼汀能改善离体鼠心脏的低温保存效果。     

常用心脏保存液及其改良方法

心脏移植是治疗终末期心力衰竭的最佳方案,但由于捐献器官的不足,心脏移植手术的开展受到极大限制。心脏保存液的改良对于扩大移植心脏供体池极为关键,该文介绍UW液、HTK液和Celsior液等3种常见的心脏保存液及其改良方法。     

零下非结冰保存L-02细胞的效果及与细胞凋亡的关系

目的 采用UW液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用L-02细胞,与常规低温(4℃及0℃)比较,探索零下非结冰保存肝细胞的效果以及同细胞凋亡的关系.方法 制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24 h、48 h及72 h后,分别测定细胞存活率及凋亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能.结果 零下非结冰(-0.8℃)较常规低温(0℃及4℃)明显提高了低温保存L-02细胞的存活率[72 h:-0.8℃(70.17±2.82)% vs 4℃(60.05±3.17)%],降低了细胞凋亡率[72 h:-0.8℃(5.73±1.68)% vs 4℃(9.20±2.35)%].零下非结冰明显抑制了LDH的释放[72 h:-0.8℃(113.88±5.64)U/L vs 4℃(170.47±11.80)U/L],更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72 h:-0.8℃(1.01±0.14)mmol/L vs 4℃(0.66±0.09)mmol/L]及白蛋白分泌功能[72 h:-0.8℃(9.04±0.53)μg/ml vs 4℃(7.70±0.52)μg/ml].结论 与0℃及4℃相比,零下非结冰(-0.8℃)可明显提高L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效的保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.     

零下非结冰UW液、Celsior液和HTK液保存C3A细胞的效果比较

目的 比较UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用C3A细胞的效果.方法 制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于-0.8℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了零下非结冰保存72 h的C3A细胞的存活率[(84.34±4.25)%,(83.53±3.73)% vs (75.65±3.01)%,P<0.001]和细胞内ATP含量[(5.54±1.44)μg/106 个细胞,(5.51±1.31)μg/106个细胞 vs (2.75±1.03)μg/106 个细胞,P<0.001];抑制了LDH释放(P<0.001);更好地维持了细胞尿素合成功能[(0.63±0.10)mmol/L,(0.62±0.06)mmol/L vs (0.39±0.04)mmol/L,P<0.001]和白蛋白分泌功能[(1.99±0.38)g/L,(1.96±0.24)g/L vs (1.50±0.18)g/L,P<0.05].UW液与Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异.结论 同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液零下非结冰(-0.8℃)保存C3A细胞可以明显地提高复温后细胞存活率和细胞内ATP含量,降低低温损伤引起的LDH释放,有效地保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.UW液同Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异,保存时间不宜超过72 h.     

威斯康星大学保存液在冠状动脉旁路移植术中对隐静脉的保护作用

目的探讨威斯康星大学保存液(UW液)在冠状动脉旁路移植术中对隐静脉的保护作用。方法获取小鼠腔静脉和搭桥术中废弃隐静脉,分别给予UW液和生理盐水处理。观察两组组织病理变化、ROS产生、TUNEL和NLRP3炎性小体阳性率,检测UW液对隐静脉的保护作用。结果与对照组相比,经UW液处理的隐静脉ROS生成与TUNEL阳性率明显下降,且差异具有统计学意义(P0.05)。此外,与实验组相比,未经UW液处理的临床对照组NLRP3炎性小体阳性率上升,且差异具有统计学意义(P0.05)。结论 UW液能抑制冠状动脉旁路移植术中隐静脉保存过程中ROS产生、降低细胞凋亡和炎症反应,从而有效保护隐静脉。     

热缺血供肝耐受冷保存时限的实验研究

心脏停搏供体是肝移植供肝来源的重要途径之一。有研究表明，热缺血30min以内的供肝可考虑应用，但此类供肝本身存在热缺血损伤，在后续的威斯康星大学溶液（UW液）中能冷保存多久能为临床所用尚未可知。本实验探讨了存在热缺血10min的供肝在UW液中冷保存的安全时限。     

原代乳猪肝细胞低温保存的初步探索

目的：探讨4℃低温保存肝细胞的方法。方法：两步法分离新生乳猪肝细胞，将肝细胞分别以3种不同低温保存液（RPM1－1640培养液；加有聚乙二醇（PEG）的RPM1－1640培养液；UW液）4℃保存24h、48h及72h。复苏后接种培养，作存活率、贴壁率及细胞活性等检测，并观察其形态结构变化。结果：不同低温保存液保存不同时间的猪肝细胞的活力、生物学功能及形态学表现均有所不同，其中单用RPM1－1640培养液组效果最差，PEG组和UW组结果相似，均保持70％以上存活率达48h，活力与药物代谢功能无明显差别，镜下见复苏肝细胞浆内含丰富颗粒，可见较多双核细胞，线粒体无减少，粗面内质网数下降，滑面内质网增多。结论：猪肝细胞在4℃可保存48h，加入PEG的RPM1－1640培养液可更好地保持肝细胞活性。     

瘦素预处理对小鼠心肌冷/热缺血再灌注损伤的差异性

目的 研究同种小鼠腹部心脏移植模型中,瘦素预处理对心肌冷/热缺血再灌注损伤(IRI)的差异性.方法 30只雄性C57BL/6小鼠被随机分为3组:(1)心肌冷IRI组:瘦素预处理(术前30 min予腹腔注射重组瘦素,剂量为50 μg/kg.)后行同种间小鼠腹部心脏移植,供体置于4℃ UW液中保存6 h;(2)心肌热IRI组;(3)心肌缺血再灌注模型对照组(MIRI组).分别于术后6h收获标本,观察组织形态学变化,检测小鼠移植心脏及血清中性粒细胞活性,炎性细胞因子水平等.结果 心肌冷/热IRI两组对照比较,小鼠血清心肌肌钙蛋白(TnⅠ)、心肌髓过氧化物酶(MPO)活性、血清细胞炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α,白介素(IL)-1 β,IL-6水平无明显差异(P＞0.05).结论 瘦素预处理虽然可以减轻心肌冷/热IRI,减轻炎症反应,但是小鼠心肌冷/热IRI之间的差异性无统计学意义.     

大囊包被胰岛非低温长期保存的研究

目的　研究一种理想的、能维持胰岛活性和功能的长期保存方法。方法　作者采用琼脂糖和胶原包被大鼠胰岛后于３７ ℃、５ ％ Ｃ Ｏ２ 孵箱中培养，并在体内外条件下研究存放后胰岛的活性和功能。结果　此方法能保存胰岛达４０ 周之久，并能维持胰岛的正常形态、活性及胰岛素分泌功能。接受保存１ ～２７ 周的大囊包被胰岛移植后，９２ ．８ ％ 的糖尿病小鼠血糖恢复正常，大部分宿主的正常血糖持续到大囊包被胰岛取出为止。结论　采用琼脂糖和胶原包被胰岛并培养于３７ ℃、５ ％ Ｃ Ｏ２ 孵箱中是移植前长期保存胰岛的理想方法。     

输血样本ALT活性在保存过程中的变化规律及其重要意义

目的：探讨输血样本不同保存形式丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性的变化规律。方法：将输血样本以全血及血浆形式分别在22℃（仅全血）、4℃、-20℃（仅血浆）保存,在不同保存时间检测ALT活性。结果：以全血形式保存的输血样本随保存时间延长ALT活性逐步升高,并且22℃比4℃保存升高快;以血浆形式保存的输血样本随保存时间延长ALT活性逐步下降,并且-20℃比4℃下降慢。结论：认识全血、血浆样本ALT活性在保存过程中的变化规律,有助于血液检测的准确性,避免宝贵血液的无故报废,也说明长时间保存输血样本-20℃保存血浆（血清）为较好。     

冷冻干燥长期低温保存后鼠疫菌某些生物学的研究

取冷冻干燥（冻干）低温保存近３０年的家鼠疫地源疫苗８株干燥物为研究对象，对菌株复苏情况，生长发育特点，噬菌体实验，生化特性与斜面定期移植保存期的对比，以及毒力因子，质粒ＤＮＡ种类的观察和比较，结果证明，所研究的全部菌均能存活，种和型的性状与冻干前一致，毒力因子，质粒ＤＮＡ种类不受影响。     

Redefining the properties of an osmotic agent in an intestinal-specific preservation solution

AIM: To investigate the effects of dextrans of various molecular weights (Mw) during a 12 h cold storage time-course on energetics, histology and mucosal infiltration of fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextran. METHODS: Rodent intestines were isolated and received a standard University of Wisconsin vascular flush followed by intraluminal administration of a nutrientrich preservation solution containing dextrans of varying Mw: Group D1, 73 kdal; Group D2, 276 kdal; Group D3, 534 kdal; Group D4, 1185 kdal; Group D5, 2400 kdal. RESULTS: Using FITC-labeled dextrans, fluorescent micrographs demonstrated varying degrees of mucosal infiltration; lower Mw (groups D1-D3: 73-534 kdal) dextrans penetrated the mucosa as early as 2 h, whereas the largest dextran (D5: 2400 kdal) remained captive within the lumen and exhibited no permeability even after 12 h. After 12 h, median injury grades ranged from 6.5 to 7.5 in groups D1-D4 (73-1185 kdal) representing injury of the regenerative cryptal regions and submucosa; this was in contrast to group D5 (2400 kdal) which exhibited villus denudation (with intact crypts) corresponding to a median injury grade of 4 (P < 0.05). Analysis of tissue energetics reflected a strong positive correlation between Mw and adenosine triphosphate (r 2 = 0.809), total adenylates (r 2 = 0.865) and energy charge (r 2 = 0.667).CONCLUSION: Our data indicate that dextrans of Mw > 2400 kdal act as true impermeant agents during 12 h ischemic storage when incorporated into an intraluminal preservation solution.     

左旋精氨酸对离体兔肺脏保存质量的影响

观察左旋精氨酸对离体兔肺脏保存的保护作用 ,健康家兔随机分成对照组 (EC组 )和实验组 (Arg组 ) ,每组 15只 ,EC组兔肺脏予Euro collins液进行灌洗 ,Arg组予含左旋精氨酸的EC液进行灌洗肺脏 ,灌洗总量 6 0ml/kg ,灌注压力 2 0cm水柱 ,灌毕完整取下心肺组织浸入保存液 4℃环境冷藏 ,7h后取肺进行离体复灌 ,测定肺血管阻力 ,血气分析 ,肺血管对Ach舒血管反应性 ,肺组织湿干重比例及肺组织电镜检查等指标。EC组肺血管阻力 ,肺组织湿干重比例均高于Arg组 ,肺血管对Ach反应性EC组较Arg组差 ,血气指标EC组下降明显 ,Arg组肺组织形态轻微改变 ,而EC组水肿明显渗出严重。左旋精氨酸具有改善离体兔肺脏的保存效果。     

Preservation of the pylorus in resection of the head of the pancreas

Pylorus preservation has been advocated to decrease the morbidity associated with the classical or standard pancreaticoduodenectomy. The proposed advantages are decreased incidence of peptic ulceration, dumping syndrome, and nutritional problems. However, after an initial period of enthusiasm for the procedure, it is now being found that marginal ulceration at the duodenojejunal anastomosis is encountered with increasing frequency. Delay in gastric emptying occurs frequently, with an overall incidence of 30%. With the availability of better pancreatic enzyme supplements, the current incidence of nutritional problems and weight loss after the standard Whipple procedure is unknown. Whether there is a difference in long-term survival after the two procedures performed for adenocarcinoma of the head of the pancreas is still debatable. A controlled trial is needed to answer many of these questions, and pylorus-preserving pancreaticoduodenectomy should be used cautiously until further data become available.     

Liver graft preservation:an overview

Liver graft preservationT he viability of the organ and its maintenance are very important during any transplant procedure and there is usually a period between the stoppage of the circulation in the donor and re-vascularisation of the organ in the recipient. During this period the harvested organ may have an irreversible harmful series of events rendering it not suitable for transplantation. This non-reversible damage which occurs during the ischaemic period depends partly on the metabolic re…     

Preservation of fertility in females with haematological malignancy

Several options are currently available for the preservation of fertility in cancer patients: embryo cryopreservation, oocyte cryopreservation or ovarian tissue cryopreservation. The choice of the most suitable strategy for preserving fertility depends on different parameters: the type and timing of chemotherapy, the type of cancer, the patient's age and the partner status. Cryopreservation of ovarian tissue is the only option available for prepubertal girls and woman who cannot delay the start of chemotherapy. So far, 15 live births have been obtained after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue.     

不同保存液对自体静脉移植后血管内膜增生的影响

目的:探讨晶、胶体保存液对自体静脉移植后血管内膜增生的影响,以筛选出优良的移植血管保存液.方法:建立大鼠自体静脉移植模型,分为2组:晶体液保存组,术中移植静脉以晶体液保存;胶体液保存组, 术中移植静脉以胶体液保存.分别于术后第1 天、3天、1周、2周、4周、6周取材.对移植血管应用苏木精-伊红染色,进行组织形态学观察;应用免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原(PCNA)、P21在移植后不同时期的表达情况.结果:晶体液保存组的静脉较胶体液保存组增厚明显;PCNA表达高峰在1～2周,晶体液保存的静脉表达较胶体液保存的静脉明显;P21在1～2周时表达水平较低,其后逐渐升高,至4周时达高峰,在同一时点,胶体液保存的静脉较晶体液保存的静脉表达明显.结论:自体静脉移植血管保存中,胶体保存液优于晶体保存液.