低表达miRNA-21对人肺癌H358细胞增殖及凋亡作用的研究

目的 探讨微RNA(miRNA)-21对人肺癌H358细胞体外增殖及诱导凋亡方面的作用.方法 采用体外转染法将miRNA-21抑制剂瞬时转染H358细胞48 h后,应用定量real-time PCR特异探针法检测H358细胞中miRNA-21的表达水平,应用MTT法检测H358细胞的生长情况,荧光缺口末端标记法(TUNEL)法分析H358细胞凋亡情况,并用Western blot检测H358细胞中抑癌基因PTEN表达的变化.结果 与对照组比较,miRNA-21抑制剂转染组H358细胞的miRNA-21表达水平显著降低(P＜0.05),细胞生长明显受到抑制(P＜0.05),且通过PTEN靶蛋白诱导细胞凋亡(P＜0.05).结论 低表达miRNA-21可以抑制人肺癌H358细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡,为肺癌生物治疗提供新的治疗靶点.     

IL-10对miRNA-125b表达和非小细胞肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究白细胞介素10(IL-10)对miRNA-125b表达和非小细胞肺癌增殖与凋亡的影响.方法:采用实时荧光定量PCR检测IL-10刺激肺癌细胞系NCI-H460各微小RNA(miRNA)的表达水平变化;利用细胞计数试剂盒(CCK8)比较IL-10刺激后和恢复miRNA-125b表达后对细胞增殖的影响;流式细胞术检测IL-10刺激后和恢复miRNA-125b表达后对细胞凋亡的影响;荧光定量PCR技术验证miRNA-125b在非小细胞肺癌组织和癌旁组织中的表达情况.结果:IL-10刺激NCI-H460细胞后,miRNA受到调控的程度不同,所测21种miRNA中,miRNA-125b下调程度最大;miRNA-125b恢复表达后,抑制了由IL-10刺激引起的细胞增殖(P<0.01),促进了细胞凋亡;miRNA-125b在非小细胞肺癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P<0.01).结论:在IL-10诱导的细胞增殖中,miRNA-125b起到抑癌的作用,可作为未来治疗非小细胞肺癌的药物研发对象.     

miRNA21抑制物对食管癌细胞凋亡的影响

目的:利用miRNA21抑制物抑制食管癌细胞系ECA-109中miRNA21的表达,观察对ECA-109细胞凋亡的影响,为探讨miRNA21抑制物在食管癌治疗中的应用提供理论参考。方法:以正常培养的ECA-109细胞为空白对照组,转染miRNA21抑制物阴性对照物作为阴性对照组,转染miRNA21抑制物作为实验组,通过MTT法、流式细胞术、实时荧光定量PCR研究miRNA21抑制物对ECA-109细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因表达的影响。结果:与空白对照组和阴性对照组相比,转染miRNA21抑制物能够显著性地抑制ECA-109细胞的增殖(P<0.05),并且明显提高ECA-109细胞的凋亡率(P<0.05),促进细胞凋亡。同时,转染miRNA21抑制剂的实验组ECA-109细胞中促凋亡基因caspase3、p53、在m RNA水平的表达均显著升高(P<0.05),而抗凋亡基因Bcl-2的表达则被显著抑制(P<0.05)。结论:miRNA21抑制剂能够抑制食管癌细胞ECA-109的增殖,增强促凋亡相关基因的表达,促进癌细胞的凋亡;miRNA21具有明显的原癌基因样功能,可作为食管癌细胞治疗的靶标。     

癫痫主要病理机制及其相关微RNA的研究进展

微RNA(miRNA)广泛参与癫痫病理机制中的炎症反应、神经细胞凋亡、胶质细胞功能异常、突触重构等过程。miRNA通过调控白细胞介素1、干扰素α、肿瘤坏死因子α等参与癫痫炎症反应;机体通过上调促凋亡miRNA和下调抗凋亡miRNA的表达影响细胞凋亡,促使癫痫发作;miRNA调节胶质细胞发育,引起胶质细胞功能异常,引起癫痫发作;miRNA也可以通过合成蛋白质、共价修饰已有蛋白质及再利用膜受体等方式影响突触重构而促发癫痫。     

miRNA与消化系统肿瘤的关系

microRNA(miRNA)是一类新的非编码小分子RNA。生理条件下,miRNA参与生命过程中一系列重要进程,包括发育、增殖、分化和凋亡。不同类型肿瘤有不同组合的异常miRNA表达谱,miRNA可通过类似癌基因和抑癌基因的作用参与肿瘤发生、发展和转归过程。现已发现若干miRNA直接参与肝、胃、结直肠、胰腺、食管等消化系统肿瘤的发生和发展,如癌基因miRNA-21和miRNA-155,抑癌基因miRNA-193b、miRNA-145、miRNA-221、miRNA-126和miRNA-195。     

miRNA-21对PI3K/Akt信号通路的调控及其对非小细胞肺癌预后的影响

miRNA-21是miRNA家族中十分重要的一个基因，在多种恶性肿瘤中高表达。研究表明，miRNA-21对PI3K/Akt信号通路的调控可影响相关靶点的表达情况，因此，miRNA-21可能为非小细胞肺癌临床诊断和疾病治疗提供新靶标。本文对miRNA-21对PI3K/Akt信号通路的调控及其对非小细胞肺癌预后的影响作一综述。     

miRNA-21在泌尿系统肿瘤中的研究进展

miRNAs是一类长度仅为18～25个核苷酸的内源性非编码小RNA,通过靶向蛋白质编码基因的信使RNA进行翻译抑制或转录调控来调节蛋白质表达,从而广泛地在细胞生物学功能中发挥作用。miRNA-21是人类基因组中最早发现的miRNAs之一,在多种人类肿瘤和癌细胞系中高表达,miRNA-21在致癌过程中起重要作用,与肿瘤细胞的高增殖、低凋亡、高侵袭和转移潜能相关。越来越多的研究表明,miRNA-21在肿瘤的发生和发展中扮演重要角色,并在肿瘤疾病的诊断、治疗及预后中显示出巨大的潜力,具有重要的研究价值。文章综述了miRNA-21在泌尿系统肿瘤特别是前列腺癌、膀胱癌和肾癌中的作用机制及临床价值。     

microRNA定向诱导iPS细胞向心肌细胞分化的初步研究

目的研究miRNAs诱导iPS细胞向心肌细胞的定向分化。方法将心肌细胞特异性miRNA-1、miR-NA-133a和miRNA-208排列组合后分别转染iPS细胞,悬浮培养3d后提取RNA和蛋白,应用Real-timePCR和Western blot的方法检测心肌细胞标志分子α-肌球蛋白重链(α-MHC)和肌钙蛋白T(Troponin-t)的表达。结果转染了miRNA-133a和miRNA-208+miRNA-133a组合的两个实验组中,α-MHC的mRNA表达量显著升高;同时转染了miRNA-208+miRNA-133a两个miRNA的实验组中,Troponin-t的mRNA和蛋白表达量显著上调。结论 miRNA-208和miRNA-133a共同作用,有利于诱导iPS细胞向心肌细胞的定向分化。     

MicroRNA-145在动脉粥样硬化血管平滑肌细胞增殖迁移及表型转化中的研究进展

微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类长度为22～28个核苷酸的内源性非编码单链RNA,通过降解mRNA或抑制蛋白质翻译后修饰调控转录后基因的表达,是调控蛋白质生物合成的一类重要的非编码RNA。研究发现,miRNAs参与了动脉粥样硬化（atherosclerosis,As）斑块的形成、脂质代谢障碍、血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）损伤等过程的调节。miRNAs在VSMCs中的表达水平,为阐明As的发病机制提供了新视角,也为As的治疗提供了新靶点。miRNA-145是血管壁和新鲜分离的VSMCs中含量最丰富的miRNA,是VSMCs表型和增殖的关键调节因子。文章就miRNA-145对As发生发展过程中的VSMCs增殖、迁移及表型转化的调控作用进行了综述。     

microRNA-132通过调节VEGF通路抑制缺血性脑血管病患者血管生成的机制研究

目的 探讨microRNA(miRNA)-132通过调节血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路抑制缺血性脑血管病患者血管生成的机制。方法 人脐静脉内皮细胞分为空白组、阴性组与实验组,空白组不进行转染,阴性组与实验组经Lipofectamine2000转染对照模拟物及miRNA-132模拟物。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,real-time PCR检测RNA表达,Western blot法检测蛋白表达。结果 转染后24h与36h,实验组的miRNA-132表达水平、细胞凋亡指数显著高于阴性组与空白组(P<0.05),低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α和VEGF RNA与蛋白表达水平、细胞增殖指数显著低于阴性组与空白组(P<0.05),阴性组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miRNA-132可通过抑制HIF-1α、VEGF的表达,抑制人脐静脉内皮细胞增殖,促进其凋亡,从而发挥抑制缺血性脑血管病患者血管生成的作用。     

miRNA-200在卵巢癌中的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类长约19～25个核苷酸的小分子非编码RNA,参与基因的表达调控,调节细胞转录、信号转导,进而调控肿瘤的发生发展。目前已发现16 772种miRNA,其中miRNA-200在卵巢癌中表达上调倍数最高,其与卵巢癌的发生及侵袭转移的关系密切已被多个研究证实。本文综合国内外研究结果,对miRNA-200在卵巢癌中的研究进展作一综述。     

微小RNA与子宫颈癌

子宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一。微小RNA(miRNA)是一类小分子非编码调控的单链RNA。近年来,关于miRNA与子宫颈癌关系的研究成为热点。大量的研究表明,miRNA在细胞增殖、凋亡和肿瘤形成等方面广泛而精确地调控蛋白质的合成。miRNA的异常表达被认为与宫颈癌的发生与发展密切相关。现就miRNA与子宫颈癌的发生、发展及治疗和预后等方面予以综述。     

MicroRNA-574-5p对冠状动脉平滑肌细胞生长的影响及其调控机制

目的:研究miRNA-574-5p对冠状动脉平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响及其调控的分子机制。方法:实时定量PCR检测冠心病(coronary artery heart disease,CAD)患者及健康体检者外周血中miRNA-574-5p的表达及正常人VSMCs细胞中miRNA-574-5p及ZDHHC14的表达。MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡。双荧光素酶报告分析检测miRNA-574-5p与靶基因的结合。结果:与正常体检者对比,CAD患者血清中miRNA-574-5p的表达显著增加(P<0.05)。与阴性对照组相比,miRNA-574-5p类似物显著提高VSMCs的增殖(P<0.01),降低VSMCs的凋亡(P<0.01)。经在线miRNA靶基因预测软件分析,miRNA-574-5p的一个靶基因为ZDHHC14。miRNA-574-5p降低ZDHHC14 3'UTR端的荧光素酶活性(P<0.01),且抑制其表达(P<0.01)。ZDHHC14过表达降低miRNA-574-5p诱导的VSMCs的增殖(P<0.05),提高miRNA-574-5p诱导的VSMCs的凋亡(P<0.05)。结论:miR-574-5p通过抑制ZDHHC14表达促进VSMCs增殖,并抑制其凋亡。miR-574-5p可能为CAD相关因子,并可能成为CAD治疗的潜在分子靶点。     

非小细胞肺癌早期诊断的潜在生物标志物:血浆miRNA-23a和miRNA-451

目的研究血浆中miRNA23-a及miRNA-451 作为潜在生物标志物在非小细胞肺癌（NSCLC）中早期诊断的价值。方法 选取本院50例NSCLC病例和50例健康对照,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）测定组织和血浆中miRNA23-a及miRNA-451 的表达水平,分析miRNA23-a及miRNA-451在组织和血浆中的表达差异及相关性。同时使用受试者工作特征曲线（ROC曲 线）和线下面积（AUC）评估miRNA23-a、miRNA-451及CEA在NSCLC中的诊断能力。通过瞬时转染技术,在NSCLC细胞系 A549 中分别抑制miRNA-23a 和miRNA-451 的表达,使用qRT-PCR 检测SPRY2 mRNA及MIF mRNA的表达水平。结果 miRNA-23a及miRNA-451在NSCLC组织中的表达与吸烟状态、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期显著相关（P<0.05）。与对 照组相比,miRNA-23a在NSCLC患者的肿瘤组织和血浆中显著升高,而miRNA-451明显低于对照组。这2种miRNA的水平 在肿瘤组织与血浆中表现出相同的表达趋势,呈高度相关。ROC分析显示,miRNA-23a和miRNA-451较之传统的肿瘤标志物 CEA,AUCROC、灵敏度和特异度均显著高于后者（P<0.05）。当miRNA23-a及miRNA-451联合检测时,AUCROC/灵敏度/特异度均 得到改善,分别为0.900/78%/86%。在NSCLC细胞系A549中分别抑制miRNA-23a和miRNA-451的表达后,SPRY2 mRNA及 MIF mRNA表达水平显著升高。结论miRNA-23a和miRNA-451可用作NSCLC早期诊断的候选标志物,这2种标志物联合检 测对NSCLC诊断更有效。     

miRNA-125a-5p对胰腺癌皮下移植瘤细胞Caspase-8表达的影响

目的 研究miRNA-125 a-5 p对胰腺癌皮下移植瘤细胞凋亡的影响.方法 使用miRNA-125a-5p过表达、低表达慢病毒稳定转染PANC-1细胞.选取BALB/C雄性裸鼠18只,随机分为3组,每组6只,分别接种miRNA-125a-5p过表达载体、低表达载体的稳转株细胞和胰腺癌PANC-1细胞,分为miRNA...     

长链非编码RNA HOTAIR 对胃肠间质瘤 细胞化疗敏感性的影响

目的 研究长链非编码RNA（lncRNA）HOTAIR 对胃肠间质瘤细胞伊马替尼化疗敏感性的影响, 并探讨其作用机制。方法 首先在胃肠间质瘤组织中检测HOTAIR 的表达水平。选择胃肠间质瘤细胞GIST-T1 为研究对象,si 干扰HOTAIR 后,采用dUTP 缺口末端标记测定法（TUNEL）和半抑制浓度（IC50）法检 测GIST-T1 对伊马替尼化疗敏感性的变化。通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法、RNAhybird 软件分析和荧光素酶报告法,筛选并验证与HOTAIR 存在内源性竞争关系的miRNAs。最后将miRNA 与 HOTAIR 共转染,观察HOTAIR 与miRNA 的竞争性结合能否改变GIST-T1 细胞对伊马替尼的化疗敏感性。 结果 HOTAIR 在胃肠间质瘤组织中表达含量高于正常组织（P <0.05）。伊马替尼药物作用下,si-HOTAIR 组细胞IC50 低于si-NC 组（P <0.05）;TUNEL 阳性细胞比例高于si-NC 组（P <0.05）;差异有统计学意 义。qRT-PCR 结果显示,si-HOTAIR 组细胞miRNA-21 表达水平高于si-NC 组（P <0.05）;RNA hybird 分析及荧光素酶验证结果显示HOTAIR 与miR-21 核心序列区存在碱基互补。将miRNA-21 与HOTAIR 共转染GIST-T1 细胞后,与miRNA-21+HOTAIR- 突变型组比较,miRNA-21+HOTAIR- 野生型组细 胞IC50 增高（P <0.05）;TUNEL 阳性细胞比例降低,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 长链非编码RNA HOTAIR 可通过内源性竞争结合miRNA-21,降低胃肠间质瘤细胞对伊马替尼的化疗敏感性。     

应用微阵列芯片分析人不同分化鼻咽癌细胞株miRNA的表达

目的 探讨分化角化型鼻咽癌(NPC)细胞系CNE1和未分化非角化型NPC细胞系C666-1中微小RNA(miRNA)的差异性表达,预测异常表达miRNA的靶基因.方法 常规培养NPC细胞株CNE1和C666-1,分别提取总RNA并进行质检;miRNA芯片技术检测miRNAs的表达并对其表达谱进行差异性分析;采用荧光定量RT-PCR进行验证;运用MIRanda、TargetScan、PicTar、Diana-microT软件预测可能调控的靶基因.结果 通过对NPC中has-miRNA表达谱的差异分析,在CNE1,677个miRNA中上调27个、下调25个.miRNA-323-3p和miRNA-574-5p分别是2个最显著差异表达的miRNA.实时定量PCR证实miRNA-323-3p在CNE1中高表达,而miRNA-574-5p低表达.对上述2个miRNA进行靶基因预测,分别筛选出28和18个靶基因.结论 获得了分化角化型和未分化非角化型NPC细胞miRNA的差异表达谱,部分miRNA可能通过调控其靶基因而参与NPC的发病机制.     

miRNA在肾脏缺血再灌注损伤中的作用研究进展

肾脏缺血再灌注损伤（IRI）是导致急性肾损伤（AKI）的主要原因之一。肾脏IRI涉及炎症反应、氧化应激反应、细胞凋亡与自噬等过程。miRNA是内源性的、短链非编码RNA,可通过抑制靶mRNA的转录后活性影响转录后翻译过程。miRNA介导的基因调控是调节细胞周期、增殖、生长和凋亡等基本细胞过程的重要调节机制,进而对病理生理结果产生重要影响。研究显示miRNA在多种肾脏疾病发病过程中起关键作用,如IRI、AKI和肾癌。多种miRNA表现出差异性表达,可能通过调节炎症、氧化应激、细胞凋亡和自噬来减轻损伤反应,部分miRNA甚至表现出良好的诊断IRI致AKI的效能。本文就miRNA在肾脏IRI中的作用研究进展作一综述。     

miRNA-30c的研究进展

miRNA是近年来发现的一类长度为18～24个核苷酸的可调控基因表达的非编码小分子RNA,它主要通过与靶标基因3′UTR 的完全或不完全配对,降解靶标基因mRNA 或抑制其翻译,从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动.miRNA-30c作为miRNAs中的一员,不仅在多种组织中表达,而且许多研究还表明它可...     

miR-21-3p与肿瘤研究进展

微RNA(miRNA)是一类参与基因转录后调控的小分子非编码RNA,其在肿瘤中的表达水平、肿瘤发生中的调控作用及在肿瘤早期检测、治疗、预后等方面的研究一直是肿瘤研究的热点问题。而miRNAs*的作用却被忽视,近年来发现miRNA*可以作为功能链在肿瘤细胞迁移、侵袭、分化、增殖和凋亡等多种生物学过程中发挥重要作用。研究发现,许多肿瘤中存在异常表达的miR-21-3p,其功能广泛,包括调节肿瘤细胞增殖、迁移、凋亡和分化等过程。随着研究的深入,miR-21-3p可能成为新的肿瘤标志物,并为肿瘤的基因治疗提供新靶点。