甲基莲心碱在大鼠肝脏中的代谢产物及其途径

大鼠灌胃给予甲基莲心碱 20 mg·kg^-1，采用液相色谱-串联质谱联用法对大鼠肝脏中的代谢产物进行分析；并建立肝微粒体温浴及NADPH再生体系，采用高效液相色谱-紫外检测法研究CYP450亚型的特异性抑制剂对甲基莲心碱体外代谢的影响。在正离子检测方式下，除甲基莲心碱外共检测到4种代谢产物M₁、M₂(主要代谢产物)、M₃和M₄。其中，M₂和M₄通过与对照品的色谱和质谱比对，确认为莲心碱和异莲心碱，而M₁ 和M₃可能为去甲基莲心碱和去甲基异莲心碱。CYP3A1的特异性抑制剂酮康唑和CYP2D1的特异性抑制剂奎尼丁均可抑制甲基莲心碱在肝微粒体温孵液中的代谢，其主要代谢产物莲心碱的生成抑制率分别为25.7%和80.5%。因此提示，甲基莲心碱在肝脏中的主要代谢途径是苄基和喹啉环上的甲氧基脱甲基化，其主要代谢物为莲心碱，CYP2D1和CYP3A1均参与了其生物转化。     

丹酚酸A对实验性糖尿病大鼠的降糖作用及其机制初探

目的:考察丹酚酸A对实验性糖尿病大鼠的降糖、降脂作用及其可能机制。方法:采用高糖高脂膳食4周诱导大鼠胰岛素抵抗后,腹腔注射亚致病剂量链脲佐菌素制备实验性糖尿病大鼠模型,观察丹酚酸A对血糖、血脂代谢的影响及其可能的机制。结果:连续灌胃给药8周,丹酚酸A可显著降低实验性糖尿病大鼠的空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇及游离脂肪酸含量,显著增高实验性糖尿病大鼠血清超氧化物歧化酶活力,降低模型组大鼠丙二醛含量。结论:丹酚酸A不仅对实验性糖尿病大鼠血脂具有良好的调节作用,还能改善实验性糖尿病大鼠的血糖代谢,显著降低空腹血糖。     

本草消渴丹对2型糖尿病大鼠血糖和血清胰岛素含量的影响

目的:研究本草消渴丹对2型糖尿病大鼠血糖和血清胰岛素含量的影响。方法:选择高脂、高糖饲料加小剂量链脲佐素(STZ,25mg·kg-1腹腔注射)复制大鼠2型糖尿病模型,分别以本草消渴丹和二甲双胍进行干预,检测空腹血糖。治疗4周后测大鼠空腹血糖、血清胰岛素含量以及大鼠体质量变化。结果:本草消渴丹能显著降低2型糖尿病大鼠血糖含量和胰岛素含量且具有显著缓解体质量增长缓慢的作用。结论:本草消渴丹治疗糖尿病的机制之一是缓解血清胰岛素抵抗。     

骨钙素对糖尿病大鼠血糖浓度的影响

目的观察骨钙素对2型糖尿病大鼠血糖的影响。方法选用雄性SD大鼠,高脂高糖饲料喂养4周后加小剂量链脲佐菌素注射建立2型糖尿病大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、骨钙素(低、中、高剂量)糖尿病组,检测空腹血糖。结果注射链脲佐菌素3天后造模大鼠血糖均明显高于注射前(P<0.05)和正常对照组(P<0.05),与糖尿病模型组相比,骨钙素(低、中、高剂量)糖尿病组空腹血糖均明显降低(P<0.05)。但骨钙素(低、中、高剂量)糖尿病组空腹血糖两两相比较无明显差异性(P>0.05)。结论骨钙素有降糖的作用,但骨钙素的降糖效果无明显剂量差异。     

糖尿病胃轻瘫动物模型建立方法初探

目的探讨糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠的造模方法。方法从70只正常SD雄性大鼠中随机选择60只高脂高糖饲养2周后,禁食、自由饮水12 h,腹腔注射溶于柠檬酸盐缓冲液的链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)50 mg/kg建立糖尿病大鼠模型。从50只糖尿病大鼠中随机选取10只高脂高糖饮食喂养8周,设为DGP模型组。余10只健康SD大鼠普通饲料饲养2周后腹腔注射等剂量柠檬酸盐缓冲液普通饲料喂养8周,设为对照组。检测造模期间大鼠血糖、体重变化及胃肠动力指标。结果与正常组相比,模型组造模后空腹血糖显著增加(P<0.01),8周后体重明显下降(P<0.01),胃残留率增加(P<0.05),小肠推进率显著降低(P<0.01)。结论在腹腔注射STZ配合高脂高糖饲养诱导SD大鼠形成糖尿病基础上,高脂高糖喂养可构建DGP大鼠模型。     

实验性2型糖尿病大鼠模型的研究

目的　制作一种与人类 2型糖尿病发病过程类似的动物模型。方法　选体重 16 0～ 180 gWistar大鼠 ,雌雄各半 ,先喂以高脂高糖饲料 4周 ,促发胰岛素抵抗 ,继以小剂量链脲佐菌素 (STZ) (30mg/kg ,每周 1次 )连续腹腔注射 2次 ,诱导建立 2型糖尿病模型。结果　高脂高糖饲料喂养 4周后大鼠空腹胰岛素显著高于对照组(P <0 0 5 ) ,出现胰岛素抵抗 (胰岛素敏感指数ISI =- 5 72± 0 4 3,对照组ISI =- 4 37± 0 6 1,P <0 0 1) ,第 2次注射STZ后大鼠于 1周始出现葡萄糖负荷后 6 0、12 0min血糖显著升高 (P <0 0 1) ,造模成功 ;18周时出现空腹和葡萄糖负荷后血糖均明显升高 (P <0 0 5 ) ,而空腹胰岛素分泌与对照组相比差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　本实验方法建立的 2型糖尿病大鼠模型 ,与人类 2型糖尿病代谢特征相似 ,是研究人类 2型糖尿病较理想的动物模型     

2型糖尿病大鼠脂联素受体基因表达的相关性研究

目的研究2型糖尿病大鼠骨骼肌和肝脏脂联素受体的表达变化。方法将20只健康雄性SD大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和对照组(NC组),每组10只,分别饲以高脂饲料和普通饲料。第13周末DM组大鼠一次性腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ)溶液(STZ 25mg/kg,以0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液配制,pH=4.4),NC组腹腔注射等体积的无菌柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。第14周末进行葡萄糖耐量试验(OGTT)筛选成模大鼠,第25周末处死所有大鼠,取血检测空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、脂联素、胰岛素水平,并计算胰岛素敏感指数(ISI),使用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别检测2组大鼠骨骼肌和肝脏组织中脂联素受体(AR)mRNA表达水平。结果 DM组大鼠空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、胰岛素水平高于NC组,脂联素水平和ISI低于NC组(P<0.05);DM组大鼠骨骼肌中AR1mRNA和肝脏组织中AR2mRNA的表达水平低于NC组(0.64±0.25与1.36±0.30,0.93±0.18与1.52±0.21;P<0.05),AR1和AR2表达水平分别与空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、胰岛素、脂联素、ISI相关。结论 2型糖尿病大鼠AR mRNA的表达水平显著降低,与胰岛素敏感性密切相关。     

恒顺降糖胶囊对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察恒顺降糖胶囊(Hengshun Jiangtang capsules,HS)对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响。方法对连续10d灌胃给予脂肪乳的大鼠腹腔注射四氧嘧啶,72h后血糖值≥16.7mmol·L-1者为2型糖尿病大鼠模型;给药28d,观察HS对空腹血糖(FBG)、糖耐量(OGTT)、空腹血清胰岛素(FINS)、胰岛素耐量(ITT)和胰岛素抵抗指数(Homa-IR)的影响。结果HS能改善2型糖尿病大鼠的OGTT和ITT,降低FGB,FINS和Homa-IR。结论HS明显降低2型糖尿病大鼠的胰岛素血症,改善其对胰岛素的抵抗。     

槲皮苷衍生物的合成及药理作用研究

摘 要 目的： 初步探讨槲皮苷衍生物3′,4′,5,7-四-(O-甲氧羰甲基)槲皮苷的合成及对心肌缺血的作用。方法: 以槲皮苷为原料,N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂,在无水碳酸钾存在下,缓慢滴加氯乙酸甲酯,在3′、4′、5、7位引入醚键,预得到目标产物3′,4′,5,7-四-(O-甲氧羰甲基)槲皮苷。化合物结构经LC-MS、1H-NMR进行了表征。利用薄膜分散法将产物3′,4′,5,7-四-(O-甲氧羰甲基)槲皮苷制成纳米乳,通过腹腔注射给药,观察其对垂体后叶素诱导的心肌缺血大鼠心血管系统的作用。结果: 合成了3′,4′,5,7-四-(O-甲氧羰甲基)槲皮苷,体外代谢试验证明该产物大部分被代谢为末端游离羧基的去甲基产物,极性明显增大。心电图及动物试验结果显示产物对垂体后叶素致心肌缺血大鼠有一定的抗心肌缺血作用。结论:3′,4′,5,7-四-(O-甲氧羰甲基)槲皮苷制成纳米乳腹腔注射对静脉注射垂体后叶素的心肌缺血模型大鼠有明显的对抗作用。     

糖尿病大鼠早期骨组织中BMP-2基因表达初探

目的:观察糖尿病大鼠早期骨密度、骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因的表达。方法:清洁级健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组(每组10只)。A组以普通饲料喂养4周,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液;B组以高脂饲料喂养4周,以STZ按30mg/kg体质量腹腔内注射;C组以普通饲料喂养4周,STZ按50mg/kg体质量腹腔内注射。腹腔注射1周后采静脉血测定血生化指标。腹腔注射8周后,分别测定各组大鼠骨密度并采用原位杂交技术检测骨组织中BMP2-mRNA的表达。结果:与A组比较,B、C组空腹血糖(FBG)显著升高(P<0.01);C组空腹胰岛素(FINS)明显减少(P<0.05),B组明显升高(P<0.05);胰岛素敏感指数(ISI)绝对值B、C组均明显高于A组(P<0.05);B、C组糖化血红蛋白(HbA1c)均高于A组(P<0.05)。与A组相比,腰椎骨密度(BMD)在B、C组大鼠显著降低(P<0.05);股骨、胫骨BMD仅C组大鼠显著降低(P<0.05)。与A组相比,B组大鼠椎骨、胫骨上段BMP2-mRNA表达染色平均光密度显著升高(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠早期,已存在不同程度的骨量的丢失;高胰岛素血症可引起骨组织中BMP2-mRNA表达增加。     

Protect dextran sulfate sodium-induced ulcerative colitis in mice by neferine,a natural product from Nelumbo nucifera Gaertn

OBJECTIVE Ulcerative colitis(UC) is a long lasting inflammatory disease of the colon. Epidemiological studies showed that the prevalence and incidence of UC is increasing worldwide in recent years. Neferine is a natural alkaloid isolated from Nelumbo nucifera Gaertn with a variety of biological activities. This study is designed to evaluate the protective effect of neferine on dextran sulfate sodium(DSS)-induced experimental UC in mice.METHODS In this experimental study, 4% DSS was used to induced the UC mice model. Neferine(5 and10 mg · kg-1) was administrated by intraperitoneal injection(ip). The clinical symptoms and disease activity index(DAI) scores were recorded and calculated. The pathological changes of colon tissues were detected by H&E staining. The levels of inflammatory mediators were detected by ELISA kits. Western blotting and immunohistochemistry were used for protein expressions. RESULTS Neferine treatment significantly alleviated DSS-induced UC by inhibiting weight loss, decreasing DAI scores, and alleviating the pathological changes in colon tissues.Furthermore, neferine significantly decreased the serum levels of pro-inflammatory cytokines including TNF-α,IL-1β, and IL-6 and increased anti-inflammatory cytokine IL-10. The increased myeloperoxidase(MPO) activity and nitric oxide(NO) in colon tissues were also inhibited.In addition, neferine significantly down-regulated inducible nitric oxide synthase(i NOS), cyclooxygenase-2(COX-2), and intercellular cell adhesion molecule 1(ICAM-1) expression in colon tissues. CONCLUSION These results provide evidence that neferine could protect DSS-induced UC symptoms in experimental mice model.The underlying mechanisms might be through inhibition of inflammation.     

灵芝多糖对2型糖尿病大鼠心肌组织氧化应激的影响

目的:探讨灵芝多糖(GLPs)对2型糖尿病大鼠心肌组织氧化应激的影响.方法:SD大鼠高脂饮食喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg·kg-1建立2型糖尿病(T2DM)模型.成模后将大鼠随机分为正常对照组、模型组、小檗碱组(Ber组)、灵芝多糖低、中、高剂量组(剂量分别为200、400、800 mg·kg-1),给予药物治疗,第12周末检测心脏NO、SOD、MDA、CAT、GSH-Px水平及心肌细胞超微结构的变化.结果:与DM组比较,灵芝多糖中、高剂量组能有效降低血糖水平,能够有效对抗氧化应激作用.其中GLPs高剂量组效果优于中剂量组和Ber组.结论:灵芝多糖明显降低心肌组织氧化应激的水平,对2型糖尿病大鼠心肌组织具有保护作用.     

miRNA在2型糖尿病胰腺中的表达

目的 探讨糖尿病胰腺组织miRNA的表达变化.方法 链脲佐菌素(STZ)40 mg/kg腹腔注射+高脂高糖饲料喂饲健康雄性SD大鼠,成模(测血糖≥16.7 mmol/L)后4周,取胰腺组织常规抽提总RNA,采用含有2340种miRNA的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析.结果 模型组miRNA表达谱中异常表达(2倍以上)的miRNA共有37个.其中,17个表达上调,20个表达下调.结论 在大鼠糖尿病模型中,部分胰腺miRNA的表达发生明显变化,提示miRNA可能参与糖尿病诱发的调节作用.     

氯胺酮滥用大鼠心血中氯胺酮含量变化

目的:研究长期腹腔注射(ip)不同剂量氯胺酮大鼠心血中氯胺酮含量变化规律。方法:120只♂Wistar大鼠随机分为4大组,分别为生理盐水对照组、10 mg.kg-1、30 mg.kg-1和60 mg.kg-1氯胺酮剂量组。每天按体重ip一次,制备大鼠氯胺酮滥用模型。对照组和3个剂量组又各分为5批,分别在染毒或给予生理盐水后45 min、1周、2周、3周和3周停药3 d后各处死一批大鼠(6只/批),提取并用GC/MS和GC法分析不同时间点大鼠心血中氯胺酮含量。结果:氯胺酮连续滥用后大鼠血中氯胺酮浓度逐渐增加,且停药3 d后仍可检出。结论:氯胺酮可能存在体内积蓄,长期服用可使氯胺酮半衰期延长。     

甲基莲心碱降低血压及松弛血管作用的分析

甲基莲心碱(neferine,Nef)对自发性高血压大鼠有明显的降压作用,ig给药降压作用可维持3h以上。对由高钾去极化引起的兔主动脉环收缩的抑制作用为维拉帕米(verapamil,Ver)的1/792,使CaCl_2及甲氧明(methoxamine,Met)的量效曲线平行右移,最大反应前者压低、后者不变,pD_2及pA_2值分别为5.4及6.3。还抑制由去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)引起的依内钙收缩反应,提示Nef对α_1肾上腺素受体有阻断作用及较弱的钙拮抗作用。     

在毁脊髓大鼠和肛尾肌上甲基莲心碱对α_1受体激动剂作用的影响

甲基莲心碱(Nef)使甲氧胺(Met)升高毁脊髓大鼠血压的量效曲线平行右移,用大鼠肛尾肌标本、观察Nef的α_1受体阻断作用,发现Nef 1,10,30μmol9·L~(-1)和哌唑嗪(Pra)3,10,30 nmol·L~(-1)一样,使去氧肾上腺素(Phe)累积量效曲线平行右移,不明显压低最大反应,测得Nef的pA_2值为6.9,Nef对高钾去极化收缩的胆囊及Oddi括约肌有抑制作用,以对炎性标本作用为强,结果提示Nef能阻断x_1,受体,能松弛由高钾去极化收缩的胆道平滑肌。     

甲基莲心碱对正常及高血压大鼠血流动力学的影响

iv甲基莲心碱(Nef)6 mg/kg于正常血压、肾性高血压、DOCA盐型高血压大鼠,在血压下降的同时,伴有LVSP,±(dp/dt)max,(dp/dt)P~(-1)的降低,正常血压及肾性高血压大鼠LVSP~-(dp/dt)P~(-1)环缩小,其斜率变小,心率短时变慢,LVEDP变化不明显。iv Nef 2 mg/kg于Wistar高血压大鼠时,仅明显降低血压,而对其它血流动力学指标无明显影响,Nef降低舒张压的作用大于降低收缩压。猫后肢灌流实验证明Nef有明显降低血管阻力的作用。结果表明Nef的降压作用可能由于扩张外周血管所致。     

盐酸二甲双胍对2型糖尿病大鼠波动性高血糖状态下血管内皮功能的影响

目的观察盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride,MH)对2型糖尿病大鼠波动性高血糖状态下血管内皮功能的影响。方法采用高脂饲料喂养加链脲佐菌素(streptozo-tocin,STZ)35 mg.kg-1腹腔注射建立2型糖尿病(T2DM)大鼠模型,并依照空腹血糖变异系数将造模成功的T2DM大鼠分为波动高糖组和稳定高糖组,并将波动高糖组随机分为3组:MH 150 mg.kg-1.d-1组、300 mg.kg-1.d-1组和波动高糖对照组。药物干预8周,观察盐酸二甲双胍对波动性高血糖大鼠主动脉内皮,血浆肝细胞生长因子(HGF)、血浆糖基化终末产物(AGEs)、氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)含量及血清抗氧化能力、TNF-α、sICAM-1的影响。结果盐酸二甲双胍组大鼠血浆HGF、AGEs、LOX-1及血清TNF-α、sICAM-1均较波动高糖组降低,血清抗氧化能力改善。结论二甲双胍具有减轻血糖波动T2DM大鼠血管内皮损伤的作用,其保护作用可能与其减少脂质过氧化产物的产生,增强机体的抗氧化能力,减轻炎症反应,减少细胞黏附因子表达及糖基化终末产物的蓄积有关。     

糖尿病大鼠肾脏水通道蛋白-2mRNA的表达及黄芪的调节作用

目的观察黄芪注射液(astragalus membranaceus,AM)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏髓质水通道蛋白-2(aquaporin-2,AQP-2)基因表达的影响,以探讨黄芪治疗糖尿病的分子生物学机制。方法实验大鼠分为4组:正常组、糖尿病模型组、AM小剂量组和AM大剂量组,后两组应用AM5、10g·kg-1·d-1腹腔注射6周,测定各组大鼠血糖、血清胰岛素及C肽水平,用代谢笼法测定各组大鼠24h尿量,RT-PCR方法测定各组大鼠肾AQP-2 mRNA的表达。结果糖尿病大鼠血糖水平明显增高,血清胰岛素及C肽水平明显下降,单用黄芪注射液治疗对血糖、血清胰岛素和C肽水平无明显影响,但黄芪治疗可使糖尿病大鼠尿量明显增加。RT-PCR检测发现糖尿病大鼠肾髓质AQP-2 mRNA的表达明显上调,黄芪治疗可使其表达下降。结论黄芪治疗糖尿病利水消肿、改善水平衡代谢紊乱的作用可能与其降低肾髓质AQP-2 mRNA的表达有关。