补阳还五汤和黄芪对沙土鼠脑缺血再灌注后脑组织兴奋性氨基酸的影响

研究补阳还五汤和黄芪对脑缺血及其再灌注损伤与脑组织兴奋性氨基酸(EAA)的影响.采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型,于缺血后15 min、再灌注48 h取脑组织测定Glu、Asp、GABA、Gly.结果显示: 缺血15 min后,脑组织Glu、Asp含量明显升高(P<0.05,P<0.01),GABA含量升高(P<0.05),补阳还五汤和黄芪可降低脑组织Glu含量(P<0.05).缺血后15 min再灌注48 h后,脑组织Glu及Asp含量显著升高(P<0.05),补阳还五汤和黄芪均可使脑组织Glu含量降低(P<0.05).说明补阳还五汤和黄芪抗缺血性脑损伤的作用机理可能与其对抗脑缺血及其再灌注后EAA的升高有关.     

补阳还五汤对鼠脑缺血再灌注后脑组织兴奋性氨基酸的作用

【目的】观察补阳还五汤对沙土鼠脑缺血及再灌注损伤与脑组织兴奋性氨基酸(EAA)的影响。【方法】复制沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型,于缺血后15min再灌注48h,取脑组织测定天冬氨酸(GJu)、谷氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)的含量。【结果】缺血15min后,脑组织Glu、Asp、GABA含量升高(P<0.05或P<0.01),补阳还五汤可降低脑组织Glu含量(P<0.05);缺血15min再灌注48h后,脑组织Glu及Asp含量升高(P<0.05),补阳还五汤可使脑组织Glu含量降低(P<0.05)。【结论】补阳还五汤抗缺血性脑损伤的作用机理可能与其对抗脑缺血及再灌注后EAA的升高有关。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后兴奋性氨基酸、NOS和NO的含量变化

目的 :通过测定大鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸 (EAA)、一氧化氮合酶 (NOS)和一氧化氮 (NO)含量的变化 ,探讨脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法 :将动物分为假手术组和缺血 30min后再灌注组 ,通过高效液相色谱或分光光度法测定再灌注后不同时间 (1h、6h、2 4h、4 8h和 72h)脑组织EAA、NOS和NO的含量。结果 :再灌注后 1hEAA水平较假手术组显著增高 ,以谷氨酸最为明显 ,随后逐渐下降 ,2 4h达正常水平。NOS和NO于再灌注后1h即升高 (P <0 .0 5 ) ,2 4h达最高水平 (P <0 .0 1) ,72h降至正常。结论 :脑缺血再灌注后EAA、NOS和NO含量发生变化 ,与缺血再灌注脑损伤有相关关系     

低温异丙酚对脊髓缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 探讨低温异丙酚经腹主动脉灌注对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用.方法 健康成年新西兰大白兔60只.随机分为6组,每组10只,分别为SN组(生理盐水组)、IPN组(10%常温脂肪乳组)、PN组(50 mg/kg常温异丙酚组)、SH组(4 ℃生理盐水组)、PH组(4 ℃ 50 mg/kg异丙酚组)、IPH组(4 ℃ 10%脂肪乳组).每组的灌注容积均为5 mL/kg,灌注速度为10 mL/(kg·h).采用左肾下腹主动脉阻断法建立脊髓缺血再灌注模型,阻断开始时即泵入灌注液,30 min后停止灌注并开放腹主动脉.记录术中兔生命体征及再灌注后6 h、24 h、48 h神经行为学评分,于再灌注后48 h取L4-6节段脊髓观察组织形态学改变;取T8节段脊髓组织作为正常对照(N组),测定L4-6脊髓组织中兴奋性氨基酸(EAA)及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量.结果 ①与对照组(SN、IPN组)比较,常温异丙酚组(PN组)和低温灌注组(SH、PH、IPH组)动物神经行为学评分均明显升高,脊髓组织中EAA含量明显降低,其中以低温异丙酚组(PH组)最显著(P＜0.05),SN、IPN组间差异无统计学意义.②与正常对照组(N组)比较,各实验组(SN～IPH组)L4-6脊髓组织中EAA及MDA含量明显升高,而SOD含量明显降低(P＜0.05).③与SN、IPN、SH、IPH组比较,常温和低温异丙酚组(PN、PH组)脊髓组织中SOD含量明显升高,MDA含量降低(P＜0.05).但PN、PH两组间差异无统计学意义.结论 异丙酚及低温液体均能减轻脊髓缺血再灌注损伤,具有脊髓保护作用,其中低温异丙酚的保护作用更显著.     

家兔急性完全性脑缺血及再灌注后山莨菪碱对脑组织[Ca^2＋]i和超微结构变化的影响

采用家兔急性完全性脑缺血及再灌注损伤模型,观察山莨菪碱对脑组织[Ca^2 ]i和超微结构变化的影响。结果发现：缺血组及缺血再灌注组脑组织[Ca^2 ]i明显升高（P＜0．01）,而且缺血再灌注组明显高于缺血组（P＜0．01）,脑组织超微结构损伤明显加重;山莨菪碱治疗组脑组织[Ca^2 ]i较缺血组及缺血再灌注组明显降低（P＜0．01）,脑组织超微结构损伤亦明显减轻。提示山莨菪碱可能通过Ca^2 拮抗及膜稳定作用对全脑缺血及 再灌注损伤有保护作用。     

通脉注射液对脑缺血再灌注大鼠兴奋性毒性作用的干预机制

【目的】观察脑缺血再灌注后大鼠皮质谷氨酸(Glu)含量及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体活性变化，旨在探讨通脉注射液对缺血性中风后兴奋性毒性作用可能的干预机制。【方法】采用四血管结扎全脑缺血再灌注模型，以放免法测定皮质中Glu和NMDA受体的活性，观察脑缺血后Glu和NMDA受体变化及比较通脉注射液对二者的影响。【结果】脑缺血再灌注模型组皮质Glu含量显著升高、NMDA受体活性上升，通脉注射液组大鼠皮质Glu的含量和NMDA受体活性与模型组比较显著降低。【结论】脑缺血再灌注后兴奋性毒性作用产生，以黄芪和益母草为主的通脉注射液能够通过减弱缺血再灌注后的兴奋性毒性过程,从而起到保护脑皮质的作用。     

亚低温对大鼠脊髓损伤后[Ca^2＋]i的影响

目的 观测大鼠脊髓损伤后一定时段脊髓组织内[Ca^2 ]i的动态变化及亚低温对其的影响。方法应用激光共聚焦显微镜观测亚低温对大鼠脊髓损伤后[Ca^2 ]i的影响，并与钙组化染色相对照。结果大鼠脊髓损伤后[Ca^2 ]i明显升高，至伤后8h达高峰，伤后立即（5min）亚低温治疗明显减轻细胞内钙聚现象，但与对照组相比，不能完全阻止[Ca^2 ]i升高是其脊髓保护机制之一。钙组化染色结果支持上述论点，但很难对[Ca^2 ]i进行准确快捷的动态检测。     

益气活血药对脑缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸的实验研究

目的探讨益气活血药对脑缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸的影响。方法实验动物用沙土鼠，假手术组8只，缺血模型及再灌注组17只，缺血及再灌注加中药组15只(益气活血中药2．5g／kg)。按Chen法测定脑组织缺血及再灌注后谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GAB)、甘氨酸(Gly)的水平。结果预先给予益气活血药，能使沙土鼠缺血15min和再灌注48h后，脑组织Glu、Asp及CABA含量明显升高(P＜0．05)。沙土鼠死亡率由35．3％降至6．7％。结论益气活血中药能对抗沙土鼠缺血性脑损伤，其机理与提高兴奋性氨基酸有关。     

麦芽醇对大鼠脑缺血再灌注损伤的防治作用

目的 研究麦芽醇对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 采用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠脑缺血再灌注模型。观察脑组织含水量及脑组织匀桨中Na^ 、Ca^2 、兴奋性氨基酸(EAA)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的动态变化及麦芽酵对上述指标的影响。结果 麦芽醇可明显降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量、脑组织Na^ 、Ca^2 ，EAA及MDA含量。结论 麦芽醇有抑制大鼠脑缺血再灌注损伤作用，其机制可能与其抑制脑组织内Ca^2 及EAA含量，抑制脂质过氧化作用有关。     

经腹主动脉灌注低温异丙酚对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究低温异丙酚对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用。方法40只新西兰白兔,随机分为4组,每组10只。采用阻断兔左肾下腹主动脉30min建立的脊髓缺血模型,经左股动脉灌注液体,A组(对照组)为常温生理盐水组;实验组:B组为低温生理盐水组;C组为低温脂肪乳组;D组为低温异丙酚组(50mg/kg)。4组灌注液体量均为5ml/kg。观察每组兔术中生命体征、再灌注后6,24,48h的神经行为学(Tarlov)评分、再灌注48h后的脊髓组织病理改变和测定脊髓组织中兴奋性氨基酸(谷氨酸和天门冬氨酸)的含量。结果实验组体温均于阻断15min开始下降,组间无差异(P>0.05):除D组阻断15min后平均动脉压开始下降外(P<0.05),A、B、C组均无明显变化;4组动物心率相对平稳;实验组Tarlov评分、脊髓病理学改变及兴奋性氨基酸含量均显著优于A组,其中以D组最佳(P<0.05)。结论经腹主动脉灌注低温液体对脊髓缺血再灌注损伤有保护作用,其中以低温异丙酚的保护作用为明显。     

Spinal cord protection: effect of N-methyl-D-aspartate receptor antagonist MK-801 for spinal cord ischemia in a rabbit model

Excitatory amino acids (glutamate, aspartate) play an important role in the ischemic cascade leading to cell death. The N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor is an excitatory amino acid (EAA) receptor, and NMDA receptor antagonists have been shown to exert a neuroprotective effect in central nervous system ischemia. The purpose of this study was to investigate the effects of noncompetitive NMDA receptor antagonists MK-801 and to observe the changes in EAAs after spinal cord ischemia in a rabbit model. Spinal cord ischemia was induced by clamping the infrarenal abdominal aorta for 24 min. Group 1 (n = 6) received no pharmacologic infusion. Group 2 (n = 5) was administered an intra-aortic hypothermic MK-801 (1 mg/kg) solution and group 3 (n = 6) was administered an intra-aortic normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution immediately after clamping of the abdominal aorta. We evaluated the neurological function at 12, 24 and 48 hrs after spinal cord ischemia. A histopathologic study was carried out 72 hrs after spinal cord ischemia, and the results for groups 1 and 3 were compared. The glutamate and aspartate levels in the blood plasma were compared at pre-ischemia and at 12, 24, and 48 hrs among the groups. The perfusion of a normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution significantly reduced the neurological dysfunction and the neuronal damage. There was a significant increase in aspartate at 24 and 48 hrs in group 1, but no such increase in glutamate occurred in groups 1 and 3. In conclusion, these data provide the evidence that therapeutic intervention with MK-801 (2 mg/kg) in the early period of spinal cord ischemia is beneficial in reducing neurological dysfunction and neuronal damage.     

氯胺酮对缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸递质及钙含量的影响

用“四动脉闭塞法”制成兔脑缺血再灌注损伤模型，测定其组织兴奋性氨基酸递质、脑组织钙及线性粒体钙含量变化，同时观察兴奋性氨基酸受体拮抗剂氯胺酮对上述指标的影响。结果提示：缺血２０ｍｉｎ，脑组织兴奋性氨基酸递质谷氨酸和天门氨酸明显降低，再灌注后其降低更加明显。     

急性脊髓损伤后脑脊液中兴奋性氨基酸含量变化的临床观察

目的；探讨脑脊液中兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量性急性脊髓损伤的关系。方法；采用氨基酸自动分析仪检测２６例生脊髓损伤患者脑脊髓（ＣＳＦ）中天门冬氨基酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）等ＥＡＡ含量的动态变化。结果；脊髓损伤后２４ｈ内ＣＳＦ中Ａｓｐ、Ｇｌｕ显著升高，其升高幅度与脊髓损伤的程度成正相关，即脊髓损伤越重；Ａｓｐ、Ｇｌｕ升高越显著，且预后就越差；结论；伤后ＣＳＦ中ＥＡＡ含量可作为衡量脊髓损伤程度和预     

缺血后处理与控制性低压灌注对大鼠脊髓缺血-再灌注损伤的影响

目的:观察缺血后处理与控制性低压灌注对大鼠脊髓缺血-再灌注损伤的影响.方法:雄性SD大鼠309只,随机分为3组(n=103):对照组(Control组)、后处理组(Post-con组)和低压灌注组(LR组).2F Fogarty球囊导管阻断胸主动脉9min合并体循环低压40 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)诱导大鼠脊髓缺血.再灌注期,Control组以平均动脉压(MAP)100mmHg迅速回灌;Post-con组进行3次30 s再灌/30 s阻断的操作;LR组MAP维持40 mmHg 3 min再升至100 mmHg.监测再灌30 min内脊髓相对血流量(rSCBF);测定再灌1、4、12、24 h腰骶部脊髓组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和髓过氧化物酶(MPO)的活性,及丙二醛(MDA)含量;评定大鼠后肢神经功能,观察脊髓腰段的病理改变.结果:后处理和低压灌注可改善再灌早期的高流量状态.与Control组比较,Post-con组于再灌1、4 h SOD、CAT活性上调,24 h内MDA含量降低,MPO活性下降(P<0.01).LR组MDA含量虽降低(P<0.05),但SOD、CAT活性无变化;MPO活性干再灌1,4 h达峰值,后逐渐下降.Post-con及LR组再灌注24 h内神经功能皆明显好转,但LR组的神经行为学评分低干Post-con组.脊髓病理改变与行为学结果类似.结论:缺血后处理与控制性低压灌注皆可减轻大鼠脊髓缺血一再灌注损伤,但由于缺血后处理可提高再灌注期内源性抗氧化酶活性、减少中性粒细胞堆积而具有更强的脊髓保护作用.     

大剂量甲基强的松龙联合MK-801治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究

目的观察大剂量甲基强的松龙（MP）联合MK-801（地卓西平马来酸盐）对大鼠急性脊髓损伤的治疗效果。方法采用Allen的重物坠落法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将72只致伤大鼠一次性随机分为4组,每组18只大鼠（其中每组又包括24h、72h、15d三个亚组,每个亚组6只大鼠）。对照组伤后0．5h腹腔注射5mL生理盐水;MP组伤后0．5h腹腔注射甲基强的松龙30mg／kg体重;MK-801组伤后0．5h腹腔注射2．5％MK-801（地卓西平马来酸盐）5mg／kg体重;联合组伤后0．5h腹腔注射甲基强的松龙和MK-801（剂量、浓度同前）。分别在伤后24h、72h、15d处死动物,观察受损部位脊髓的病理形态和细胞凋亡,其中15d组分别于第1、3、5、7、10、15天做Gales评分和斜板试验。结果甲基强的松龙、MK-801及联合组治疗大鼠急性脊髓损伤,在Gales评分、斜板试验及病理形态上、细胞凋亡检测与对照组相比都有很大提高,但三个治疗组在上述方面却处于同一水平。结论甲基强的松龙、MK-801及两药联合对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用在目前的实验条件下无明显差异。     

电针预处理对脊髓缺血再灌注损伤后血脊髓屏障的影响

目的 研究电针预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后血脊髓屏障的影响.方法 SD大鼠90只,随机分为3组,每组30只:假手术组(S组)、脊髓缺血再灌注损伤组(IR组)、电针预处理组(E组).IR组和E组大鼠阻断胸主动脉造成缺血再灌注损伤模型,S组只开胸暴露胸主动脉但不阻断,E组在夹闭胸主动脉前行电针刺激预处理.观察记录术后48 h大鼠神经运动功能评分,依文思兰荧光法测定血脊髓屏障通透性,Western blot检测脊髓组织中AQP-4表达情况.结果 与S组比较,IR组神经功能评分明显降低,血脊髓屏障通透性明显增加,AQP-4表达明显增多(P<0.05).与IR组比较,E组神经功能评分增高,血脊髓通透性降低,AQP-4表达减少(P<0.05).结论 电针预处理可以明显抑制脊髓缺血再灌注损伤后AQP-4的表达,降低血脊髓屏障通透性,进而减轻脊髓缺血再灌注损伤.     

罗哌卡因用于大鼠连续腰麻的行为学及脊髓组织钙含量变化

目的：观察大鼠鞘内（蛛网膜下腔）间断给予不同浓度剂量的罗哌卡因行为学及脊髓组织钙含量变化。方法：雄性SD大鼠24只,按改良Yaksh法置入microspinal导管至脊髓腰段8cm,随机分为4组（每组6只）。N组(对照组)经 microspinal导管注入0.9%氯化钠40μl,每间隔1.5h一次,共3次。R1,R2,R3 3组：注药方式同N组,注入药物分别为0.5%,0.75%,1%罗哌卡因40μl。注药开始同期观察大鼠行为学变化,6h后取腰段脊髓测定钙离子含量变化。结果：R1,R2,R3 3组注药后30s双下肢麻痹; 30～90min双下肢肌张力恢复,R1组较R2组快,R2组较R3组快,组间比较差异有显著性（P<0.05）。R3组脊髓组织钙离子含量明显高于N,R1和R2 3组（P<0.05）。结论： 0.5%,0.75%和1%罗哌卡因用于连续蛛网膜下腔运动神经完全阻滞时间无差异,恢复时间与剂量有关。1%罗哌卡因能使脊髓组织钙含量明显增高。     

亚硒酸钠对全脑缺血再灌注脊髓损伤的保护作用

目的探讨亚硒酸钠对全脑缺血再灌注所致脊髓损伤的保护作用及其机制.方法家兔18只,随机分成假手术组,缺血再灌注组,亚硒酸钠预防组.采用改进的缺血再灌模型对家兔全脑缺血10min复流1h,重复1次,术后12h取材测定血清和脊髓组织匀浆中GSH-Px活力;电镜观察脊髓前角运动神经元形态的改变.结果亚硒酸钠预防组脊髓组织中GSH-Px活力明显增加,与缺血再灌注组比较有显著差异(P＜0.01),血清中GSH-Px活力也明显增加,与缺血再灌注组比较有显著差异(P＜0.01);电镜观察亚硒缺钠预防组能使脑缺血再灌注所脊髓前角运动神经元的损伤明显减轻.结论亚硒酸钠对缺血再灌注所致脊髓神经元损伤有明显的保护作用.     

缺氧缺血后脑细胞内Ca~(2+)含量变化及药物干预

目的：了解缺氧缺血后新生鼠脑细胞胞浆及线粒体Ca2+浓度的动态变化及MK-801、硫酸镁、苯巴比妥钠干预对胞浆钙超载的影响。方法：结扎左颈总动脉并吸入8％氧气2h制成缺氧缺血模型，用Fura-2／AM法及原子吸收火烙法测定。结果：缺氧缺血后1h胞浆及线粒体Ca2+浓度均明显升高，24h胞浆Ca2+浓度恢复正常，线粒体Ca2+含量进一步升高，48及72h两者均降至正常；预防性应用MK-801及硫酸镁可抑制缺氧后胞浆钙超载，苯巴比男钠此效果不明显。结论：缺氧缺血可致脑细胞胞浆及线粒体Ca2+浓度增加，硫酸镁和MK-801可抑制缺氧后胞浆钙超载，苯巴比男钠效果不著。     

脊髓进行性压迫损伤过程中脊髓神经细胞内Ca~(2+)和Ire1的变化

目的 观察脊髓进行性压迫损伤(SCII)过程中神经细胞内钙离子(Ca2+)浓度、内质网跨膜激酶(Ire1)表达变化规律,探讨其在内质网应激过程中的意义.方法 制作大鼠脊髓压迫模型,运用生物化学、免疫组化、Western blot、RT-PCR和图像分析等方法,观察SCII后脊髓神经细胞内Ca2+浓度、Ire1表达变化规律.结果 SCII后神经细胞内Ca2+浓度于术后1、3、7、14、21、28d呈升高趋势,手术组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).术后1d Ire1 mRNA和Ire1即有较高水平表达,术后3、7、14d迅速增高,术后21、28d逐渐下降,手术组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 SCII导致细胞内Ca2+浓度升高而引起内质网应激.Ire1表达标志着内质网上未折叠蛋白积聚以及相关蛋白表达增加.表明Ca2+和Ire1都参与了内质网应激所致细胞凋亡信号转导的调节.