内源性一氧化碳与一氧化氮在运动中的相互作用

目的：利用Nω-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）抑制一氧化氮合酶（NOS），观察大鼠主动脉平滑肌血红素氧合酶一氧化碳（HO/CO）和一氧化氮合酶-一氧化氮（NOS/NO）两系统在运动中的相互作用。方法：检测主动脉平滑肌血红素氧合酶（HO）活性，一氧化碳（CO）生成量及血清一氧化氮（NO）。结果：运动训练组HO及CO比对照组上升了81％，83％，NOS抑制组的HO和CO分别比对照组上升了34％，50％；而运动 NOS抑制组的HO和CO比对照组分别上升了135％、116％。运动 NOS抑制组的HO和CO值比单纯NOS抑制组分别上升了76％、44％。结论：运动可激发HO-CO活性，通过cGMP等机制改善血管舒张反应性，抑制平滑肌增殖及血小板活化，是对NO-cGMP机制的补充；当NOS/NO功能障碍时，运动HO-CO是代偿可更强；NOS/NO与HO/CO存在相互代偿调节。     

内源性一氧化碳与一氧化氮在运动中的相互作用

目的:利用Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)抑制一氧化氮合酶(NOS),观察大鼠主动脉平滑肌血红素氧合酶-一氧化碳(HO/CO)和一氧化氮合酶-一氧化氮(NOS/NO)两系统在运动中的相互作用。方法:检测主动脉平滑肌血红素氧合酶(HO)活性,一氧化碳(CO)生成量及血清一氧化氮(NO)。结果:运动训练组HO及CO比对照组上升了81%,83%,NOS抑制组的HO和CO分别比对照组上升了34%,50%;而运动+NOS抑制组的HO和CO比对照组分别上升了135%、116%。运动+NOS抑制组的HO和CO值比单纯NOS抑制组分别上升了76%、44%。结论:运动可激发HO-CO活性,通过cGMP等机制改善血管舒张反应性,抑制平滑肌增殖及血小板活化,是对NO-cGMP机制的补充;当NOS/NO功能障碍时,运动者HO-CO的代偿可更强;NOS/NO与HO/CO存在相互代偿调节。     

有氧运动对自发性高血压大鼠心肌血红素氧合酶活性及血红素氧合酶-1mRNA表达的影响

目的:观察有氧运动对自发性高血压大鼠(SHR)心肌血红素氧合酶(HO)活性及HO-1mRNA表达的影响,探讨适宜的有氧运动对高血压性心肌肥大的防治作用及机制。方法:雄性Wistar大鼠6只为正常对照组(C组),雄性自发性高血压大鼠16只,随机分为高血压组(S组)和高血压运动组(T组)。T组每日进行60min无负重游泳,每周6次,共9周,用RT-PCR方法检测大鼠心脏HO-1mRNA表达。结果:与C组相比,S组心肌HO活性显著降低(P<0.05);与S组相比,T组心肌HO活性显著升高(P<0.05)。与C组相比,各组心肌HO-1mRNA表达差异均有显著性意义,S组心肌HO-1mRNA表达显著升高(P<0.01);与S组相比,T组心肌HO-1mRNA表达也显著升高(P<0.01)。结论:说明长期有规律的运动可以升高SHR心肌HO活性和HO-1mRNA表达。     

辛伐他汀对实验性兔动脉粥样硬化进程中HO/CO系统的影响

目的探讨血红素加氧酶(HO)一氧化碳(CO)系统在动脉粥样硬化中的变化、相互关系及辛伐他汀对动脉粥样硬化进程中血红素加氧酶-一氧化碳的影响。方法家兔予以高胆固醇饮食(n=16)8周,8周后改用普通饮食并随机分为3组,模型组停用高胆固醇饮食,改普通饮食(n=8);辛伐他汀组给予喂饲辛伐他汀进行药物干预8周。同时设正常对照组(n=8):给予普通饲料喂养16周。然后取静脉血分别用Chalmers A.H、硝酸还原酶法测定各实验组血中CO,取主动脉组织用免疫组织化学方法测定主动脉组织中HO-1的表达;并比较组间各项参数的差异。结果与对照组比较,模型组血脂水平明显升高,血浆一氧化碳水平明显升高,血红素加氧酶-1表达明显升高(P均<0.01)。与模型组比较辛伐他汀组血浆TC、TG、LDL下降明显(P<0.01),HDL升高(P<0.01);血浆一氧化碳水平明显降低(P<0.01),血红素加氧酶-1表达明显减少(P<0.01)。结论动脉粥样硬化进程中,辛伐他汀可以通过下调血红素加氧酶/一氧化碳系统而延缓动脉粥样硬化进程。     

辛伐他汀对动脉粥样硬化大鼠主动脉血红素氧合酶-1表达的影响

目的探讨辛伐他汀对动脉粥样硬化（AS）大鼠主动脉血红素氧合酶1（HO-1）表达的影响。方法取健康SD大鼠24只，随机分为3组；对照组、AS模型组和治疗组，每组8只。AS模型组和治疗组在实验开始时，一次性腹腔注射维生素D3 60万U／kg，以后喂食高脂饮食；对照组喂食普通饲料。4周后治疗组灌胃给予辛伐他汀10mg／（kg·d）治疗。干预治疗4周后处死大鼠，取主动脉观察形态及病理学变化，同时采用免疫组织化学方法检测大鼠主动脉HO-1的表达情况，并应用人工计数分析法对免疫组化结果进行定量分析。结果（1）AS模型组主动脉出现典型AS斑块，其主动脉HO-1的表达水平显著高于对照组（P〈0.001）。（2）治疗组的主动脉粥样硬化程度与AS模型组比较明显减轻，但其HO-1的表达水平显著高于AS模型组（P〈0.001）。结论（1）辛伐他汀能够上调HO-1在AS大鼠主动脉的表达水平。（2）辛伐他汀可能通过上调HO-1的表达而发挥抗AS作用。     

肝细胞生长因子治疗冠状动脉粥样硬化大鼠的实验研究

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)治疗大鼠冠状动脉粥样硬化(AS)的实验效果。方法选取10周龄SPF级成年雄性SD大鼠72只,其中18只为正常组(等量生理盐水灌胃)、54只为AS模型大鼠。AS模型大鼠随机分为阳性对照组[阿托伐他汀治疗,4.8 mg/(kg·d)],实验组A[HGF,10 mg/(kg·d)]、实验组B[HGF,30 mg/(kg·d)]各18只,干预时间12周。检测并对比各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化修饰低密度蛋白(ox-LDL)、内皮型一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、过氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及冠状动脉中CD40L、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达情况。结果模型组的血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、ET-1、IL-6、TNF-α水平均显著高于正常组(P0.05),模型组HDL-C、NO、SOD水平均低于正常组(P0.05);实验组A、实验组B及阳性对照组的TC、TG、LDL-C、ox-LDL、ET-1、IL-6、TNF-α水平均显著低于模型组(P0.05),HDL-C、NO、SOD均显著高于模型组(P0.05);模型组的冠脉CD40L、MMP-9蛋白水平均显著高于正常组(P0.05);实验组A、实验组B及阳性对照组冠脉CD40L、MMP-9蛋白表达水平均显著低于模型组(P0.05)。实验组B的TC、TG、LDL-C、ox-LDL、ET-1、IL-6、TNF-α、CD40L、MMP-9蛋白水平显著低于实验组A(P0.05),HDL-C、NO、SOD显著高于实验组A(P0.05)。结论 HGF治疗大鼠AS的实验疗效明显,可以显著降低血脂及炎症反应水平,减轻冠脉损伤程度。     

葱白提取物通过PPARγ/HO-1途径对动脉粥样硬化大鼠血脂异常和炎症反应的调节作用

目的 探讨葱白提取物(FOB)通过调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)/血红素氧合酶1(HO-1)途径对动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂异常和炎症反应的影响。方法 40只SD大鼠随机分为对照组、模型组(AS组)、FOB组和FOB+GW9662组,每组10只。对照组大鼠给予正常饲料喂养,其余3组大鼠均建立AS模型。各组大鼠连续给药4周。采用苏木精-伊红(HE)染色与油红O染色观察主动脉病变和脂质沉积情况;采用全自动分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并计算动脉粥样硬化指数(AI);采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法和Western blot法分别检测大鼠胸主动脉组织中PPARγ和HO-1的mRNA和蛋白表达水平。结果 与对照组相比,AS组大鼠胸主动脉管壁明显增厚,内膜下可见炎症细胞浸润和泡沫细胞堆积,脂质斑块形成;FOB组大鼠胸主动脉组织病理变化及脂质斑块较A...     

辛伐他汀干预对大鼠动脉粥样硬化斑块内高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 观察辛伐他汀对动脉粥样硬化(AS)大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达及斑块形态学的影响,以期揭示其抗AS的作用机制.方法 60只Wistar大鼠按随机数字表法均分为对照组、AS模型组、辛伐他汀干预组.给予高脂饮食同时灌胃维生素D3建立AS模型;干预组于第8周开始给予辛伐他汀2.5 mg·kg-1·d-1灌胃;各组分别于10周、12周用免疫组化法检测主动脉粥样硬化斑块内HMGB1蛋白表达,实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HMGB1 mRNA表达,并观察主动脉斑块形态学变化.结果 模型组主动脉斑块内HMGB1蛋白表达呈强阳性,辛伐他汀干预组HMGB1表达较模型组明显减少,12周时更为显著.与对照组比较,模型组10周、12周时HMGB1 mRNA表达均明显升高(10周:19.695±1.418、比2.981±0.753,12周:20.542±1.132比3.219±0.332,均P<0.01);辛伐他汀干预组10周、12周HMGB1mRNA表达(15.798±0.891,12.641±0.734)明显低于模型组相应时间点,且12周时表达低于10周时(P<0.05或P<0.01).模型组主动脉内有明显钙化斑块,呈环状,斑块遍及整条动脉;辛伐他汀干预后可明显抑制斑块形成,12周斑块面积较10周时进一步减小.结论 辛伐他汀能减轻AS大鼠主动脉粥样斑块形成,降低斑块组织中HMGB1的蛋白及mRNA表达,通过减轻炎症反应起到血管保护作用.     

锌原卟啉干预对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的影响

目的探讨锌原卟啉干预对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的影响。方法7日龄SD仔鼠125只,随机分为3组,观察各组脑组织HO-1活性、CO和cGMP含量的变化及脑组织的病理改变。结果(1)缺血缺氧组HO-1活性、cGMP及CO水平升高,与对照组比较有明显差异(P<0.01);HI+Znpp组的HO-1活性,cGMP及CO水平低于HI组(P<0.01)。(2)HI组及HI+Znpp组均表现出缺血缺氧的改变但HI组的病理改变明显比HI+Znpp组严重。结论缺血缺氧时应用锌原卟啉预处理对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤有保护作用。     

电针内关穴对一氧化氮合酶抑制大鼠主动脉平滑肌血红素氧合酶-一氧化碳系统的影响

目的:观察电针内关穴对一氧化氮合酶抑制的SD大鼠主动脉平滑肌血红素氧合酶-一氧化碳系统(CO)的影响。方法:实验于2001-04/12在扬州大学运动人体科学实验室完成。取30只SD雄性大鼠随机分为3组,10只/组:①L-NAME组:腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME5mg/kg,1次/d,连续2周。②电针 L-NAME组:在L-NAME组基础上,后10d给予电针双侧内关穴,1次/d,10min/次,共针10次,频率2Hz左右,强度以大鼠双前肢出现与电针频率一致的轻微颤动为度。③对照组:不干预。实验2周后处死大鼠,检测主动脉平滑肌中血红素氧合酶活性、CO生成量及血清NO水平。结果:26只大鼠进入结果分析。①血清NO浓度:L-NAME组和电针 L-NAME组分别比对照组低了34.14%(P<0.05)、49.57%(P<0.01),但两组间比较差异不显著(P>0.05)。②主动脉平滑肌中血红素氧合酶活性:L-NAME组和电针 L-NAME组分别比对照组高了33.64%(P<0.05),102.34%(P<0.01);电针 L-NAME组比L-NAME组高了51.40%(P<0.01)。③主动脉平滑肌中CO的生成量:L-NAME组和电针 L-NAME组分别比对照组高了49.83%(P<0.01),87.85%(P<0.01);电针 L-NAME组比L-NAME组高了25.37%(P<0.05)。结论:①一氧化氮合酶-NO系统抑制时,血红素氧合酶-CO系统活性可代偿性上升。②电针内关穴可以激发主动脉平滑肌中的血红素氧合酶-CO的活性。     

内源性一氧化碳对高血压大鼠血压的长期影响

目的 :探讨内源性一氧化碳对高血压大鼠的长期影响及其可能机制。方法 :3 2只Wistar大鼠随机分为 4组 ,A组为对照组 ;B组为高血压组 ;C和D组为高血压干预组 ,C组用Hm ,D组用Hm +HLL干预。测量大鼠尾动脉收缩压。检测血一氧化碳 ,ET 1,NO质量浓度。结果 :A组血压在实验过程中无明显变化 ;B ,C ,D组血压均较A组明显升高 (P均<0 .0 1) ;药物干预后C ,D组血压较B组降低 ,D组血压低于C组 (P均 <0 .0 1)。血NO质量浓度B ,C ,D组较A组降低 ,D组较B ,C组升高 (P均 <0 .0 1)。血CO质量浓度C ,D组较A ,B组升高 ,D组高于C组 (P均 <0 .0 1)。B ,C组的ET 1质量浓度较A ,D组升高 (P均 <0 .0 5 )。结论 :内源性一氧化碳能长期有效地降低高血压大鼠的血压 ,可能与其能舒张血管平滑肌及升高NO、降低ET 1质量浓度有关。     

内源性一氧化碳对感染性休克大鼠器官保护作用及机制研究

目的探讨内源性一氧化碳（CO）对感染性休克大鼠肺、肝组织的保护作用及其机制。方法采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制感染性休克模型，按随机数字表法将96只大鼠分为假手术对照组、CLP组、CLP＋氯血红素（Hm）组和CLP＋锌原卟啉（ZnPP）组。各组分别在制模后2、4和6h测定出入肺血中碳氧血红蛋白（COHb）水平；肺、肝组织及血液中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性；光镜下观察肺、肝组织形态学改变；免疫组化分析血红素加氧酶-1（HO-1）在肺、肝组织中的蛋白表达和分布。结果与假手术对照组比较，CLP组大鼠不同时间点的出入肺血中COHb水平以及肺、肝组织和全血中MDA含量均显著增高（P〈0．05或P〈0．01），SOD活性显著下降（P〈0．05或P〈0．01）；光镜下肺、肝组织损伤严重，HO-1蛋白表达增多。给予Hm后不同时间点，出、入肺血中的COHb水平均较CLP组进一步升高，肺、肝组织及全血中MDA含量均显著下降，SOD活性显著增高；光镜下肺、肝组织损伤明显缓解，HO-1蛋白表达进一步增多。结论感染性休克时内源性CO产生增多可能对肺、肝组织发挥了保护作用。     

雌激素对大鼠动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系的调节

目的：研究雌激素对大鼠主动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系的影响，以探讨雌激素对心血管系统保护作用的机制。方法：对30只雌性大鼠随机分为三个组，每组10只，去卵巢组（A组）、去卵巢＋雌激素组（B组）、假手术组（C组）。正常饮食2个月后处死大鼠，测雌激素，主动脉匀浆血红素氧合酶及一氧化碳含量。结果：同假手术组相比，去卵巢大鼠主动脉匀浆血红素氧合酶活性及CO含量显降低，在补充适量的雌激素后，主动脉匀浆血红素氧合酶活性及CO含量显上升，结论：雌激素可以调节大鼠动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系，可能是其对心血管系统具有保护作用的机制。     

谷氨酰胺对内毒素血症大鼠肠道损伤的保护作用及对血红素加氧酶-1表达的影响

目的 探讨谷氨酰胺(Glu)对内毒素血症大鼠肠道损伤的保护作用以及对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响.方法 按随机数字表法将32只雄性SD 大鼠分为正常对照组、模型组、Glu组和Glu+锌原卟啉(ZnPP)组,每组8只.腹腔注射内毒素脂多糖(LPS)10 mg/kg制备内毒素血症动物模型.Glu组注射LPS前12 h灌胃Glu 1 g/kg;Glu+ZnPP组注射LPS前12 h灌胃Glu 1 g/kg,注射LPS前1 h静脉注射ZnPP 10 mmol/kg.术后12 h取回肠组织,测定髓过氧化物酶(MPO)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量,并进行肠组织学评分;用免疫组化法检测回肠组织HO-1表达.结果 与正常对照组比较,模型组回肠组织学评分、MPO活性及TNF-α、IL-10含量显著升高[组织学评分(分):3.3±0.4比1.1±0.6,MPO活性(U/g):0.40±0.08比0.26±0.07,TNF-α含量(ng/g):25.2±6.9比6.5±2.8,IL-10含量(ng/g):27.6±10.2比5.7±2.9,均P<0.01];HO-1表达较低.与模型组比较,Glu组组织学评分、MPO活性和TNF-α含量明显减低[组织学评分(分):1.6±0.5比3.3±0.4,MPO活性(U/g):0.25±0.05比0.40±0.08,TNF-α含量(ng/g):13.4±3.2比25.2±6.9,均P<0.01],IL-10含量(ng/g)显著升高(47.3±5.5比27.6±10.2,P<0.01),HO-1表达明显增加.Glu+ZnPP组与模型组各指标比较差异无统计学意义.结论 Glu能明显增强内毒素血症大鼠肠组织HO-1表达,明显减轻肠道炎症反应,从而保护肠黏膜.

Abstract：

Objective To investigate the protective effect of glutamine (Glu) pretreatment on intestinal injury induced by endotoxin and expression of heme oxygenase-1 (HO-1) in rats.Methods Thirty-two male Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into four groups (n=8 in each group): normal control group, model group, Glu group and Glu+zinc protoporphyrin (ZnPP) group. In model group, endotoxemia was produced by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide (LPS, 10 mg/kg). In Glu group, the rats received intragastraiclly 1 g/kg of Glu 12 hours before LPS intraperitoneal injection. In Glu+ZnPP group, the rats received 1 g/kg of Glu by gavage 12 hours before LPS intraperitoneal injection and ZnPP 10 mmol/kg intravenously via tail vein 1 hour before LPS injection. The distal ileum was harvested in full thickness 12 hours after LPS injection. The myeloperoxidase (MPO) activity, tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10) in the intestine were determined, the pathologic changes were observed and expressed in Chiu grade. The expression of HO-1 was evaluated by immunohistochemistry method. Results Compared with normal control group, the Chiu grade, MPO activity, the content of TNF-α and IL-10 were significantly increased in model group [Chiu grade: 3.3±0.4 vs. 1.1±0.6, MPO activity (U/g): 0.40±0.08 vs. 0.26±0.07, TNF-α (ng/g): 25.2±6.9 vs. 6.5±2.8, IL-10 (ng/g): 27.6±10.2 vs. 5.7±2.9, all P<0.01], and the expression of HO-1 was decreased. Compared with model group, the Chiu grade, MPO activity, the content of TNF-α in Glu group were significantly decreased [Chiu grade: 1.6±0.5 vs. 3.3±0.4, MPO activity (U/g): 0.25±0.05 vs. 0.40±0.08, the content of TNF-α (ng/g): 13.4±3.2 vs. 25.2±6.9, all P<0.01], while the level of IL-10 (ng/g) elevated (47.3±5.5 vs. 27.6±10.2, P<0.01), and the expression of HO-1 was increased. There was no difference in above mentioned indexes between model group and Glu+ZnPP group. Conclusion Glu pretreatment significantly ameliorates the expression of HO-1 of intestinal tissue induced by LPS in rats, and intestinal mucosa is protected with alleviation of inflammatory reaction in intestinal tract.     

IL-33 reduces the development of atherosclerosis

Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease of the vasculature commonly leading to myocardial infarction and stroke. We show that IL-33, which is a novel IL-1-like cytokine that signals via ST2, can reduce atherosclerosis development in ApoE(-/-) mice on a high-fat diet. IL-33 and ST2 are present in the normal and atherosclerotic vasculature of mice and humans. Although control PBS-treated mice developed severe and inflamed atherosclerotic plaques in the aortic sinus, lesion development was profoundly reduced in IL-33-treated animals. IL-33 also markedly increased levels of IL-4, -5, and -13, but decreased levels of IFNgamma in serum and lymph node cells. IL-33 treatment also elevated levels of total serum IgA, IgE, and IgG(1), but decreased IgG(2a), which is consistent with a Th1-to-Th2 switch. IL-33-treated mice also produced significantly elevated antioxidized low-density lipoprotein (ox-LDL) antibodies. Conversely, mice treated with soluble ST2, a decoy receptor that neutralizes IL-33, developed significantly larger atherosclerotic plaques in the aortic sinus of the ApoE(-/-) mice compared with control IgG-treated mice. Furthermore, coadministration of an anti-IL-5 mAb with IL-33 prevented the reduction in plaque size and reduced the amount of ox-LDL antibodies induced by IL-33. In conclusion, IL-33 may play a protective role in the development of atherosclerosis via the induction of IL-5 and ox-LDL antibodies.     

硫化氢逆转脂多糖诱导大鼠肺动脉低反应性以及与一氧化碳的关系

目的 观察整体水平应用硫化氢(H2S)后脂多糖(LPS)诱导的离体肺动脉对H2S舒张反应的变化及其与一氧化碳(CO)的关系.方法 将48只大鼠按照随机数字表法分为对照组[给予生理盐水(NS)]、LPS组、H2S供体硫氢化钠(NaHS)+LPS组和NaHS+NS组4组,每组12只.采用经大鼠气管内滴注LPS(0.8 ml/kg)染毒;NaHS±+LPS组和NaHS±NS组滴注LPS或NS之前10 min和之后2 h腹腔注射NaHS各0.5 ml(28 μmol/kg).各组取6只大鼠于染毒后12 h制备肺动脉环(PARs),采用离体血管环张力测定技术检测用血红素氧合酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)孵育前后PARs对累积浓度NaHS的舒张反应变化;各组另取6只大鼠于染毒后12 h检测出肺血(EPB)和入肺血(APB)中碳氧血红蛋白(COHb)含量,以其差值反映肺循环CO生成的水平.结果 与对照组相比,滴注LPS后PARs对NaHS的最大舒张反应百分比明显降低[(75.72±7.22)%比(96.40±4.40)%,P＜0.01＝;用ZnPPⅨ孵育PARs后,LPS诱导的PARs对NaHS舒张反应进一步降低[(62.91±8.22)%比(75.72±7.22)%,P＜0.01＝.腹腔注射NaHS可明显逆转LPS诱导的PARs对NaHS的低反应性,PARs对NaHS的最大舒张反应百分比明显升高[(94.65±8.45)%比(75.72±7.22)%,P＜0.01＝;但用ZnPPⅨ孵育PARs后,PARs对NaHS的舒张反应较孵育前显著下降[(83.75±9.76)%比(94.65±8.45)%,P＜0.01＝.NaHS+NS组中PARs对NaHS的舒张反应与对照组相比无明显差异,且在ZnPPⅨ孵育前后也无明显变化.COHb检测结果显示,与对照组相比,滴注LPS后APB和EPB中COHb水平的差值明显增高[(3.12±0.48)%比(2.12±0.32)%,P＜0.05＝;腹腔注射NaHS后,COHb水平的差值[(4.03±0.56)%]较LPS组进一步升高(P＜0.01＝.结论 腹腔注射H2S可以改善LPS诱导的离体肺动脉对H2S的低反应性,其机制可能与增强肺动脉HO-1/CO体系有关.

Abstract：

Objective To explore the effect of hydrogen sulfide (H2S) on abnormal pulmonary artery reactivity induced by lipopolysaccharide (LPS) and its relationship with carbon monoxide (CO). Methods Forty-eight rats were divided into four groups randomly according to table of random number: control group (normal saline, NS), LPS group, a donor of H2S sodium hydrosulfide (NaHS)+LPS group, and NaHS+NS group (n=12 in each group). Rats were given LPS by intratracheal instillation (0. 8 ml/kg). 0. 5 ml of NaHS (28 μmol/kg) was injected intraperitoneally 10 minutes before LPS or NS instillation and 2 hours after LPS or NS instillation in NaHS+LPS and NaHS+NS groups. Twelve hours after instillation of LPS, 6 rats from each group were sacrificed. The pulmonary artery rings (PARs) were prepared and the changes in cumulative relaxation response of PARs to NaHS were detected before and after incubation with an inhibitor of heme oxygenase-1 (HO-1) zinc protoporphyrin Ⅸ (ZnPP Ⅸ ) using isolated vascular ring tension detecting technique. Twelve hours after LPS instillation, the remaining 6 rats in each group were sacrificed, and the contents of carboxyhemoglobin (COHb) in efferent pulmonary blood (EPB) and afferent pulmonary blood (APB) were measured, and the difference between the contents of COHb in EPB and that of APB was calculated to represent content of CO from pulmonary circulation. Results In the present study, compared with control group, after the instillation of LPS the percentage of relaxation response of PARs to NaHS was significantly declined [(75. 72±7. 22)% vs. (96. 40±4. 40)%, P＜0. 01]. After being incubated with ZnPP Ⅸ, the decreased relaxation response of PARs to NaHS induced by LPS was further depressed [(62. 91 ±8. 22) % vs. ( 75. 72 ± 7. 22) %, P ＜ 0. 01]. Administration of NaHS intraperitoneally reversed the hyporesponsiveness of PARs to NaHS, the percentage of relaxation response of PARs to NaHS was significantly increased [(94.65± 8.45)% vs. (75.72 ± 7.22)%, P＜0.01]. However ZnPP Ⅸ also attenuated the effect [(83. 75 ± 9. 76)% vs. (94. 65 ± 8. 45)%, P ＜ 0. 01]. NO significant changes were observed between NaHS+NS group and control group, also between the results before and after ZnPP Ⅸincubation. Compared with control group, the difference between the contents of COHb in EPB and that of APB increased after instillation of LPS [(3. 12±0. 48)% vs. (2. 12±0. 32)%, P＜0. 05], which further increased after intraperitoneal administration of NaHS [(4.03 ± 0. 56) %, P ＜ 0. 01]. Conclusion The results suggested that intraperitoneal administration of H2S could reverse hyporesponsiveness of PARs to H2S induced by LPS, and the result might be related to an intensification of HO-1/CO system in pulmonary artery tissue.     

两种内源性内皮素对脑出血应激性溃疡干预作用的对比研究

目的 观察内皮素(ET)抗体、ET受体拮抗剂对大鼠脑出血致应激性溃疡的干预作用,并比较其效果.方法 将SD大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、ET抗体组(C组)、ET受体拮抗剂组(D组),每组10只.用非精确定位穿刺法将实验组大鼠自体尾静脉血200μl注入右脑实质内制备大鼠尾状核脑出血致应激性溃疡模型.B、C、D组分别于尾静脉注射0.2 ml生理盐水、ET抗体、ET受体拮抗剂(阿魏酸钠),每日1次,连用3 d.处死大鼠,观察其胃黏膜溃疡发生率、溃疡指数,血清ET-1,血清、脑、胃黏膜的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),光镜和电镜下观察脑、胃黏膜病理变化并进行超微结构电脑图像定量分析线粒体比表面(Rsv)和体积密度(Vv).结果 制模后,血清ET-1无明显变化;血清、脑、胃黏膜MDA显著升高,SOD显著下降,脑组织含水量也明显升高;脑、胃壁细胞Rsv及胃壁细胞Vv均显著下降(P＜0.05或P＜0.01).B组胃黏膜溃疡发生率为30%,溃疡指数为15,其他组肉眼均未见溃疡灶.与B组比较,C、D组血清、脑、胃黏膜的MDA显著降低.SOD显著升高;C组脑含水量较B组显著下降,差异均有统计学意义(P均＜0.01),C、D组间上述指标差异均无统计学意义.B、C、D组间脑神经细胞、胃壁细胞超微结构电脑图像定量分析中的Rsv、Vv变化及各组间血清ET-1差异亦均无统计学意义.结论 ET抗体、ET受体拈抗剂均可有效减轻大鼠脑出血致应激性溃疡的发生发展,ET抗体的干预效果似乎稍优于ET受体拮抗剂.     

Role of the heme oxygenases in abnormalities of the mesenteric circulation in cirrhotic rats

Carbon monoxide (CO), a product of heme metabolism by heme-oxygenase (HO), has biological actions similar to those of nitric oxide (NO). The role of CO in decreasing vascular responses to constrictor agents produced by experimental cirrhosis induced by carbon tetrachloride was evaluated before and after inhibition of HO with tin-mesoporphyrin (SnMP) in the perfused superior mesenteric vasculature (SMV) of cirrhotic and normal rats and in normal rats transfected with the human HO-1 (HHO-1) gene. Perfusion pressure and vasoconstrictor responses of the SMV to KCl, phenylephrine (PE), and endothelin-1 (ET-1) were decreased in cirrhotic rats. SnMP increased SMV perfusion pressure and restored the constrictor responses of the SMV to KCl, PE, and ET-1 in cirrhotic rats. The relative roles of NO and CO in producing hyporeactivity of the SMV to PE in cirrhotic rats were examined. Vasoconstrictor responses to PE were successively augmented by stepwise inhibition of CO and NO production, suggesting a complementary role for these gases in the regulation of reactivity of the SMV. Expression of constitutive but not of inducible HO (HO-1) was increased in the SMV of cirrhotic rats as was HO activity. Administration of adenovirus containing HHO-1 gene produced detection of HHO-1 RNA and increased HO activity in the SMV within 7 days. Rats transfected with HO-1 demonstrated reduction in both perfusion pressure and vasoconstrictor responses to PE in the SMV. We propose that HO is an essential component in mechanisms that modulate reactivity of the mesenteric circulation in experimental hepatic cirrhosis in rats.     

血红素加氧酶-1重组乳酸乳球菌灌胃对失血性休克大鼠肠道炎症反应及细菌移位的影响

目的 利用基因工程原理合成携带血红素加氧酶-1（HO—1）基因的乳酸乳球菌，通过对正常大鼠灌胃后，观察其减轻失血性休克大鼠肠道炎症反应及肠黏膜屏障的保护效应。方法 按随机数字表法将30只健康清洁级雄性SD大鼠分为携带HO-1基因的乳酸乳球菌灌胃组（HO组，n=10）、乳酸乳球菌灌胃组（LL组，n=10）及磷酸盐缓冲液灌胃组（PBS组，n=10）。实验前24h灌胃，复制失血性休克模型。液体复苏1h后取材，比较各组动物的死亡率、细菌移位以及肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性、HO-1、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）含量，并检查肠组织病理学变化。结果 与LL组和PBS组比较，HO组的死亡率、Chiu6级评分、细菌移位发生率均明显降低（P均〈0．05）；HO-1含量和IL-10灰度值均明显增加（P均〈0．05）；与HO组和LL组比较，PBS组肠组织MPO活性明显增加（P〈0．05）。结论 携带HO-1基因的乳酸乳球菌对失血性休克大鼠有较好的肠黏膜屏障保护作用，能明显减轻肠道炎症反应和细菌移位的发生率。     

内皮素1增高对大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用

背景作为一种强效血管和神经活性肽,内皮素1在各种中枢神经系统病理生理情况下表达增加,可能对神经组织产生有害作用.然而,增高的内皮素1有无直接诱导神经元凋亡的作用尚不清楚.目的观察内皮素1有无直接诱导原代培养神经元凋亡的作用.设计以细胞为研究对象,完全随机对照实验研究.单位一所大学医院的神经内科和一所大学的病理学教研室、生命科学技术学院组织与移植免疫实验中心.材料实验于2001-03/2002-02在暨南大学医学院病理教研室和生命科学和技术学院组织移植与免疫研究所实验室进行.来自于新生大鼠大脑皮质的原代神经元培养,新生大鼠由中山大学医学中心动物研究所提供.干预原代大脑皮质神经元培养5 d后分别加入0.2,20 nmol/L内皮素1处理24 h,用Annexin V,Hoechst 33258染色半定量测定细胞凋亡.再用流式细胞仪分别定量检测内皮素受体A拮抗剂或内皮素受体B拮抗剂对20 nmol/L内皮素1诱导神经元凋亡的效果.对照组加入等量磷酸盐缓冲液.主要观察指标观察内皮素1直接诱导培养神经元凋亡的作用,以及其通过的ET受体亚型.结果加入0.2 nmol/L内皮素1 24 h后,Annexin-V和Hoechst 33258阳性染色细胞率分别为(23.00±9.96)%,(9.82±0.95)%,与对照组相比差异无显著性意义[(Annexin-V(13.50±3.35)%;Hoechst 33258(8.21±2.17)%].加入20 nmol/L后24 h,Annexin-V以及Hoechst33258染色阳性细胞率(50.50±10.78)%,(13.78±1.52)%显著增高,与对照组比较,差异有显著性意义.流式细胞仪检测对照组和20 nmol/L内皮素1组凋亡率分别为(0.20±0.15)%和(26.11±3.28)%;内皮素受体A拮抗剂,内皮素受体B拮抗剂分别部分阻断了内皮素1诱导培养神经元凋亡的作用,内皮素受体A拮抗剂+内皮素1组凋亡率为(13.58±4.92)%,内皮素受体B拮抗剂+内皮素1组为(9.99±3.30)%,与内皮素1组比较,差异有显著性意义.结论较高浓度的内皮素1(20 nmol/L)可直接诱导培养大鼠大脑皮质神经元凋亡,其作用可能是通过其A受体和B受体亚型共同实现的.